1.一種乳品中β-內(nèi)酰胺的檢測方法,其特征在于,包括以下步驟:
調(diào)校儀器:將酶熱生物分析儀上的蠕動泵校準(zhǔn)為0.45-0.5ml/L;
安裝樣品環(huán):取市場上常見的非親水透明塑料管支撐的塑膠管一根,安裝在酶熱生物分析儀上;
將酶熱生物分析儀上的儀器信號放大旋鈕調(diào)至80,然后將電流表指針調(diào)至中央零點(diǎn)位置,確保電流表工作正常;
調(diào)校記錄儀:取市場上通用型記錄儀,將其電壓調(diào)至一伏左右,記錄紙滾動速度為8cm/小時;
取適量青霉素酶溶液于容器內(nèi),再向容器內(nèi)添加適量的青霉素溶液,的青霉素酶混合液,從而保持青霉素酶的活性,向酶熱生物分析儀上的樣品環(huán)內(nèi)依次注射待測牛奶樣品、青霉素酶混合液,然后將注射閥由注射檔調(diào)至為上樣檔,檢測樣品8-10分鐘,待樣品的峰回落至基線時,注射下一個樣品;
檢測試驗結(jié)束之后,將樣品環(huán)從酶熱生物分析儀上取下,向樣品環(huán)內(nèi)注入濃度為45%-60%濃度的酒精試劑,清洗儀器及樣品環(huán)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種乳品中β-內(nèi)酰胺的檢測方法,其特征在于,所述青霉素酶溶液及青霉素溶液由以下方法可制得:
一、材料準(zhǔn)備:
磷酸二氫鈉:3-6克;
磷酸氫二鈉:15-20克;
去離子水:800-1000毫升;
青霉素樣品:50-80毫升;
青霉素酶樣品:6-10毫克;
牛奶:200-260毫升;
酒精試劑:300-400毫升;
配制樣品:
S1、取3-6克磷酸二氫鈉和15-20克磷酸氫二鈉置于容器中,并向容器中添加800-1000毫升的去離子水,攪拌5-10分鐘,靜置,得到磷酸鹽溶液;
S2、向磷酸鹽溶液中添加6-20毫克青霉素酶樣品,攪拌5-8分鐘,得青霉素酶溶液,置于溫度為4度的環(huán)境中儲存;
S3、取少量S1中制得的磷酸鹽溶液,并向其中添加6-10毫升的青霉素樣品,得青霉素溶液。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種乳品中β-內(nèi)酰胺的檢測方法,其特征在于,所述注射樣品進(jìn)樣品環(huán)與酶熱生物分析同步進(jìn)行,所述含β-內(nèi)酰胺的牛奶待測樣品與青霉素酶的混合液分別在兩個獨(dú)立的流動腔進(jìn)入反應(yīng)系統(tǒng),在反應(yīng)器內(nèi)混合后產(chǎn)生催化反應(yīng),并且放熱,酶熱生物分析儀通過檢測放出的熱量數(shù)據(jù)通過溫度傳感器轉(zhuǎn)化為溫度數(shù)值,然后顯示在酶熱生物分析儀的顯示屏上,便于試驗人員進(jìn)行記錄。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種乳品中β-內(nèi)酰胺的檢測方法,其主要的檢測儀器如下:
A、雙通道流動控制系統(tǒng)及其混合器、反應(yīng)器和檢測器;
B、檢測傳感器為溫度傳感器,包括熱敏電阻、熱電偶、熱電堆和范文晶體管等;
C、電子測量為開爾文雙臂電橋,差分溫度測量方式,其檢測靈敏度可達(dá)0.0001攝氏度-0.00015攝氏度。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種乳品中β-內(nèi)酰胺的檢測方法,其特征在于,所述酶熱生物分析儀的檢測原理是由該熱焓變化所產(chǎn)生的反應(yīng)系統(tǒng)的溫度變化為檢測信號,該溫度信號可以分為差分方式或非差分方式測定。
6.一種乳品中β-內(nèi)酰胺的檢測方法,其特征在于,所述的乳品β-內(nèi)酰胺的檢測方法可擴(kuò)展至其它非含乳成分的液態(tài)食品、飲料、藥品、化妝品、化學(xué)試劑和發(fā)酵制劑等。
7.一種乳品中β-內(nèi)酰胺的檢測方法,其特征在于,所述樣品每注射一次后,及時記錄酶熱生物分析儀上顯示的溫度數(shù)據(jù),使用相同濃度的青霉素酶溶液和青霉素溶液對待測牛奶進(jìn)行依次試驗,并依次記錄溫度數(shù)據(jù),將所得溫度數(shù)據(jù),去掉一個最大值,去掉一個最小值,然后求和再求得平均值,即可得到待測牛奶中所含的β-內(nèi)酰胺的濃度值。