專利名稱：作為mek抑制劑的n3烷基化苯并咪唑衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一系列烷基化的(1H-苯并咪唑-5-基)-(4-取代的苯基)-胺衍生物，其可用于治療哺乳動(dòng)物中的過(guò)度增殖性疾病，如癌癥和炎癥。本發(fā)明還涉及在治療哺乳動(dòng)物、特別是人中的過(guò)度增殖性疾病時(shí)使用所述化合物的方法，還涉及包含這些化合物的藥物組合物。

背景技術(shù)：
通過(guò)生長(zhǎng)因子受體和蛋白質(zhì)激酶進(jìn)行細(xì)胞信號(hào)傳遞是細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖和分化中的重要調(diào)節(jié)劑。在正常的細(xì)胞生長(zhǎng)中，通過(guò)受體活化，生長(zhǎng)因子(如PDGF或EGF等)激活MAP激酶通道。在正常和非受控細(xì)胞生長(zhǎng)中最重要而且也是最被了解的MAP激酶通道之一是Ras/Raf激酶通道?；钚訥TP所結(jié)合的Ras導(dǎo)致Raf激酶的活化和間接磷酸化。Raf接著使兩個(gè)絲氨酸殘基上的MEK1和2磷酸化(對(duì)于MEK1是S218和S222，而對(duì)于MEK2是S222和S226(Ahn等人，Methods in Enzymology2001，332，417-431)。經(jīng)活化的MEK然后使其已知的底物--MAP激酶(ERK1和2)磷酸化。由MEK產(chǎn)生的ERK磷酸化對(duì)于ERK1是發(fā)生在Y204和T202上，而對(duì)于ERK2是發(fā)生在Y185和T183上(Ahn等人，Methods in Enzymology 2001，332，417-431)。被磷酸化的ERK發(fā)生二聚合，然后移位至細(xì)胞核中，并在此累積(Khokhlatchev等人，Cell1998，93，605-615)。在該細(xì)胞核中，ERK參與數(shù)種重要的細(xì)胞功能中，包括但不限于核轉(zhuǎn)運(yùn)、信號(hào)傳導(dǎo)、DNA修復(fù)、核小體組裝和移位、以及mRNA加工和翻譯(Ahn等人，Molecular Cell 2000，6，1343-1354)?？傊?，用生長(zhǎng)因子處理細(xì)胞導(dǎo)致ERK1和2的活化，這又導(dǎo)致增殖，而且在某些情況下導(dǎo)致分化(Lewis等人，Adv.Cancer Res.1998，74，49-139)。
在增殖性疾病中，ERK激酶通道所涉及的生長(zhǎng)因子受體、下游信號(hào)蛋白或蛋白激酶的基因突變和/或過(guò)度表達(dá)導(dǎo)致非受控的細(xì)胞增殖，并最終導(dǎo)致腫瘤形成。例如，一些癌癥所包含的突變由于連續(xù)形成生長(zhǎng)因子而導(dǎo)致該通道的連續(xù)活化。其他突變可在已活化的結(jié)合GTP的Ras復(fù)合物的去活化中導(dǎo)致缺陷產(chǎn)生，這又導(dǎo)致MAP激酶通道的活化。在50％的結(jié)腸和90％以上的胰腺癌，以及許多其他類型的癌癥中都發(fā)現(xiàn)了突變、致癌性的Ras(Kohl等人，Science 1993，260，1834-1837)。最近，在60％以上的惡性黑素瘤中鑒別出bRaf突變(Davies，H.等人.Nature 2002，417，949-954)。bRaf中的這些突變導(dǎo)致組成性的活性MAP激酶級(jí)聯(lián)。原生腫瘤樣品和細(xì)胞系的研究也已表明胰腺、結(jié)腸、肺、卵巢和腎的癌癥中MAP激酶通道的組成性或過(guò)度活化(Hoshino，R.等人，Oncogene 1999，18，813-822)。由此，在癌癥和由于基因突變導(dǎo)致的過(guò)度活性的MAP激酶通道之間存在強(qiáng)烈的關(guān)聯(lián)性。
因?yàn)镸AP激酶級(jí)聯(lián)的組成性或過(guò)度活化在細(xì)胞增殖和分化中起著重要的作用，相信抑制該通道在過(guò)度增殖性疾病中是有益的。因?yàn)樵赗as和Raf的下游，MEK在該通道中是一個(gè)關(guān)鍵的因素。另外，其是一個(gè)具有吸引力的治療目標(biāo)，因?yàn)閷?duì)于MEK磷酸化已知的底物是MAP激酶--ERK1和2。在多個(gè)研究中已表明抑制MEK具有潛在的治療作用。例如，已表明小分子的MEK抑制劑在無(wú)毛鼠異種移植中抑制人腫瘤生長(zhǎng)(Sebolt-Leopold等人，Nature-Medicine 1999，5(7)，810-816；Trachet等人，AACR April 6-10，2002，Poster #5426；Tecle，H.IBC 2ndInternational Conference of Protein kinases，September 9-10，2002)、在動(dòng)物中阻斷靜態(tài)異常性疼痛(2001年1月25日公布的WO 01/05390)、以及抑制極性髓性白血病細(xì)胞的生長(zhǎng)(Milella等人，J Clin Invest 2001，108(6)，851-859)。
已公開(kāi)了MEK的小分子抑制劑。在過(guò)去的數(shù)年中，至少有13個(gè)專利申請(qǐng)1995年1月24日申請(qǐng)的US 5,525,625；1998年10月8日公布的WO 98/43960；1999年1月14日公布的WO 99/01421；1999年1月14日公布的WO 99/0142；2000年7月20日公布的WO 00/41505；2000年7月20日公布的WO 00/42002，2000；2000年7月20日公布的WO00/42003；2000年7月20日公布的WO 00/41994；2000年7月20日公布的WO 00/42022；2000年7月20日公布的WO 00/42029；2000年11月16日公布的WO 00/68201；2001年9月20日公布的WO 01/68619；以及2002年1月24日公布的WO 02/06213。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供式I的烷基化(1H-苯并咪唑-5-基)-(4-取代的苯基)-胺化合物及其藥物學(xué)上可接受的鹽和前藥，它們可用于治療過(guò)度增殖性疾病。具體而言，本發(fā)明涉及用作MEK抑制劑的式I化合物。本發(fā)明還提供治療癌癥的方法。本發(fā)明還提供包含式I的化合物的制劑以及使用該化合物治療患者的方法。另外，本發(fā)明還描述了制備式I的抑制劑化合物的方法。
因此，本發(fā)明提供式I的化合物及其藥物學(xué)上可接受的鹽、前藥和溶劑化物
其中 ------是任選的鍵，條件是環(huán)中有且僅有一個(gè)氮是雙鍵的； R1、R2、R9和R10獨(dú)立地選自于氫、鹵素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、疊氮基、-OR3、-C(O)R3、-C(O)OR3、-NR4C(O)OR6、-OC(O)R3、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR5C(NCN)NR3R4、-NR3R4，以及 C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10環(huán)烷基、C3-C10環(huán)烷基烷基、-S(O)j(C1-C6烷基)、-S(O)j(CR4R5)m-芳基、芳基、芳基烷基、雜芳基、雜芳基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基、-O(CR4R5)m-芳基、-NR4(CR4R5)m-芳基、-O(CR4R5)m-雜芳基、-NR4(CR4R5)m-雜芳基、-O(CR4R5)m-雜環(huán)基以及-NR4(CR4R5)m-雜環(huán)基，其中每個(gè)烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基部分可任選地被1-5個(gè)獨(dú)立地選自于以下組中的基團(tuán)取代氧代、鹵素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、疊氮基、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-C(O)R3、-C(O)OR3、-OC(O)R3、-NR4C(O)OR6、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR5C(NCN)NR3R4、-OR3、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、雜環(huán)基、和雜環(huán)基烷基； R3選自于氫、三氟甲基、以及 C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10環(huán)烷基、C3-C10環(huán)烷基烷基、芳基、芳基烷基、雜芳基、雜芳基烷基、雜環(huán)基、和雜環(huán)基烷基，其中每個(gè)烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基部分可任選地被1-5個(gè)獨(dú)立地選自于以下組中的基團(tuán)取代氧代、鹵素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、疊氮基、-NR′SO2R″″、-SO2NR′R″、-C(O)R′、-C(O)OR′、-OC(O)R′、-NR′C(O)OR″″、-NR′C(O)R″、-C(O)NR′R″、-SR′、-S(O)R″″、-SO2R″″、-NR′R″、-NR′C(O)NR″R″′、-NR′C(NCN)NR″R″′、-OR′、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、雜環(huán)基、和雜環(huán)基烷基； R′、R″和R″′獨(dú)立地選自于氫、低級(jí)烷基、低級(jí)烯基、芳基和芳基烷基； R″″選自于低級(jí)烷基、低級(jí)烯基、芳基和芳基烷基；或者 R′、R″、R″′或R″″中的任意兩個(gè)可與它們所連接的原子一起形成4-10元碳環(huán)、雜芳基或雜環(huán)，這些基團(tuán)中每一個(gè)都可任選地被1-3個(gè)獨(dú)立地選自于以下組中的基團(tuán)取代鹵素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、疊氮基、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、雜環(huán)基、和雜環(huán)基烷基；或者 R3和R4與它們所連接的原子一起形成4-10元碳環(huán)、雜芳基或雜環(huán)，這些基團(tuán)中每一個(gè)都可任選地被1-3個(gè)獨(dú)立地選自于以下組中的基團(tuán)取代鹵素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、疊氮基、-NR′SO2R″″、-SO2NR′R″、-C(O)R′、-C(O)OR′、-OC(O)R′、-NR′C(O)OR″″、-NR′C(O)R″、-C(O)NR′R″、-SO2R″″、-NR′R″、-NR′C(O)NR″R″′、-NR′C(NCN)NR″R″′、-OR′、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、雜環(huán)基、和雜環(huán)基烷基；或者 R4和R5獨(dú)立地代表氫或C1-C6烷基；或者 R4和R5與它們所連接的原子一起形成4-10元碳環(huán)、雜芳基或雜環(huán)，這些基團(tuán)中每一個(gè)都可任選地被1-3個(gè)獨(dú)立地選自于以下組中的基團(tuán)取代鹵素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、疊氮基、-NR′SO2R″″、-SO2NR′R″、-C(O)R″″、-C(O)OR′、-OC(O)R′、-NR′C(O)OR″″、-NR′C(O)R″、-C(O)NR′R″、-SO2R″″、-NR′R″、-NR′C(O)NR″R″′、-NR′C(NCN)NR″R″′、-OR′、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、雜環(huán)基、和雜環(huán)基烷基； R6選自于三氟甲基、以及 C1-C10烷基、C3-C10環(huán)烷基、芳基、芳基烷基、雜芳基、雜芳基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基，其中每個(gè)烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基部分可任選地被1-5個(gè)獨(dú)立地選自于以下組中的基團(tuán)取代氧代、鹵素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、疊氮基、-NR′SO2R″″、-SO2NR′R″、-C(O)R′、-C(O)OR′、-OC(O)R′、-NR′C(O)O R″″、-NR′C(O)R″、-C(O)NR′R″、-SO2R″″、-NR′R″、-NR′C(O)NR″R″′、-NR′C(NCN)NR″R″′、-OR′、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、雜環(huán)基、和雜環(huán)基烷基； R7選自于氫、以及 C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10環(huán)烷基、C3-C10環(huán)烷基烷基、芳基、芳基烷基、雜芳基、雜芳基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基，其中每個(gè)烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基部分可任選地被1-5個(gè)獨(dú)立地選自于以下組中的基團(tuán)取代氧代、鹵素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、疊氮基、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-C(O)R3、-C(O)OR3、-OC(O)R3、-NR4C(O)OR6、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-SO2R6、-NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR5C(NCN)NR3R4、-OR3、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、雜環(huán)基、和雜環(huán)基烷基； W選自于雜芳基、雜環(huán)基、-C(O)OR3、-C(O)NR3R4、-C(O)NR4OR3、-C(O)R4OR3、-C(O)(C3-C10環(huán)烷基)、-C(O)(C1-C10烷基)、-C(O)(芳基)、-C(O)(雜芳基)和-C(O)(雜環(huán)基)，這些基團(tuán)中的每一個(gè)都可任選地被1-5個(gè)獨(dú)立地選自于以下組中的基團(tuán)取代 -NR3R4、-OR3、-R2、以及 C1-C10烷基、C2-C10烯基、和C2-C10炔基，它們中的每一個(gè)都任選地被1或2個(gè)選自于-NR3R4和-OR3中的基團(tuán)取代； R8選自于氫、-SCF3、-Cl、-Br、-F、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、疊氮基、-OR3、-C(O)R3、-C(O)OR3、-NR4C(O)OR6、-OC(O)R3、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR3R4、以及 C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10環(huán)烷基、C3-C10環(huán)烷基烷基、-S(O)j(C1-C6烷基)、-S(O)j(CR4R5)m-芳基、芳基、芳基烷基、雜芳基、雜芳基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基、-O(CR4R5)m-芳基、-NR4(CR4R5)m-芳基、-O(CR4R5)m-雜芳基、-NR4(CR4R5)m-雜芳基、-O(CR4R5)m-雜環(huán)基和-NR4(CR4R5)m-雜環(huán)基，其中每個(gè)烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基部分可任選地被1-5個(gè)獨(dú)立地選自于以下組中的基團(tuán)取代氧代、鹵素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、疊氮基、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-C(O)R3、-C(O)OR3、-OC(O)R3、-NR4C(O)OR6、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR5C(NCN)NR3R4、-OR3、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、雜環(huán)基、和雜環(huán)基烷基； m是0、1、2、3、4或5；以及 j是1或2。

