一種增菌培養(yǎng)基及其制備方法、增菌培養(yǎng)方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種增菌培養(yǎng)基，其包括母液和選擇性添加在母液中用以抑制革蘭氏陰性菌生長的選擇性添加劑，母液由按重量份數(shù)計(jì)的氯化鈉1.5～3.0份、蛋白胨1.0～3.0份、酵母浸粉0.2～0.8份、磷酸二氫鈉0.5～1.5份、磷酸二氫鉀0.1～0.5份、組合促進(jìn)劑0.7～2.0份加入到100份的水中經(jīng)加熱溶解再冷卻制得。該增菌培養(yǎng)基可對(duì)沙門氏菌、出血性大腸埃希氏菌O157、阪崎腸桿菌、金黃色葡萄球菌、志賀氏菌、霍亂弧菌、副溶血性弧菌和單增李斯特氏菌同時(shí)進(jìn)行增菌培養(yǎng)，為食品檢驗(yàn)節(jié)約了工作量和提高了檢驗(yàn)的效率。此外，本發(fā)明還公開了此增菌培養(yǎng)基的制備方法。
【專利說明】
-種増菌培養(yǎng)基及其制備方法、増菌培養(yǎng)方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明設(shè)及微生物培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，具體而言，設(shè)及一種增菌培養(yǎng)基及其制備方法、 增菌培養(yǎng)方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 目前，食品中的生物性污染問題無論是發(fā)達(dá)國家還是發(fā)展中國家都是關(guān)于食品安 全的最主要原因。目前針對(duì)食品中的致病菌的檢測(cè)一般都是按照有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行，而相 關(guān)標(biāo)準(zhǔn)方法的確立主要依賴于傳統(tǒng)的分離鑒定方法。針對(duì)于每種致病菌均需要其特定的增 菌培養(yǎng)基進(jìn)行增菌，選擇性增菌等步驟;同一樣品需要同時(shí)進(jìn)行多種致病菌的檢測(cè)，運(yùn)樣就 需要同時(shí)在多種特定的增菌培養(yǎng)基上進(jìn)行樣品的增菌處理，造成檢測(cè)工作前期增菌過程繁 瑣。
[0003] 傳統(tǒng)的微生物培養(yǎng)的方法至今仍然是甄別微生物的權(quán)威方法。國標(biāo)增菌方法需要 對(duì)樣品進(jìn)行3-4次增菌才能完成細(xì)菌的增菌過程，而復(fù)合增菌只需要一次增菌過程即可完 成細(xì)菌的增殖過程，相比較于國標(biāo)增菌方法操作簡便。現(xiàn)有的增菌培養(yǎng)基單次增菌只能增 菌1~巧巾致病菌，無法實(shí)現(xiàn)快速檢測(cè)的目的，因此，為實(shí)現(xiàn)致病菌的快速增菌檢測(cè)，有必要 對(duì)于傳統(tǒng)培養(yǎng)基和方法進(jìn)行改進(jìn)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一種增菌培養(yǎng)基，此增菌培養(yǎng)基夠用于對(duì)多種致病菌的同 時(shí)快速增菌培養(yǎng)，實(shí)現(xiàn)快速檢測(cè)的目的。
[0005] 本發(fā)明的另一目的在于提供上述增菌培養(yǎng)基的制備方法，W得到增菌培養(yǎng)基，此 增菌培養(yǎng)基夠用于對(duì)多種致病菌的同時(shí)快速增菌培養(yǎng)，實(shí)現(xiàn)快速檢測(cè)的目的。
[0006] 本發(fā)明的再一目的在于提供一種增菌培養(yǎng)方法，該增菌培養(yǎng)方法能夠同時(shí)對(duì)多種 致病菌進(jìn)行增菌培養(yǎng)，實(shí)現(xiàn)快速檢測(cè)的目的。
[0007] 本發(fā)明解決其技術(shù)問題是采用W下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的。
