一種基于馬蹄渣的蟬花液體菌種培養(yǎng)基以及蟬花液體菌種制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種基于馬蹄渣的蟬花液體菌種培養(yǎng)基，包括以下重量份組分：馬蹄渣56?57、多孔膨化淀粉67?68、無菌馬血蛋白粉62?63、麥芽糖6?7、葡萄糖7?8、葡萄糖酸鋅2?3、氨基酸螯合鈣2.2?2.3、納米級電氣石粉3.6?3.8、細(xì)菌納米纖維素3.8?4等。本發(fā)明采用馬蹄渣、多孔膨化淀粉、無菌馬血蛋白粉等主料制備蟬花液體菌種，培養(yǎng)基的營養(yǎng)均勻，來源廣泛，為蟬花液體菌種的經(jīng)濟(jì)制備奠定了基礎(chǔ)；同時，在培養(yǎng)基中加入細(xì)菌納米纖維素，改善了培養(yǎng)基的均勻性、穩(wěn)定性以及空間結(jié)構(gòu)特定，為蟬花液體菌種的制備提供良好營養(yǎng)的同時，也提供了良好的環(huán)境，培養(yǎng)的蟬花液體菌種的菌絲球生長良好，分布均勻，活性強(qiáng)。
【專利說明】 一種基于馬蹄渣的蟬花液體菌種培養(yǎng)基以及蟬花液體菌種制
備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及液體菌種技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種基于馬蹄渣的蟬花液體菌種培養(yǎng)基以及蟬花液體菌種制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]蟬花生產(chǎn)過程中，液體菌種具有固體菌種所不可比擬的優(yōu)勢，液體菌種具有生產(chǎn)周期短，菌齡短而一致，純度高、活力強(qiáng)，接種簡便快捷，易實行工廠化、規(guī)?；?、標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)等優(yōu)點(diǎn)?，F(xiàn)在，越來越多的人都在研究和使用液體菌種，而液體菌種的推廣和使用也是實現(xiàn)食用菌工廠化、規(guī)?；?biāo)準(zhǔn)化的必然趨勢。但是液體菌種也存在著自身的缺陷和不足:1、液體菌種萌發(fā)點(diǎn)多生長速度快，但是穿透力不強(qiáng)，培養(yǎng)料過粗菌絲不易吃透培養(yǎng)料，菌絲將沿著培養(yǎng)料表面快速生長，培養(yǎng)料內(nèi)部菌絲量很少，嚴(yán)重影響了菌種產(chǎn)量和質(zhì)量的問題;2、常規(guī)的液體菌種雖然解決了固體菌種存在的一些問題，能明顯縮短栽培周期、增強(qiáng)菌種活力和抗逆性、降低菌種污染率、使得菌種質(zhì)量整齊度提高，但仍存在例如發(fā)酵得到的液體菌種中菌球的密度、大小、均勻度等物理特性不是很理想等不足，如果用攪拌剪切的方法將菌球打碎，得到的菌種均勻度會更理想，但是，高速攪拌粉碎和打漿的剪切力對菌種傷害極大，對菌種整體的質(zhì)量影響較為嚴(yán)重。開發(fā)分布均勻且具有更小粒徑菌絲球的高質(zhì)量的液體菌種具有重要意義。