具體實(shí)施例方式 本發(fā)明中包括的新化合物是那些如上述通式I所描述的化合物、及其藥物學(xué)上可接受的鹽和前藥。
本發(fā)明還提供式I的化合物，其中R7是C1-C10烷基、C3-C7環(huán)烷基、C3-C7環(huán)烷基烷基、C3-C7雜環(huán)烷基或C3-C7雜環(huán)烷基烷基，它們中的每一個(gè)可任選地被1-3個(gè)獨(dú)立地選自于以下組中的基團(tuán)取代氧代、鹵素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、疊氮基、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-C(O)R3、-C(O)OR3、-OC(O)R3、-SO2R3、-NR4C(O)OR6、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR5C(NCN)NR3R4、-OR3、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、雜環(huán)基、和雜環(huán)基烷基。
本發(fā)明還提供式I的化合物其中R8是-OCF3、-Br或-Cl，R2是氫，而R1是低級(jí)烷基或鹵素。
本發(fā)明還提供式I的化合物，其中R9是氫或鹵素，而R10是氫。
本發(fā)明還提供式I的化合物，其中W是-C(O)OR3或-C(O)NR4OR3。
本發(fā)明還提供式II的化合物
其中W、R1、R7、R8、R9和R10如以上式I所述。
本發(fā)明還提供式II的化合物，其中R7是C1-C10烷基、C3-C7環(huán)烷基或C3-C7環(huán)烷基烷基，這些基團(tuán)中的每一個(gè)都可任選地被1-3個(gè)獨(dú)立地選自于以下組中的基團(tuán)取代氧代、鹵素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、疊氮基、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-C(O)R3、-C(O)OR3、-OC(O)R3、-SO2R3、-NR4C(O)OR6、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR5C(NCN)NR3R4、-OR3、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、雜環(huán)基、和雜環(huán)基烷基。
本發(fā)明還提供式II的化合物，其中R8是-OCF3、-Br或-Cl，而R1是低級(jí)烷基或鹵素。
本發(fā)明還提供式II的化合物，其中R9是氫或鹵素，而R10是氫。
本發(fā)明還提供式II的化合物，其中W是-C(O)OR3或-C(O)NR4OR3。
本發(fā)明還提供式III的化合物
其中W、R1、R7、R8、R9和R10如以上式I所述，而A是-OR3或-NR4OR3，其中R3和R4如以上式I所述。
本發(fā)明還提供式III的化合物，其中R7是C1-C10烷基、C3-C7環(huán)烷基或C3-C7環(huán)烷基烷基，這些基團(tuán)中的每一個(gè)都可任選地被1-3個(gè)獨(dú)立地選自于以下組中的基團(tuán)取代氧代、鹵素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、疊氮基、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-C(O)R3、-C(O)OR3、-OC(O)R3、-SO2R3、-NR4C(O)OR6、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR5C(NCN)NR3R4、-OR3、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、雜環(huán)基、和雜環(huán)基烷基。
本發(fā)明還提供式III的化合物，其中R8是-OCF3、-Br或-Cl，R2是氫，而R1是低級(jí)烷基或鹵素。
本發(fā)明還提供式III的化合物，其中R9是氫或鹵素。
本發(fā)明還提供式III的化合物，其中當(dāng)A是-OR3時(shí)，R3是氫或低級(jí)烷基；以及當(dāng)A是-NR4OR3時(shí)，R4是氫。
本發(fā)明還提供式IIIa的化合物
其中R1、R2、R7、R8和R9如以上式I所述，而A是-OR3或-NR4OR3，其中R3和R4如以上式I所述。
本發(fā)明還提供式IIIa的化合物，其中R7是C1-C10烷基、C3-C7環(huán)烷基或C3-C7環(huán)烷基烷基，這些基團(tuán)中的每一個(gè)都可任選地被1-3個(gè)獨(dú)立地選自于以下組中的基團(tuán)取代氧代、鹵素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、疊氮基、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-C(O)R3、-C(O)OR3、-OC(O)R3、-SO2R3、-NR4C(O)OR6、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR5C(NCN)NR3R4、-OR3、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、雜環(huán)基、和雜環(huán)基烷基。
本發(fā)明還提供式IIIa的化合物，其中R8是-OCF3、-Br或-Cl，R2是氫，而R1是低級(jí)烷基或鹵素。
本發(fā)明還提供式IIIa的化合物，其中R9是氫或鹵素。
本發(fā)明還提供式IIIa的化合物，其中當(dāng)A是-OR3時(shí)，R3是氫或低級(jí)烷基；以及當(dāng)A是-NR4OR3時(shí)，R4是氫。
本發(fā)明還提供式IIIb的化合物
其中R1、R7、R8和R9如以上式I所述，而A是-OR3或-NR4OR3，其中R3和R4如以上式I所述。
本發(fā)明還提供式IIIb的化合物，其中R7是C1-C10烷基、C3-C7環(huán)烷基或C3-C7環(huán)烷基烷基，這些基團(tuán)中的每一個(gè)都可任選地被1-3個(gè)獨(dú)立地選自于以下組中的基團(tuán)取代氧代、鹵素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、疊氮基、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-C(O)R3、-C(O)OR3、-OC(O)R3、-SO2R3、-NR4C(O)OR6、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR5C(NCN)NR3R4、-OR3、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、雜環(huán)基、和雜環(huán)基烷基。
本發(fā)明還提供式IIIb的化合物，其中R8是-OCF3、-Br或-Cl，而R1是低級(jí)烷基或鹵素。
本發(fā)明還提供式IIIb的化合物，其中R9是氟或氯。
本發(fā)明還提供式IIIb的化合物，其中當(dāng)A是-OR3時(shí)，R3是氫或低級(jí)烷基；以及當(dāng)A是-NR4OR3時(shí)，R4是氫。
除非另有明確定義外，在本發(fā)明的說(shuō)明書(shū)中使用的術(shù)語(yǔ)采用以下定義。
本發(fā)明中術(shù)語(yǔ)“C1-C10烷基”、“烷基”和“低級(jí)烷基”是指具有1-10個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，例如甲基、乙基、丙基、異丙基、n-丁基、sec-丁基、叔丁基、戊基、2-戊基、異戊基、新戊基、己基、2-己基、3-己基、3-甲基戊基、庚基、辛基等。優(yōu)選的烷基是C1-6烷基。更優(yōu)選的烷基是C1-3烷基。
術(shù)語(yǔ)“C2-C10烯基”、“低級(jí)烯基”和“烯基”是指具有2-10個(gè)碳原子以及至少一個(gè)雙鍵的烴基，并且包括乙烯基、丙烯基、1-丁-3-烯基、1-戊-3-烯基、1-己-5-烯基等。更優(yōu)選的是具有3-5個(gè)碳原子的低級(jí)烯基。
術(shù)語(yǔ)“C2-C10炔基”、“低級(jí)炔基”和“炔基”是指具有2-10個(gè)碳原子以及至少一個(gè)叁鍵的烴基，并且包括乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔-2-基等。更優(yōu)選的是具有3-5個(gè)碳原子的炔基。
在本發(fā)明中術(shù)語(yǔ)“鹵素”是指氟、溴、氯和碘。
術(shù)語(yǔ)“芳基”是指具有單環(huán)(如苯基)、多環(huán)(如聯(lián)苯基)或其中至少一個(gè)是芳香環(huán)的多個(gè)稠合環(huán)(如1，2，3，4-四氫萘基、萘基)的芳香碳環(huán)基，其任選被例如鹵素、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、三氟甲基、芳基、雜芳基、和羥基單、二或三取代。
術(shù)語(yǔ)“雜芳基”是指5-、6-或7-元環(huán)的一個(gè)或多個(gè)芳香環(huán)系，其包括稠合環(huán)系(其中至少一個(gè)是芳香性的)，具有5-10個(gè)原子，其中有至少一個(gè)并最多4個(gè)選自于氮、氧或硫的雜原子。雜芳基的例子有吡啶基、咪唑基、嘧啶基、吡唑基、三唑基、吡嗪基、四唑基、呋喃基、噻吩基、異噁唑基、噻唑基、噁唑基、異噻唑基、吡咯基、喹啉基、異喹啉基、吲哚基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、噌啉基、吲唑基、中氮茚基、2，3-二氮雜萘基、噠嗪基、三嗪基、異吲哚基、蝶啶基、嘌呤基、噁二唑基、三唑基、噻二唑基、噻二唑基、呋咱基、苯并呋咱基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、喹唑啉基、喹喔啉基、1，5-二氮雜萘基、以及呋喃并吡啶基。螺環(huán)部分也包括在該定義的范圍內(nèi)。雜芳基任選地被例如鹵素、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、鹵代烷基、芳基、雜芳基、和羥基單、二或三取代。
在此所用術(shù)語(yǔ)“碳環(huán)”、“碳環(huán)基”、“環(huán)烷基”或“C3-C10環(huán)烷基”是指具有3-10個(gè)碳原子的飽和碳環(huán)基團(tuán)。該環(huán)烷基可以是單環(huán)或者多環(huán)稠合系統(tǒng)，而且可以稠合在芳香環(huán)上。此等基團(tuán)的例子包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基和環(huán)己基。該環(huán)烷基在此可以是未取代的，或者如詳細(xì)說(shuō)明，可在一個(gè)或者多個(gè)合適的位置處被各種基團(tuán)取代。例如，此等環(huán)烷基可任選地被例如以下基團(tuán)取代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、鹵素、羥基、氰基、硝基、氨基、單(C1-C6)烷基氨基、二(C1-C6)烷基氨基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C1-C6鹵代烷基、C1-C6鹵代烷氧基、氨基(C1-C6)烷基、單(C1-C6)烷基氨基(C1-C6)烷基或二(C1-C6)烷基氨基(C1-C6)烷基。
術(shù)語(yǔ)“雜環(huán)”或“雜環(huán)基”是指5-、6-或7-元環(huán)的一個(gè)或者多個(gè)碳環(huán)環(huán)系，其包括稠合環(huán)系，具有4-10個(gè)原子，其中包含至少1個(gè)至最多4個(gè)選自于氮、氧或硫的雜原子，其條件是該基團(tuán)的環(huán)不包含兩個(gè)相鄰的O或S原子。稠合環(huán)系可以是稠合在芳香基團(tuán)上的雜環(huán)。優(yōu)選的雜環(huán)包括但不限于吡咯烷基、四氫呋喃基、二氫呋喃基、四氫噻吩基、四氫吡喃基、二氫吡喃基、四氫硫代吡喃基、哌啶基、嗎啉基、硫代嗎啉基、噻噁烷基、哌嗪基、高哌嗪基、氮雜環(huán)丁烷基、氧雜環(huán)丁烷基、硫雜環(huán)丁烷基、高哌啶基、氧雜環(huán)戊烷基(oxepanyl)、硫雜環(huán)戊烷基(thiepanyl)、氧氮雜卓(oxazepinyl)、二氮雜卓、硫氮雜卓(thiazepinyl)、1，2，3，6-四氫吡啶基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、二氫吲哚基、2H-吡喃基、4H-吡喃基、二噁烷基、1，3-二氧戊環(huán)基、吡唑啉基、二噻烷基、二硫戊環(huán)基、二氫吡喃基、二氫噻吩基、二氫呋喃基、吡唑烷基咪唑啉基、咪唑啉基、3-氮雜二環(huán)[3.1.0]己烷基、3-氮雜二環(huán)[4.1.0]庚烷基、氮雜二環(huán)[2.2.2]己烷基、3H-吲哚基和喹嗪基。螺環(huán)部分也包括在該定義的范圍內(nèi)。如有可能，衍生于上述基團(tuán)的基團(tuán)可以是C-連接的或N-連接的。例如，衍生于吡咯基的基團(tuán)可以吡咯-1-基(N-連接的)或吡咯-3-基(C-連接的)。另外，衍生于咪唑的基團(tuán)可以是咪唑-1-基(N-連接的)或咪唑-3-基(C-連接的)。其中2個(gè)環(huán)碳原子被氧代基團(tuán)(＝O)取代雜環(huán)基的例子是1，1-二氧代-鹵代嗎啉基。雜環(huán)基在此可以是未取代的，或者如詳細(xì)說(shuō)明，可在一個(gè)或者多個(gè)合適的位置處被各種基團(tuán)取代。例如，此等雜環(huán)基可任選地被例如以下基團(tuán)取代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、鹵素、羥基、氰基、硝基、氨基、單(C1-C6)烷基氨基、二(C1-C6)烷基氨基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C1-C6鹵代烷基、C1-C6鹵代烷氧基、氨基(C1-C6)烷基、單(C1-C6)烷基氨基(C1-C6)烷基或二(C1-C6)烷基氨基(C1-C6)烷基。
術(shù)語(yǔ)“芳基烷基”是指被一個(gè)或者多個(gè)(如上定義的)芳基取代的(如上定義的)烷基。更優(yōu)選的芳基烷基是芳基-C1-3-烷基。其例子包括芐基、苯基乙基等。
術(shù)語(yǔ)“雜芳基烷基”是指被一個(gè)或者多個(gè)(如上定義的)雜芳基取代的(如上定義的)烷基。更優(yōu)選的雜芳基烷基是5-或6-元雜芳基-C1-3-烷基。其例子包括噁唑基甲基、吡啶基乙基等。
術(shù)語(yǔ)“雜環(huán)基烷基”是指被一個(gè)或者多個(gè)(如上定義的)雜環(huán)基取代的(如上定義的)烷基。更優(yōu)選的雜環(huán)基烷基是5或6元雜環(huán)基-C1-3-烷基。其例子包括四氫呋喃基甲基。
術(shù)語(yǔ)“環(huán)烷基烷基”是指被一個(gè)或者多個(gè)(如上定義的)環(huán)烷基取代的(如上定義的)烷基。更優(yōu)選的環(huán)烷基烷基是5或6元環(huán)烷基-C1-3-烷基。其例子包括環(huán)丙基甲基。
術(shù)語(yǔ)“Me”代表甲基，“Et”代表乙基，“Bu”代表丁基，而“Ac”代表乙?；?。
除非另有說(shuō)明，在此所用術(shù)語(yǔ)“藥物學(xué)上可接受的鹽”包括在本發(fā)明化合物中存在的酸性和堿性基團(tuán)的鹽。本身為堿性的本發(fā)明化合物能夠與各種無(wú)機(jī)和有機(jī)酸形成各種鹽。可用于制備本發(fā)明堿性化合物的藥物學(xué)上可接受的酸加成鹽的酸是那些能夠形成無(wú)毒性酸加成鹽的酸，即、包含藥物學(xué)上可接受的陰離子的鹽，如乙酸鹽、苯磺酸鹽、苯甲酸鹽、碳酸氫鹽、硫酸氫鹽、酒石酸氫鹽、硼酸鹽、溴化物、鈣、樟腦磺酸鹽(camsylate)、碳酸鹽、氯化物、clavulanate、檸檬酸鹽、二鹽酸鹽、edislyate、estolate、乙磺酸鹽、乙基琥珀酸鹽、富馬酸鹽、gluceptate、葡糖酸鹽、谷氨酸鹽、乙醇酰阿散酸鹽、己基resorcinate、hydrabamine、氫溴酸鹽、鹽酸鹽、碘化物、isothionate、乳酸鹽、乳糖酸鹽、月桂酸鹽、蘋(píng)果酸鹽、馬來(lái)酸鹽、扁桃酸鹽、甲磺酸鹽、甲基硫酸鹽、粘酸鹽、萘磺酸鹽、硝酸鹽、油酸鹽、草酸鹽、pamoate(embonate)、棕櫚酸鹽、泛酸鹽、磷酸鹽/磷酸氫鹽、聚半乳糖醛酸鹽、水楊酸鹽、硬脂酸鹽、堿式乙酸鹽、琥珀酸鹽、單寧酸鹽、酒石酸鹽、teoclate、甲苯磺酸鹽、triethiodode、以及戊酸鹽。因?yàn)楸景l(fā)明的單個(gè)化合物可包括一個(gè)以上的酸性或堿性基團(tuán)，所以本發(fā)明的化合物在單個(gè)化合物中有可能包括單、二或三鹽。
如果在本發(fā)明的化合物中存在酸性基團(tuán)，則可通過(guò)用堿性化合物處理本發(fā)明的化合物來(lái)形成鹽，特別是用無(wú)機(jī)堿。優(yōu)選的無(wú)機(jī)鹽是那些用堿金屬和堿土金屬形成的鹽，如鋰、鈉、鉀、鋇和鈣。優(yōu)選的有機(jī)堿鹽包括例如銨、二芐基銨、芐基銨、2-羥基乙基銨、二(2-羥基乙基)銨、苯基乙基芐基胺、二芐基-亞乙基二胺等鹽。酸性基團(tuán)的其他鹽包括例如那些用以下物質(zhì)形成的鹽普魯卡因、奎寧和N-甲基葡糖胺，以及與堿性氨基酸形成的鹽，如甘氨酸、鳥(niǎo)氨酸、組氨酸、苯基甘氨酸、賴氨酸和精氨酸。特別優(yōu)選的鹽是本發(fā)明化合物的鈉或鉀鹽。
對(duì)于堿性基團(tuán)，所述鹽是用酸性化合物、特別是無(wú)機(jī)酸處理本發(fā)明的化合物而形成的鹽。優(yōu)選的該類型的無(wú)機(jī)鹽包括例如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽等。優(yōu)選的該類型的有機(jī)鹽包括例如與以下有機(jī)酸形成的鹽甲酸、乙酸、琥珀酸、檸檬酸、乳酸、馬來(lái)酸、富馬酸、棕櫚酸、膽酸、粘酸、D-谷氨酸、D-樟腦酸、戊二酸、乙醇酸鹽、鄰苯二甲酸、酒石酸、月桂酸、硬脂酸、水楊酸、甲磺酸、苯磺酸、對(duì)甲苯磺酸、山梨酸、puric、苯甲酸、肉桂酸等。特別優(yōu)選的該類型的鹽是本發(fā)明化合物的鹽酸鹽或硫酸鹽。
在本發(fā)明的化合物中，在使用諸如(CR4R5)m或(CR4R5)t的術(shù)語(yǔ)時(shí)，R4和R5可隨著1以上的m或t而變化。例如，如果m或t是2，術(shù)語(yǔ)(CR4R5)m或(CR4R5)t可等于-CH2CH2-或-CH(CH3)C(CH2CH3)(CH2CH2CH3)-或任意數(shù)量的在R4和R5定義范圍內(nèi)的類似基團(tuán)。
本發(fā)明的某些化合物可具有不對(duì)稱中心，并且因此以不同對(duì)映體的形式存在。本發(fā)明化合物所有可能的異構(gòu)體和立體異構(gòu)體、以及它們的混合物也被認(rèn)為是在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。對(duì)于本發(fā)明的化合物，本發(fā)明包括外消旋體、一種或多種對(duì)映體、一種或多種非對(duì)映異構(gòu)體、或者它們的混合物的應(yīng)用。本發(fā)明的化合物也可為互變異構(gòu)體的形式。本發(fā)明涉及所有此等互變異構(gòu)體及其混合物的應(yīng)用。
本發(fā)明還包括經(jīng)同位素標(biāo)記的化合物，該化合物與本發(fā)明的化合物是相同的，但是其中一個(gè)或者多個(gè)原子被具有與天然原子量或原子數(shù)不同的原子量或原子數(shù)的原子置換。可摻入在本發(fā)明化合物中的同位素的例子包括氫、碳、氮、氧、鱗、硫、氟和氯的同位素，如分別是2H、3H、13C、14C、15N、18O、17O、31P、32P、35S、18F、和36Cl。本發(fā)明的化合物、其前藥、以及包含上述同位素和/或其他原子的同位素的所述化合物或所述前藥的藥物學(xué)上可接受的鹽也在本發(fā)明的范圍內(nèi)。某些經(jīng)同位素標(biāo)記的本發(fā)明的化合物，例如那些摻入放射性同位素如3H和14C的化合物，可用于藥物和/或底物組織分布分析中。氚化的(即3H)以及碳-14(即14C)同位素對(duì)于制備和可檢測(cè)性是特別優(yōu)選的。另外，用更重的同位素如氘(即2H)取代，由于具有更高的代謝穩(wěn)定性，可提供某些有利的治療價(jià)值，如增加體內(nèi)半衰期或降低所需的劑量，并因此在某些情況下是優(yōu)選的。經(jīng)同位素標(biāo)記的本發(fā)明的化合物及其前藥通?？赏ㄟ^(guò)用易于得到的經(jīng)同位素標(biāo)記的試劑替代未被同位素標(biāo)記的試劑按照以下合成路線和/或?qū)嵤├椭苽淅忻枋龅姆椒▉?lái)制備。
本發(fā)明還包括包含式I-IIIb化合物的藥物組合物以及通過(guò)給藥本發(fā)明的化合物的前藥來(lái)治療增殖性疾病或異常細(xì)胞生長(zhǎng)的方法。具有游離氨基、酰胺基、羥基或羧基的本發(fā)明化合物可轉(zhuǎn)化為前藥。該前藥包括以下化合物氨基酸殘基或由一個(gè)或多個(gè)(如2、3或4個(gè))氨基酸殘基組成的多肽鏈通過(guò)酰胺或酯鍵共價(jià)連接在本發(fā)明化合物的游離氨基、羥基或羧基上。氨基酸殘基包括但不限于20個(gè)通常用3個(gè)字母符號(hào)表示的天然氨基酸，而且還包括4-羥基脯氨酸、羥基賴氨酸、demosine、isodemosine、3-甲基組氨酸、正纈氨酸、β-丙氨酸、γ-氨基丁酸、cirtulline、高半胱氨酸、高絲氨酸、鳥(niǎo)氨酸和氮氨酸砜。也包括其他類型的前藥。例如，游離羧基可衍生為酰胺或烷基酯。如Advanced DrugDelivery Reviews 1996，19，115中所述，游離羥基通過(guò)使用以下基團(tuán)來(lái)進(jìn)行衍生化，所述基團(tuán)包括但不限于半琥珀酸酯、磷酸酯、二甲基氨基乙酸酯和磷?；趸谆趸驶?。羥基和氨基的氨基甲酸酯前藥，以及羥基的碳酸酯前藥、磺酸酯和硫酸酯，也包括在內(nèi)。還包括羥基的衍生化如(?；趸?甲基和(酰基氧基)乙基醚，其中所述酰基可以是烷基酯，任選被包括但不限于醚、胺和羧酸官能團(tuán)的基團(tuán)取代，或者其中所述?；侨缟纤龅陌被狨?。該類型的前藥描述在以下文獻(xiàn)中J.Med.Chem.1996，39，10。游離胺也可被衍生為酰胺、磺酰胺或膦酰胺。所有這些其他部分可摻入包括但不限于醚、胺和羧酸官能團(tuán)的基團(tuán)。
應(yīng)理解的是，如果兩個(gè)或者更多的基團(tuán)被連續(xù)地用于限定連接在結(jié)構(gòu)上的取代基，則第一個(gè)命名的基團(tuán)被認(rèn)為是端基，而最后命名的基團(tuán)被認(rèn)為是連接在所需的結(jié)構(gòu)上。因此，例如，芳基烷基是通過(guò)烷基連接在所需的結(jié)構(gòu)上。
本發(fā)明還涉及用于治療哺乳動(dòng)物中過(guò)度增殖性疾病的藥物組合物，該組合物包括治療有效量的本發(fā)明的化合物或其藥物學(xué)上可接受的鹽、前藥或水合物，以及藥物學(xué)上可接受的載體。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述藥物組合物是用于治療癌癥，如腦、肺、鱗狀細(xì)胞、膀胱、胃、胰腺、乳腺、頭、頸、腎、卵巢、前列腺、結(jié)腸直腸、食管、睪丸、婦科或甲狀腺癌。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述藥物組合物是用于治療非癌癥性的過(guò)度增殖性疾病，如良性的皮膚(如牛皮癬)、再狹窄、或前列腺(如良性的前列腺肥大(BPH))增生。
本發(fā)明還涉及用于治療哺乳動(dòng)物中胰腺炎或腎疾病(包括增殖性腎小球腎炎和糖尿病誘發(fā)的腎疾病)或者治療哺乳動(dòng)物疼痛的藥物組合物，其包括治療有效量的本發(fā)明的化合物或其藥物學(xué)上可接受的鹽、前藥或水合物，以及藥物學(xué)上可接受的載體。
本發(fā)明還涉及用于預(yù)防哺乳動(dòng)物中胚細(xì)胞移植的藥物組合物，其包括治療有效量的本發(fā)明的化合物或其藥物學(xué)上可接受的鹽、前藥或水合物，以及藥物學(xué)上可接受的載體。
本發(fā)明還涉及用于治療哺乳動(dòng)物中與血管發(fā)生或血管形成有關(guān)的疾病的藥物組合物，其包括治療有效量的本發(fā)明的化合物或其藥物學(xué)上可接受的鹽、前藥或水合物，以及藥物學(xué)上可接受的載體。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述藥物組合物是用于治療選自于以下組中的疾病腫瘤血管發(fā)生，慢性炎性疾病如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，動(dòng)脈硬化，炎性腸疾病，皮膚疾病如牛皮癬、疹、和硬皮病，糖尿病，糖尿病性視網(wǎng)膜炎，早熟性視網(wǎng)膜炎，與年齡有關(guān)的肌肉減退，血管瘤，神經(jīng)膠質(zhì)瘤，黑素瘤，卡波濟(jì)肉瘤，以及卵巢、乳腺、肺、胰腺、前列腺、結(jié)腸和表皮癌。
本發(fā)明還涉及治療哺乳動(dòng)物中過(guò)度增殖性疾病的方法，其包括向所述哺乳動(dòng)物給藥治療有效量的本發(fā)明的化合物或其藥物學(xué)上可接受的鹽、前藥或水合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述方法涉及治療以下疾病癌癥，如腦、肺、鱗狀細(xì)胞、膀胱、胃、胰腺、乳腺、頭、頸、腎、卵巢、前列腺、結(jié)腸直腸、食管、睪丸、婦科或甲狀腺癌。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述方法是用于治療非癌癥性的過(guò)度增殖性疾病，如良性的皮膚(如牛皮癬)、再狹窄、或前列腺(如良性的前列腺肥大(BPH))增生。
本發(fā)明還涉及治療哺乳動(dòng)物中過(guò)度增殖性疾病的方法，其包括向所述哺乳動(dòng)物給藥治療有效量的本發(fā)明的化合物或其藥物學(xué)上可接受的鹽、前藥或水合物以及選自于以下組中的抗腫瘤劑有絲分裂抑制劑、烷基化劑、抗代謝藥物、插入抗生素、生長(zhǎng)因子抑制劑、細(xì)胞周期抑制劑、酶抑制劑、拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑、生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑、抗激素藥、血管發(fā)生抑制劑、以及抗雄激素。
本發(fā)明還涉及治療哺乳動(dòng)物中胰腺炎和腎疾病的方法，其包括向所述哺乳動(dòng)物給藥治療有效量的本發(fā)明的化合物或其藥物學(xué)上可接受的鹽、前藥或水合物。
本發(fā)明還涉及預(yù)防哺乳動(dòng)物中胚細(xì)胞移植的方法，其包括向所述哺乳動(dòng)物給藥治療有效量的本發(fā)明的化合物或其藥物學(xué)上可接受的鹽、前藥或水合物。
本發(fā)明還涉及治療哺乳動(dòng)物中與血管發(fā)生或血管形成有關(guān)的疾病的方法，其包括向所述哺乳動(dòng)物給藥治療有效量的本發(fā)明的化合物或其藥物學(xué)上可接受的鹽、前藥或水合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述方法是用于治療選自于以下組中的疾病腫瘤血管發(fā)生，慢性炎性疾病如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，動(dòng)脈硬化，炎性腸疾病，皮膚疾病如牛皮癬、疹、和硬皮病，糖尿病，糖尿病性視網(wǎng)膜炎，早熟性視網(wǎng)膜炎，與年齡有關(guān)的肌肉減退，血管瘤，神經(jīng)膠質(zhì)瘤，黑素瘤，卡波濟(jì)肉瘤，以及卵巢、乳腺、肺、胰腺、前列腺、結(jié)腸和表皮癌。
根據(jù)本發(fā)明的方法，可用本發(fā)明的化合物或其藥物學(xué)上可接受的鹽、前藥和水合物治療的患者包括例如已被診斷患有以下疾病的患者牛皮癬，再狹窄，動(dòng)脈粥樣硬化，BPH，肺癌，骨癌，CMML，胰腺癌，皮膚癌，頭和頸的，皮膚或眼內(nèi)黑素瘤，子宮癌，卵巢癌，直腸癌，肛門(mén)區(qū)域的癌癥，胃癌，結(jié)腸癌，乳腺癌，睪丸癌，婦科腫瘤(如子宮肌瘤、輸卵管癌、子宮內(nèi)膜癌、子宮頸癌、陰道癌或外陰癌)，何杰金(Hodgkin)氏病，食管癌，小腸癌，內(nèi)分泌系統(tǒng)的癌癥(如甲狀腺癌、甲狀旁腺癌或腎上腺癌)，軟組織的肉瘤，尿道癌，陰莖癌，前列腺癌，慢性或急性白血病，兒童實(shí)體瘤，淋巴細(xì)胞的淋巴瘤，膀胱癌，腎或輸尿管癌(如腎細(xì)胞癌、腎盂癌)，或者中樞神經(jīng)系統(tǒng)的癌癥(如原發(fā)性CNS淋巴瘤、脊椎軸腫瘤、腦干神經(jīng)膠質(zhì)瘤或垂體腺癌)。
本發(fā)明還涉及用于抑制哺乳動(dòng)物中異常細(xì)胞生長(zhǎng)的藥物組合物，其包括本發(fā)明的化合物或其藥物學(xué)上可接受的鹽、前藥或水合物以及化療劑，其中本發(fā)明化合物、其鹽、溶劑化物或前藥的量以及所述化療劑的量在一起能夠有效地抑制異常細(xì)胞生長(zhǎng)。目前在本領(lǐng)域中已知許多的化療劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述化療劑選自于以下組中有絲分裂抑制劑、烷基化劑、抗代謝藥物、插入抗生素、生長(zhǎng)因子抑制劑、細(xì)胞周期抑制劑、酶抑制劑、拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑、生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑、抗激素藥、血管發(fā)生抑制劑、以及抗雄激素。
本發(fā)明還涉及用于抑制哺乳動(dòng)物中異常細(xì)胞生長(zhǎng)或者治療過(guò)度增殖性疾病的方法，其包括向所述哺乳動(dòng)物給藥一定量的本發(fā)明的化合物或其藥物學(xué)上可接受的鹽、前藥或水合物并聯(lián)合放射療法，其中本發(fā)明化合物、其鹽、溶劑化物或前藥的量以及放射療法在一起能夠在哺乳動(dòng)物中有效地抑制異常細(xì)胞生長(zhǎng)或者治療過(guò)度增殖性疾病。給藥放射治療劑的技術(shù)在本領(lǐng)域中是已知的，而且這些技術(shù)都可用于以上聯(lián)合療法中。在該組合療法中本發(fā)明化合物的給藥量可如下所述進(jìn)行確定。
據(jù)信，本發(fā)明的化合物能夠使異常細(xì)胞對(duì)于用于殺死和/或抑制此等細(xì)胞生長(zhǎng)的放射治療更為敏感。因此，本發(fā)明還涉及用于使哺乳動(dòng)物中的異常細(xì)胞對(duì)于放射治療更加敏感的方法，其包括向所述哺乳動(dòng)物給藥一定量的本發(fā)明化合物或其藥物學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物或前藥，其中所述量對(duì)于增加異常細(xì)胞對(duì)放射治療的敏感性是有效的。在該方法中，本發(fā)明化合物、其鹽或溶劑化物的量可根據(jù)如下所述的用于測(cè)定這些化合物的有效量的方法來(lái)確定。
本發(fā)明還涉及抑制哺乳動(dòng)物中異常細(xì)胞生長(zhǎng)的方法和藥物組合物，其包括一定量的本發(fā)明的化合物或其藥物學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物、前藥、或同位素標(biāo)記的衍生物，以及一定量的一種或多種選自于抗血管發(fā)生劑、信號(hào)傳導(dǎo)抑制劑、和抗增殖劑的物質(zhì)。
抗血管發(fā)生劑如MMP-2(基質(zhì)-金屬蛋白酶2)抑制劑、MMP-9(基質(zhì)-金屬蛋白酶9)抑制劑和COX-II(環(huán)加氧酶II)抑制劑可與本發(fā)明的化合物以及藥物組合物聯(lián)合使用。有用的COX-II抑制劑的例子包括CELEBREXTM(alecoxib)、伐地考昔、和羅非考昔。有用的基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑的例子描述在以下文獻(xiàn)中WO 96/33172(1996年10月24日公開(kāi))、WO 96/27583(1996年3月7日公開(kāi))、第97304971.1號(hào)歐洲專利申請(qǐng)(1997年7月8日申請(qǐng))、第99308617.2號(hào)歐洲專利申請(qǐng)(1999年10月29日申請(qǐng))、WO 98/07697(1998年2月26日公開(kāi))、WO 98/03516(1998年1月29日公開(kāi))、WO98/34918(1998年8月13日公開(kāi))、WO 98/34915(1998年8月13日公開(kāi))、WO 98/33768(1998年8月16日公開(kāi))、第606,046號(hào)歐洲專利公布(1994年7月13日公開(kāi))、第931,788號(hào)歐洲專利公布(1999年7月28日公開(kāi))、WO 90/05719(1990年5月31日公開(kāi))、WO99/52910(1999年10月21日公開(kāi))、WO 99/52889(1999年10月21日公開(kāi))、WO 99/29667(1999年6月17日公開(kāi))、第PCT/IB98/01113號(hào)PCT國(guó)際申請(qǐng)(1998年7月21日申請(qǐng))、第99302232.1號(hào)歐洲專利申請(qǐng)(1999年3月25日申請(qǐng))、第9912961.1號(hào)英國(guó)專利申請(qǐng)(1999年6月3日申請(qǐng))、第60/148,464號(hào)美國(guó)臨時(shí)專利申請(qǐng)(1999年8月12日申請(qǐng))、第5,863,949號(hào)美國(guó)專利(1999年1月26日授權(quán))、第5,861,510號(hào)美國(guó)專利(1999年1月19日授權(quán))、以及第號(hào)歐洲專利公布780,386(1997年6月25日公開(kāi))，所有以上文獻(xiàn)的內(nèi)容在此全部并入作為參考。優(yōu)選的MMP-2和MMP-9抑制劑是那些在抑制MMP-1方面幾乎沒(méi)有或者根本沒(méi)有活性的抑制劑。更優(yōu)選的是那些相對(duì)于其他基質(zhì)-金屬蛋白酶(即、MMP-1、MMP-3、MMP-4、MMP-5、MMP-6、MMP-7、MMP-8、MMP-10、MMP-11、MMP-12、和MMP-13)選擇性抑制MMP-2和/或MMP-9的抑制劑。
一些可用于本發(fā)明中的MMP抑制劑的具體例子是AG-3340、RO32-3555、和RS 13-0830。
術(shù)語(yǔ)“異常細(xì)胞生長(zhǎng)”和“過(guò)度增殖性疾病”在本申請(qǐng)是可以相互交換使用的。
除非另有說(shuō)明，在此所用術(shù)語(yǔ)“異常細(xì)胞生長(zhǎng)”是指獨(dú)立于正常細(xì)胞調(diào)節(jié)機(jī)制(如接觸抑制作用丟失)的細(xì)胞生長(zhǎng)。這例如包括以下的異常生長(zhǎng)(1)通過(guò)表達(dá)突變的酪氨酸激酶或者受體酪氨酸激酶的過(guò)度表達(dá)而增殖的腫瘤細(xì)胞(腫瘤)；(2)其中發(fā)生異常酪氨酸激酶活化的其他增殖性疾病的良性和惡性細(xì)胞；(3)任何通過(guò)受體酪氨酸激酶增殖的腫瘤；(4)任何通過(guò)異常絲氨酸/蘇氨酸激酶活化而增殖的腫瘤；以及(5)其中發(fā)生異常絲氨酸/蘇氨酸激酶活化的其他增殖性疾病的良性和惡性細(xì)胞。
除非另有說(shuō)明，在此所用術(shù)語(yǔ)“治療”是指反轉(zhuǎn)、緩解、抑制該術(shù)語(yǔ)所適用的疾病或病癥、或者所述疾病或病癥的一種或多種癥狀。
