專利名稱：呋喃唑酮代謝物elisa檢測試劑盒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實(shí)用新型涉及動(dòng)物源性食品中藥物物殘留量的檢測試 劑盒，特別是檢測動(dòng)物源性食品中呋喃唑酮代謝物殘留量的試劑盒。
(二) 背景技術(shù)硝基呋喃類藥物因有非常好的抗菌作用和藥動(dòng)力學(xué)的特 性，曾經(jīng)被廣泛應(yīng)用，作為禽類、水產(chǎn)和豬促生長的添加劑。但在長時(shí)間的實(shí) 驗(yàn)研究過程中發(fā)現(xiàn)，硝基呋喃類藥物和代謝物均可以使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物發(fā)生癌變和基 因突變，正因?yàn)槿绱瞬艑?dǎo)致此類藥物禁止在治療和飼料中使用。呋喃唑酮在1995 年被禁用。
由于硝基呋喃類藥物在體內(nèi)很快就能被代謝，而在組織中結(jié)合的代謝產(chǎn)物 則能存留較長的一段時(shí)間，所以在分析此類藥物的殘留時(shí)經(jīng)常要分析其代謝后 的產(chǎn)物，管理部門就以檢測代謝產(chǎn)物為手段達(dá)到檢測硝基吹喃類殘留的目的。 吹喃唑酮代謝產(chǎn)物AOZ; ^^喃它酮代謝產(chǎn)物AMOZ;硝基吹喃托英代謝產(chǎn)物 AHD;硝基糠腙(呋喃西林)代謝產(chǎn)物SEM。
用來檢測呋喃唑酮代謝物的最常用方法是LC-UV， LC-MS和LC-MS/MS，
但其檢測樣本的搡作步驟麻煩，檢測時(shí)間長， 一次性檢測樣本少。
(三) 實(shí)用新型內(nèi)容本實(shí)用新型所要解決的問題是提供一種小巧輕便的 呋喃唑酮代謝物殘留檢測試劑盒，其操作簡便，檢測快速、準(zhǔn)確、靈敏度高， 成本低，穩(wěn)定性好，需要的技術(shù)含量不高，可進(jìn)行一次連續(xù)多個(gè)樣品中吹喃唑 酮代謝物含量的測定，減少了檢驗(yàn)樣本所需要的時(shí)間。
本實(shí)用新型的技術(shù)方案是采用96孔聚苯乙烯試劑板作為固相載體，放入 真空鋁鉑袋中，在試劑盒酶標(biāo)板微孔條上預(yù)包被呋喃唑酮代謝物偶聯(lián)抗原制成 檢測板，以塑料硬膜為蓋板膜，將40ml濃縮洗滌液、50ml濃縮復(fù)溶液、15.1mg 2-硝基苯甲醛、12ml酶標(biāo)二抗、0.8ml呋喃唑酮代謝物抗體濃縮液、7ml顯色液 A液、7ml顯色液B液、7ml終止液和6瓶lml梯度濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液及l(fā)ml 高濃度標(biāo)準(zhǔn)品溶液，試劑用不同大小、不同顏色的塑料瓶和玻璃瓶盛裝并固定 在泡沫塑料模具中與試劑板、蓋板膜一同封裝在盒內(nèi)，以便于攜帶和運(yùn)輸。每 一個(gè)試劑盒中的試劑足夠進(jìn)行96次測定(包括標(biāo)準(zhǔn)分析孔)，既可進(jìn)行一次連 續(xù)多個(gè)樣品的檢測，也可以將板孔拆開多次檢測。檢測時(shí)，樣本中的殘留物(吹 喃唑酮代謝物)將和酶標(biāo)板微孔條上預(yù)包被的偶聯(lián)呋喃唑酮代謝物抗原竟?fàn)幙筎MB底物顯色，樣本吸光度值與樣本中所含殘留物。夫喃唑酮代謝物)的含量 成負(fù)相關(guān)，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較再乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)，即可得出樣品中吹喃唑 酮代謝物的殘留量，其搡作簡便易行。
經(jīng)實(shí)驗(yàn)表明本試劑盒具有很高的靈敏度組織/蜂蜜的最低檢測限為 0.1|ig/kg、雞蛋的最低檢測限為0.1(ig/kg、蝦/魚等水產(chǎn)組織(因存在一定的干擾) 檢測下限為0.2嗎/kg;水產(chǎn)、肌肉、肝臟組織的回收率為75%±15%、蜂蜜的回 收率為90%±15%、雞蛋的回收率為90±20%,同其他呋喃唑酮代謝物類藥物
