一種基于菌草的茶樹菇培養(yǎng)基以及茶樹菇液體菌種制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種基于菌草的茶樹菇培養(yǎng)基，包括以下重量份組分：菌草120?122、胡羅卜粉70?80、酵母自溶粉90?92、蜂皇漿100?102、槐糖脂1?2、丙酸鈣1.2?1.4、植物氫化油0.2?0.3、納米級(jí)電氣石粉5.6?6、細(xì)菌納米纖維素5?6等。本發(fā)明結(jié)合酶解菌草以及胡羅卜粉、蜂皇漿、酵母自溶粉為主料制備茶樹菇液體培養(yǎng)基，為茶樹菇母種以及擴(kuò)培提供了豐富的營(yíng)養(yǎng)；在液體培養(yǎng)基的制備過程中，借助納米級(jí)電氣石粉電激處理時(shí)的滅菌功效，輔助液體培養(yǎng)基的滅菌，相對(duì)傳統(tǒng)的滅菌，操作簡(jiǎn)單，能耗少；同時(shí)加入納米電氣石粉和納米纖維素營(yíng)養(yǎng)以及載體物質(zhì)，可以提高菌絲球分布的穩(wěn)定性，是高質(zhì)量的茶樹菇液體菌種。
【專利說明】
一種基于菌草的茶樹菇培養(yǎng)基以及茶樹菇液體菌種制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及液體菌種技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種基于菌草的茶樹菇培養(yǎng)基以及茶樹菇液體菌種制備的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]茶樹菇生產(chǎn)過程中，液體菌種具有固體菌種所不可比擬的優(yōu)勢(shì)，液體菌種具有生產(chǎn)周期短，菌齡短而一致，純度高、活力強(qiáng)，接種簡(jiǎn)便快捷，易實(shí)行工廠化、規(guī)?；?、標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)等優(yōu)點(diǎn)?，F(xiàn)在，越來越多的人都在研究和使用液體菌種，而液體菌種的推廣和使用也是實(shí)現(xiàn)食用菌工廠化、規(guī)模化、標(biāo)準(zhǔn)化的必然趨勢(shì)。但是液體菌種也存在著自身的缺陷和不足:
1、液體菌種萌發(fā)點(diǎn)多生長(zhǎng)速度快，但是穿透力不強(qiáng)，培養(yǎng)料過粗菌絲不易吃透培養(yǎng)料，菌絲將沿著培養(yǎng)料表面快速生長(zhǎng)，培養(yǎng)料內(nèi)部菌絲量很少，嚴(yán)重影響了菌種產(chǎn)量和質(zhì)量的問題；
2、常規(guī)的液體菌種雖然解決了固體菌種存在的一些問題，能明顯縮短栽培周期、增強(qiáng)菌種活力和抗逆性、降低菌種污染率、使得菌種質(zhì)量整齊度提高，但仍存在例如發(fā)酵得到的液體菌種中菌球的密度、大小、均勻度等物理特性不是很理想等不足，如果用攪拌剪切的方法將菌球打碎，得到的菌種均勻度會(huì)更理想，但是，高速攪拌粉碎和打漿的剪切力對(duì)菌種傷害極大，對(duì)菌種整體的質(zhì)量影響較為嚴(yán)重。開發(fā)分布均勻且具有更小粒徑菌絲球的高質(zhì)量的液體菌種具有重要意義。