包括在本發(fā)明中的代表性的本發(fā)明化合物包括但不限于實(shí)施例中的化合物及其藥物學(xué)上可接受的酸或堿加成鹽或前藥。
以下實(shí)施例僅是用于說(shuō)明本發(fā)明的具體實(shí)施方案，而絕不是用于限制本發(fā)明說(shuō)明書(shū)以及所附權(quán)利要求書(shū)的范圍。
本發(fā)明的化合物的制備顯示在以下合成路線1-4中。
合成路線1
合成路線1a
合成路線2
合成路線3
合成路線4
合成路線5
PCT專利申請(qǐng)WO 00/42022(2000年7月20日公開(kāi))提供了制備一些本發(fā)明化合物的總合成方法。上述專利申請(qǐng)的整個(gè)內(nèi)容在此并入作為參考。
僅是用于說(shuō)明本發(fā)明的具體實(shí)施方案，而絕不是用于限制本發(fā)明說(shuō)明書(shū)以及所附權(quán)利要求書(shū)的范圍。
本發(fā)明的化合物的制備方法示于以下合成路線1-4中。
合成路線1顯示了本發(fā)明化合物的合成。在步驟1中，使用標(biāo)準(zhǔn)的條件，優(yōu)選在H2SO4中的發(fā)煙硝酸，是所述酸硝酸化。在步驟2中，在室溫下于水中用NH4OH置換氟，然后小心地用濃的無(wú)機(jī)酸酸化至pH接近0，由此制備所述苯胺。在步驟3中，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)的方法，包括但不限于Fisher酯化(MeOH、H2SO4)，然后在合適的有機(jī)溶劑如PhMe/MeOH或THF/MeOH中與TMSCHN2反應(yīng)，由此制備所述酯。在步驟4中，使所述酯與過(guò)濾的合適苯胺或者在有機(jī)溶劑如二甲苯中進(jìn)行加熱(60-200℃)，由此制備二苯胺基衍生物。例如，如果R1＝Me且R2＝H，優(yōu)選的方法是在二甲苯中于回流下攪拌所述酯和10當(dāng)量的苯胺，直至反應(yīng)完全。在步驟5中，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)條件，包括但不限于在有機(jī)溶劑如EtOH或THF中用H2、或Pd/C或Pd(OH)2/C或Raney鎳，在AcOH中用Fe，在AcOH中用Zn，或者在MeOH中用Zn、NH4Cl(aq)，還原所述硝基芳烴，以產(chǎn)生二胺。在步驟6中，僅與甲酸一起加熱或者在合適的溶劑如EtOH中與甲醚乙酸鹽一起加熱，由此使所述二胺環(huán)化。或者，當(dāng)R1或R2不是鹵素時(shí)，在甲酸中與Pd(OH)2/C或其他鈀源如Pd/C一起加熱，由此將硝基芳烴直接轉(zhuǎn)化為苯并咪唑。在步驟8中，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)方法，包括但不限于在有機(jī)輔助溶劑如THF和MeOH中使用NBS或NCS和pTsOH，可加入鹵化物。在步驟9中，使苯并咪唑烷基化，以形成N1和N3產(chǎn)物接近相同的混合物，它們可通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)分離，包括例如色譜法和研磨。烷基化反應(yīng)是在合適的有機(jī)溶劑如DMF或THF中于0-80℃的溫度下使用烷基化劑如烷基鹵和堿如NaH或K2CO3而完成的。R7可通過(guò)本領(lǐng)域已知的如下所述的各種合成方法進(jìn)行改性。在步驟10中，所述酯通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)的皂化方法進(jìn)行水解。接著在步驟11中通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)的偶聯(lián)方法將酸轉(zhuǎn)化為所希望的異羥肟酸鹽，所述偶聯(lián)方法包括但不限于在合適的有機(jī)溶劑如DMF、THF或二氯甲烷中使用EDCI、HOBt或PyBOP以及合適的羥胺。
合成路線2顯示了其中在與硝基酯偶聯(lián)之前R8取代基在苯胺上的實(shí)施例。反應(yīng)描述與合成路線1相同，區(qū)別在于不需要加入R8取代基，因?yàn)槠湓陂_(kāi)始時(shí)就已存在于苯胺上。
在合成路線3中顯示了N3烷基氨基苯并咪唑衍生物的制備。在步驟1中，使用合適的氧化劑如在合適溶劑中的OsO4或者KMnO4或I2、AgOAc、AcOH、水，使N3烷基化苯并咪唑異羥肟酸鹽的端烯烴二羥基化。該二醇在步驟2中在合適的二相混合物中用NaIO4或Pb(OAc)4進(jìn)一步氧化，形成醛?；蛘?步驟3)，所述烯烴可通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)方法直接轉(zhuǎn)化為醛，所述方法包括但不限于臭氧/Me2S、NaIO4/OsO4或KMnO4。在步驟4中，在有或沒(méi)有AcOH的情況下，在合適的溶劑如二氯甲烷、乙腈或THF中，使用標(biāo)準(zhǔn)方法如Na(CN)BH3、Na(OAc)3BH、NMe4BH(OAc)3，通過(guò)還原性胺化反應(yīng)制備胺。優(yōu)選的還原胺化反應(yīng)是用胺、Me4NBH(OAc)3和乙酸在MeCN中于室溫下處理所述醛。
合成路線4顯示了其中W是雜環(huán)的本發(fā)明化合物的制備。在步驟1中，在合適的溶劑如EtOH中于50-100℃的溫度下與肼一起攪拌，由此將甲基酯轉(zhuǎn)化為酰肼。通過(guò)與合適的試劑環(huán)化制備所希望的雜環(huán)衍生物。對(duì)于噁二唑21，所述酰肼在合適的有機(jī)溶劑如EtOH中于升高的溫度(50-100℃)下用原甲酸酯如原甲酸三乙酯、以及酸催化劑如pTsOH處理。對(duì)于羥基噁二唑22，所述酰肼可在合適的溶劑如甲苯中于50-120℃的溫度下與光氣或光氣等價(jià)物如三光氣或羰基二咪唑環(huán)化。巰基噁二唑23可通過(guò)在合適的有機(jī)溶劑如EtOH中于升高的溫度(50-100℃)下與二硫化碳、和堿如KOH反應(yīng)來(lái)制備。氨基噁二唑24可通過(guò)在兩相溶劑系統(tǒng)如二噁烷和水中于室溫下與BrCN和堿如NaHCO3的反應(yīng)來(lái)制備。最后，取代的氨基噁二唑25可如下制備首先使所述酰肼與合適的異硫氰酸酯在合適的有機(jī)溶劑DMF或THF中于25-100℃的溫度下反應(yīng)。中間產(chǎn)物可分離或者通過(guò)在合適的有機(jī)溶劑如THF和DMF中于室溫-80℃的溫度下用EDCI或其他碳二亞胺處理而進(jìn)行環(huán)化。
在合成路線5中描述了酮基苯并咪唑衍生物的制備。在步驟1中，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)的還原方法，優(yōu)選0℃下在THF中的LAH或者室溫下在EtOHTHF中的NaBH4，將甲基酯轉(zhuǎn)化為芐基醇。在步驟2中，在丙酮THF中于50℃下用MnO2進(jìn)行氧化，形成醛。在步驟3中，在THF中于低溫(如-78℃)下向所述醛中添加有機(jī)金屬試劑如有機(jī)鋰試劑和格氏試劑，形成取代的芐基醇。在步驟4中，在標(biāo)準(zhǔn)的條件下，如Swern或Dess-Martin氧化反應(yīng)，氧化所述芐基醇，由此制備所述酮基衍生物。
本發(fā)明的化合物有可能具有不對(duì)稱的碳原子。基于它們的物理活性性質(zhì)的差異，通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法，例如色譜法或分級(jí)結(jié)晶法，可將非對(duì)映異構(gòu)體混合物分離為單個(gè)非對(duì)映異構(gòu)體。通過(guò)與合適旋光化合物(如醇)的反應(yīng)，將對(duì)映體混合物轉(zhuǎn)化為非對(duì)映異構(gòu)體混合物，分離所述非對(duì)映異構(gòu)體并轉(zhuǎn)化(例如水解)所述單個(gè)非對(duì)映異構(gòu)體為相應(yīng)純的對(duì)映體。所有此等異構(gòu)體，包括非對(duì)映異構(gòu)體混合物和純的對(duì)映體，都被認(rèn)為是本發(fā)明的一部分。
本發(fā)明化合物的活性可通過(guò)以下方法進(jìn)行測(cè)定。在E.coli中表達(dá)N-端6His標(biāo)記的、組成性活性MEK1(2-393)，然后通過(guò)常規(guī)方法純制該蛋白(Ahn等人，Science 1994，265，966-970)。MEK1的活性通過(guò)以下方法進(jìn)行評(píng)估在MEK1存在下，測(cè)量來(lái)源于γ-33P-ATP中的γ-33P-磷酸酯在N-端His標(biāo)記的ERK2上的摻入，該N-端His標(biāo)記的ERK2是在E.coli中表達(dá)的并通過(guò)常規(guī)方法純制的。該實(shí)驗(yàn)是在96孔聚丙烯板上進(jìn)行的。溫育混合物(100μL)包括25mM Hepes，pH 7.4、10mMMgCl2、5mMβ-甘油磷酸鹽、100μM原釩酸鈉、5mM DTT、5nMMEK1、和1μM ERK2。將抑制劑懸浮在DMSO中，然后所有的反應(yīng)(包括對(duì)照)都是在1％DMSO的最終濃度下進(jìn)行的。添加10μM ATP(0.5μCiγ-33P-ATP/孔)，由此使反應(yīng)開(kāi)始，然后在室溫下溫育45分鐘。添加等體積的25％TCA，以使反應(yīng)停止，并使蛋白沉淀。沉淀出的蛋白收集在玻璃纖維B過(guò)濾板上，并用Tomtec MACH III收集器洗除過(guò)量的經(jīng)標(biāo)記的ATP。在添加30μL/孔的Packard Microscint 20之前，使所述板進(jìn)行空氣干燥，然后使用Packard TopCount對(duì)這些板進(jìn)行計(jì)數(shù)。在該實(shí)驗(yàn)中，本發(fā)明的化合物表現(xiàn)出不超過(guò)50μM的IC50。
以下化合物代表了具有此等活性的化合物。
本發(fā)明的化合物(以下稱為“活性化合物”)的給藥可通過(guò)任何能夠?qū)⒃摶衔镛D(zhuǎn)運(yùn)至作用部位的方法來(lái)實(shí)現(xiàn)。這些方法包括口服途徑、十二指腸內(nèi)途徑、非胃腸道注射(包括靜脈、皮下、肌肉內(nèi)、血管內(nèi)或輸注)、局部和直腸給藥。
活性化合物的給藥量將取決于所治療的患者、疾病或病癥的嚴(yán)重程度、給藥率、化合物的處置、處方醫(yī)生的感覺(jué)。但是，有效劑量范圍是約0.001-100mg/kg體重/天，優(yōu)選約1-35mg/kg/day，可在單個(gè)劑量中或者分為多個(gè)劑量。對(duì)于70kg的人，該劑量相當(dāng)于約0.05-7g/天，優(yōu)選為約0.05-2.5g/天。在某些情況下，低于上述劑量范圍下限的劑量水平有可能已是足夠的，而在其他情況下，在不產(chǎn)生任何有害副作用的情況下可使用更高的劑量，其條件是此等更大的劑量首先被分為數(shù)個(gè)小的劑量，用于整天的給藥。
活性化合物可以單獨(dú)給藥或者與一種或多種其他抗腫瘤物質(zhì)組合使用，這些其他的抗腫瘤物質(zhì)例如選自于有絲分裂抑制劑，如長(zhǎng)春堿；烷基化劑，如順鉑、卡鉑和環(huán)磷酰胺；抗代謝藥，如5-氟尿嘧啶、阿糖胞苷、和羥基脲，或者例如在第239362號(hào)歐洲專利申請(qǐng)中公開(kāi)的優(yōu)選抗代謝藥之一，如N-(5-[N-(3，4-二氫-2-甲基-4-氧代喹唑啉-6-基甲基)-N-甲基氨基]-2-噻吩甲?；?-L-谷氨酸；生長(zhǎng)因子抑制劑；細(xì)胞周期抑制劑；插入抗生素，如阿霉素和博來(lái)霉素；酶，如干擾素；以及抗激素，例如，抗雌激素，如NolvadexTM(他莫昔芬)，或者例如，抗雄激素如CasodexTM(4’-氰基-3-(4-氟苯基磺?；?-2-羥基-2-甲基-3’-(三氟甲基)-N-丙酰苯胺)。此等組合治療可通過(guò)同時(shí)、順序或分開(kāi)給藥各單獨(dú)治療成分來(lái)實(shí)現(xiàn)。
本發(fā)明的組合物例如可為使用口服給藥的形式，如片劑、膠囊、丸劑、緩釋制劑、溶液、混懸液，用于非胃腸道注射的形式，如無(wú)菌溶液、混懸液或乳液，用于局部給藥的形式，如軟膏或乳膏，或者是用于直腸給藥的形式，如栓劑。該藥物組合物可以是適用于單獨(dú)給藥精確劑量的單元?jiǎng)┝縿┬汀Ｔ撍幬锝M合物將包括常規(guī)的藥物載體或賦形劑以及作為活性成分的本發(fā)明化合物。另外，其還可包含其他的藥物或藥劑、載體、輔劑等。
示例性的非胃腸道給藥劑型包括活性化合物在無(wú)菌水溶液(例如丙二醇水溶液或葡萄糖水溶液)中的溶液或混懸液。如果需要，此等進(jìn)行可進(jìn)行合適的緩沖。
合適的藥物載體包括惰性稀釋劑或填料、水和各種有機(jī)溶劑。如果需要，該藥物組合物可包含其他成分，如調(diào)味劑、粘合劑、賦形劑等。因此，對(duì)于口服給藥，可使用包含各種賦形劑如檸檬酸、各種崩解劑如淀粉、藻酸和某些復(fù)合硅酸鹽、以及粘合劑如蔗糖、明膠和阿拉伯膠的片劑。另外，對(duì)于成片，潤(rùn)滑劑通常是非常有用的，例如硬脂酸鎂、月桂基硫酸鈉和滑石。類似類型的固體組合物也可以軟和硬填充明膠膠囊的形式使用。因此，優(yōu)選的材料包括乳糖和高分子量聚乙二醇。如果需要口服給藥含水混懸液或酏劑時(shí)，其中的活性化合物可與甜味劑或調(diào)味劑、著色劑或染料組合使用，而且，如果需要，還可添加乳化劑或懸浮劑、以及稀釋劑如水、乙醇、丙二醇、甘油和它們的混合物。
制備各種具有特定含量的活性化合物的藥物組合物的方法是已知的，或者對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員是顯而易見(jiàn)的。例如可參見(jiàn)Remington’sPharmaceutical Sciences，Mack Publishing Company，Ester，Pa.，15th Edition(1975)。
以下提供的實(shí)施例和制備方法進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的化合物以及制備這些化合物的方法。應(yīng)理解的是，本發(fā)明的范圍不僅局限于這些實(shí)施例和制備方法中。在以下實(shí)施例中，除非另有說(shuō)明，具有單個(gè)手性中心的分子是以外消旋混合物的形式存在。除非另有說(shuō)明，那些具有兩個(gè)或者更多個(gè)手性中心的分子則以非對(duì)映異構(gòu)體的外消旋混合物的形式存在。單個(gè)的對(duì)映體/非對(duì)映異構(gòu)體可通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法得到。
所有文章和參考文獻(xiàn)(包括專利)的內(nèi)容都并入本申請(qǐng)中作為參考。
將通過(guò)以下實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但是這些實(shí)施例絕不意味著是對(duì)本發(fā)明范圍或精神的限制。
起始物和各種中間體可市售得到、由市售得到的化合物制備、或者使用已知的合成方法進(jìn)行制備。
以下是制備本發(fā)明的中間體的方法的代表性例子。
實(shí)施例 實(shí)施例1
7-氟-6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺(11a) 步驟A2，3，4-三氟-5-硝基-苯甲酸2 在一個(gè)3升三口圓底燒瓶中加入125ml H2SO4。添加發(fā)煙硝酸(8.4ml，199mmol)，然后輕柔地?cái)嚢杌旌衔?。?0分鐘的時(shí)間內(nèi)，按照每次5g的量添加2，3，4-三氟苯甲酸1(25g，142mmol)。暗棕黃色的溶液在反應(yīng)完成時(shí)攪拌60分鐘。將反應(yīng)混合物傾倒在1升的冰水混合物中，并用乙醚(3x600ml)萃取。合并的有機(jī)萃取液進(jìn)行干燥(MgSO4)，然后減壓濃縮，得到黃色固體。將該固體懸浮在己烷中并攪拌30分鐘，之后過(guò)濾，得到29g(92％)純凈的所希望的產(chǎn)物，其為淡黃色固體經(jīng)檢測(cè)MS APCI(-)m/z 220(M-1)。
步驟B4-氨基-2，3-二氟-5-硝基-苯甲酸3 在0℃下將氫氧化銨溶液(～30％水溶液)(35ml，271mmol)添加至2，3，4-三氟-5-硝基-苯甲酸2(15g，67.8mmol)在30ml水中的溶液內(nèi)，同時(shí)進(jìn)行攪拌。氫氧化銨添加完成后，將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝兀瑫r(shí)進(jìn)行攪拌。2.5小時(shí)后，將反應(yīng)混合物冷卻至0℃，然后小心地添加濃鹽酸，直至反應(yīng)混合物的pH接近0。反應(yīng)混合物用水(30ml)稀釋，然后用乙醚(3x50ml)萃取。合并的有機(jī)萃取液進(jìn)行干燥(MgSO4)，然后減壓濃縮，得到14g(95％)純的標(biāo)題化合物經(jīng)檢測(cè)為MS APCI(-)m/z217(M-1)。
步驟C4-氨基-2，3-二氟-5-硝基-苯甲酸甲基酯4 于0℃和氮?dú)夥障聦?M的TMS重氮甲烷己烷溶液(6.88ml，13.75mmol)添加至4-氨基-2，3-二氟-5-硝基-苯甲酸3(2.00g，9.17mmol)在25ml 4∶1THF∶MeOH內(nèi)的懸浮液中。添加完成后，反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝亍?.5小時(shí)后，通過(guò)小心地添加乙酸破壞過(guò)量的TMS重氮甲烷。減壓濃縮反應(yīng)混合物，然后真空干燥，得到1.95g(92％)純的標(biāo)題化合物經(jīng)檢測(cè)MS APCI(-)m/z 231(M-1)。
步驟D4-氨基-3-氟-5-硝基-2-o-甲苯基氨基-苯甲酸甲基酯5a 4-氨基-2，3-二氟-5-硝基-苯甲酸甲基酯4(12.0g，51.7mmol)懸浮在二甲苯(60ml)中，然后添加ortho-甲胺苯(55.2ml，517mmol)。在氮?dú)夥障聦⒎磻?yīng)混合物加熱至回流，同時(shí)進(jìn)行攪拌。36小時(shí)后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用乙醚稀釋，然后用10％鹽酸水溶液洗滌。含水洗滌液用乙醚萃取。合并的有機(jī)萃取液減壓濃縮。殘留物溶解在二氯甲烷中，然后通過(guò)玻璃漏斗中的硅膠過(guò)濾，用二氯甲烷洗滌。回收三該部分。第一個(gè)部分(2升)通過(guò)HPLC純制。第二個(gè)部分(1升)和第三個(gè)部分(1升)僅是部分純的。第一個(gè)部分減壓濃縮并用乙醚研磨，得到11.2g(68％)純凈的所希望的產(chǎn)物，其是亮黃色的固體經(jīng)檢測(cè)MSAPCI(-)m/z 318(M-1)。
步驟E7-氟-6-o-甲苯基氨基-1H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯7a 4-氨基-3-氟-5-硝基-2-o-甲苯基氨基-苯甲酸甲基酯5a(1.57g，4.92mmol)、甲酸(25ml，26.5mmol)和20％Pd(OH)2/C(1.57g，2.95mmol)在25ml EtOH中加熱至95℃，并同時(shí)進(jìn)行攪拌。16小時(shí)后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，然后添加0.5g 20％Pd(OH)2/C和10ml甲酸。將反應(yīng)混合物加熱至95℃，同時(shí)進(jìn)行攪拌。16小時(shí)后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，通過(guò)Celite過(guò)濾，并用EtOH洗滌。減壓濃縮濾液，直至沉淀出所希望的產(chǎn)物。過(guò)濾收集所希望的產(chǎn)物。重新濃縮濾液，直至沉淀出更多的所希望的產(chǎn)物。過(guò)濾收集產(chǎn)物。重復(fù)EtOH濃縮、產(chǎn)物過(guò)濾數(shù)次?；厥?.09g(74％)純的所希望的產(chǎn)物經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 300(M+1)；經(jīng)檢測(cè)MS APCI(-)m/z 298(M-1)。
步驟F7-氟-6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-1H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯8a 在氮?dú)夥障聦?-氟-6-o-甲苯基氨基-1H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯7a(2.00g，6.68mmol)懸浮在1∶1THF∶MeOH混合物(60ml)中并冷卻至-78℃。添加NBS(1.20g，6.75mmol)在1∶1THF/MeOH(5ml)中的溶液，然后添加TsOH·H2O(1.9g，10.0mmol)的MeOH(5ml)溶液。30分鐘，使反應(yīng)混合物溫?zé)嶂?℃，并在1小時(shí)后溫?zé)嶂潦覝亍?6小時(shí)后，進(jìn)一步添加NBS(0.12g，0.67mmol)，并攪拌反應(yīng)混合物3小時(shí)。添加10％Na2S2O4溶液，由此淬滅反應(yīng)混合物。30分鐘后，反應(yīng)混合物用水和乙酸乙酯稀釋，然后分層。含水層用乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)萃取液進(jìn)行干燥(Na2SO4)，然后減壓濃縮?；厥盏墓腆w用二氯甲烷研磨，得到2.00g(79％)純的所希望的產(chǎn)物經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 380，378(M+1Br圖形)。
步驟G7-氟-6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-1H-苯并咪唑-5-羧酸10a 將7-氟-6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-1H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯8a(63mg，0.167mmol)懸浮在MeOH(1.5ml)中，然后添加20％NaOH(400μl)溶液。16小時(shí)后，反應(yīng)混合物冷卻至0℃，然后滴加1N HCl溶液直至pH為2-3。反應(yīng)混合物用乙酸乙酯和水稀釋，然后分層。有機(jī)層用鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)，然后減壓濃縮，得到58mg(95％)所希望的產(chǎn)物經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 366，364(M+1Br圖形)；經(jīng)檢測(cè)MS APCI(-)m/z364，362(M-1Br圖形)。
步驟H7-氟-6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-1H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺11a 將7-氟-6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-1H-苯并咪唑-5-羧酸10a(48mg，0.132mmol)溶解在1∶1THF∶二氯甲烷(1ml)中，添加Hunig堿(0.23μl，1.32mmol)，然后再添加PyBOP(82mg，0.158mmol)。數(shù)分鐘后，添加環(huán)丙基甲基羥胺鹽酸鹽(20mg，0.158mmol)(WO 0042022)。反應(yīng)完成后，混合物在二氯甲烷和飽和NaHCO3溶液之間分配。分層，并用飽和NaHCO3和鹽水洗滌有機(jī)層。有機(jī)層進(jìn)行干燥(Na2SO4)，然后減壓濃縮。通過(guò)FCC(用洗脫20∶1二氯甲烷∶MeOH)純制后，分離出25mg(45％)純的標(biāo)題化合物經(jīng)檢測(cè)MS ESI(+)m/z 435，433(M+1Br圖形)；經(jīng)檢測(cè)MS ESI(-)m/z 433，431(M-1Br圖形)；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.15(s，1H)，8.02(s，1H)，7.28(s，1H)，7.43(d，1H)，7.07(dd，1H)，6.36(m，1H)，3.70(d，2H)，2.38(s，3H)，0.86(m，1H)，0.41(m，2H)，0.13(m，2H)；19F NMR(376MHz，CDCl3)-134.05(s). 實(shí)施例2
7-氟-6-苯基氨基-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯(27a) 步驟A4-氨基-3-氟-5-硝基-2-苯基氨基-苯甲酸甲基酯26a 將4-氨基-2，3-二氟-5-硝基-苯甲酸甲基酯4(23.48g，101.1mmol)--實(shí)施例1步驟C的產(chǎn)物懸浮在中二甲苯(125mL)中，然后添加苯胺(92mL，1011mmol)。反應(yīng)混合物在125℃和氮?dú)夥障聰嚢?6小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，并從溶液中沉淀出固體。.過(guò)濾收集該固體，并先后用二甲苯和乙醚洗滌。回收的22.22g(72.78mmol)黃色固體是純的所希望的產(chǎn)物。減壓濃縮濾液，重新溶解在二氯甲烷中，并由硅膠柱中用二氯甲烷洗脫。減壓濃縮所希望的部分，得到棕色固體，其用乙醚研磨，得到5.47g(17.91mmol)黃色固體，其是純的所希望的產(chǎn)物。合并產(chǎn)物的產(chǎn)量為27.69g(90％)。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(-)m/z 304(M-1)。
步驟B7-氟-6-苯基氨基-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯27a 在乙醇(250mL)中于40℃和氮?dú)夥障聰嚢?-氨基-3-氟-5-硝基-2-苯基氨基-苯甲酸甲基酯26a(16.70g，54.71mmol)、甲酸(250mL，6.63mol)和20％Pd(OH)2/C(9.00g，16.91mmol)共2小時(shí)，然后在95℃下16小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，并通過(guò)Celite過(guò)濾，用乙酸乙酯洗滌。濾液減壓濃縮，得到黃色固體。該固體用乙醚研磨，得到13.47g(86％)棕黃色固體狀的所希望的產(chǎn)物。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 286(M+1)；經(jīng)檢測(cè)MS APCI(-)m/z 284(M-1)。
實(shí)施例3
6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯(8b) 步驟A6-(4-溴-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯28a 將7-氟-6-苯基氨基-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯27a(4.99g，17.51mmol)溶解在N，N-二甲基甲酰胺(275mL)中。在室溫和氮?dú)夥障绿砑庸腆w狀的N-溴代琥珀酰亞胺(3.15g，17.70mmol)，并攪拌反應(yīng)混合物。30分鐘后，添加飽和亞硫酸氫鈉水溶液，由此淬滅反應(yīng)混合物。將反應(yīng)混合物傾倒在分離漏斗中，用水和乙酸乙酯稀釋，然后分層。含水層用乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)萃取液用水洗滌3次，用鹽水洗滌1次，接著干燥(Na2SO4)，然后減壓濃縮，產(chǎn)生6.38g(100％)純的所希望的產(chǎn)物，其為棕黃色固體。經(jīng)檢測(cè)MS ESI(+)m/z 364，366(M+Br圖形)。
步驟B6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯8b 將6-(4-溴-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯28a(6.38g，17.51mmol)溶解在N，N-二甲基甲酰胺(275mL)。在室溫和氮?dú)夥障绿砑庸腆w狀的N-氯琥珀酰亞胺(2.36g，17.70mmol)，并攪拌反應(yīng)混合物，直至反應(yīng)完全(5-6天)。添加飽和亞硫酸氫鈉水溶液，由此淬滅反應(yīng)混合物，得到一懸浮液。過(guò)濾收集所得的固體，用水和乙醚洗滌，然后在減壓下干燥，產(chǎn)生6.07g(87％)純的所希望的產(chǎn)物，其為米黃色固體。經(jīng)檢測(cè)MS ESI(+)m/z 398，400(M+Br圖形)。
實(shí)施例4
6-(2，4-二氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯(8c) 在氮?dú)夥障聦?-氟-6-苯基氨基-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯27a(1.00g，3.51mmol)懸浮在1∶1四氫呋喃/甲醇(20mL)中并冷卻至-78℃。先后添加TsOH·H2O(3.00g，10.50mmol)和N-氯琥珀酰亞胺(0.95g，7.08mmol)。10分鐘后，將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂?℃，得到一溶液，并在30分鐘后溫?zé)嶂潦覝?。攪?6小時(shí)后，反應(yīng)完全。添加飽和亞硫酸氫鈉水溶液，由此淬滅反應(yīng)混合物，用乙酸乙酯和水稀釋，然后分層。含水層用乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)萃取液用鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)，然后減壓濃縮。所得固體殘留物用二氯甲烷研磨，產(chǎn)生的白色固體通過(guò)過(guò)濾收集，得到1.05g(85％)純的所希望的產(chǎn)物。經(jīng)檢測(cè)MS ESI(+)m/z355，357(M+Cl圖形)。
實(shí)施例5
6-(4-溴-2-氟-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯(8d) 步驟A4-氨基-3-氟-2-(2-氟-苯基氨基)-5-硝基-苯甲酸甲基酯5b 將4-氨基-2，3-二氟-5-硝基-苯甲酸甲基酯4(1.50g，6.46mmol)懸浮在二甲苯(7.5mL)中，然后添加2-氟-苯基胺(6.24mL，64.6mmol)。反應(yīng)混合物在140℃和氮?dú)夥障聰嚢?。攪?天后，反應(yīng)完全。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用二氯甲烷稀釋，在硅膠柱上用二氯甲烷(1L)洗脫過(guò)濾，得到橙色濾液。該濾液濃縮至干，然后用乙醚研磨，產(chǎn)生亮黃色固體。重復(fù)進(jìn)行研磨。收集黃色固體，得到1.08g(52％)純的所希望的產(chǎn)物。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(-)m/z 322(M-1)。
步驟B6-(4-溴-2-氟-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯8d 通過(guò)已描述的還原/環(huán)化和溴化步驟，轉(zhuǎn)化4-氨基-3-氟-2-(2-氟-苯基氨基)-5-硝基-苯甲酸甲基酯5b，得到所希望的產(chǎn)物。經(jīng)檢測(cè)MS ESI(+)m/z 382，384(M+，Br圖形)。
實(shí)施例6
6-(4-氯-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯(8e) 通過(guò)已描述的溴化反應(yīng)步驟，轉(zhuǎn)化7-氟-6-o-甲苯基氨基-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯7a，不同之處在于使用N-氯琥珀酰亞胺替代N-溴代琥珀酰亞胺，得到所希望的產(chǎn)物。經(jīng)檢測(cè)MS ESI(+)m/z 334，336(M+，Cl圖形)。
實(shí)施例7
7-氟-6-(2-甲基-4-三氟甲氧基-苯基氨基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯(8f) 步驟A.4-氨基-3-氟-2-(2-甲基-4-三氟甲氧基-苯基氨基)-5-硝基-苯甲酸甲基酯12a 將4-氨基-2，3-二氟-5-硝基-苯甲酸甲基酯4(0.50g，2.15mmol)懸浮在二甲苯(3mL)中，然后添加2-甲基-4-三氟甲氧基-苯基胺(1.00g，5.23mmol)。反應(yīng)混合物在140℃和氮?dú)夥障聰嚢?。攪?天后，反應(yīng)產(chǎn)物是起始物和產(chǎn)物的混合物。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫。將反應(yīng)混合物傾倒在分離漏斗中，添加乙醚和10％鹽酸水溶液，然后分層。含水相用三份乙醚萃取。合并的乙醚層干燥(MgSO4)，然后減壓濃縮。殘留物重新溶解在二氯甲烷中，然后在硅膠柱上用二氯甲烷進(jìn)行洗脫過(guò)濾。濾液減壓濃縮，得到亮黃色固體。該固體用乙醚洗滌，而濾液減壓濃縮，殘留物通過(guò)FCC(用100％二氯甲烷洗脫)進(jìn)一步純制，得到0.39g(45％)黃色固體狀所希望的純產(chǎn)物。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(-)m/z 402(M-1)。
步驟B.7-氟-6-(2-甲基-4-三氟甲氧基-苯基氨基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯8f 通過(guò)已描述的還原/環(huán)化步驟轉(zhuǎn)化4-氨基-3-氟-2-(2-甲基-4-三氟甲氧基-苯基氨基)-5-硝基-苯甲酸甲基酯12a，產(chǎn)生所希望的產(chǎn)物。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 384(M+1)；經(jīng)檢測(cè)MS APCI(-)m/z 382(M-1)。
實(shí)施例8 羥胺的制備 用于合成本發(fā)明化合物的羥胺可如下制備。
(i)O-(2-甲氧基-乙基)-羥胺 步驟A2-(2-甲氧基-乙氧基)-異吲哚-1，3-二酮 將DEAD(10mL，63mmol)添加至2-甲氧基乙醇(5.0mL，63mmol)、PPh3(17g，63mmol)、和N-羥基鄰苯二甲酰亞胺(10g，62mmol)在THF(170mL)中的混合物內(nèi)。所得的橙色溶液在室溫下攪拌16小時(shí)。真空濃縮反應(yīng)混合物，過(guò)濾出固體并用CHCl3洗滌。濃縮濾液，過(guò)濾出固體并用CHCl3洗滌。重復(fù)該輔助，直至沒(méi)有沉淀物形成。最終的黃色固體由乙醇中重結(jié)晶，得到所希望的產(chǎn)物(7.7g，55％)。
步驟BO-(2-甲氧基-乙基)-羥胺 在室溫下向2-(2-甲氧基-乙氧基)-異吲哚-1，3-二酮(7.7g，35mmol)在CH2Cl2(30mL)中的溶液內(nèi)添加甲基肼(2.0mL，36mmol)。所得的溶液在室溫下攪拌16小時(shí)。過(guò)濾出白色的固體。在減壓下小心地蒸餾出溶劑，濃縮物進(jìn)行真空蒸餾(20torr，57-58℃)，得到所希望的產(chǎn)物(2.2g，68％)。
(ii)使用合適的醇如上所述制備以下羥胺。異吲哚-1，3-二酮中間體通過(guò)快速色譜純制。