的交叉反應(yīng)率為<0.01%。相對(duì)于其他p夫喃唑酮代謝物殘留檢測方法，本試劑盒
所需儀器較少，只需要酶標(biāo)儀、勻質(zhì)器、振蕩機(jī)和微量加樣器，同類實(shí)驗(yàn)室一 般均有配備，所需成本較低。
本實(shí)驗(yàn)新型的有益效果是能快速、簡便、靈敏、準(zhǔn)確地用于動(dòng)物源性食 品中吹喃唑酮代謝物殘留的檢測。


圖1為本實(shí)驗(yàn)新型酶聯(lián)板的側(cè)面橫剖面圖(長為12.8cm);
圖2為本實(shí)驗(yàn)新型酶聯(lián)板的俯視圖3為本實(shí)驗(yàn)新型酶聯(lián)板的側(cè)面縱剖面圖(長為8.55cm);
圖4為本實(shí)驗(yàn)新型蓋板膜平面圖5為本實(shí)驗(yàn)新型試劑瓶縱剖面平面圖6為本實(shí)驗(yàn)新型固定泡沬模具的俯視圖。
參見附圖酶標(biāo)反應(yīng)微孔條(2)預(yù)包被呋喃唑酮代謝物偶聯(lián)抗原(3)固 定于酶標(biāo)板的外框支撐架(1)上，酶標(biāo)反應(yīng)微孔條(2)可隨要求拆卸；蓋板膜 (4)用于酶標(biāo)板置水洛或恒溫箱內(nèi)反應(yīng)時(shí)封蓋酶標(biāo)反應(yīng)微孔條(2);透明帽的 半透明塑料試劑瓶(5)用于封裝40ml濃縮洗滌液；藍(lán)色帽的半透明塑料試劑 瓶(5)用于封裝50ml濃縮復(fù)溶液；白色帽(6)的白色塑料試劑瓶(7)用于 封裝7ml顯色液A液，紅色帽(6)的黑色塑料試劑瓶(7)用于封裝7ml顯色 液B液，黃色帽(6)的白色塑料試劑瓶(7)用于封裝7ml終止液，紅色帽的 白色塑料試劑瓶(8)用于封裝12ml酶標(biāo)二抗，綠色帽的白色塑料試劑瓶(8) 用于封裝0.8ml呋喃唑酮代謝物抗體濃縮液，黑色帽的棕色玻璃試劑瓶(9)用 于封裝15.1mg 2-硝基苯甲醛，白色帽的棕色玻璃試劑瓶(9)用于封裝lml/瓶 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液及l(fā)ml高濃度標(biāo)準(zhǔn)品溶液；泡沬塑料模具(10)有15個(gè)瓶位，放置位置依次為40ml濃縮洗滌液瓶位(18)， 50ml濃縮復(fù)溶液(11 ), 7ml顯色 液A液瓶位(14)， 7ml顯色液B液瓶位(13)， 7ml終止液瓶位(12), 0.8ml 呋喃唑酮代謝物抗體濃縮液瓶位(16)， 12ml酶標(biāo)二抗瓶位(15), 6種lml/瓶 各種濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液及1瓶lml高濃度標(biāo)準(zhǔn)品溶液瓶位(17), 15.1mg2-硝基 苯甲醛的瓶位(17)。
本實(shí)驗(yàn)新型的實(shí)施例
一、樣本的前處理
1.配液
配液l:復(fù)溶工作液
用去離子水將2x濃縮復(fù)溶液按1: 1體積比進(jìn)行稀釋(1份2x 濃縮復(fù)溶液+l份去離子水)用于樣本的復(fù)溶
配液2:衍生化試劑
向裝有2-硝基苯甲醛的試劑瓶中加甲醇溶解定容至10ml (濃 度為10mM)。
配液3: O.IM磷酸氫二鉀溶液
稱取22.8g三水合磷酸氫二鉀加去離子水溶解定容至1L。
配液4: C液(供奶樣用)
0.36M亞硝基鐵氰化鈉(Na2Fe(CN)5'NO2H20 )溶液
12.5g亞硝基鐵氰化鈉加去離子水定容至100ml
配液5: D液(供奶樣用)
1M硫酸鋅(ZnS04'7H20)溶液
29.8g硫酸鋅用去離子水定容至100m
配液6: 1M鹽酸溶液
量取8.3ml濃鹽酸加入到盛有去離子水的容器中定容至 謂ml。