公開號(hào)CN105309194A《食用菌微粒液體菌種生產(chǎn)新技術(shù)》提供了一種菌絲球粒徑在0.5mm的食用菌微粒液體菌種，采用的增加食用菌液體菌種培養(yǎng)液通氣量，使通氣量在1: 0.6—0.9V/V.min為適宜，同時(shí)在通氣發(fā)酵罐內(nèi)裝置攪拌器使培養(yǎng)液渦流運(yùn)動(dòng)延長(zhǎng)氣泡的運(yùn)動(dòng)路線的技術(shù)操作方法，該生產(chǎn)微粒液體菌種的方法是從生產(chǎn)工藝上進(jìn)行改進(jìn)，并沒有液體菌種培養(yǎng)基方面進(jìn)行改進(jìn)，實(shí)施起來技術(shù)難度要求高;公開號(hào)CN105130516A《分子級(jí)生物培養(yǎng)基制作方法》提到了分子級(jí)生物培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分可以快速全面的被吸收，促進(jìn)液體菌種的生長(zhǎng)，但是并沒有提到分子級(jí)生物培養(yǎng)基對(duì)液體菌種菌絲球直徑大小的影響。發(fā)展一種基于液體菌種培養(yǎng)基原材料成分改進(jìn)液體菌種菌絲球直徑改善食用菌菌種產(chǎn)量和質(zhì)量的技術(shù)，具有重要的意義。
[0003]細(xì)菌納米纖維素是自然界的豐富的可再生產(chǎn)物之一，細(xì)菌納米纖維素是纖維素的物理最小結(jié)構(gòu)單元，是指直徑1-1OOnm之間的纖維，細(xì)菌納米纖維素質(zhì)輕，生物相容性好，可降解、可再生，反應(yīng)活性高，且具有楊氏模量高，聚合度高，潔凈度高，強(qiáng)度高，比表面積大等優(yōu)勢(shì)。將細(xì)菌納米纖維素作作為食用菌液體菌種培養(yǎng)基原材料，對(duì)食用菌液體菌種的菌絲球分布以及直徑具有一定的影響，進(jìn)而起到改善食用菌菌種質(zhì)量的作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明目的就是為了彌補(bǔ)已有技術(shù)的缺陷，提供一種基于菌草的茶樹菇培養(yǎng)基以及茶樹菇液體菌種制備方法。
[0005]本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的:
一種基于菌草的茶樹燕培養(yǎng)基，包括以下重量份組分:菌草120-122、胡羅卜粉70-80、酵母自溶粉90-92、蜂皇漿100-102、磷酸二氫鉀0.4-0.5、硫酸鎂0.3-0.4、石膏粉0.3-0.4、槐糖脂1-2、丙酸鈣1.2-1.4、植物氫化油0.2-0.3、羥甲基纖維素鈉0.2-0.3、纖維素酶2-3、輕質(zhì)碳酸鈣8-9、納米級(jí)電氣石粉5.6-6、細(xì)菌納米纖維素5-6、適量的水。
[0006]—種采用上述的培養(yǎng)基制備茶樹菇液體菌種的方法，包括以下步驟:
(I )、將一半納米級(jí)電氣石粉和水按照0.lg/L混合，通電激發(fā)制備無菌水備用;將植物氫化油、羥甲基纖維素鈉的總量和無菌水按lg/L混合在30°C攪拌溶解得溶液一;將磷酸二氫鉀、硫酸鎂、石膏粉、槐糖脂、丙酸鈣的總量和無菌水按4g/L混合攪拌溶解得溶液二;將菌草放入超微粉碎機(jī)中粉碎處理30min，之后加入纖維素酶以及輕質(zhì)碳酸鈣以及總重量12-13倍的水混合攪拌均勻后在45°C下攪拌酶解50min，將該酶解液中加入胡羅卜粉、酵母自溶粉、蜂皇漿混合攪拌溶解，并在進(jìn)行98°C進(jìn)行巴氏滅菌滅酶1min，得溶液三;將另一半納米電氣石粉和細(xì)菌納米纖維素以及總重量3-4倍的水混合攪拌均勻并采用高溫蒸汽滅菌，得溶液四備用；
(2 )、將溶液三保持20 0C、溶液二保持25 0C、溶液一保持30 V，先將溶液一加入到溶液二中混合攪拌均勻得復(fù)合液，在將該復(fù)合液加入到溶液三中混合攪拌均勻得營(yíng)養(yǎng)液，并調(diào)整pH，此后對(duì)該營(yíng)養(yǎng)液進(jìn)行通電激發(fā)處理30min得液體培養(yǎng)基備用；