O-(2-異丁氧基-乙基)-羥胺無(wú)需純制直接使用。


O-(2-吡咯烷-1-基-乙基)-羥胺無(wú)需純制直接使用。


O-(2-哌啶-1-基-乙基)-羥胺通過(guò)Kugelrohr蒸餾(腔室溫度140℃，1torr)進(jìn)行純制。


O-(2-甲基硫烷基-乙基)-羥胺通過(guò)真空蒸餾(76-78℃，20torr)進(jìn)行純制。


O-(2-苯基硫烷基-乙基)-羥胺無(wú)需純制直接使用。


O-(3-甲基硫烷基-丙基)-羥胺無(wú)需純制直接使用。
(iii)由合適的異吲哚-1，3-二酮用臭氧進(jìn)行氧化(Tetrahedron Lett.1981，22，1287)，然后如上所述脫保護(hù)，由此制備以下羥胺。


O-(2-甲磺酰基-乙基)-羥胺無(wú)需純制直接使用。


O-(2-苯磺酰基-乙基)-羥胺通過(guò)快速色譜(1％MeOH，在CH2Cl2中)進(jìn)行純制。


O-(3-甲磺酰基-丙基)-羥胺無(wú)需純制直接使用。


通過(guò)WO 0018790中的專利方法，然后如上所述脫保護(hù) 由PhSCH2CH2CH2Br和N-羥基鄰苯二甲酰亞胺制備O-(3-苯基硫烷基-丙基)-羥胺，無(wú)需純制直接使用。
(iv)