配液7: 1M氫氧化鈉溶液稱取4g氫氧化鈉加去離子水溶解定容至100ml。 配液8:洗滌工作液
用去離子水將20x濃縮洗滌液按1: 19體積比進(jìn)行稀釋(或按 一需量稀釋)(1份20x濃縮洗滌液+19份去離子水)用于酶標(biāo)板的 洗滌
2. 肌肉、肝臟、水產(chǎn)(魚蟲下等)組織前處理方法
用均質(zhì)器均質(zhì)樣本；稱取1.0土0.05g均質(zhì)后的組織樣本(肝樣/肉樣)至50ml 聚苯乙烯離心管中，分別加入4ml的去離子水、0.5ml 1M鹽酸和10(^1衍生化 試劑，用振蕩器充分振蕩2min;在37°C過夜孵育(大約16h);分別加入5ml 0.1M 磷酸氫二鉀溶液、0.4ml 1M氫氧化鈉溶液和5ml乙酸乙酯，用振蕩器劇烈振蕩 30s; 3000g以上，室溫(20-25°C/68-77°F )離心10min;取2.5ml乙酸乙酯相至 10ml干燥的玻璃試管中，于50 6(TC氮?dú)饬飨麓蹈?；加入lml正己烷(或正庚 烷)，用渦旋儀渦動(dòng)30s,再加入lml復(fù)溶工作液，用渦旋儀渦動(dòng)lmin充分混勻， 3000g以上，室溫(20-25。C/68-77°F )離心10min;除去上層有機(jī)相，取下層水 相50pl用于分析。
3. 牛奶樣本前處理
取牛奶樣本，3000g以上，1(TC離心10min,吸除上層脂肪；取5ml去除脂 肪牛奶樣本至10ml玻璃離心管中；分別加入250jal C液和250^1 D液；用振蕩 器充分振蕩混合，3000g以上，4~12°C (39-54。F )離心10min (如果沒有恒溫離 心機(jī)，則先將樣本降溫至大約8。C(46下)，然后離心)；取出制備好的牛奶樣本 上清液Uml (相當(dāng)于lml的奶樣)，分別加入4ml的去離子水、0.5mllM鹽酸 和100^衍生化試劑，用振蕩器充分振蕩2min;在37 °C過夜孵育(大約16h); 分別加入5ml0.1M磷酸氫二鉀溶液、0.4ml 1M氫氧化鈉溶液和5ml乙酸乙酯， 用振蕩器劇烈振蕩30s, 3000g以上，室溫(20-25 。C/68-77。F )離心10min;取 2.5ml乙酸乙酯相至10ml干燥的玻璃試管中，于50 ~ 6(TC氮?dú)饬飨麓蹈?；加?lml正己烷(或正庚烷)，用渦旋儀渦動(dòng)30s,再加入lml復(fù)溶工作液，用渦旋 儀渦動(dòng)lmin充分混勻,3000g以上，室溫(20-25 °C/68-77°F )離心10min;除 去上層有機(jī)相，取下層水相5(V1用于分析。
4. 蜂蜜樣本前處理
稱取1.0土0.05g蜂蜜至50ml聚苯乙烯離心管中，加入4ml去離子水，用振蕩器振蕩至蜂蜜全部溶解；加入0.5ml 1M鹽酸溶液和100pl衍生化試劑，用振 蕩器充分振蕩；在37。C過夜孵育(大約16h);分別加入5ml 0.1M磷酸氫二鉀 溶液、0.4ml 1M氫氧化鈉溶液和5ml乙酸乙酯，用振蕩器劇烈振蕩30s, 3000g 以上，室溫(20-25 。C/68-77。F )離心10min;取2.5ml乙酸乙酯相至10ml干燥 的玻璃試管中，于50-60。C氮?dú)饬飨麓蹈?；加入lml正己烷(或正庚烷)，用渦 旋儀渦動(dòng)30s,再加入lml復(fù)溶工作液，用渦旋儀渦動(dòng)lmin充分混勻，3000g 以上，室溫(20-25°C/68-77°F )離心10min;除去上層有機(jī)相，取下層水相50^1 用于分析。
5.雞蛋樣本前處理方法
