技術(shù)特征：

1.一種高通量液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜的檢測方法，所述方法包括以下步驟：

S1樣品制備：往待測樣品中加入一定量的含有已知濃度內(nèi)標(biāo)的乙腈溶液，進(jìn)行蛋白質(zhì)沉淀，離心后取上請液；

S2衍生化反應(yīng)：上清液利用離心濃縮冷凍系統(tǒng)凍干后，加入用衍生化試劑對上述上清液進(jìn)行衍生化反應(yīng)；

S3樣品前處理：將衍生化反應(yīng)后的樣品調(diào)節(jié)pH至7后離心，取上清液于液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜上樣分析；

S4液相色譜分離：利用超高壓液相色譜以及相應(yīng)的流動相，在反向C18分析柱上對樣品進(jìn)行分離；

S5串聯(lián)質(zhì)譜檢測：色譜上分離后的樣品進(jìn)入到質(zhì)譜進(jìn)行檢測，利用三重四級桿質(zhì)譜中的多重反應(yīng)監(jiān)控模式檢測，根據(jù)色譜洗脫時(shí)間，設(shè)置檢測窗口以及參數(shù)。

2.如權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述衍生化反應(yīng)采用丹磺酰氯作為衍生化試劑并在避光條件下進(jìn)行。

3.如權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述內(nèi)標(biāo)為氘代香草扁桃酸和/或氘代甲氧基腎上腺素。

4.高通量液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法檢測4種兒茶酚胺代謝物的方法，所述方法包括以下步驟：

S11標(biāo)準(zhǔn)品制備：將兒茶酚胺代謝物標(biāo)準(zhǔn)品用乙腈稀釋到若干個(gè)不同濃度備用，每個(gè)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品中加入等量的含有已知濃度內(nèi)標(biāo)的乙腈溶液，高速離心后取上清液；

S12衍生化反應(yīng)：將上清液利用離心濃縮冷凍系統(tǒng)凍干后，利用衍生化試劑進(jìn)行衍生化反應(yīng)使得4種兒茶酚胺代謝物發(fā)生化學(xué)反應(yīng)；

S13樣品前處理：反應(yīng)完后把混合溶液pH調(diào)到7左右，再使用低溫離心機(jī)對混合溶液進(jìn)行離心分離，取上清液于96孔板用于液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜上樣分析；

S14液相色譜分離：利用超高壓液相色譜以及相應(yīng)的流動相，在反向C18分析柱上對4種兒茶酚胺代謝物進(jìn)行分離；

S15串聯(lián)質(zhì)譜檢測：色譜上分離后的4種兒茶酚胺代謝物進(jìn)入到質(zhì)譜進(jìn)行檢測，利用三重四級桿質(zhì)譜中的多重反應(yīng)監(jiān)控模式特異性地檢測4種兒茶酚胺代謝物，根據(jù)不同的色譜洗脫時(shí)間，設(shè)置不同的檢測窗口以及參數(shù)；

S16校正方程：液相色譜上分離出的4種兒茶酚胺代謝物進(jìn)入到三重四級桿質(zhì)譜進(jìn)行檢測，利用三重四級桿質(zhì)譜中的多重反應(yīng)監(jiān)控模式特異性地檢測4種兒茶酚胺代謝物的含量，根據(jù)信號噪音比計(jì)算得到定量檢測限與鑒定檢測限，根據(jù)比值以及已知標(biāo)準(zhǔn)品和內(nèi)標(biāo)濃度值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖并得到定量校正方程；

S21待測樣品處理：取血漿樣本，加入含內(nèi)標(biāo)的乙腈溶液進(jìn)行蛋白沉淀，充分沉淀后第一次離心，移取血漿上清液并進(jìn)行冷凍干燥；

S22衍生化反應(yīng)：利用衍生化試劑對血漿凍干樣品進(jìn)行衍生化處理使得兒茶酚胺發(fā)生化學(xué)反應(yīng)；反應(yīng)完后加入甲酸水溶液調(diào)節(jié)使pH＝7，第二次離心后取樣品上清液于96孔板上備用，用于液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜上樣分析；

S23液相色譜分離：利用超高壓液相色譜以及相應(yīng)的流動相，在反向C18分析柱上對4種兒茶酚胺代謝物進(jìn)行分離：

S24串聯(lián)質(zhì)譜檢測：色譜上分離后的4種兒茶酚胺代謝物進(jìn)入到質(zhì)譜進(jìn)行檢測，利用三重四級桿質(zhì)譜中的多重反應(yīng)監(jiān)控模式特異性地檢測4種兒茶酚胺代謝物，根據(jù)不同的色譜洗脫時(shí)間，設(shè)置不同的檢測窗口以及參數(shù)；

S25兒茶酚胺代謝物的含量計(jì)算：質(zhì)譜檢測得到兒茶酚胺代謝物與內(nèi)標(biāo)的比值，將比值代入到定量校正方程，計(jì)算得到血漿中兒茶酚胺代謝物的含量。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，所述衍生化反應(yīng)是采用丹磺酰氯作為衍生化試劑并在避光條件下進(jìn)行的。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，所述液相色譜分離的洗脫梯度如下：

7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，所述質(zhì)譜檢測的多重反應(yīng)監(jiān)控參數(shù)如下：

8.根據(jù)權(quán)利要求4-7任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所述液相色譜分離的洗脫梯度如下：

9.根據(jù)權(quán)利要求4-7任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所述內(nèi)標(biāo)為氘代香草扁桃酸和/或氘代甲氧基腎上腺素。

10.根據(jù)權(quán)利要求4-7任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所述香草扁桃酸保留時(shí)間為4.88min，高香草酸保留時(shí)間為5.69min，甲氧基腎上腺素保留時(shí)間為8.05min，甲氧基去甲腎上腺素保留時(shí)間為8.93min，氘代香草扁桃酸保留時(shí)間為4.88min，氘代甲氧基腎上腺素保留時(shí)間為8.05min。