公開號CN105309194A《食用菌微粒液體菌種生產(chǎn)新技術(shù)》提供了一種菌絲球粒徑在0.5mm的食用菌微粒液體菌種，采用的增加食用菌液體菌種培養(yǎng)液通氣量，使通氣量在1: 0.6—0.9V/V.min為適宜，同時在通氣發(fā)酵罐內(nèi)裝置攪拌器使培養(yǎng)液渦流運(yùn)動延長氣泡的運(yùn)動路線的技術(shù)操作方法，該生產(chǎn)微粒液體菌種的方法是從生產(chǎn)工藝上進(jìn)行改進(jìn)，并沒有液體菌種培養(yǎng)基方面進(jìn)行改進(jìn)，實施起來技術(shù)難度要求高;公開號CN105130516A《分子級生物培養(yǎng)基制作方法》提到了分子級生物培養(yǎng)基營養(yǎng)成分可以快速全面的被吸收，促進(jìn)液體菌種的生長，但是并沒有提到分子級生物培養(yǎng)基對液體菌種菌絲球直徑大小的影響。發(fā)展一種基于液體菌種培養(yǎng)基原材料成分改進(jìn)液體菌種菌絲球直徑改善食用菌菌種產(chǎn)量和質(zhì)量的技術(shù)，具有重要的意義。
[0003]細(xì)菌納米纖維素是自然界的豐富的可再生產(chǎn)物之一，細(xì)菌納米纖維素是纖維素的物理最小結(jié)構(gòu)單元，是指直徑1-1OOnm之間的纖維，細(xì)菌納米纖維素質(zhì)輕，生物相容性好，可降解、可再生，反應(yīng)活性高，且具有楊氏模量高，聚合度高，潔凈度高，強(qiáng)度高，比表面積大等優(yōu)勢。將細(xì)菌納米纖維素作作為食用菌液體菌種培養(yǎng)基原材料，對食用菌液體菌種的菌絲球分布以及直徑具有一定的影響，進(jìn)而起到改善食用菌菌種質(zhì)量的作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明目的就是為了彌補(bǔ)已有技術(shù)的缺陷，提供一種基于馬蹄渣的蟬花液體菌種培養(yǎng)基以及蟬花液體菌種制備方法。
[0005]本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的: 一種基于馬蹄渣的蟬花液體菌種培養(yǎng)基，包括以下重量份組分:馬蹄渣56-57、多孔膨化淀粉67-68、無菌馬血蛋白粉62-63、麥芽糖6-7、葡萄糖7_8、葡萄糖酸鋅2_3、氨基酸螯合I丐2.2-2.3、γ -輕基精氨酸1.1-1.2、酪蛋白胨2.1-2.2、食用氫化茶花油0.9-1、石霄1-1.2、過磷酸鈣1.2-1.3、ΚΗ2Ρ040.8-0.9、MgS040.5-0.6、納米級電氣石粉3.6-3.8、細(xì)菌納米纖維素3.8-4、適量的水。
[0006]—種上述的培養(yǎng)基制備蟬花液體菌種的方法，包括以下步驟:
(1)、將一半納米級電氣石粉和水按照0.lg/L混合，通電激發(fā)制備無菌水備用;將石膏、過磷酸鈣、KH2P04、MgS04的總量和無菌水按I g/L混合在30 °C攪拌溶解得溶液一;將麥芽糖、葡萄糖、葡萄糖酸鋅、氨基酸螯合鈣、γ -羥基精氨酸、酪蛋白胨、食用氫化茶花油的總量和無菌水按4g/L混合攪拌溶解得溶液二;將馬蹄渣放入超微粉碎機(jī)中粉碎處理30min，放入鍋中加入總重量4倍的水小火文煮lh，之后過濾，得濾液和濾渣，將濾液、多孔膨化淀粉、無菌馬血蛋白粉的總量和無菌水按100g/L混合攪拌，并在進(jìn)行98 °C進(jìn)行巴氏滅菌滅酶1min，得溶液三，將濾渣采用膨化機(jī)處理，得膨化馬蹄渣微粉備用;將另一半納米電氣石粉和細(xì)菌納米纖維素以及總重量3-4倍的水混合攪拌均勻并采用高溫蒸汽滅菌，得溶液四備用；
(2 )、將溶液三保持20 0C、溶液二保持25 0C、溶液一保持30 V，先將溶液一加入到溶液二中混合攪拌均勻得復(fù)合液，在將該復(fù)合液加入到溶液三中混合攪拌均勻得營養(yǎng)液，并調(diào)整pH，此后對該營養(yǎng)液進(jìn)行通電激發(fā)處理30min得液體培養(yǎng)基備用；
