技術(shù)總結(jié)
可實(shí)現(xiàn)GLAST蛋白鑒定及絕對定量的試劑盒及測定方法該試劑盒由標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和反應(yīng)試劑兩部分組成,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)包括:特征肽段及其內(nèi)標(biāo)肽段;反應(yīng)試劑包括:碳酸氫銨、二硫蘇糖醇、碘乙酰胺、胰蛋白酶、甲酸。通過將含谷氨酸?天冬氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白樣品與反應(yīng)試劑按一定的體積比混合,經(jīng)溫育振蕩,蛋白經(jīng)變性、還原、乙酰化及酶解反應(yīng),得到最終產(chǎn)物,再將標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和/或最終產(chǎn)物分別注入(超)高效液相色譜?三重四級桿質(zhì)譜儀中,根據(jù)特征肽段母離子和子離子的質(zhì)荷比(m/z)及特征肽段的保留時(shí)間(tR)進(jìn)行定性鑒別,通過色譜峰面積變化測算出谷氨酸?天冬氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白的絕對含量。
技術(shù)研發(fā)人員:姜泓;封聰;袁明美;王守云
受保護(hù)的技術(shù)使用者:中國醫(yī)科大學(xué)
文檔號碼:201611013896
技術(shù)研發(fā)日:2016.11.18
技術(shù)公布日:2017.05.31