用均質(zhì)器低速均質(zhì)樣本(蛋黃或全蛋)；稱取2.0士0.05g均質(zhì)過的蛋樣本至 10ml玻璃離心管中，分別加入4ml去離子水、0.5mllM鹽酸、200jalC液，用 振蕩器振蕩lmin混勻；加入200ialD液，用振蕩器充分振蕩5min, 3000g以上， 室溫(20-25。C/68-77。F )離心10min;取全部上清液至15ml玻璃離心管中，加 入200^11衍生化試劑，用振蕩器充分振蕩，5(TC水洛2h (中間每半小時(shí)用振蕩 器劇烈振蕩l-2分鐘)；分別加入5ml0.1M磷酸氫二鉀溶液、0.4ml 1M氫氧化 鈉5ml乙酸乙酯，用振蕩器劇烈振蕩30s, 3000g以上，室溫(20-25°C/68-77°F ) 離心10min;取2.5ml上層有機(jī)相，于50 ~ 6(TC氮?dú)饬飨麓蹈?；加入lml正己 烷(或正庚烷)，用渦旋儀渦動(dòng)30s,再加入2ml復(fù)溶工作液，用渦旋儀渦動(dòng)lmin 充分混勻(如出現(xiàn)乳化現(xiàn)象，請(qǐng)于6(TC水浴中加熱5min,再重復(fù)離心)；除去 上層有機(jī)相，取下層水相5(Vl用于分析。
二、使用試劑盒的操作步驟
1、 從4。C冷藏環(huán)境中取出所需試劑，置室溫(20-25'C)平衡30min以上，注
意每種液體試劑使用前均須搖勻。
2、 取出框架及需要數(shù)量的微孔，將不用的微孔放入自封袋，保存于2-8'C。
3、 洗滌工作液在使用前也需回溫。
4、 編號(hào)將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平 行，并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。
5、 抗體工作液的稀釋將抗體濃縮液用復(fù)溶工作液按照1:10體積比進(jìn)行稀 釋(1份抗體濃縮液加入10份復(fù)溶工作液)。
6、 加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本50(il/孔到對(duì)應(yīng)的微孔中，再加入抗體工作液50W/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置25。C避光環(huán)境中反應(yīng)60min。
7、 洗板小心揭開蓋板膜，將孔內(nèi)液體甩干，用洗滌工作液250)id/孔，充 分洗滌4-5次，每次間隔IO秒，用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用 未使用過的槍頭戳破)。
8、 加酶標(biāo)二抗加入酶標(biāo)二抗100pl/孔，輕輕振蕩混句，用蓋板膜蓋板后 置25。C避光環(huán)境中反應(yīng)30min。取出重復(fù)洗板步驟7。
9、 顯色加入底物液A液50iil/孔，再加B液50^il/孔，輕輕振蕩混勻，用 蓋板膜蓋板后置25C環(huán)境中避光顯色30min (見注意事項(xiàng)8 )。
10、 測定加入終止液50pl/孔，輕輕振蕩混勻，設(shè)定酶標(biāo)儀于450nm處， (建議用雙波長450/630nm檢測，在5min內(nèi)讀完數(shù)據(jù))，測定每孔OD值。(若
無酶標(biāo)儀，則不加終止液用目測法可進(jìn)行判定)。
三、結(jié)果判定
結(jié)果判定有兩種方法，粗略判定可用第1種方法,定量判定用第2種方法。注 意樣本吸光值與其所含吹喃唑酮代謝物成負(fù)相關(guān)。
1、 用樣本的平均吸光度值與標(biāo)準(zhǔn)值比較即可得出其濃度范圍Oig/L)。假設(shè) 樣本1的吸光度值為0.310，樣本2的吸光度值為0.820,標(biāo)準(zhǔn)液吸光度值分 別是Opg/L為2.104; 0.05昭/L為1.224; 0.15嗎/L為0.859; 0.45嗎/L為0.522; U5嗎/L為0.270; 4.05|ig/L為0.129。則樣本1的濃度范圍是0.45嗎/L-1.35^ig/L
再乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)即可得出樣本中喃唑酮代謝物殘留的濃度范圍；樣 本2的濃度范圍是0.15嗎/L-0.45嗎/L再乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)即可得出樣本中 吹喃唑酮代謝物殘留的濃度范圍。