(3)、將蟬花母種在無菌環(huán)境中先接種到一半的液體培養(yǎng)基上進(jìn)行液體發(fā)酵，發(fā)酵條件為PH5.3-5.5、接種量11%、溫度21-22°C、搖床轉(zhuǎn)速100r/min、培養(yǎng)24-25h，得蟬花液體菌種
，
(4)、將剩余一半的液體培養(yǎng)基以及溶液四無菌混合均勻，之后加入膨化馬蹄渣微粉，并將其總量與無菌水350g/L混合，高壓均質(zhì)之后，通電激化配合高溫再次滅菌，并放置到無菌培養(yǎng)瓶中，得復(fù)合培養(yǎng)基，將步驟(3)得到的蟬花液體菌種一按25%的接種量在無菌環(huán)境中接種到該培養(yǎng)瓶中，溫度19-20°C，培養(yǎng)30-32h即得。
[0007]本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是:
本發(fā)明采用馬蹄渣、多孔膨化淀粉、無菌馬血蛋白粉以及麥芽糖、葡萄糖等主料配合營養(yǎng)添加物葡萄糖酸鋅、氨基酸螯合鈣、γ -羥基精氨酸以及微量物質(zhì)鈣鉀磷鎂制備蟬花液體菌種，培養(yǎng)基的營養(yǎng)均勻，來源廣泛，為蟬花液體菌種的經(jīng)濟(jì)制備奠定了基礎(chǔ)；同時，在培養(yǎng)基中加入納米級電氣石粉以及細(xì)菌納米纖維素兩種原料，改善了培養(yǎng)基的均勻性、穩(wěn)定性以及空間結(jié)構(gòu)特定，為蟬花液體菌種的制備提供良好營養(yǎng)的同時，也提供了良好的環(huán)境，培養(yǎng)的蟬花液體菌種的菌絲球生長良好，分布均勻，活性強(qiáng)。
【具體實施方式】
[0008]一種基于馬蹄渣的蟬花液體菌種培養(yǎng)基，包括以下重量份組分:馬蹄渣56、多孔膨化淀粉67、無菌馬血蛋白粉62、麥芽糖6、葡萄糖7、葡萄糖酸鋅2、氨基酸螯合鈣2.2、γ羥基精氨酸1.1、酪蛋白胨2.1、食用氫化茶花油0.9、石膏1、過磷酸鈣1.2、KH2P040.8、MgS040.5、納米級電氣石粉3.6、細(xì)菌納米纖維素3.8、適量的水。
[0009]—種上述的培養(yǎng)基制備蟬花液體菌種的方法，包括以下步驟:
(1)、將一半納米級電氣石粉和水按照0.lg/L混合，通電激發(fā)制備無菌水備用;將石膏、過磷酸鈣、KH2P04、MgS04的總量和無菌水按I g/L混合在30 V攪拌溶解得溶液一;將麥芽糖、葡萄糖、葡萄糖酸鋅、氨基酸螯合鈣、T羥基精氨酸、酪蛋白胨、食用氫化茶花油的總量和無菌水按4g/L混合攪拌溶解得溶液二;將馬蹄渣放入超微粉碎機(jī)中粉碎處理30min，放入鍋中加入總重量4倍的水小火文煮lh，之后過濾，得濾液和濾渣，將濾液、多孔膨化淀粉、無菌馬血蛋白粉的總量和無菌水按100g/L混合攪拌，并在進(jìn)行98°C進(jìn)行巴氏滅菌滅酶lOmin，得溶液三，將濾渣采用膨化機(jī)處理，得膨化馬蹄渣微粉備用;將另一半納米電氣石粉和細(xì)菌納米纖維素以及總重量3倍的水混合攪拌均勻并采用高溫蒸汽滅菌，得溶液四備用；
(2 )、將溶液三保持20 0C、溶液二保持25 0C、溶液一保持30 V，先將溶液一加入到溶液二中混合攪拌均勻得復(fù)合液，在將該復(fù)合液加入到溶液三中混合攪拌均勻得營養(yǎng)液，并調(diào)整pH，此后對該營養(yǎng)液進(jìn)行通電激發(fā)處理30min得液體培養(yǎng)基備用；
(3)、將蟬花母種在無菌環(huán)境中先接種到一半的液體培養(yǎng)基上進(jìn)行液體發(fā)酵，發(fā)酵條件為PH5.3、接種量11%、溫度21°C、搖床轉(zhuǎn)速100r/min、培養(yǎng)24h，得蟬花液體菌種一；
