本發(fā)明涉及一種dart-ms法快速測定黑蒜中的氨基酸的方法，屬于離子色譜檢測領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

黑蒜又名黑大蒜、發(fā)酵黑蒜，是用新鮮的生蒜，帶皮放在高溫高濕的發(fā)酵箱里自然發(fā)酵而成的食品，它在保留生大蒜原有成份、功能的基礎(chǔ)上，使生大蒜的抗氧化、抗酸化功效提高了數(shù)十倍，又把生大蒜本身的蛋白質(zhì)大量轉(zhuǎn)化成為人體每天所必需的氨基酸，進(jìn)而被人體迅速吸收，對增強(qiáng)人體免疫力、恢復(fù)人體疲勞，保持人體健康起到巨大積極作用，是速效性的保健食品。黑蒜中的主要營養(yǎng)成分氨基酸因產(chǎn)地和發(fā)酵工藝的不同差別較大。目前，氨基酸的主要檢測方法為氨基酸測定儀法，操作步驟較為繁瑣，費(fèi)用較高。近年來，各式各樣的黑蒜產(chǎn)品入市，所以建立一種快速檢測黑蒜中氨基酸的方法，對維持黑蒜市場良好發(fā)展和保障人類健康具有重要意義。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是：提供一種dart-ms法快速測定黑蒜中的氨基酸的方法。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：

dart-ms法快速測定黑蒜中的氨基酸的方法，其特征在于，包括下列步驟：

(1)樣品前處理；(2)進(jìn)樣分析；(3)定性定量分析。

樣品前處理的步驟如下：黑蒜去殼，用剪刀剪成碎塊，置于研砵中研磨成泥狀；準(zhǔn)確稱取5.00g于離心管中，加水至50ml，振蕩30min，然后超聲20min，最后離心5min(5000r/min)，待測。

進(jìn)樣分析的步驟如下：

①dart源(ionsense)；溫度400℃；平移速度0.2mm/s；工作氣體：氦氣(5-5.5psi)；正離子模式；

②4000qtrapms/ms(ab)；cur10psi；掃描范圍100-300da；掃描時間：0.5s；

③用移液槍(0-10μl量程)取待測樣品5μl，均勻的點(diǎn)在玻棒的尖端處，保持所點(diǎn)位置的一致性，直接進(jìn)樣分析。

本發(fā)明的有益效果：

本發(fā)明中，樣品前處理方法簡單快捷；進(jìn)樣分析速度快，5min內(nèi)可實(shí)現(xiàn)4個樣品的測定；可實(shí)現(xiàn)黑蒜樣品中氨基酸種類的快速篩查和半定量。

附圖說明

下面結(jié)合附圖對本發(fā)明的具體實(shí)施方式作進(jìn)一步詳細(xì)的說明。

圖1是黑蒜樣品總離子流色譜圖。

圖2是黑蒜樣品a氨基酸檢出質(zhì)譜圖。

圖3是黑蒜樣品b氨基酸檢出質(zhì)譜圖。

圖4是黑蒜樣品c氨基酸檢出質(zhì)譜圖。

圖5是黑蒜樣品d氨基酸檢出質(zhì)譜圖。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1

本實(shí)施例提供的dart-ms法快速測定黑蒜中的氨基酸的方法，其特征在于，包括下列步驟：

(1)樣品前處理；(2)進(jìn)樣分析；(3)定性定量分析。

樣品前處理的步驟如下：黑蒜去殼，用剪刀剪成碎塊，置于研砵中研磨成泥狀；準(zhǔn)確稱取5.00g于離心管中，加水至50ml，振蕩30min，然后超聲20min，最后離心5min(5000r/min)，待測。

進(jìn)樣分析的步驟如下：

①dart源(ionsense)；溫度400℃；平移速度0.2mm/s；工作氣體：氦氣(5-5.5psi)；正離子模式；

②4000qtrapms/ms(ab)；cur10psi；掃描范圍100-300da；掃描時間：0.5s；

③用移液槍(0-10μl量程)取待測樣品5μl，均勻的點(diǎn)在玻棒的尖端處，保持所點(diǎn)位置的一致性，直接進(jìn)樣分析。

實(shí)施例2實(shí)際樣品檢測

取不同黑蒜樣品，標(biāo)記為樣品a、b、c、d，按實(shí)施例1的方法進(jìn)行檢測，經(jīng)測定發(fā)現(xiàn)，不同種類氨基酸在質(zhì)譜上響應(yīng)模式不同，可歸納為兩類：[m(母離子)+h]+模式和[m+na]+模式，部分氨基酸(例：亮氨酸)兩種模式均有響應(yīng)。黑蒜樣品中不同氨基酸響應(yīng)模式見表1。

表1黑蒜中不同氨基酸dart-ms法響應(yīng)模式分布

注*n(無響應(yīng))

圖1是黑蒜樣品總離子流色譜圖(4針不同樣品)。圖2-5分別是黑蒜樣品a、b、c、d的氨基酸檢出質(zhì)譜圖。

經(jīng)檢測分析，發(fā)現(xiàn)黑蒜樣品中主要含有亮氨酸、賴氨酸、谷氨酸、纈氨酸、丙氨酸、酪氨酸、色氨酸、胱氨酸、苯丙氨酸、脯胺酸等氨基酸，含量和種類因樣品不同而不同。所含氨基酸的含量可以根據(jù)出峰的高度測定。

以上所述，僅是本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已，并非是對本發(fā)明作其它形式的限制，任何熟悉本專業(yè)的技術(shù)人員可能利用上述揭示的技術(shù)內(nèi)容加以變更或改型為等同變化的等效實(shí)施例。但是凡是未脫離本發(fā)明技術(shù)方案內(nèi)容，依據(jù)本發(fā)明的技術(shù)實(shí)質(zhì)對以上實(shí)施例所作的任何簡單修改、等同變化與改型，仍屬于本發(fā)明技術(shù)方案的保護(hù)范圍。

技術(shù)特征：

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種DART?MS法快速測定黑蒜中的氨基酸的方法，包括下列步驟：（1）樣品前處理；（2）進(jìn)樣分析；（3）定性定量分析。本發(fā)明的有益效果：本發(fā)明中，樣品前處理方法簡單快捷；進(jìn)樣分析速度快，5min內(nèi)可實(shí)現(xiàn)4個樣品的測定；可實(shí)現(xiàn)黑蒜樣品中氨基酸種類的快速篩查和半定量。

技術(shù)研發(fā)人員：崔鶴;張濤;蔡峰
受保護(hù)的技術(shù)使用者：山東出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心
技術(shù)研發(fā)日：2017.05.03
技術(shù)公布日：2017.07.21