2、 定量分析
(1) 百分吸光率的計(jì)算，標(biāo)準(zhǔn)品或樣本的百分吸光率等于標(biāo)準(zhǔn)品或樣本的 百分吸光率等于標(biāo)準(zhǔn)品或樣品的百分吸光度值的平均值(雙孔)除以第一個(gè)標(biāo) 準(zhǔn)(O標(biāo)準(zhǔn))的吸光度值，再乘以100%，即
百分吸光度值(％) =B/B。 x 100%
B—標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣本溶液的平均吸光度值
B0—0嗎/L標(biāo)準(zhǔn)溶液的平均吸光度值
(2) 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制與計(jì)算
8以標(biāo)準(zhǔn)品百分吸光率為縱坐標(biāo)，以吹喃唑酮代謝物標(biāo)準(zhǔn)品濃度(嗎/L)的 半對(duì)數(shù)為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標(biāo)準(zhǔn)曲線中，從 標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出樣本所對(duì)應(yīng)的濃度，乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中吹喃唑 酮代謝物的實(shí)際殘留量。
若利用試劑盒專業(yè)分析軟件進(jìn)行計(jì)算，更便于大量樣品的準(zhǔn)確、快速分析。
四、測定前的注意事項(xiàng)
1 、室溫低于20°C或試劑及樣本沒有回到室溫(20-25°C )會(huì)導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的 OD值偏低。
2、 在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況，則會(huì)出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性， 重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步搡作。
3、 每加一種試劑前需將其搖勻。
4、 反應(yīng)終止液為2M硫酸，避免接觸皮膚。
5、 不要使用過了有效日期的試劑盒；也不要使用過了有效期的試劑盒中的 任何試劑，摻雜使用過了有效期的試劑盒會(huì)引起靈敏度的降低；不要交換使用 不同批號(hào)試劑盒中的試劑。
6、 儲(chǔ)存條件
保存試劑盒于2-8'C,不要冷凍；將不用的酶標(biāo)板微孔板放進(jìn)自封袋重新密 封；標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和無色的發(fā)色劑對(duì)光敏感，因此要避免直接暴露在光線下。
7、 試劑變質(zhì)的跡象
發(fā)色試劑有任何顏色表明發(fā)色劑變質(zhì)，應(yīng)當(dāng)棄之。0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度 (450/630nm)值小于0.5 ( A45onm<0.5 )時(shí)，表示試劑可能變質(zhì)。
8、 在加入底物液A和底物液B液后， 一般顯色時(shí)間為20-30min即可。若 顏色較淺，可延長反應(yīng)時(shí)間到35min(或更長)，但不得超過40min。反之，則 減短反應(yīng)時(shí)間。
9、 該試劑盒最佳反應(yīng)溫度為25°C，溫度過高或過低將導(dǎo)致檢測吸光度值和 靈敏度發(fā)生變化。