由異吲哚-1，3-二酮通過(guò)臭氧氧化，然后如上所述脫保護(hù)，通過(guò)快速色譜(100％CH2Cl2至2％MeOH，在CH2Cl2中)進(jìn)行純制，得到O-(3-苯磺?；?丙基)-羥胺。
(v)O-(2-嗎啉-4-基-乙基)-羥胺二鹽酸鹽 步驟AO-(2-溴-乙基)-羥胺氫溴酸鹽 如WO 0018790所述，由1，2-二溴乙烷和N-羥基鄰苯二甲酰亞胺制備2-(2-溴-乙氧基)-異吲哚-1，3-二酮，然后進(jìn)行文獻(xiàn)J.Org.Chem.1963，28，1604中描述的方法，產(chǎn)生所希望的產(chǎn)物。
步驟B(2-溴-乙氧基)-氨基甲酸叔丁基酯 在室溫下向O-(2-溴-乙基)-羥胺氫溴酸鹽(100mg，0.45mmol)和二t-丁基二碳酸酯(110mg，0.49mmol)在CH2Cl2(1mL)中的溶液內(nèi)添加Et3N(0.08mL，0.56mmol)。所得的懸浮液在室溫下攪拌16小時(shí)。反應(yīng)混合物用EtOAc稀釋，用1N aq HCl和鹽水洗滌，在MgSO4上干燥，過(guò)濾，濃縮，然后通過(guò)快速色譜(100％CH2Cl2)進(jìn)行純制，得到所希望的產(chǎn)物(81mg，75％)。
步驟C(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-氨基甲酸叔丁基酯 在室溫下向(2-溴-乙氧基)-氨基甲酸叔丁基酯(252mg，1.05mmol)在DMF(2mL)中的溶液內(nèi)添加嗎啉(0.14mL，1.6mmol)。反應(yīng)混合物在50℃下攪拌7小時(shí)。反應(yīng)混合物用EtOAc稀釋，然后用水洗滌。有機(jī)層在MgSO4上干燥，過(guò)濾，濃縮，然后通過(guò)快速色譜(2％MeOH，在CH2Cl2)中進(jìn)行純制，得到所希望的產(chǎn)物(118mg，46％)經(jīng)檢測(cè)MSAPCI(+)m/z 247。
步驟DO-(2-嗎啉-4-基-乙基)-羥胺二鹽酸鹽 在室溫下向(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-氨基甲酸叔丁基酯(118mg，0.48mmol)在MeOH(1mL)中的溶液內(nèi)添加4M鹽酸的二噁烷溶液(2.4mL，9.60mmol)。所得的溶液在室溫下攪拌16小時(shí)。添加額外的HCl(2.4mL)并攪拌4小時(shí)后，真空濃縮反應(yīng)混合物，得到黃色固體(82mg，78％)。
(vi)按照J(rèn).Heterocyclic Chem.2000，37，827-830中描述的方法，由合適的烷基鹵化物和N-羥基鄰苯二甲酰亞胺制備以下羥胺的異吲哚-1，3-二酮中間體。這些異吲哚-1，3-二酮通過(guò)如上所述的步驟脫保護(hù)O-丁-3-烯基-羥胺、O-(四氫呋喃-2-基甲基)-羥胺、O-(3-甲氧基-丙基)-羥胺、和O-(3-芐氧基-丙基)-羥胺。
(vii)如WO 0206213中所述制備以下羥胺O-(2-乙烯基氧基-乙基)-羥胺、2-氨基氧基-2-甲基-丙烷-1-醇、1-氨基氧基-2-甲基-丙烷-2-醇、3-氨基氧基-丙烷-1-醇、和(2-氨基氧基-乙基)-甲基-氨基甲酸叔丁基酯。
實(shí)施例9
6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺(11b) 步驟A4-氨基-2-(2-氯-苯基氨基)-3-氟-5-硝基-苯甲酸甲基酯5b 將4-氨基-2，3-二氟-5-硝基-苯甲酸甲基酯4(2.00g，8.62mmol)懸浮在二甲苯(15ml)中，然后添加2-氯苯胺(9.06ml，86.15mmol)。在氮?dú)夥障聦⒎磻?yīng)混合物加熱至140℃。6天后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，并用乙酸乙酯稀釋。反應(yīng)混合物用水、10％HCl溶液和鹽水洗滌。有機(jī)層干燥(MgSO4)，然后減壓濃縮。粗產(chǎn)物用乙醚研磨兩次，得到0.35g(12％)純的所希望的產(chǎn)物，其為棕色固體。
步驟B4，5-二氨基-2-(2-氯-苯基氨基)-3-氟-苯甲酸甲基酯6a 將4-氨基-2-(2-氯-苯基氨基)-3-氟-5-硝基-苯甲酸甲基酯5b(0.30g，0.88mmol)懸浮在AcOH(5ml)中，然后添加鋅粉(0.29g，4.42mmol)。15分鐘后，反應(yīng)完全。反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，然后通過(guò)Celite過(guò)濾。濾液用水、飽和NaHCO3、10％K2CO3和鹽水洗滌。有機(jī)層干燥(MgSO4)，然后減壓濃縮，得到0.13g(48％)純的所希望的產(chǎn)物，其為發(fā)白的棕色泡沫。
步驟C6-(2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯7b 將4，5-二氨基-2-(2-氯-苯基氨基)-3-氟-苯甲酸甲基酯6a(0.125g，0.404mmol)懸浮在EtOH(2ml)中，然后添加甲脒乙酸鹽(63mg，0.605mmol)。將反應(yīng)混合物加熱至回流。16小時(shí)后，反應(yīng)混合物冷卻至室溫并用乙酸乙酯稀釋。有機(jī)層用水、飽和NaHCO3、10％K2CO3和鹽水洗滌。有機(jī)層干燥(MgSO4)，然后減壓濃縮，得到0.109g(85％)純的所希望的產(chǎn)物。
步驟D6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯8b 在氮?dú)夥障聦?-(2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯7b(55mg，0.172mmol)溶解在1∶1THF∶MeOH(2ml)中并冷卻至-78℃。先后添加TsOH·H2O(49mg，0.258mmol)和NBS(31mg，0.174mmol)。10分鐘后，反應(yīng)混合物溫?zé)嶂?℃，并在2小時(shí)后溫?zé)嶂潦覝亍?6小時(shí)后，添加10％Na2S2O3，由此淬滅反應(yīng)混合物，并用乙酸乙酯和水稀釋。分層，而含水層用乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)萃取液進(jìn)行干燥(MgSO4)，然后減壓濃縮。粗產(chǎn)物用二氯甲烷研磨，得到58mg(85％)純的標(biāo)題化合物，其為棕黃色固體。
步驟E6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸10b 將6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯8b(58mg，0.146mmol)懸浮在EtOH(2ml)中，然后添加1ml 2N NaOH。16小時(shí)后，反應(yīng)混合物用乙酸乙酯、水、和10％HCl溶液稀釋。分層，而有機(jī)層用鹽水洗滌。有機(jī)層干燥(MgSO4)，然后減壓濃縮。用MeOH研磨，得到22mg(39％)純的所希望的產(chǎn)物。
步驟F6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺(11b) 將6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸10b(22mg，0.057mmol)溶解在DMF(1ml)，并先后添加HOBt(9mg，0.062mmol)和三乙基胺(18μl，0.132mmol)。先后添加環(huán)丙基甲基羥胺鹽酸鹽(8mg，0.062mmol)和EDCI(14mg，0.074mmol)。16小時(shí)后，反應(yīng)混合物用乙酸乙酯和水稀釋，然后分層。有機(jī)層用飽和NH4Cl、鹽水、飽和NaHCO3、水和鹽水洗滌。有機(jī)層干燥(MgSO4)，然后減壓濃縮，得到23mg(89％)純的所希望的產(chǎn)物。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 455，453(M+Br圖形)；經(jīng)檢測(cè)MS APCI(-)m/z 453，451(M-Br圖形)；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.69(br s，1H)，8.43(s，1H)，7.62(d，1H)，7.28(dd，1H)，6.42(m，1H)，3.63(d，2H)，1.03(m，1H)，0.48(m，2H)，0.19(m，2H)；19F NMR(376MHz，DMSO-d6)-132.95(s). 類似于實(shí)施例1和實(shí)施例9中描述的方法，使用合適的羧酸和羥胺制備以下化合物
實(shí)施例10
6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羥基-乙氧基)-酰胺(29c) 步驟A.6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯9a和6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-1-甲基-1H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯 在75℃下攪拌6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯8b(150mg，0.38mmol)、碘甲烷(28μL，0.45mmol)和碳酸鉀(78mg，0.56mmol)在二甲基甲酰胺(1.5mL)中的溶液1小時(shí)。反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，用飽和碳酸鉀水溶液(2x)、鹽水洗滌，然后干燥(Na2SO4)。進(jìn)行快速色譜(20∶1二氯甲烷/乙酸乙酯)純制，得到56mg(36％)更易于移動(dòng)的6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯9a，其為白色固體。19F NMR(376MHz，CD3OD)-133.5(s)。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 412，414(M+，Br圖形)。還分離出54mg(35％)的6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-1-甲基-1H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯，其為白色固體。19F NMR(376MHz，CD3OD)-139.9(s)。經(jīng)檢測(cè)MSAPCI(+)m/z 412，414(M+，Br圖形)。
步驟B.6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸10c 將6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯9a(56mg，0.14mmol)溶解在2∶1THF/水(3mL)中，然后添加NaOH(0.55mL，1.0M水溶液，0.55mmol)。攪拌2小時(shí)后，通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)使溶液物減少至初始體積的斯分之一，殘留物用水稀釋至50mL。該水溶液通過(guò)添加1.0M鹽水水溶液而被酸化至pH 2，用1∶1四氫呋喃/乙酸乙酯(3x)萃取，干燥(Na2SO4)，然后減壓濃縮，得到43mg(79％)淺白色固體狀的純羧酸。經(jīng)檢測(cè)MS ESI(+)m/z 397，398(M+，Br圖形)。
步驟C6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-乙烯基氧基-乙氧基)-酰胺29a 將6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸10c(2.00g，5.0mmol)、O-(2-乙烯基氧基-乙基)-羥胺(0.776g，7.5mmol)、HOBt(0.88g，6.5mmol)、三乙基胺(1.61mL，2.3mmol)和EDCI(1.3g，6.5mmol)溶解在二甲基甲酰胺(52mL)中，然后在室溫下攪拌48小時(shí)。反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，用水(3x)、飽和碳酸鉀(2x)、飽和氯化銨(2x)、鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)，然后減壓濃縮，得到淺白色固體。用乙醚研磨該固體，得到2.18g(90％)淺白色固體狀的希望產(chǎn)物。經(jīng)檢測(cè)MS ESI(+)m/z 483，485(M+Br圖形)。
步驟D6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羥基-乙氧基)-酰胺29c 將鹽酸(14mL，1.0M水溶液，14mmol)添加至6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-乙烯基氧基-乙氧基)-酰胺29a(2.18g，4.50mmol)在乙醇(50mL)中的懸浮液內(nèi)，攪拌反應(yīng)混合物24小時(shí)。通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮反應(yīng)混合物至干，固體在3∶1乙酸乙酯/四氫呋喃和飽和碳酸鉀之間分配。含水相用3∶1乙酸乙酯/四氫呋喃(3x)萃取，合并的有機(jī)物干燥(Na2SO4)，然后濃縮，得到2.11g(100％)6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羥基-乙氧基)-酰胺，其為淺白色固體。經(jīng)檢測(cè)MS ESI(+)m/z 457，459(M+，Br圖形)。1H NMR(400MHz，MeOH-d4)

8.26(s，1H)，7.78(s，1H)，7.57(d，1H)，7.24(dd，1H)，6.40(dd，1H)，3.86(s，3H)，3.79(m，2H)，3.49(m，2H)。19F NMR(376MHz，MeOH-d4)-133.68(s). 實(shí)施例11 類似于實(shí)施例10中描述的方法，使用甲基酯8b以及合適的烷基化劑(步驟A)和合適的羥胺(步驟C)制備以下化合物




實(shí)施例12
6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2，3-二羥基-丙氧基)-酰胺(29hhh) 向6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸烯丙基氧基-酰胺29tt(20mg，0.04mmol)在0.50mL 4∶1四氫呋喃/水中的溶液內(nèi)先后添加OsO4(41μL，0.054M的t-BuOH溶液，0.002mmol)和NMO(7mg，0.06mmol)。溶液在室溫下攪拌8小時(shí)，之后HPLC分析顯示完全轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物。該溶液接著與飽和NaHSO3一起攪拌，并用乙酸乙酯稀釋。有機(jī)相干燥(Na2SO4)。通過(guò)FCC(DCM-＞20∶1 DCM/MeOH)純制，得到16mg所希望的產(chǎn)物，其為淺白色固體。經(jīng)檢測(cè)MS ESI(+)m/z487，489(M+，Br圖形)。
實(shí)施例13
6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(3，4-二羥基-丁氧基)-酰胺(29iii) 6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸丁-3-烯基氧基-酰胺29uu進(jìn)行如實(shí)施例12中描述的二羥基化方法。經(jīng)檢測(cè)MSAPCI(+)m/z 501，503(M+Br圖形)。
實(shí)施例14
6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-甲基氨基-乙氧基)-酰胺TFA鹽(29jjj) 由(2-{[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羰基]-氨基氧基}-乙基)-甲基-氨基甲酸叔丁基酯29ww起始，在二氯甲烷中進(jìn)行三氟乙酸脫保護(hù)，由此制得標(biāo)題化合物。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z470，472(M+，Br圖形)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.31(s，1H)，7.74(s，1H)，7.51(d，1H)，7.19(dd，1H)，6.39(dd，1H)，4.11(m，2H)，3.97(s，3H)，3.12(m，2H)，2.72(s，3H)；19F NMR(376MHz，CD3OD)-77.41(s，3F)，-134.79(s，1F). 實(shí)施例15 類似于實(shí)施例10中描述的方法，使用甲基酯8a以及合適的烷基化劑(步驟A)和合適的羥胺(步驟C)制備以下化合物
實(shí)施例16 類似于實(shí)施例10中描述的方法，使用甲基酯8e以及合適的烷基化劑(步驟A)和合適的羥胺(步驟C)制備以下化合物
實(shí)施例17 類似于實(shí)施例10中描述的方法，使用甲基酯8c以及合適的烷基化劑(步驟A)和合適的羥胺(步驟C)制備以下化合物
實(shí)施例18 類似于實(shí)施例10中描述的方法，使用甲基酯8d以及合適的烷基化劑(步驟A)和合適的羥胺(步驟C)制備以下化合物
實(shí)施例19
6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丁基]-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺(11o) 步驟A6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3-戊-4-烯基-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯9b 在氮?dú)夥障聦?-氟-6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-1H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯8a(0.915g，2.419mmol)懸浮在DMF(18ml)中。添加溴戊烯(0.430ml，3.629mmol)和K2CO3(0.502g，3.629mmol)，然后將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂?0℃。1后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，然后傾倒在100ml的1∶1乙酸乙酯∶乙醚中。有機(jī)層用水和鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)，然后減壓濃縮。N3和N1烷基化產(chǎn)物通過(guò)快速柱色譜分離，用20∶1二氯甲烷∶乙酸乙酯洗脫。進(jìn)行兩次色譜分離，由此得到完全分離的異構(gòu)體。更高Rf的產(chǎn)物是N3產(chǎn)物9b，而較低Rf的產(chǎn)物是N1產(chǎn)物?；厥盏玫降腘3產(chǎn)物9b為0.415g(38％)經(jīng)檢測(cè)LC/MS ESI(+)m/z 448，446(M+1Br圖形)?；厥盏玫降腘1產(chǎn)物是0.486g(45％)經(jīng)檢測(cè)LC/MS ESI(+)m/z448，446(M+1Br圖形)。
步驟B6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3-戊-4-烯基-3H-苯并咪唑-5-羧酸10d 將6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3-戊-4-烯基-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯9b溶解在1∶1THF∶MeOH(10ml)中，然后添加1N NaOH溶液(2.3ml)。5小時(shí)后，減壓除去有機(jī)溶劑，而殘留物用水和100ml 1∶1 THF∶乙酸乙酯稀釋。分層，而含水層用乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)萃取液進(jìn)行干燥(Na2SO4)，然后減壓濃縮，得到0.39g(100％)純凈的希望產(chǎn)物，其為亮黃色固體。
步驟C6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3-戊-4-烯基-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺11f 將6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3-戊-4-烯基-3H-苯并咪唑-5-羧酸10d(0.390g，0.902mmol)溶解在1∶1THF∶二氯甲烷(6ml)中，并先后添加Hunig堿(0.346ml，1.985mmol)和PyBOP(0.563g，1.083mmol)。10分鐘后，添加環(huán)丙基甲基羥胺鹽酸鹽(0.134g，1.083mmol)。16小時(shí)后，反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，并用0.1N HCl、飽和NaHCO3、和鹽水洗滌。有機(jī)層干燥(Na2SO4)，然后減壓濃縮。粗的黃色殘留物通過(guò)FCC純制，其中用乙酸乙酯洗脫，得到0.315g(70％)純的所希望的產(chǎn)物，其為黃色固體經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 503，501(M+1Br圖形)。
步驟D6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-3-(4，5-二羥基-戊基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺11m 將6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3-戊-4-烯基-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺11f(0.307g，0.612mmol)溶解在4∶1THF∶水(8ml)中，并先后添加1.134ml(0.061mmol)0.054M OsO4在t-BuOH中的溶液和NMO(0.093g，0.796mmol)。5小時(shí)后，添加10％NaHS2O3溶液，由此淬滅反應(yīng)混合物。10分鐘后，反應(yīng)混合物通過(guò)Celite過(guò)濾并用乙酸乙酯和二氯甲烷洗滌。濾液用稀釋乙酸乙酯并用0.01N HCl、和鹽水洗滌。有機(jī)層干燥(Na2SO4)，然后減壓濃縮。粗產(chǎn)物通過(guò)FCC純制，其中用9∶1乙酸乙酯∶MeOH洗脫，得到0.244g(74％)純的所希望的產(chǎn)物。
步驟E6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3-(4-氧代-丁基)-3H苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺11n 向6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-3-(4，5-二羥基-戊基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺11m(0.244g，0.456mmol)、THF(5ml)和pH 7磷酸鹽緩沖液(3ml)的混合物中添加高碘酸鈉(0.195g，0.911mmol)。16小時(shí)后，反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋并用NaHCO3、和鹽水洗滌。有機(jī)層干燥(Na2SO4)，然后減壓濃縮，得到橙色固體。通過(guò)FCC純制，其中用4∶1二氯甲烷∶MeOH洗脫，得到0.189g(82％)純的所希望的產(chǎn)物，其為黃色固體經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 505，503(M+1Br圖形)；經(jīng)檢測(cè)MS APCI(-)m/z 503，501(M-1Br圖形)。
步驟F6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丁基]-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺11o 將6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3-(4-氧代-丁基)-3H苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺11n(15mg，0.030mmol)溶解在MeCN(500μl)中，并先后添加甲基哌嗪(10μl，0.089mmol)和AcOH(5μl，0.089mmol)。5分鐘后，添加四甲基三乙酰氧基硼氫化銨(12mg，0.045mmol)。5分鐘后，反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋并用NaHCO3和鹽水洗滌。有機(jī)層干燥(Na2SO4)，然后減壓濃縮，得到12mg(69％)純的標(biāo)題化合物，其為白色固體。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(-)m/z 587，585(M-1Br圖形)；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.99(s，1H)，7.98(s，1H)，7.30(d，1H)，7.08(dd，1H)，6.30(d，1H)，6.1(broad singlet，1H)，4.26(t，2H)，3.64(d，2H)，3.37(s，1H)，2.45(br，8H)，2.41(s，3H)，2.38(t，2H)，2.28(s，3H)，1.95(quin，2H)，1.55(quin，2H)，0.98(m，1H)，0.50(qt，2H)，0.22(qt，2H). 實(shí)施例20 類似于實(shí)施例19中描述的方法，在還原胺化(步驟F)中使用合適的烯基取代的苯并咪唑以及合適的胺，制備以下化合物


實(shí)施例21
6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-3-[4-(1，1-二氧代-1λ6-硫代嗎啉-4-基)-丁基]-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺(18cc) 向6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3-(4-硫代嗎啉-4-基-丁基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺18l(8mg，0.014mmol)在1∶1∶1水/丙酮/MeOH(1mL)中的溶液內(nèi)添加NMO(1.6mg，0.014mmol)和四氧化餓(250μL，0.054M的t-BuOH溶液，0.014mmol)。攪拌24小時(shí)后，溶液用飽和硫代硫酸鈉溶液稀釋，攪拌10分鐘并用乙酸乙酯稀釋。溶液用鹽水(2x)洗滌，干燥(Na2SO4)，然后減壓濃縮。，得到灰色固體。FCC(10∶1二氯甲烷/甲醇)產(chǎn)生6mg(71％)所希望的產(chǎn)物，其為淺白色固體。經(jīng)檢測(cè)MS ESI(+)m/z 622，624(M+，Br圖形)。
實(shí)施例22
6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丁基]-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺(18dd) 在85℃下攪拌6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-3-(4-氯-丁基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺18ee(10mg，0.018mmol)、碘化鈉(14mg，0.092mmol)、以及1-甲基-哌嗪(10μL，0.092mmol)共3小時(shí)。反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，并用水洗滌3次，用飽和碳酸鉀水溶液洗滌2次，干燥(Na2SO4)，然后減壓濃縮，得到黃色油?？焖偕V純制(1∶1二氯甲烷/甲醇，接著甲醇，然后20∶1甲醇/三乙基胺)，得到純凈的產(chǎn)物(8mg，72％)，其為淺白色泡沫。經(jīng)檢測(cè)MS ESI(+)m/z 607，609(M+，Br圖形)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)

