本發(fā)明涉及食品安全技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種酒中γ氨基丁酸的測定方法。
背景技術(shù)：
γ-氨基丁酸（gaba）是一種天然活性成分，廣泛分布于動植物體內(nèi)。1961年，γ-氨基丁酸(gaba)被醫(yī)學(xué)界承認(rèn)可以用在治療上；1979年，gaba被發(fā)現(xiàn)在人體消化道內(nèi)也可以作為神經(jīng)傳導(dǎo)物質(zhì)，自此gaba在人體組織內(nèi)的存在也被證實(shí)了。γ-氨基丁酸（gaba）是國家衛(wèi)生部于2009年9月27日第十二號公告批準(zhǔn)的一種新資源食品。使用范圍：飲料、可可制品、巧克力和巧克力制品、糖果、焙烤食品、膨化食品等，但不包括嬰幼兒食品。《國家食品安全標(biāo)準(zhǔn)食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》gb2760-2014標(biāo)準(zhǔn)中將γ-氨基丁酸列入“表b.3允許使用的食品用合成香料名單”?！鼎?氨基丁酸》qb/t4587-2013產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定γ-氨基丁酸的化學(xué)名稱、分子式、相對分子質(zhì)量、結(jié)構(gòu)式、要求、試驗(yàn)方法、檢驗(yàn)規(guī)則、標(biāo)志、包裝、運(yùn)輸及貯存。近幾年，γ-氨基丁酸在酒類也得到廣泛使用。白酒中添加適當(dāng)劑量的gaba，起到鎮(zhèn)定、醒酒、促進(jìn)乙醇代謝，增加飲用者酒量。果酒中添加適當(dāng)劑量的gaba，配制成gaba酒，可以滿足更多消費(fèi)群體的需求，如適合女性、中老年人群、白領(lǐng)人士享用的中高檔花色果酒。隨之其在酒中應(yīng)用研究日趨活躍、廣泛，其在酒中檢測研究也應(yīng)然而生。
由于γ-氨基丁酸對電化學(xué)和紫外、可見光不靈敏，目前對食品中γ-氨基丁酸的測定主要是采用衍生化-色譜法、衍生化-氨基酸分析法、衍生化-毛細(xì)管電化學(xué)等。衍生化法易引入衍生劑、副產(chǎn)物等，影響色譜分離、污染儀器和形成干擾峰等，同時(shí)難以保證衍生化程度完全性和一致性，直接影響測定結(jié)果的準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性?；谏鲜鲫愂?，本發(fā)明提出了一種酒中γ氨基丁酸的測定方法。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是為了解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的缺點(diǎn)，而提出的一種酒中γ氨基丁酸的測定方法。
一種酒中γ氨基丁酸的測定方法，包括以下步驟：
s1、測定前準(zhǔn)備：準(zhǔn)備液質(zhì)聯(lián)用儀，即液相色譜四極桿串聯(lián)質(zhì)譜，且液相色譜包括自動進(jìn)樣器，預(yù)先設(shè)定液相色譜條件和質(zhì)譜條件；
s2、制備測試液：直接從酒中取5ml試樣于試管中，對取得的試樣進(jìn)行預(yù)處理后，經(jīng)0.45μm濾膜過濾作為測試液；
s3、配制標(biāo)準(zhǔn)液：精確配制10、30、60、100、300、500ng/ml的γ-氨基丁酸標(biāo)準(zhǔn)液備用；
s4、分別取步驟s2中制備的測試液和步驟s3中配制的標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定，以γ-氨基丁酸的質(zhì)量濃度mg/ml為橫坐標(biāo)x，以γ-氨基丁酸的峰面積為縱坐標(biāo)y進(jìn)行線性回歸，計(jì)算得出酒中γ氨基丁酸的含量。
優(yōu)選的，所述步驟s1中的液相色譜條件包括：流動相由濃度為0.1%的乙酸水溶液和甲醇組成，其中乙酸水溶液和甲醇體積比為4/6；流速：200μl/min；注射體積：20μl；柱溫：26℃。
優(yōu)選的，所述步驟s1中的質(zhì)譜條件包括：離子源：電噴霧離子源esi；掃描方式：正離子掃描；檢測方式：多反應(yīng)監(jiān)測mrm；干燥氣溫度：350℃；干燥氣流速：10l/min；霧化器壓力；40psi；毛細(xì)管電壓：4000v。