(3)、將茶樹菇母種在無菌環(huán)境中先接種到一半的液體培養(yǎng)基上進(jìn)行液體發(fā)酵，發(fā)酵條件為PH5.2-5.5、接種量12%、溫度28-30°C、搖床轉(zhuǎn)速105r/min、培養(yǎng)13-14h，得茶樹菇液體菌種一；
(4)、將剩余一半的液體培養(yǎng)基以及溶液四無菌混合均勻得復(fù)合培養(yǎng)基，并放置到無菌培養(yǎng)瓶中，將步驟(3 )得到的茶樹菇液體菌種一按30%的接種量在無菌環(huán)境中接種到該培養(yǎng)瓶中，溫度28-30°C，培養(yǎng)23-24h即得。
[0007]本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是:
本發(fā)明結(jié)合酶解菌草以及胡羅卜粉、蜂皇漿、酵母自溶粉為主料制備茶樹菇液體培養(yǎng)基，為茶樹菇母種以及擴(kuò)培提供了豐富的營(yíng)養(yǎng);在液體培養(yǎng)基的制備過程中，借助納米級(jí)電氣石粉電激處理時(shí)的滅菌功效，輔助液體培養(yǎng)基的滅菌，相對(duì)傳統(tǒng)的滅菌，操作簡(jiǎn)單，能耗少；同時(shí);茶樹菇液體菌種的制備采用了液體發(fā)酵以及擴(kuò)培兩階段，第二階段的培養(yǎng)基中加入納米電氣石粉和納米纖維素營(yíng)養(yǎng)以及載體物質(zhì)，避免了雜菌的污染，同時(shí)給茶樹菇種提供了良好的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生存環(huán)境，可以提高菌絲球分布的穩(wěn)定性，避免了液體菌種使用前通過對(duì)菌絲球的機(jī)械粉碎造成的損失，是高質(zhì)量的茶樹菇液體菌種。
【具體實(shí)施方式】
[0008]一種基于菌草的茶樹菇培養(yǎng)基，包括以下重量份組分:菌草120、胡羅卜粉70、酵母自溶粉90、蜂皇漿100、磷酸二氫鉀0.4、硫酸鎂0.3、石膏粉0.3、槐糖脂1、丙酸鈣1.2、植物氫化油0.2、羥甲基纖維素鈉0.2、纖維素酶2、輕質(zhì)碳酸鈣8、納米級(jí)電氣石粉5.6、細(xì)菌納米纖維素5、適量的水。
[0009]—種采用上述的培養(yǎng)基制備茶樹菇液體菌種的方法，包括以下步驟:
(I )、將一半納米級(jí)電氣石粉和水按照0.lg/L混合，通電激發(fā)制備無菌水備用;將植物氫化油、羥甲基纖維素鈉的總量和無菌水按lg/L混合在30°C攪拌溶解得溶液一;將磷酸二氫鉀、硫酸鎂、石膏粉、槐糖脂、丙酸鈣的總量和無菌水按4g/L混合攪拌溶解得溶液二;將菌草放入超微粉碎機(jī)中粉碎處理30min，之后加入纖維素酶以及輕質(zhì)碳酸鈣以及總重量12倍的水混合攪拌均勻后在45°C下攪拌酶解50min，將該酶解液中加入胡羅卜粉、酵母自溶粉、蜂皇漿混合攪拌溶解，并在進(jìn)行98 °C進(jìn)行巴氏滅菌滅酶1min，得溶液三;將另一半納米電氣石粉和細(xì)菌納米纖維素以及總重量3倍的水混合攪拌均勻并采用高溫蒸汽滅菌，得溶液四備用;
(2 )、將溶液三保持20 0C、溶液二保持25 0C、溶液一保持30 V，先將溶液一加入到溶液二中混合攪拌均勻得復(fù)合液，在將該復(fù)合液加入到溶液三中混合攪拌均勻得營(yíng)養(yǎng)液，并調(diào)整pH，此后對(duì)該營(yíng)養(yǎng)液進(jìn)行通電激發(fā)處理30min得液體培養(yǎng)基備用；