8.37(s，1H)，7.71(s，1H)，7.49(d，1H)，7.18(dd，1H)，6.40(dd，1H)，4.38(t，2H)，3.62(d，2H)，2.45(br，8H)，2.41(t，2H)，2.28(s，3H)，1.96(m，2H)，1.54(m，2H)，1.07(m，1H)，0.50(d，2H)，0.22(d，2H). 實(shí)施例23 類似于實(shí)施例22中描述的方法，使用合適的胺和伯烷基氯化物制備以下化合物。



實(shí)施例24
6-(4-氯-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3-噁唑-5-基甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺(18ggg) 將6-(4-氯-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3-(2-氧代-乙基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺(0.020g，0.046mmol)溶解在甲醇(2mL)中。添加碳酸鉀(0.013g，0.093mmol)和1-異氰基甲磺?；?4-甲基-苯(0.010g，0.051mmol)。反應(yīng)混合物在回流和氮?dú)夥障聰嚢?6小時(shí)，然后減壓濃縮。殘留物溶解在乙酸乙酯中，然后傾倒在分離漏斗中并用水和鹽水洗滌。合并的含水層重新用乙酸乙酯(2x)萃取。合并的乙酸乙酯層干燥(Na2SO4，)，然后減壓濃縮。所得的固體通過(guò)快速柱色譜進(jìn)行純制(用15∶1二氯甲烷∶甲醇洗脫)，得到0.011g(50％)所希望的產(chǎn)物。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 470，472(M+，Cl圖形)；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.51(br s，1H)，8.07(s，1H)，8.02(s，1H)，7.89(s，1H)，7.23(s，1H)，7.15(d，1H)，6.92(dd，1H)，6.31(d，1H)，6.11(br s，1H)，5.45(s，2H)，3.62(d，2H)，2.40(s，3H)，0.87(m，1H)，0.49(m，2H)，0.20(m，2H).19F NMR(376MHz，CDCl3)-134.54(s). 實(shí)施例25
6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(3-氧代-3-吡咯烷-1-基-丙基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺(18hhh) 步驟A6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-3-(2-叔丁氧基羰基-乙基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯 在氮?dú)夥障聦?-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯8b(0.50g，1.25mmol)溶解在DMF(8ml)，并先后添加K2CO3(0.26g，1.88mmol)和丙烯酸t(yī)-丁基酯(1.84ml，12.54mmol)。將反應(yīng)混合物加熱至90℃，同時(shí)進(jìn)行攪拌。4小時(shí)后，反應(yīng)混合物冷卻至室溫，并用乙酸乙酯稀釋。有機(jī)層用水(3x)和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，然后減壓濃縮。通過(guò)柱色譜純制，其中用19∶1二氯甲烷∶乙酸乙酯洗脫，得到0.41g(62％)希望的產(chǎn)物。
步驟B6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-3-(2-羧基-乙基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯TFA鹽 將6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-3-(2-叔丁氧基羰基-乙基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯(0.050g，0.095mmol)溶解在二氯甲烷(0.5ml)中，然后添加TFA(0.5ml)。45分鐘后，濃縮反應(yīng)混合物至干，得到0.49g(88％)所希望的產(chǎn)物經(jīng)檢測(cè)LC/MS ESI(+)m/z 472，470(M+Br圖形)；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)

8.51(s，1H)，8.20(s，1H)，8.13(s，1H)，7.64(d，1H)，7.29(dd，1H)，6.45(dd，1H)，4.55(t，2H)，2.89(t，2H). 步驟C6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(3-氧代-3-吡咯烷-1-基-丙基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯 在室溫下向6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-3-(2-羧基-乙基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯(60mg，0.13mmol)在DMF(1.8mL)中的溶液內(nèi)添加HOBt-H2O(24mg，0.16mmol)、Et3N(0.043mL，0.31mmol)、吡咯烷(0.011mL，0.13mmol)、和EDCI(34mg，0.18mmol)。所得的黃色溶液在室溫下攪拌16小時(shí)。反應(yīng)混合物用EtOAc和水稀釋，用飽和NH4Cl水溶液、鹽水、飽和NaHCO3水溶液、和鹽水洗滌。有機(jī)層在MgSO4上干燥，過(guò)濾，然后真空濃縮，得到的粗產(chǎn)物通過(guò)快速色譜純制(3％MeOH，在CH2Cl2中)，得到45mg(67％)所希望的產(chǎn)物經(jīng)檢測(cè)MSAPCI(+)m/z 523，525(M+，Br圖形)。
步驟D6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(3-氧代-3-吡咯烷-1-基-丙基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸 在室溫下向6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(3-氧代-3-吡咯烷-1-基-丙基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯(41mg，0.079mmol)在THF/H2O(1.5mL/0.75mL)中的溶液內(nèi)添加0.20mL(0.20mmol)1N LiOH水溶液。所得的溶液攪拌16小時(shí)。反應(yīng)混合物用1N aq HCl酸化(pH～2-3)，然后用EtOAc稀釋。有機(jī)層在MgSO4上干燥，過(guò)濾，然后真空濃縮，粗產(chǎn)物(42mg)，其無(wú)需進(jìn)一步純制就直接使用。
步驟E6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(3-氧代-3-吡咯烷-1-基-丙基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺18hhh 按照步驟A中描述的標(biāo)準(zhǔn)偶聯(lián)步驟，由6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(3-氧代-3-吡咯烷-1-基-丙基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸和O-環(huán)丙基甲基-羥胺鹽酸鹽制備標(biāo)題化合物經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 578，580(M+，Br圖形)；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.66(s，1H)，8.42(s，1H)，8.01(s，1H)，7.76(s，1H)，7.62(s，1H)，7.28(d，1H)，6.39(m，1H)，4.52(t，2H)，3.66(d，2H)，3.33(t，2H)，3.28(t，2H)，2.89(t，2H)，1.83(m，2H)，1.76(m，2H)，1.06(m，1H)，0.49(m，2H)，0.22(m，2H)；19F NMR(376MHz，DMSO-d6)-132.94(s，1F). 實(shí)施例26 按照類似于實(shí)施例25中描述的方法，使用甲基酯8b以及合適的胺制備以下化合物
實(shí)施例27
6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(四氫吡喃-2-基甲基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羥基-乙氧基)-酰胺(11p) 步驟A6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(四氫吡喃-2-基甲基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯11q 將6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯8b(0.25g，0.63mmol)溶解在N，N-二甲基甲酰胺(5mL)中。添加2-溴甲基-四氫吡喃(0.34g，1.88mmol)和碳酸鉀(0.26g，1.88mmol)，并在60℃和氮?dú)夥障聰嚢璺磻?yīng)混合物12小時(shí)。將反應(yīng)混合物傾倒在中分離漏斗中，用乙酸乙酯和水稀釋，然后分層。乙酸乙酯層用水和鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)，然后減壓濃縮。所得固體殘留物用研磨乙醚，得到淡黃色固體(通過(guò)NMR確定為N3區(qū)域異構(gòu)體)和黃色濾液(通過(guò)NMR確定為N1和N3區(qū)域異構(gòu)體的混合物)。收集這些固體并用乙醚洗滌，得到0.12g(37％)所希望的純的N3區(qū)域異構(gòu)體產(chǎn)物，其為淡黃色固體。經(jīng)檢測(cè)MS ESI(+)m/z 496，498(M+，Br圖形)。
步驟B6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(四氫吡喃-2-基甲基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸11r 將6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(四氫吡喃-2-基甲基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯11q懸浮在4∶1四氫呋喃/水(2.5mL)中，然后添加1MLiOH水溶液(2.5mL)。在室溫下攪拌16小時(shí)后，反應(yīng)混合物為均相的，而且反應(yīng)完全。反應(yīng)混合物冷卻至0℃，用水稀釋，然后滴加2MHCI水溶液，直至該溶液的pH為1-2，此時(shí)變?yōu)閼腋∫?。將反?yīng)混合物傾倒在中分離漏斗并用乙酸乙酯/四氫呋喃和水稀釋，然后分層。含水層用萃取乙酸乙酯。合并的有機(jī)層用鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)，然后減壓濃縮，得到0.11g(100％)純的所希望的產(chǎn)物，其為白色固體。經(jīng)檢測(cè)MS ESI(+)m/z 482，484(M+，Br圖形)。
步驟C6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(四氫吡喃-2-基甲基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-乙烯基氧基-乙氧基)-酰胺11s 將6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(四氫吡喃-2-基甲基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸11r(0.11g，0.23mmol)溶解在N，N-二甲基甲酰胺(2mL)中。添加HOBT(0.037g，0.27mmol)和三乙基胺(0.094mL，0.68mmol)。接著在室溫和氮?dú)夥障绿砑覱-(2-乙烯基氧基-乙基)-羥胺(0.028g，0.27mmol)和EDCI(0.056g，0.29mmol)，并攪拌反應(yīng)混合物，直至HPLC顯示反應(yīng)完全(2-天)。將反應(yīng)混合物傾倒在中分離漏斗，用乙酸乙酯和水稀釋，然后分層。乙酸乙酯層順序地用飽和NH4Cl水溶液(2x)、鹽水(1x)、飽和碳酸氫鈉水溶液(2x)、水(1x)、和鹽水(1x)洗滌，干燥(Na2SO4)，然后減壓濃縮。所得的固體通過(guò)FCC純制(用15∶1二氯甲烷∶甲醇洗脫)，得到0.039g(79％)純的所希望的產(chǎn)物，其為淺白色固體。經(jīng)檢測(cè)MS ESI(+)m/z 567，569(M+，Br圖形)。
步驟D6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(四氫吡喃-2-基甲基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羥基-乙氧基)-酰胺11p 將6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(四氫吡喃-2-基甲基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-乙烯基氧基-乙氧基)-酰胺11s(0.039g，0.068mmol)溶解在乙醇(2mL)中，然后添加2M HCl水溶液(200μL)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌30分鐘。反應(yīng)混合物用水稀釋，并用2M NaOH水溶液(～200μL)中和至pH 7，然后減壓濃縮。在分離漏斗中，殘留物在乙酸乙酯和鹽水之間分配，然后分層。乙酸乙酯層干燥(Na2SO4)，然后減壓濃縮，得到0.034g(91％)純的所希望的產(chǎn)物，其為淺白色固體。經(jīng)檢測(cè)MSESI(+)m/z 541，543(M+，Br圖形)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.29(s，1H)，7.75(s，1H)，7.49(d，1H)，7.18(dd，1H)，6.40(dd，1H)，4.40(dd，A ofABX圖形，1H)，4.28(dd，B of ABX圖形，1H)，3.92(m，X of ABX圖形，1H)，3.66(t，2H)，3.35(m，1H)，1.89(m，1H)，1.76(m，1H)，2.28(s，3H)，1.54(m，3H)，1.30(m，1H).19F NMR(376MHz，CD3OD)-134.87(s). 實(shí)施例28 按照類似于實(shí)施例27中描述的方法，使用合適的甲基酯和烷基化劑(步驟A)以及合適的羥胺(步驟C)制備以下化合物。

實(shí)施例29
6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(2-甲磺?；?乙基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺(11bb) 步驟A6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(2-甲磺?；?乙基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯11cc 在氮?dú)夥障聦?-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯8b(1.55g，3.89mmol)溶解在15ml DMF中。先后添加K2CO3(0.70g，5.06mmol)和甲基乙烯基砜(0.41ml，4.67mmol)。在室溫下攪拌16小時(shí)后，反應(yīng)混合物用稀釋乙酸乙酯和水。分層，有機(jī)層用水(3x)和鹽水洗滌。合并的含水洗滌液用乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)萃取液溶解在二氯甲烷中并用乙醚沉淀，重復(fù)數(shù)次，由此進(jìn)行純制，得到1.16g(59％)純的所希望的產(chǎn)物，其為黃色固體MS APCI(+)m/z 506，504(M+Br圖形)和400，398(M-甲基乙基砜Br圖形)。
步驟B6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(2-甲磺?；?乙基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺11bb 使6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(2-甲磺?；?乙基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯11cc進(jìn)行如上所述的方法，得到6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(2-甲磺?；?乙基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 561，559(M+Br圖形)和MS APCI(-)m/z 559，557(M-Br圖形)；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)

11.75(s，1H)，8.47(s，1H)，8.04(s，1H)，7.77(s，1H)，7.62(d，1H)，7.28(dd，1H)，6.40(dd，1H)，4.78(t，2H)，3.82(t，2H)，3.62(d，2H)，3.07(s，3H)，1.02(m，1H)，0.49(m，2H)，0.21(m，2H)；19F NMR(376MHz，DMSO-d6)-132.66(s)。
實(shí)施例30 使用合適的甲基酯和Michael受體以及如上所述的方法制備以下化合物。

實(shí)施例31
[6-(5-氨基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-4-氟-1H-苯并咪唑-5-基]-(4-溴-2-甲基-苯基)-胺(24a) 步驟A6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸酰肼20a 將6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯8a(0.051g，0.135mmol)懸浮在EtOH(5ml)中，然后添加水合肼(0.118g，2.023mmol)。反應(yīng)混合物在回流下加熱16小時(shí)。反應(yīng)混合物減壓濃縮并通過(guò)FCC進(jìn)行純制，其中用97∶3乙酸乙酯∶MeOH洗脫，得到0.041g(81％)純凈的希望產(chǎn)物經(jīng)檢測(cè)LC/MS ESI(+)m/z 378，380(M+Br圖形)。
步驟B[6-(5-氨基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-4-氟-1H-苯并咪唑-5-基]-(4-溴-2-甲基-苯基)-胺24a 將6-(4-溴-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸酰肼20a(0.041g，0.109mmol)懸浮在1，4-二噁烷(1.5ml)中，然后添加36μl 3M溴化氰在二氯甲烷中的溶液。接著添加NaHCO3(9mg，0.109mmol)在水(1.5ml)中的溶液。16小時(shí)后，反應(yīng)混合物用水和鹽水稀釋，然后用THF萃取。合并的有機(jī)萃取液進(jìn)行干燥(Na2SO4)，然后減壓濃縮。通過(guò)FCC進(jìn)行純制，其中用98∶2乙酸乙酯∶MeOH洗脫，得到24mg(55％)純的標(biāo)題化合物，其為黃色固體經(jīng)檢測(cè)LC/MS ESI(+)m/z 403，405(M+Br圖形)；1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)

12.97(s，1H)，8.42(s，1H)，7.94(s，1H)，7.74(s，1H)，7.36(s，2H)，7.33(d，1H)，7.15(d，1H)，6.40(bs，1H)，2.34(s，3H). 實(shí)施例32
[6-(5-氨基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-4-氟-1H-苯并咪唑-5-基]-(4-氯-2-甲基-苯基)-胺(24b) 如實(shí)施例31所述，由6-(4-氯-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯8e起始，制備[6-(5-氨基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-4-氟-1H-苯并咪唑-5-基]-(4-氯-2-甲基-苯基)-胺24b。經(jīng)檢測(cè)LC/MS ESI(+)m/z 359，361(M+Cl圖形)；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)

8.42(s，1H)，8.00(bs，1H)，7.78(bs，1H)7.48(s，2H)，7.22(s，1H)，7.04(d，1H)，6.48(bs，1H)，2.37(s，3H). 實(shí)施例33
[6-(5-氨基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-4-氟-1H-苯并咪唑-5-基]-(4-溴-2-氯-苯基)-胺(24c) 如實(shí)施例31所述，由6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯8b起始，制備[6-(5-氨基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-4-氟-1H-苯并咪唑-5-基]-(4-溴-2-氯-苯基)-胺24c。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 425，423(M+Br圖形)和MS APCI(-)m/z 423，421(M-Br圖形). 實(shí)施例34
6-(4-氯-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸酰肼(20b) 如實(shí)施例31之步驟A所述，由6-(4-氯-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯8e起始，制備6-(4-氯-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸酰肼20b。經(jīng)檢測(cè)LC/MS ESI(+)m/z 334，336(M+Cl圖形)；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)

13.09(bs，1H)，9.98(s，1H)，8.40(s，1H)，8.17(bs，1H)，7.64(bs，1H)，7.20(s，1H)，7.03(d，1H)，6.41(bs，1H)，4.49(s，2H)，2.23(s，3H). 實(shí)施例35
5-16-(4-氯-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-[1，3，4]噁二唑-2-醇(22a) 將6-(4-氯-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸酰肼20b(0.050g，0.150mmol)懸浮在PhMe(2ml)中，然后添加20％光氣在PhMe中的溶液(0.24ml，0.45mmol)。反應(yīng)混合物在回流和氮?dú)夥障聰嚢?小時(shí)，然后冷卻至室溫。添加THF和10％HCl的1∶1混合物(20ml)，由此淬滅反應(yīng)混合物。分層，而含水層用THF(3x)萃取。合并的有機(jī)層用鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)，然后減壓濃縮，得到54mg(99％)所希望的產(chǎn)物，其為黃色固體經(jīng)檢測(cè)LC/MS ESI(+)m/z 360，362(M+Cl圖形)；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.64(s，1H)，8.83(s，1H)，7.88(s，1H)，7.30(s，1H)，7.20(d，1H)，7.00(dd，1H)，6.38(dd，1H)，2.30(s，3H). 實(shí)施例36
(4-氯-2-甲基-苯基)-(4-氟-6-[1，3，4]噁二唑-2-基-1H-苯并咪唑-5-基)-胺(21a) 將6-(4-氯-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸酰肼20b(0.048g，0.144mmol)懸浮在3ml無(wú)水EtOH中，并先后添加HC(OEt)3(0.60ml，3.54mmol)和催化劑pTsOH·H2O。在氮?dú)夥障聦⒎磻?yīng)混合物加熱至回流。2小時(shí)后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，然后減壓濃縮。通過(guò)快速柱色譜純制(97∶3乙酸乙酯∶MeOH)，得到36mg(73％)所希望的產(chǎn)物，其為亮黃色固體。經(jīng)檢測(cè)LC/MS ESI(+)m/z 344，346(M+Cl圖形)；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)

13.10(bs，1H)，9.39(s，1H)，8.49(s，1H)，8.10(bs，1H)，7.78(bs，1H)，7.20(d，1H)，7.00(dd，1H)，6.41(bs，1H)，2.18(s，3H). 實(shí)施例37
5-[6-(4-氯-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-[1，3，4]噁二唑-2-硫醇(23a) 在氮?dú)夥障聦?-(4-氯-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸酰肼20b(0.050g，0.150mmol)懸浮在3ml無(wú)水EtOH中，然后冷卻至0℃。先后添加CS2(26mg，0.346mmol)和KOH粉末(8mg，0.150mmol)。在0℃下攪拌30分鐘后，將反應(yīng)混合物加熱至回流。3.5小時(shí)后，添加水，然后添加乙酸乙酯和1N HCl，由此淬滅反應(yīng)混合物。分層，而含水層用乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)萃取液進(jìn)行干燥(Na2SO4)，然后減壓濃縮，得到所希望的產(chǎn)物，其為黃色固體經(jīng)檢測(cè)LC/MS ESI(+)m/z 376，378(M+Cl圖形)；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)

8.51(s，1H)，7.92(s，1H)，7.19(s，1H)，7.12(s，1H)，6.98(d，1H)，6.29(d，1H)，2.28(s，3H). 實(shí)施例38
6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酰胺(11oo) 將6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸10c(0.029g，0.076mmol)溶解在N，N-二甲基甲酰胺(1.1mL)中。在室溫下向反應(yīng)混合物中順序地添加HOBT(0.016g，0.10mmol)、三乙基胺(0.028mL，0.20mmol)、甲基胺(0.059mL，0.12mmol，2M四氫呋喃溶液)、以及EDCI(0.019g，0.10mmol)。溶液在室溫和氮?dú)夥障聰嚢?6小時(shí)。反應(yīng)混合物將傾倒在中分離漏斗并用乙酸乙酯和水稀釋，然后分層。乙酸乙酯層順序地用飽和NH4Cl水溶液(2x)、鹽水(1x)、飽和碳酸氫鈉水溶液(2x)、水(1x)、和鹽水(1x)洗滌，干燥(MgSO4)，然后減壓濃縮。所得的固體通過(guò)FCC純制(用19∶1二氯甲烷∶甲醇洗脫)，得到0.013g(42％)純的所希望的產(chǎn)物。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 397，399(M+，Br圖形)；1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.76(br s，1H)，8.69(m，1H)，8.41(s，1H)，7.76(s，1H)，7.63(d，1H)，7.30(dd，1H)，6.50(dd，1H)，2.76和2.75(s和s，總共3H，酰胺rotamers).19F NMR(376MHz，DMSO-d6)-132.69(s). 實(shí)施例39 按照類似于實(shí)施例38中描述的方法，使用合適的羧酸和酰胺，制備以下化合物。如果包含兩個(gè)胺官能團(tuán)，則在偶聯(lián)反應(yīng)中使用合適的單Boc保護(hù)的胺，而B(niǎo)oc基團(tuán)在最終的步驟中在標(biāo)準(zhǔn)的TFA脫保護(hù)條件下除去。