優(yōu)選的，所述步驟s2中的試樣的預(yù)處理方法為：將裝有試樣的試管置于沸騰水浴鍋中，去除乙醇后冷卻，然后定容至5ml。
優(yōu)選的，所述步驟s4中線性回歸方程為y=1774x，回歸系數(shù)r2=0.9998。
優(yōu)選的，所述測定方法中信噪比s/n=3時(shí)，檢出限為5ng/ml。
本發(fā)明提出的一種酒中γ氨基丁酸的測定方法，采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定酒中的γ-氨基丁酸，其具有原理明確，技術(shù)先進(jìn)，方法簡便，易于操作，靈敏度高，精密度高，且穩(wěn)定性和重復(fù)性好的優(yōu)點(diǎn)，其檢出限、靈敏度、準(zhǔn)確性和精密度等均達(dá)到檢測的要求，可以滿足我國對酒中γ氨基丁酸含量檢測的需求，值得推廣。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步解說。
實(shí)施例
本發(fā)明提出的一種酒中γ氨基丁酸的測定方法，包括以下步驟：
s1、測定前準(zhǔn)備：準(zhǔn)備液質(zhì)聯(lián)用儀，即液相色譜四極桿串聯(lián)質(zhì)譜，且液相色譜包括自動進(jìn)樣器，預(yù)先設(shè)定液相色譜條件和質(zhì)譜條件，其中液相色譜條件包括：流動相由濃度為0.1%的乙酸水溶液和甲醇組成，其中乙酸水溶液和甲醇體積比為4/6；流速：200μl/min；注射體積：20μl；柱溫：26℃；質(zhì)譜條件包括：離子源：電噴霧離子源esi；掃描方式：正離子掃描；檢測方式：多反應(yīng)監(jiān)測mrm；干燥氣溫度：350℃；干燥氣流速：10l/min；霧化器壓力；40psi；毛細(xì)管電壓：4000v；
s2、制備測試液：直接從酒中取5ml試樣于試管中，并將試管置于沸騰水浴鍋中，去除乙醇后冷卻，然后定容至5ml，經(jīng)0.45μm濾膜過濾作為測試液；
s3、配制標(biāo)準(zhǔn)液：精確配制10、30、60、100、300、500ng/ml的γ-氨基丁酸標(biāo)準(zhǔn)液備用；
s4、分別取步驟s2中制備的測試液和步驟s3中配制的標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定，以γ-氨基丁酸的質(zhì)量濃度mg/ml為橫坐標(biāo)x，以γ-氨基丁酸的峰面積為縱坐標(biāo)y進(jìn)行線性回歸，得到回歸方程y=1774x，回歸系數(shù)r2=0.9998，計(jì)算得出酒中γ氨基丁酸的含量，當(dāng)信噪比(s/n)=3時(shí)，檢出限為5ng/ml。
取不含γ-氨基丁酸的酒作為空白基質(zhì)，分別添加500ng/ml標(biāo)準(zhǔn)液0.2、0.4、1ml于10ml酒中，共3組，每組6份，進(jìn)行平行試驗(yàn)，按照本發(fā)明實(shí)施例提出的酒中γ氨基丁酸的測定方法進(jìn)行前處理和儀器分析測定，計(jì)算回收率和精密度，得出如下實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)：
由上述實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可知，本發(fā)明提出的一種酒中γ氨基丁酸的測定方法的回收率達(dá)93%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差rsd小于3%，表明本發(fā)明具有較高的測量精密度和準(zhǔn)確度。
在市場抽取中高檔白酒樣品50組，按照本發(fā)明實(shí)施例提出的酒中γ氨基丁酸的測定方法進(jìn)行測定，共檢出3組樣品含有γ-氨基丁酸，含量為0.1～0.8mg/l。
以上所述，僅為本發(fā)明較佳的具體實(shí)施方式，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于此，任何熟悉本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員在本發(fā)明揭露的技術(shù)范圍內(nèi)，根據(jù)本發(fā)明的技術(shù)方案及其發(fā)明構(gòu)思加以等同替換或改變，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。