權(quán)利要求1. 一種檢測動(dòng)物源性食品中呋喃唑酮代謝物的ELISA檢測試劑盒，包括盒體和盒內(nèi)的一塊96孔的酶標(biāo)板、一張蓋板膜、15瓶試劑和放試劑的下凹瓶位、一個(gè)自封袋、一份說明書和一份質(zhì)檢報(bào)告，其特征在于酶標(biāo)板是采用96孔試劑板作為固相載體，在試劑盒微孔條上預(yù)包被呋喃唑酮代謝物偶聯(lián)抗原制成的檢測板，15瓶試劑分別為6瓶標(biāo)準(zhǔn)品溶液、1瓶高濃度標(biāo)準(zhǔn)品溶液、酶標(biāo)二抗、呋喃唑酮代謝物抗體濃縮液、顯色液A液、顯色液B液、終止液、濃縮洗滌液、濃縮復(fù)溶液、2-硝基苯甲醛，下凹瓶位共15個(gè)。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于盒體是硬紙盒；96孔的 聚苯乙烯酶標(biāo)板，放于真空鋁鉑袋內(nèi)；蓋板膜是塑料硬膜；標(biāo)準(zhǔn)品溶液和高濃 度標(biāo)準(zhǔn)品溶液均用白色帽的棕色玻璃瓶，酶標(biāo)二抗用紅色帽的白色PE塑料瓶， 呋喃唑酮代謝物抗體濃縮液用綠色帽的白色PE塑料瓶，顯色液A液用白色帽的 白色PE塑料瓶，顯色液B液用紅色帽的黑色PE塑料瓶，終止液用黃色帽的白 色PE塑料瓶，濃縮洗滌液用透明帽的半透明PE塑料瓶，濃縮復(fù)溶液用藍(lán)色帽 的半透明PE塑料瓶，2-硝基苯甲醛用黑色帽的棕色玻璃瓶；下凹瓶位由塑料泡 沬制成。
3. 根據(jù)權(quán)利要求l所述的試劑盒，其特征在于酶標(biāo)板是由外框支撐架及 放置其上的可拆的12條酶標(biāo)反應(yīng)微孔條組成，每個(gè)可拆裝酶標(biāo)反應(yīng)微孔條有8 個(gè)反應(yīng)孔，每個(gè)反應(yīng)孔預(yù)包被呋喃唑酮代謝物偶聯(lián)抗原；蓋板膜大小與酶標(biāo)板 橫切面大小一致；標(biāo)準(zhǔn)品溶液6瓶，lml/瓶，濃度分別為0pg/L， 0.05嗎/L， 0.15pg /L，0.45ng/L， 1.35嗎/L ，4.05嗎/L;高濃度標(biāo)準(zhǔn)品溶液1瓶，lml;酶標(biāo)二抗1 瓶，12ml;呋喃唑酮代謝物抗體濃縮液1瓶，0.8ml;顯色液A液1瓶，7ml; 顯色液B液1瓶，7ml;終止液1瓶，7ml;濃縮洗滌液1瓶，40ml;濃縮復(fù)溶 液1瓶，50ml; 2-硝基苯甲醛l瓶，15.1mg。
專利摘要本實(shí)用新型涉及一種檢測動(dòng)物源性食品中呋喃唑酮代謝物的ELISA檢測試劑盒。該試劑盒組成包括96孔酶標(biāo)板、酶標(biāo)二抗、呋喃唑酮代謝物抗體濃縮液、呋喃唑酮代謝物標(biāo)準(zhǔn)品溶液、底物顯色液、終止液、濃縮洗滌液、濃縮復(fù)溶液、2-硝基苯甲醛、高濃度標(biāo)準(zhǔn)品、蓋板膜、自封袋、說明書和質(zhì)檢報(bào)告。采用間接競爭ELISA方法，在酶標(biāo)板微孔條上預(yù)包被偶聯(lián)抗原，樣本中殘留的呋喃唑酮代謝物將和微孔條上預(yù)包被的偶聯(lián)抗原競爭抗呋喃唑酮代謝物抗體，加入酶標(biāo)二抗后，用TMB底物顯色，樣本吸光度值與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較再乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)，即可得出樣品中呋喃唑酮代謝物的殘留量。與儀器分析技術(shù)相比具有操作簡便、費(fèi)用低廉、靈敏度高等特點(diǎn)。
文檔編號(hào)G01N33/543GK201130183SQ20072012729
公開日2008年10月8日 申請(qǐng)日期2007年8月2日 優(yōu)先權(quán)日2007年8月2日
發(fā)明者萬宇平, 何方洋, 馮才偉, 劉玉梅, 吳小平, 倩 孫, 汪善良, 沈建忠 申請(qǐng)人:北京望爾生物技術(shù)有限公司;北京望爾康泰生物技術(shù)有限公司