實(shí)施例40
[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-甲醇(10e) 將6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯8b(1.06g，2.65mmol)懸浮在四氫呋喃(25mL)中，然后冷卻至-78℃。向反應(yīng)混合物中滴加氫化鋁鋰(8.03mL，8.03mmol，1M四氫呋喃溶液)。在-78℃下攪拌10分鐘后，將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂?℃，并變?yōu)榫鶆虻娜芤?。反?yīng)混合物在0℃下攪拌5分鐘，然后冷卻至-778℃。用MeOH淬滅反應(yīng)混合物，用Rochelle′s鹽稀釋，溫?zé)嶂潦覝夭嚢?小時(shí)。將反應(yīng)混合物傾倒在分離漏斗中，用乙酸乙酯稀釋，然后分層。含水相用乙酸乙酯萃取。合并的乙酸乙酯層干燥(Na2SO4)，然后減壓濃縮，得到0.98g(100％)純的所希望的產(chǎn)物，其為淡黃色固體。經(jīng)檢測(cè)MS ESI(+)m/z370，372(M+，Br圖形)。
實(shí)施例41
6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-甲醛(10f) 將[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-甲醇10e(0.96g，2.58mmol)溶解在四氫呋喃/丙酮(1∶1，15mL)中，然后添加MnO2(2.24g，25.8mmol)。反應(yīng)混合物在50℃和氮?dú)夥障聰嚢?0小時(shí)。通過(guò)硅膠過(guò)濾反應(yīng)混合物，并用二氯甲烷/甲醇(10∶1，1L)洗脫。濾液減壓濃縮至小的體積，通過(guò)Acrodisc注射過(guò)濾器進(jìn)行過(guò)濾，除去少量的由硅膠中通過(guò)的MnO2。濾液減壓濃縮，而殘留物通過(guò)快速柱色譜純制(用20∶1二氯甲烷∶甲醇洗脫)，得到0.81g(85％)純的所希望的產(chǎn)物，其為亮黃色固體。經(jīng)檢測(cè)MS ESI(+)m/z 368，370(M+，Br圖形)。
實(shí)施例42
1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-基]-2-羥基-乙烷酮(10g) 步驟A1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-基]-2-甲氧基甲氧基-乙醇10i 在-78℃下向三丁基-甲氧基甲氧基甲基-錫烷(864mg，2.37mmol，根據(jù)J.Org.Chem.1988，53，4131中描述的方法制備的)在THF(8mL)中的溶液內(nèi)添加n-BuLi(0.94mL，2.35mmol，2.5M己烷溶液)。攪拌3分鐘后，在-78℃下添加6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-甲醛10h(59mg，0.15mmol)在THF(2mL)中的溶液。在-78℃下攪拌40分鐘后，反應(yīng)溶液在-78℃下用飽和氯化銨水溶液淬滅，溫?zé)嶂潦覝?，并用EtOAc稀釋。有機(jī)層用鹽水洗滌，在MgSO4上干燥，過(guò)濾，濃縮，然后通過(guò)快速色譜純制(1.5％MeOH在CH2Cl2中)，得到所希望的產(chǎn)物(45mg，64％)經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 458，460(M+，Br圖形)。
步驟B1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-基]-2-甲氧基甲氧基-乙烷酮10j 在室溫下攪拌1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-基]-2-甲氧基甲氧基-乙醇10i(44mg，0.096mmol)和Dess-Martinperiodinane(49mg，0.12mmol)在CH2Cl2(1.5mL)中的混合物共1.5小時(shí)。反應(yīng)混合物用醚(3mL)稀釋。添加飽和的NaHCO3水溶液(1mL)，其中包含硫代硫酸鈉五水合物(74mg)。所得的混合物攪拌10分鐘，并用EtOAc稀釋。有機(jī)層用飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，在MgSO4上干燥，過(guò)濾，然后真空濃縮，得到的粗產(chǎn)物通過(guò)快速色譜純制(1.5％MeOH在CH2Cl2中)，得到所希望的產(chǎn)物(31mg，71％)經(jīng)檢測(cè)MSAPCI(+)m/z 456，458(M+，Br圖形)。
步驟C1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-基]-2-羥基-乙烷酮10g 在室溫下攪拌1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-基]-2-甲氧基甲氧基-乙烷酮10j(15mg，0.033mmol)、10％HCl水溶液(0.3mL)、甲醇(0.01mL)、和水(0.05mL)的混合物共3天。用飽和NaHCO3水溶液中和反應(yīng)混合物，用EtOAc稀釋。有機(jī)層用鹽水洗滌，在MgSO4上干燥，過(guò)濾，真空濃縮，然后通過(guò)快速色譜純制(1.5％MeOH在CH2Cl2中)，得到所希望的產(chǎn)物(7.3mg，54％)經(jīng)檢測(cè)MSAPCI(+)m/z 412，414(M+，Br圖形)；1H NMR(400MHz，丙酮-d6)δ8.64(s，1H)，8.34(s，1H)，8.16(s，1H)，7.58(d，1H)，7.31(dd，1H)，6.59(dd，1H)，4.94(s，2H)，4.06(s，3H)；19F NMR(376MHz，丙酮-d6)-132.45(s，1F). 實(shí)施例43
1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-2-羥基-乙烷酮(10k) 步驟A1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-2-甲氧基甲氧基-乙醇10l 根據(jù)實(shí)施例42之步驟A中描述的方法用三丁基-甲氧基甲氧基甲基-錫烷處理6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-甲醛10f，得到化合物10l。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 444，446(M+，Br圖形)。
步驟B1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-2-甲氧基甲氧基-乙烷酮10m 在-78℃下向草酰氯(0.11mL，0.22mmol)在CH2Cl2(1mL)中的溶液內(nèi)添加DMSO(0.016mL，0.22mmol)。攪拌3分鐘后，添加1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-2-甲氧基甲氧基-乙醇10l(25mg，0.056mmol)在二氯甲烷(1mL)中的溶液。所得的溶液在-78℃下攪拌30分鐘。添加TEA(0.1mL，0.71mmol)。反應(yīng)混合物緩慢溫?zé)嶂潦覝?，在室溫?cái)嚢?分鐘，然后用水和CH2Cl2稀釋。分離有機(jī)層，在MgSO4上干燥，過(guò)濾并濃縮，得到的粗產(chǎn)物無(wú)需進(jìn)一步純制即直接使用。
步驟C1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-2-羥基-乙烷酮10k 根據(jù)實(shí)施例42之步驟C中描述的方法，使1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-2-甲氧基甲氧基-乙烷酮10m脫保護(hù)，得到化合物10k。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 398，400(M+，Br圖形)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.38(s，1H)，8.04(s，1H)，7.52(d，1H)，7.22(dd，1H)，6.53(dd，1H)，4.90(m，2H)；19F NMR(376MHz，CD3OD)-133.96(s，1F). 實(shí)施例44
1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-2-乙氧基-乙烷酮(10n) 步驟A1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-2-乙氧基-乙醇10o 在-78℃下向鋰甲基乙基醚在THF(6mL)中的溶液(根據(jù)Tetrahedron 1996，52，1643中的方法由4，4’-二叔丁基聯(lián)苯(585mg，2.20mmol)、Li(18mg，2.59mmol)、和EtOCH2Cl(0.20mL，2.05mmol)制得的)內(nèi)添加6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-甲醛10f(29mg，0.080mmol)在THF(1mL)中的溶液。所得的溶液在-78℃下攪拌1小時(shí)，然后用飽和氯化銨水溶液淬滅，溫?zé)嶂潦覝兀⒂肊tOAc萃取。有機(jī)層用洗滌鹽水，在MgSO4上干燥，過(guò)濾，真空濃縮，然后通過(guò)快速色譜純制(100％CH2Cl2-3％-5％MeOH在CH2Cl2中)，得到所希望的產(chǎn)物(15mg，44％)經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 428，430(M+，Br圖形)。
步驟B1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-2-乙氧基-乙烷酮10n 根據(jù)實(shí)施例42之步驟B中描述的方法，由1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-2-乙氧基-乙醇10o制備標(biāo)題化合物，不同之處在于，反應(yīng)混合物不用包含硫代硫酸鈉五水合物的飽和碳酸氫鈉水溶液處理。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 426，428(M+，Br圖形)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.36(s，1H)，8.04(s，1H)，7.51(d，1H)，7.21(dd，1H)，6.51(dd，1H)，4.76(s，2H)，3.57(q，2H)，1.19(t，3H)；19F NMR(376MHz，CD3OD)-133.96(s). 實(shí)施例45
1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-2-甲氧基-乙烷酮(10p) 按照實(shí)施例44中描述的方法，由6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-甲醛10f和鋰甲基甲基醚制備1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-2-甲氧基-乙烷酮10p。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z412，414(M+，Br圖形)。
實(shí)施例46
2-芐氧基-1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-乙烷酮(10q) 步驟A2-芐氧基-1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-乙醇10r 在-78℃下向芐氧基甲基鋰在THF中的水溶液(2mL，根據(jù)J.Am.Chem.Soc.1978，100，1481中描述的方法，由n-Bu3SnCH2OBn(505mg，1.23mmol)和n-BuLi(0.49mL，1.22mmol，2.5M己烷溶液)制備的)內(nèi)添加6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-甲醛10f(51mg，0.14mmol)在THF(3mL)中的溶液。所得的溶液在-78℃下攪拌1小時(shí)。用飽和氯化銨水溶液淬滅反應(yīng)，并用EtOAc萃取。有機(jī)層在MgSO4上干燥，過(guò)濾，真空濃縮，然后通過(guò)快速色譜純制(100％CH2Cl2-3％MeOH在CH2Cl2中)，得到所希望的產(chǎn)物(46mg，68％)經(jīng)檢測(cè)MSAPCI(+)m/z 490，492(M+，Br圖形)。
步驟B2-芐氧基-1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-乙烷酮10q 根據(jù)實(shí)施例42之步驟B中描述的方法，由2-芐氧基-1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-乙醇10r制備標(biāo)題化合物，不同之處在于，反應(yīng)混合物不用包含硫代硫酸鈉五水合物的飽和碳酸氫鈉水溶液處理。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 488，490(M+，Br圖形)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.37(s，1H)，8.02(s，1H)，7.51(d，1H)，7.26(m，5H)，7.19(dd，1H)，6.46(dd，1H)，4.77(s，2H)，4.58(s，2H)；19F NMR(376MHz，CD3OD)-134.52(s). 實(shí)施例47
1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-2-甲磺?；?乙烷酮(10s) 步驟A1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-2-甲磺?；?乙醇10t 在-78℃下向甲基砜(65mg，0.68mmol)在THF(1.5mL)中的溶液內(nèi)添加n-BuLi溶液(0.27mL，0.68mmol，2.5M己烷溶液)。攪拌5分鐘后，添加HMPA(0.1mL)。另外攪拌10分鐘后，添加6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-甲醛10f(26mg，0.069mmol)在THF(1mL)中的溶液。所得的溶液在-78℃下攪拌1.5小時(shí)。用飽和氯化銨水溶液淬滅反應(yīng)，溫?zé)嶂潦覝?，并用EtOAc稀釋。有機(jī)層用水洗滌，在MgSO4上干燥，過(guò)濾，真空濃縮，然后通過(guò)快速色譜純制(3％MeOH在CH2Cl2中)，得到粗的希望產(chǎn)物(31mg，96％)，其未經(jīng)進(jìn)一步純制直接使用經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 462，464(M+，Br圖形)。
步驟B1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-2-甲磺?；?乙烷酮10s 根據(jù)實(shí)施例42之步驟B中描述的方法，由1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-2-甲磺?；?乙醇10t制備標(biāo)題化合物，不同之處在于，反應(yīng)混合物不用包含硫代硫酸鈉五水合物的飽和碳酸氫鈉水溶液處理。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 460，462(M+，Br圖形)；1H NMR(400MHz，丙酮-d6)δ8.44(s，1H)，8.33(s，1H)，7.59(s，1H)，7.32(d，1H)，6.68(dd，1H)，5.00(s，1H)，3.15(s，3H)；19F NMR(376MHz，丙酮-d6)-132.97(s). 實(shí)施例48
1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-乙烷-1，2-二醇(10u) 步驟A1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-2-(異丙氧基-二甲基-硅烷基)-乙醇10v 在-78℃下向由Mg和氯甲基二甲基異丙氧基硅烷制得的格氏試劑(Org.Synth.1992，69，96)[4.4mL，3.26mmol，0.74M溶液(基于90％純度)]在THF中的溶液內(nèi)添加6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-甲醛10f(200mg，0.54mmol)在THF(1mL)中的溶液。-78℃下攪拌1小時(shí)后，用飽和氯化銨水溶液淬滅反應(yīng)，并用EtOAc萃取。有機(jī)層在MgSO4上干燥，過(guò)濾，真空濃縮，得到粗的希望產(chǎn)物，其未經(jīng)純制即直接使用。
步驟B1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-乙烷-1，2-二醇10u 在室溫下向粗的1-[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-基]-2-(異丙氧基-二甲基-硅烷基)-乙醇10v在MeOH-THF(5mL-5mL)中的溶液內(nèi)添加KHCO3(54mg，0.54mmol)、KF(74mg，1.27mmol)、以及30％H2O2水溶液(0.20mL)。在室溫下攪拌3.5小時(shí)后，反應(yīng)混合物用水稀釋，并用EtOAc萃取。有機(jī)層在MgSO4上干燥，過(guò)濾，真空濃縮，然后通過(guò)快速色譜純制(8％-10％MeOH，在CH2Cl2中)，得到所希望的產(chǎn)物(74mg，34％)經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 400，402(M+，Br圖形)；1HNMR(400MHz，CD3OD)δ8.20(s，1H)，7.62(broad s，1H)，7.47(d，1H)，7.14(dd，1H)，6.30(d，1H)，4.96(t，1H)，3.64(m，2H)；19F NMR(376MHz，CD3OD)-136.87(s). 實(shí)施例49
[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-基]-吡啶-2-基-甲醇(10w) 在-78℃下向2-溴吡啶(0.10mL，1.04mmol)在THF(3mL)中的溶液內(nèi)添加n-BuLi(0.39mL，0.98mmol，2.5M己烷溶液)。在-78℃下攪拌10分鐘后，添加6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-甲醛10h(25mg，0.064mmol)在THF(1mL)中的溶液。所得的反應(yīng)混合物在-78℃下攪拌1.5小時(shí)，用飽和氯化銨水溶液淬滅，并用EtOAc萃取。有機(jī)層在MgSO4上干燥，過(guò)濾，真空濃縮，然后通過(guò)快速色譜純制(2.5％MeOH，在CH2Cl2中)，得到所希望的產(chǎn)物(18mg，62％)經(jīng)檢測(cè)MSAPCI(+)m/z 461，463(M+，Br圖形)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.31(d，1H)，8.16(s，1H)，7.65(m，3H)，7.38(d，1H)，7.10(m，1H)，7.00(dd，1H)，6.11(dd，1H)，6.05(s，1H)，3.94(s，3H)；19F NMR(376MHz，CD3OD)-135.79(s). 實(shí)施例50
(4-溴-2-氯-苯基)-(4-氟-6-噁唑-5-基-1H-苯并咪唑-5-基)-胺(10x) 步驟A[6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(2-甲磺?；?乙基)-3H-苯并咪唑-5-基]-甲醇10y 在氮?dú)夥障聦?-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(2-甲磺酰基-乙基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯11cc(0.300g，0.594mmol)懸浮在EtOH(6ml)和THF(4ml)的混合物中。添加NaBH4(0.112g，2.97mmol)。攪拌約4天后，添加AcOH直至反應(yīng)混合物達(dá)到pH為7，由此淬滅反應(yīng)混合物。反應(yīng)混合物減壓濃縮至干，而殘留物在乙酸乙酯和水之間分配。分層，而有機(jī)層用水(3x)、鹽水、和干燥(Na2SO4)洗滌。有機(jī)層減壓濃縮，直至形成白色沉淀物，其通過(guò)過(guò)濾收集，得到0.225g(79％)純凈的希望產(chǎn)物經(jīng)檢測(cè)LC/MS ESI(+)m/z 478，476(M+Br圖形)。
步驟B6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(2-甲磺?；?乙基)-3H-苯并咪唑-5-甲醛10z 在氮?dú)夥障聦6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(2-甲磺?；?乙基)-3H-苯并咪唑-5-基]-甲醇10y(0.050，0.105mmol)溶解在1∶1THF∶丙酮(2ml)中，然后添加MnO2(0.046g，0.524mmol)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌16小時(shí)，然后在55℃下加熱5小時(shí)。添加額外的MnO2(0.046g，0.524mmol)，并且反應(yīng)混合物在55℃下攪拌2小時(shí)。反應(yīng)混合物濃縮至干，而殘留物溶解在10∶1二氯甲烷∶MeOH中。溶液通過(guò)硅膠柱過(guò)濾，其中用10∶1二氯甲烷∶MeOH洗脫。所得的濾液減壓濃縮，得到41mg(82％)所希望的產(chǎn)物，其為亮黃色固體。
步驟C(4-溴-2-氯-苯基)-(4-氟-6-噁唑-5-基-1H-苯并咪唑-5-基)-胺10x 將6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(2-甲磺?；?乙基)-3H-苯并咪唑-5-甲醛10z(0.025g，0.053mmol)懸浮在MeOH(2ml)和K2CO3(0.015g，0.105mmol)中，然后添加甲苯磺?；谆惽杌?0.011g，0.058mmol)。在氮?dú)夥障聦⒎磻?yīng)混合物加熱至回流16小時(shí)。冷卻后，添加額外的甲苯磺?；谆惽杌?0.011g，0.058mmol)，并在氮?dú)夥障录訜岱磻?yīng)混合物至回流16小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，減壓濃縮，然后溶解在乙酸乙酯中。有機(jī)溶液用水和鹽水洗滌。合并的含水洗滌液用乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)萃取液進(jìn)行干燥(Na2SO4)，然后減壓濃縮。通過(guò)快速柱色譜純制，其中用20∶1二氯甲烷∶MeOH洗脫，得到4mg(18％)所希望的產(chǎn)物10x和1mg(4％)(4-溴-2-氯-苯基)-[4-氟-1-(2-甲磺?；?乙基)-6-噁唑-5-基-1H-苯并咪唑-5-基]-胺。
(4-溴-2-氯-苯基)-(4-氟-6-噁唑-5-基-1H-苯并咪唑-5-基)-胺10x.經(jīng)檢測(cè)LC/MS ESI(+)m/z 409，407(M+Br圖形)；1H NMR(400MHz，MeOH-d4)

8.33(s，1H)，8.24(s，1H)，7.94(bs，1H)，7.51(d，1H)，7.33(s，1H)，7.07(dd，1H)，6.14(dd，1H). (4-溴-2-氯-苯基)-[4-氟-1-(2-甲磺?；?乙基)-6-噁唑-5-基-1H-苯并咪唑-5-基]-胺。經(jīng)檢測(cè)LC/MS ESI(+)m/z 515，513(M+Br圖形)；1HNMR(400MHz，MeOH-d4)

8.39(s，1H)，8.28(s，1H)，8.03(s，1H)，7.52(d，1H)，7.37(s，1H)，7.07(m，1H)，6.14(dd，1H)，3.83(t，2H)，2.99(s，3H)，1.18(t，2H). 實(shí)施例51
(4-溴-2-氯-苯基)-[4-氟-6-(3H-咪唑-4-基)-1H-苯并咪唑-5-基]-胺(10aa) 步驟A(4-溴-2-氯-苯基)-{4-氟-1-(2-甲磺?；?乙基)-6-[4-(甲苯-4-磺?；?-4，5-二氫-噁唑-5-基]-1H-苯并咪唑-5-基}-胺10bb 在氮?dú)夥障聦?-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(2-甲磺?；?乙基)-3H-苯并咪唑-5-甲醛10z(0.050g，0.107mmol)懸浮在EtOH(0.5ml)中，并先后添加甲苯磺酰基甲基異氰化物(0.020g，0.105mmol)和催化量的NaCN(～1mg)。2小時(shí)后，添加2ml THF，以有助于溶解。在室溫下攪拌16小時(shí)后，添加第二個(gè)當(dāng)量的甲苯磺?；谆惽杌?0.020g，0.105mmol)。8小時(shí)后，反應(yīng)混合物減壓濃縮并用于下一步反應(yīng)中經(jīng)檢測(cè)LC/MS ESI(+)m/z 671，669(M+Br圖形)。
步驟B(4-溴-2-氯-苯基)-[4-氟-6-(3H-咪唑-4-基)-1H-苯并咪唑-5-基]-胺10aa 在密封的壓力管中(4-溴-2-氯-苯基)-{4-氟-1-(2-甲磺酰基-乙基)-6-[4-(甲苯-4-磺?；?-4，5-二氫-噁唑-5-基]-1H-苯并咪唑-5-基}-胺10bb(0.072g，0.107mmol)用2.4ml的2.0M NH3MeOH溶液處理。將反應(yīng)混合物加熱至90℃，同時(shí)進(jìn)行攪拌20小時(shí)，然后在室溫下繼續(xù)攪拌3天。將反應(yīng)混合物轉(zhuǎn)移至圓底燒瓶中，然后減壓濃縮。通過(guò)快速柱色譜純制兩次，其中用10∶1二氯甲烷∶MeOH洗脫，然后順序地用二氯甲烷和乙醚研磨，得到3mg(7％)所希望的產(chǎn)物經(jīng)檢測(cè)LC/MS ESI(+)m/z408，406(M+Br圖形)；1H NMR(400MHz，MeOH-d4)