(4)、將剩余一半的液體培養(yǎng)基以及溶液四無菌混合均勻，之后加入膨化馬蹄渣微粉，并將其總量與無菌水350g/L混合，高壓均質(zhì)之后，通電激化配合高溫再次滅菌，并放置到無菌培養(yǎng)瓶中，得復(fù)合培養(yǎng)基，將步驟(3)得到的蟬花液體菌種一按25%的接種量在無菌環(huán)境中接種到該培養(yǎng)瓶中，溫度19°C，培養(yǎng)30h即得。
【主權(quán)項】
1.一種基于馬蹄渣的蟬花液體菌種培養(yǎng)基，其特征在于，包括以下重量份組分:馬蹄渣56-57、多孔膨化淀粉67-68、無菌馬血蛋白粉62-63、麥芽糖6_7、葡萄糖7_8、葡萄糖酸鋅2-3、氨基酸螯合鈣2.2-2.3, γ -羥基精氨酸1.1_1.2、酪蛋白胨2.1-2.2、食用氫化茶花油0.9-1、石膏 1-1.2、過磷酸鈣 I.2-1.3、ΚΗ2Ρ040.8-0.9、MgS040.5-0.6、納米級電氣石粉3.6-3.8、細(xì)菌納米纖維素3.8-4、適量的水。2.—種采用權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)基制備蟬花液體菌種的方法，其特征在于，包括以下步驟: (1)、將一半納米級電氣石粉和水按照0.lg/L混合，通電激發(fā)制備無菌水備用;將石膏、過磷酸鈣、KH2P04、MgS04的總量和無菌水按I g/L混合在30 °C攪拌溶解得溶液一;將麥芽糖、葡萄糖、葡萄糖酸鋅、氨基酸螯合鈣、γ -羥基精氨酸、酪蛋白胨、食用氫化茶花油的總量和無菌水按4g/L混合攪拌溶解得溶液二;將馬蹄渣放入超微粉碎機(jī)中粉碎處理30min，放入鍋中加入總重量4倍的水小火文煮lh，之后過濾，得濾液和濾渣，將濾液、多孔膨化淀粉、無菌馬血蛋白粉的總量和無菌水按100g/L混合攪拌，并在進(jìn)行98 °C進(jìn)行巴氏滅菌滅酶1min，得溶液三，將濾渣采用膨化機(jī)處理，得膨化馬蹄渣微粉備用;將另一半納米電氣石粉和細(xì)菌納米纖維素以及總重量3-4倍的水混合攪拌均勻并采用高溫蒸汽滅菌，得溶液四備用； (2)、將溶液三保持20°C、溶液二保持25°C、溶液一保持30°C，先將溶液一加入到溶液二中混合攪拌均勻得復(fù)合液，在將該復(fù)合液加入到溶液三中混合攪拌均勻得營養(yǎng)液，并調(diào)整pH，此后對該營養(yǎng)液進(jìn)行通電激發(fā)處理30min得液體培養(yǎng)基備用； (3)、將蟬花母種在無菌環(huán)境中先接種到一半的液體培養(yǎng)基上進(jìn)行液體發(fā)酵，發(fā)酵條件為PH5.3-5.5、接種量11%、溫度21-22°C、搖床轉(zhuǎn)速100r/min、培養(yǎng)24-25h，得蟬花液體菌種 ， (4)、將剩余一半的液體培養(yǎng)基以及溶液四無菌混合均勻，之后加入膨化馬蹄渣微粉，并將其總量與無菌水350g/L混合，高壓均質(zhì)之后，通電激化配合高溫再次滅菌，并放置到無菌培養(yǎng)瓶中，得復(fù)合培養(yǎng)基，將步驟(3)得到的蟬花液體菌種一按25%的接種量在無菌環(huán)境中接種到該培養(yǎng)瓶中，溫度19-20°C，培養(yǎng)30-32h即得。
【文檔編號】C12N1/22GK106047784SQ201610472409
【公開日】2016年10月26日
【申請日】2016年6月27日
【發(fā)明人】柯家厚
【申請人】合肥福泉現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技有限公司