(3)、將茶樹菇母種在無菌環(huán)境中先接種到一半的液體培養(yǎng)基上進(jìn)行液體發(fā)酵，發(fā)酵條件為pH5.2、接種量12%、溫度28 °C、搖床轉(zhuǎn)速105r/min、培養(yǎng)13h，得茶樹菇液體菌種一；
(4)、將剩余一半的液體培養(yǎng)基以及溶液四無菌混合均勻得復(fù)合培養(yǎng)基，并放置到無菌培養(yǎng)瓶中，將步驟(3 )得到的茶樹菇液體菌種一按30%的接種量在無菌環(huán)境中接種到該培養(yǎng)瓶中，溫度28°C，培養(yǎng)23h即得。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種基于菌草的茶樹菇培養(yǎng)基，其特征在于，包括以下重量份組分:菌草120-122、胡羅卜粉70-80、酵母自溶粉90-92、蜂皇漿100-102、磷酸二氫鉀0.4-0.5、硫酸鎂0.3-0.4、石膏粉0.3-0.4、槐糖脂1-2、丙酸鈣1.2-1.4、植物氫化油0.2-0.3、羥甲基纖維素鈉0.2-0.3、纖維素酶2-3、輕質(zhì)碳酸鈣8-9、納米級(jí)電氣石粉5.6-6、細(xì)菌納米纖維素5-6、適量的水。2.—種采用權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)基制備茶樹菇液體菌種的方法，其特征在于，包括以下步驟: (I )、將一半納米級(jí)電氣石粉和水按照0.lg/L混合，通電激發(fā)制備無菌水備用；將植物氫化油、羥甲基纖維素鈉的總量和無菌水按lg/L混合在30°C攪拌溶解得溶液一;將磷酸二氫鉀、硫酸鎂、石膏粉、槐糖脂、丙酸鈣的總量和無菌水按4g/L混合攪拌溶解得溶液二;將菌草放入超微粉碎機(jī)中粉碎處理30min，之后加入纖維素酶以及輕質(zhì)碳酸鈣以及總重量12-13倍的水混合攪拌均勻后在45°C下攪拌酶解50min，將該酶解液中加入胡羅卜粉、酵母自溶粉、蜂皇漿混合攪拌溶解，并在進(jìn)行98°C進(jìn)行巴氏滅菌滅酶1min，得溶液三;將另一半納米電氣石粉和細(xì)菌納米纖維素以及總重量3-4倍的水混合攪拌均勻并采用高溫蒸汽滅菌，得溶液四備用； (2)、將溶液三保持20°C、溶液二保持25°C、溶液一保持30°C，先將溶液一加入到溶液二中混合攪拌均勻得復(fù)合液，在將該復(fù)合液加入到溶液三中混合攪拌均勻得營(yíng)養(yǎng)液，并調(diào)整pH，此后對(duì)該營(yíng)養(yǎng)液進(jìn)行通電激發(fā)處理30min得液體培養(yǎng)基備用； (3)、將茶樹菇母種在無菌環(huán)境中先接種到一半的液體培養(yǎng)基上進(jìn)行液體發(fā)酵，發(fā)酵條件為PH5.2-5.5、接種量12%、溫度28-30°C、搖床轉(zhuǎn)速105r/min、培養(yǎng)13-14h，得茶樹菇液體菌種一； (4)、將剩余一半的液體培養(yǎng)基以及溶液四無菌混合均勻得復(fù)合培養(yǎng)基，并放置到無菌培養(yǎng)瓶中，將步驟(3 )得到的茶樹菇液體菌種一按30%的接種量在無菌環(huán)境中接種到該培養(yǎng)瓶中，溫度28-30°C，培養(yǎng)23-24h即得。
【文檔編號(hào)】C12N1/14GK106047719SQ201610472477
【公開日】2016年10月26日
【申請(qǐng)日】2016年6月27日
【發(fā)明人】柯家厚
【申請(qǐng)人】合肥福泉現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技有限公司