8.23(s，1H)，7.87(s，1H)，7.74(s，1H)，7.46(m，1H)，7.32(d，1H)，7.05(m，1H)，6.20(dd，1H). 實(shí)施例52
6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氯-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羥基-乙氧基)-酰胺(10cc) 步驟A3-氯-2，4-二氟-5-硝基-苯甲酸2a 將3-氯-2，4-二氟-苯甲酸1a(3.00g，15.6mmol)添加至濃H2SO4(16mL)和發(fā)煙硝酸(0.85mL，20.3mmol)的攪拌溶液中。3小時(shí)后形成沉淀。將黃色漿液傾倒在冰水(100mL)上。含水混合物用乙醚(3x)萃取。有機(jī)萃取液干燥(Na2SO4)，然后減壓濃縮，得到3.50g(95％)純凈的希望產(chǎn)物，其為淡黃色固體。
步驟B4-氨基-3-氯-2-氟-5-硝基-苯甲酸3a 在0℃下將氫氧化銨溶液(6.88g，～30％in水，58.9mmol)添加至3-氯-2，4-二氟-5-硝基-苯甲酸2a(3.5g，14.7mmol)在水(16mL)中的溶液內(nèi)，同時(shí)進(jìn)行攪拌。氫氧化銨添加完全后，將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝亍?小時(shí)后，將反應(yīng)混合物冷卻至0℃，并小心地添加濃HCl，直至反應(yīng)混合物的pH接近0。過(guò)濾收集固體，并用水和乙醚洗滌。將固體溶解在MeOH和EtOAc中，轉(zhuǎn)移至圓底燒瓶中，然后減壓濃縮，得到2.96g的黃色固體。濾液在乙醚和水之間分配，而有機(jī)層用洗滌鹽水。合并的有機(jī)萃取液進(jìn)行干燥(Na2SO4)，然后減壓濃縮，得到0.65g的產(chǎn)物?？偣不厥盏?.61g(104％)純的標(biāo)題化合物，其沒(méi)有進(jìn)一步純制就繼續(xù)使用。
步驟C4-氨基-3-氯-2-氟-5-硝基-苯甲酸甲基酯4a 向4-氨基-3-氯-2-氟-5-硝基-苯甲酸3a(3.61g，15.4mmol)在THF(30mL)和MeOH(10mL)中的攪拌溶液內(nèi)添加TMS重氮甲烷(9.23mL，2.0M己烷溶液，18.5mmol)。反應(yīng)完全后，通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮反應(yīng)混合物，而乙酸保留在阱中。回收的油狀固體用乙醚研磨，得到1.51g的黃色固體。濾液濃縮并用乙醚研磨，得到另外0.69g的黃色固體?？偣不厥?.20g(57％)純的標(biāo)題化合物。
步驟D4-氨基-3-氯-5-硝基-2-苯基氨基-苯甲酸甲基酯5c 將4-氨基-3-氯-2-氟-5-硝基-苯甲酸甲基酯4a(2.20g，8.84mmol)懸浮在MeOH(9.4mL)中，然后添加苯胺(3.22mL，35.4mmol)。在氮?dú)夥障聦⒎磻?yīng)混合物加熱至回流，同時(shí)進(jìn)行攪拌。19小時(shí)后，反應(yīng)完全。將蒸餾水(3.22mL)添加至反應(yīng)混合物中并繼續(xù)回流1小時(shí)。在冰浴中將反應(yīng)混合物冷卻至0℃共20分鐘。反應(yīng)混合物過(guò)濾，并用3∶10蒸餾水/MeOH(總共65mL)洗滌，然后用MeOH洗滌。將固體溶解在CH2Cl2中，然后減壓濃縮，得到2.40g(84％)純的標(biāo)題化合物。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(-)m/z 320.3(M-1)。
步驟E4，5-二氨基-3-氯-2-苯基氨基-苯甲酸甲基酯6b 將4-氨基-3-氯-5-硝基-2-苯基氨基-苯甲酸甲基酯5c(0.50g，1.55mmol)溶解在2∶1EtOH/MeOH(15.5mL)中。飽和的NH4Cl水溶液(15mL)、Zn粉(1.02g，15.6mmol)、和THF(10mL)。攪拌20小時(shí)后，反應(yīng)混合物用CH2Cl2/THF和水稀釋。有機(jī)層用水(3x)洗滌。合并的有機(jī)萃取液進(jìn)行干燥(Na2SO4)，然后減壓濃縮.該固體用醚研磨，得到0.32g(70％)純凈的希望產(chǎn)物。
步驟F7-氯-6-苯基氨基-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯7c 使4，5-二氨基-3-氯-2-苯基氨基-苯甲酸甲基酯6b(0.32g，1.09mmol)和甲脒乙酸鹽(72mg，1.64mmol)在EtOH(36mL)中加熱至80℃，同時(shí)進(jìn)行攪拌。44小時(shí)后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫并用EtOAc稀釋，然后用水(3x)、飽和NaHCO3、以及鹽水洗滌。合并的有機(jī)萃取液進(jìn)行干燥(Na2SO4)，然后減壓濃縮，得到0.33g(99％)純凈的希望產(chǎn)物，其為固體。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 302.3(M+1)。
步驟G6-(4-溴-苯基氨基)-7-氯-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯8g 將7-氯-6-苯基氨基-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯7c(0.327g，1.08mmol)溶解在DMF(16mL)中，然后添加NBS(0.193g，1.08mmol)。1小時(shí)后，添加飽和NaHSO3水溶液，由此淬滅反應(yīng)混合物。使反應(yīng)混合物在EtOAc/THF和水之間分配。有機(jī)層用水和鹽水洗滌。合并的有機(jī)萃取液進(jìn)行干燥(Na2SO4)，然后減壓濃縮.回收的固體用醚研磨，得到0.225g(54％)純的所希望的產(chǎn)物。經(jīng)檢測(cè)MS ESI(+)m/z 382，384(M+，Br圖形)。
步驟H6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氯-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯10dd 將6-(4-溴-苯基氨基)-7-氯-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯8g(0.225g，0.591mmol)溶解在DMF(2mL)中，然后添加NCS(79mg，0.591mmol)。NCS溶解后，添加濃HCl(0.005mL，0.059mmol)。2小時(shí)后，將碳酸氫鈉、水和NaHSO3添加至反應(yīng)混合物中。過(guò)濾固體，并用水和醚洗滌，得到0.141g(57％)純凈的希望產(chǎn)物，其為棕黃色固體。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(-)m/z 414，416(M-，Br圖形)。
步驟I6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氯-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯10ee 將6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氯-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯10dd(0.141g，0.34mmol)、碳酸鉀(0.141g，1.02mmol)、和碘甲烷(0.063mL，1.02mmol)溶解在二甲基甲酰胺(3mL)中。20小時(shí)后，反應(yīng)混合物用EtOAc稀釋，然后用水(3x)、碳酸鉀、和鹽水洗滌。有機(jī)層干燥(Na2SO4)并濃縮，形成棕色油。通過(guò)快速色譜(EtOAc)分離N3和N1烷基化區(qū)域異構(gòu)體?；厥盏降腘3烷基化區(qū)域異構(gòu)體為20.4mg(28％)。經(jīng)檢測(cè)MS ESI(+)m/z 428，430(M+，Br圖形)。
步驟J6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氯-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸10ff 將6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氯-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯10ee(21mg，0.048mmol)溶解在2∶1THF/水(1.2mL)中，然后添加NaOH(0.190mL，1.0M水溶液，0.190mmol)。攪拌4小時(shí)后，反應(yīng)物用水稀釋，然后通過(guò)添加1.0M HCl而酸化至pH 2。混合物用3∶1EtOAc/THF(3x)萃取，干燥(Na2SO4)并濃縮，得到定量產(chǎn)量的希望產(chǎn)物，其為白色固體。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 414，416(M+，Br圖形)。
步驟K6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氯-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-乙烯基氧基-乙氧基)-酰胺10gg 在室溫和氮?dú)夥障聦?-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氯-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸10ff(32mg，0.077mmol)、O-(2-乙烯基氧基-乙基)-羥胺(0.010mL，0.092mmol)、HOBt(13mg，0.093mmol)、三乙基胺(0.011mL，0.077mmol)、和EDCI(19mg，0.10mmol)溶解在二甲基甲酰胺(1.0mL)中，然后攪拌24小時(shí)。反應(yīng)混合物用EtOAc稀釋，用水(3x)、10％碳酸鉀(2x)、飽和氯化銨、鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)，然后減壓濃縮，得到39mg的85％純物質(zhì)。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(-)m/z 497，501(M-，Br圖形)。
步驟L6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氯-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羥基-乙氧基)-酰胺10cc 將鹽酸(0.78mL，1.0M水溶液，0.78mmol)添加至6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氯-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸10gg(2-乙烯基氧基-乙氧基)-酰胺(39mg，0.078mmol)在MeOH(1mL)中的懸浮液內(nèi)。1小時(shí)后，將反應(yīng)混合物中和至pH 7，然后減壓濃縮。將固體溶解在EtOAc中，用鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)，然后減壓濃縮。進(jìn)行快速色譜純制(20∶1CH2Cl2/MeOH)，得到9mg(23％)的純產(chǎn)物經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z473，475(M+，Br圖形)；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.30(s，1H)，8.08(s，1H)，7.57(d，1H)，7.15(dd，1H)，6.21(d，1H)，3.97(s，3H)3.86(m，2H)，3.57(m，2H). 實(shí)施例53
6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羥基-乙氧基)-酰胺(10hh) 類似于實(shí)施例52的方法制備以上化合物，但消除步驟I。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(-)m/z 457，461(M-，Br圖形)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.40(s，1H)，7.85(s，1H)，7.50(d，1H)，7.14(dd，1H)，6.21(d，1H)，3.84(m，2H)，3.61(m，2H). 實(shí)施例54
6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羥基-乙氧基)-酰胺(10ii) 步驟A4，5-二氨基-3-氟-2-苯基氨基-苯甲酸甲基酯6c 將4-氨基-3-氟-5-硝基-2-苯基氨基-苯甲酸甲基酯26a(11.44g，37.48mmol)懸浮在乙醇(400mL)中，然后添加甲酸銨(11.80g，187.0mmol)和20％Pd(OH)2/C(10.00g，18.79mmol)。反應(yīng)混合物在95℃和氮?dú)夥障聰嚢?0分鐘。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫并通過(guò)celite過(guò)濾，用乙醇洗滌。濾液減壓濃縮，得到9.63g(93％)純的所希望的產(chǎn)物，其為紫色/紅色固體。經(jīng)檢測(cè)MS ESI(+)m/z 276(M+1)。
步驟B7-氟-2-甲基-6-苯基氨基-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯31a 將4，5-二氨基-3-氟-2-苯基氨基-苯甲酸甲基酯6c(0.20g，0.73mmol)懸浮在乙醇(3mL)中，并添加5M HCl水溶液(1mL.，5.00mmol)。反應(yīng)混合物在氮?dú)夥障禄亓?，然后添?，4-戊烷二酮(0.150mL，1.45mmol)。反應(yīng)混合物在回流下攪拌60分鐘。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，然后用飽和碳酸氫鈉水溶液處理，直至反應(yīng)混合物的pH為7，并接著減壓濃縮至干。殘留物用乙酸乙酯和水稀釋，傾倒在分離漏斗中，然后分層。乙酸乙酯層用鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)，然后減壓濃縮。紅色的固體殘留物用乙醚研磨，得到亮棕色的固體和紅色濾液。收集固體并用乙醚洗滌，得到0.20g(91％)純的所希望的產(chǎn)物，其為亮棕色固體。經(jīng)檢測(cè)MS ESI(+)m/z 300(M+1)。
步驟C6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羥基-乙氧基)-酰胺10ii 按照以上描述的溴化、氯化、水解、偶聯(lián)、和水解方法，轉(zhuǎn)化7-氟-2-甲基-6-苯基氨基-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯31a，得到純的所希望的產(chǎn)物，其為淺白色固體。經(jīng)檢測(cè)MS ESI(+)m/z 457，459(M+，Br圖形)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.58(s，1H)，7.49(d，1H)，7.18(dd，1H)，6.41(m，1H)，3.91(t，2H)，3.65(t，2H)，2.61(s，3H)；19F NMR(376MHz，CD3OD)-135.84(s). 實(shí)施例55
6-(4-氰基-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺(11yy) 步驟A7-氟-6-(4-碘-2-甲基-苯基氨基)-1H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯10jj 在氮?dú)夥障聦?-氟-6-o-甲苯基氨基-1H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯7a(1.47g，4.92mmol)懸浮在1∶1THF∶MeOH混合物(44ml)中，然后冷卻至-78℃。先后添加NIS(1.66g，7.39mmol)在THF(2ml)中的溶液和TsOH·H2O(1.87g，9.84mmol)的MeOH(2ml)溶液。30分鐘，反應(yīng)混合物溫?zé)嶂?℃并添加1ml二氯甲烷。在16小時(shí)的時(shí)間內(nèi)緩慢使反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝?，同時(shí)進(jìn)行攪拌。添加10％Na2S2O4溶液，由此淬滅反應(yīng)混合物。反應(yīng)混合物用水和乙酸乙酯稀釋，然后分層。含水層用乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)萃取液進(jìn)行干燥(Na2SO4)，然后減壓濃縮。回收的固體用MeOH研磨，得到1.45g(69％)純的所希望的產(chǎn)物經(jīng)檢測(cè)MS ESI(+)m/z 426(M+1)；經(jīng)檢測(cè)MS ESI(-)m/z 424(M-1)。
步驟B7-氟-6-(4-碘-2-甲基-苯基氨基)-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯10kk 在氮?dú)夥障聦?-氟-6-(4-碘-2-甲基-苯基氨基)-1H-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯10jj(0.200g，0.470mmol)懸浮在DMF(2ml)中，然后在冰水浴中冷卻至0℃。添加NaH(60％油分散液，0.018g，0.470mmol)。10分鐘后，反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝夭嚢?0分鐘。冷卻至0℃后，添加SEMCl(0.087ml，0.494mmol)，然后使反應(yīng)物溫?zé)嶂潦覝?，同時(shí)進(jìn)行攪拌過(guò)夜。添加水和鹽水，由此淬滅反應(yīng)混合物。反應(yīng)混合物用乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)萃取液用水和鹽水洗滌，并干燥(MgSO4)，然后減壓濃縮。通過(guò)快速柱色譜純制，其中用1∶1己烷∶乙酸乙酯洗脫，得到0.182g(70％)所希望的白色泡沫狀產(chǎn)物，其是N1和N3異構(gòu)體的1∶1混合物。
步驟C6-(4-氰基-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯10ll 在室溫和氮?dú)夥障孪?-氟-6-(4-碘-2-甲基-苯基氨基)-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯10jj(0.060g，0.108mmol)的N1∶N3異構(gòu)體1∶1混合物在1ml DMF中的攪拌溶液內(nèi)添加dppf(2mg，0.004mmol)，然后添加Pd2dba3(2mg，0.002mmol)和Zn(CN)2(8mg，0.065mmol)(Tetrahedron Lett.1999，40，8193-8195)。將反應(yīng)混合物加熱至120℃共45分鐘。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，然后通過(guò)添加5ml的飽和NH4Cl溶液∶濃NH4OH溶液∶水的4∶1∶5混合物進(jìn)行淬滅。含水層用萃取乙酸乙酯。合并的有機(jī)萃取液用水(3x)、鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，然后減壓濃縮。通過(guò)快速柱色譜純制，其中用1∶1己烷∶乙酸乙酯洗脫，得到38mg(77％)所希望的產(chǎn)物，其是N1和N3異構(gòu)體的1∶1混合物經(jīng)檢測(cè)APCI MS(+)m/z 455(M+1)。
步驟D6-(4-氰基-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-苯并咪唑-5-羧酸10mm 如前所述用氫氧化鈉水溶液使6-(4-氰基-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-苯并咪唑-5-羧酸甲基酯10ll(31mg，0.068mmol)的N 1∶N3異構(gòu)體的1∶1混合物水解，得到26mg(87％)所希望的產(chǎn)物。
步驟E6-(4-氰基-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺11zz 如前所述，使6-(4-氰基-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-苯并咪唑-5-羧酸10mm(26mg，0.059mmol)的N1∶N3異構(gòu)體的1∶1混合物與EDCI和環(huán)丙基甲基羥胺鹽酸鹽偶聯(lián)，得到28mg(93％)所希望的產(chǎn)物經(jīng)檢測(cè)APCI MS(+)m/z 510(M+1)。
步驟F6-(4-氰基-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺11yy 向6-(4-氰基-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺11zz(28mg，0.055mmol)的N1∶N3異構(gòu)體的1∶1混合物在0.5ml EtOH中的漿液內(nèi)添加0.5ml 10％HCl。將反應(yīng)混合物加熱至50℃，同時(shí)進(jìn)行攪拌過(guò)夜(Whitten等人，JOC 1986，51，1891-1894)。添加另外的0.5ml 10％HCl，并在70℃下攪拌反應(yīng)混合物過(guò)夜。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，然后用1.5ml 1N NaOH中和至pH～8。反應(yīng)混合物用萃取乙酸乙酯，干燥(MgSO4)，然后減壓濃縮，得到14mg(60％)90％純的產(chǎn)物，其是rotatomer的混合物經(jīng)檢測(cè)MS APCI(+)m/z 380(M+1)；經(jīng)檢測(cè)MS APCI(-)m/z 378(M-1)；1HNMR(400MHz，MeOH-d4)δ8.41(bs，1H)，7.75(m，1H)，7.50(s，1H)，7.38(d，1H)，6.51(m，1H)，3.72(d，0.5H)，3.65(d，1.5H)，2.41(s，3H)，0.98(1H，m)，0.58(d，1.5H)，0.40(d，0.5H)，0.25(d，1.5H)，0.19(d，0.5H). 實(shí)施例56
6-(4-乙炔基-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺11aaa 步驟A.7-氟-6-(2-甲基-4-三甲基硅烷基乙炔基-苯基氨基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺11bbb 將7-氟-6-(4-碘-2-甲基-苯基氨基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺11ccc(0.025g，0.052mmol)溶解在1∶1乙腈/三乙基胺(0.50mL)中。在60℃和氮?dú)夥障逻B續(xù)地添加乙炔基-三甲基硅烷(0.013mL，0.092mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(0.004g，0.006mmol)、和CuI(0.002g，0.011mmol)，并攪拌反應(yīng)混合物1小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，然后減壓濃縮。殘留物通過(guò)FCC純制(用20∶1二氯甲烷∶甲醇洗脫)，得到0.020g(87％)所希望的產(chǎn)物。
步驟B6-(4-乙炔基-2-甲基-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺11aaa 將7-氟-6-(2-甲基-4-三甲基硅烷基乙炔基-苯基氨基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸環(huán)丙基甲氧基-酰胺11bbb(0.020g，0.044mmol)溶解在四氫呋喃(0.50mL)中，然后使反應(yīng)溶液冷卻至0℃。添加TBAF(50uL，0.050mmol，1M四氫呋喃溶液)。將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝?，并添加另外的TBAF(25uL，0.025mmol，1M四氫呋喃溶液)。反應(yīng)混合物在50℃和氮?dú)夥障聰嚢?小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，添加幾滴H2O，然后減壓濃縮。殘留物通過(guò)FCC純制(用洗脫20∶1二氯甲烷∶甲醇)，得到0.011g(65％)純的所希望的產(chǎn)物。經(jīng)檢測(cè)MS APCI(-)m/z 377(M-1)；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ10.56(broad s，1H)，8.12(s，1H)，7.99(s，1H)，7.28(s，1H)，7.11(d，1H)，6.42(broad，1H)，3.70(br s，2H)，2.96(d，1H)，2.37(s，3H)，0.85(m，1H)，0.50(m，2H)，0.22(m，2H). 現(xiàn)已完全、清楚、簡(jiǎn)明和準(zhǔn)確地描述了本發(fā)明以及制備和使用方式和方法，以是本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠?qū)嵤┍景l(fā)明。應(yīng)理解的是，本發(fā)明以上部分描述了優(yōu)選實(shí)施方案，而且在不偏離如權(quán)利要求書(shū)限定的本發(fā)明的精神和范圍的情況下還可進(jìn)行許多改進(jìn)。為具體地指出以及明確地要求保護(hù)，以下權(quán)利要求書(shū)包括該說(shuō)明書(shū)。
權(quán)利要求
1、苯并咪唑化合物，其選自具有下式的6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2，3-二羥基-丙氧基)-酰胺及其藥物學(xué)上可接受的鹽
2、苯并咪唑化合物，其選自具有下式的6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(四氫吡喃-2-基甲基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羥基-乙氧基)-酰胺及其藥物學(xué)上可接受的鹽
3、苯并咪唑化合物，其選自具有下式的6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羥基-1，1-二甲基-乙氧基)酰胺及其藥物學(xué)上可接受的鹽
4、苯并咪唑化合物，其選自具有下式的6-(4-溴-2-氯-苯基氨基)-7-氟-3-(四氫呋喃-2-基甲基)-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羥基-乙氧基)-酰胺及其藥物學(xué)上可接受的鹽
5、苯并咪唑化合物，其選自具有下式的6-(4-溴-2-氟-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羥基-乙氧基)-酰胺及其藥物學(xué)上可接受的鹽
6、苯并咪唑化合物，其選自具有下式的6-(2，4-二氯-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羥基-乙氧基)酰胺及其藥物學(xué)上可接受的鹽
全文摘要
本發(fā)明涉及式I的化合物及其藥物學(xué)上可接受的鹽和前藥，其中W、R1、R2、R7、R8、R9和R10如說(shuō)明書(shū)中所定義。此等化合物是MEK抑制劑，并且可用于治療哺乳動(dòng)物中過(guò)度增殖性疾病，如癌癥和炎癥。本發(fā)明還公開(kāi)了使用所述化合物治療哺乳動(dòng)物中過(guò)度增殖性疾病的方法以及包含所述化合物的藥物組合物。
文檔編號(hào)C07D403/06GK101633645SQ20091014929
公開(kāi)日2010年1月27日 申請(qǐng)日期2003年3月13日 優(yōu)先權(quán)日2002年3月13日
發(fā)明者伊萊·M.·華萊士, 約瑟夫·P.·利斯西凱托斯, 布賴恩·T.·赫爾利, 阿莉森·L.·馬洛 申請(qǐng)人:陣列生物制藥公司