[000引一種增菌培養(yǎng)基，其包括母液，母液由按重量份數(shù)計(jì)的氯化鋼1.5~3.0份、蛋白腺 1.0~3.0份、酵母浸粉0.2~0.8份、憐酸二氨鋼0.5~1.5份、憐酸二氨鐘0.1~0.5份、組合 促進(jìn)劑0.7~2.0份加入到100份的水中經(jīng)加熱溶解再冷卻制得，組合促進(jìn)劑是葡萄糖和乳 糖中的一種或兩種的組合，增菌培養(yǎng)基按重量份數(shù)計(jì)還包括在細(xì)菌接種至母液培養(yǎng)后添加 至母液中的W抑制革蘭氏陰性菌生長的選擇性添加劑0.001~0.003份。
[0009] -種增菌培養(yǎng)基的制備方法，其包括：按重量份計(jì)取氯化鋼1.5~3.0份、蛋白腺 1.0~3.0份、酵母浸粉0.2~0.8份、憐酸二氨鋼0.5~1.5份、憐酸二氨鐘0.1~0.5份、組合 促進(jìn)劑0.7~2.0份加入至100份水中，加熱溶解、經(jīng)滅菌后制得母液，組合促進(jìn)劑是葡萄糖 和乳糖中的一種或兩種的組合；
[0010] 按重量份計(jì)取抑制革蘭氏陰性菌生長的選擇性添加劑0.001~0.003份，用于在致 病菌接種至母液培養(yǎng)后添加至母液中。
[0011] -種增菌培養(yǎng)方法，先將致病菌接種至母液中培養(yǎng)，再往接種有致病菌的母液中 加入W抑制革蘭氏陰性菌生長的選擇性添加劑，母液將按重量份數(shù)計(jì)的氯化鋼1.5~3.0 份、蛋白腺1.0~3.0份、酵母浸粉0.2~0.8份、憐酸二氨鋼0.5~1.5份、憐酸二氨鐘0.1~ 0.5份、組合促進(jìn)劑0.7~2.0份加入到100份的水中經(jīng)加熱溶解再冷卻制得，組合促進(jìn)劑是 葡萄糖和乳糖中的一種或兩種的組合，選擇性添加劑按重量份數(shù)計(jì)為0.001~0.003份。
[0012] 本發(fā)明提供的增菌培養(yǎng)基及其制備方法、增菌培養(yǎng)方法的有益效果是:增菌培養(yǎng) 基的母液由按重量份數(shù)計(jì)的氯化鋼1.5~3.0份、蛋白腺1.0~3.0份、酵母浸粉0.2~0.8份、 憐酸二氨鋼0.5~1.5份、憐酸二氨鐘0.1~0.5份、組合促進(jìn)劑0.7~2.0份加入到100份的水 中經(jīng)加熱溶解再冷卻制得，組合促進(jìn)劑是葡萄糖和乳糖中的一種或兩種的組合，該增菌培 養(yǎng)基含有適宜比例的蛋白腺和酵母浸粉，其營養(yǎng)成分豐富全面、為致病菌提供了適宜的生 長環(huán)境，其能夠滿足多種致病菌的生長;另外，該增菌培養(yǎng)基按重量份數(shù)計(jì)還包括在致病菌 接種至母液培養(yǎng)后添加至母液中的W抑制革蘭氏陰性菌生長的選擇性添加劑0.001~ 0.003份，選擇性添加劑能抑制革蘭氏陰性菌生長，有助于實(shí)現(xiàn)各種目標(biāo)致病菌的平衡生 長，阻止非致病菌對(duì)營養(yǎng)的競爭。因此，本發(fā)明的增菌培養(yǎng)基能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)沙口氏菌、大腸埃 希氏菌0157、阪崎腸桿菌、金黃色葡萄球菌、志賀氏菌、霍亂弧菌、副溶血性弧菌和單增李斯 特氏菌等多種致病菌進(jìn)行同時(shí)增菌培養(yǎng)，增菌效率高，不用對(duì)每種致病菌進(jìn)行單獨(dú)增菌培 養(yǎng)，節(jié)約了食品檢驗(yàn)的工作量。
【具體實(shí)施方式】
[0013] 為使本發(fā)明實(shí)施例的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn)更加清楚，下面將對(duì)本發(fā)明實(shí)施例中 的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述。實(shí)施例中未注明具體條件者，按照常規(guī)條件或制造商建 議的條件進(jìn)行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可W通過市售購買獲得的常規(guī)產(chǎn) 品。
[0014] 下面對(duì)本發(fā)明實(shí)施例的增菌培養(yǎng)基及其制備方法、增菌培養(yǎng)方法進(jìn)行具體說明。
[0015] -種增菌培養(yǎng)基，其包括母液，母液由按重量份數(shù)計(jì)的氯化鋼1.5~3.0份、蛋白腺 1.0~3.0份、酵母浸粉0.2~0.8份、憐酸二氨鋼0.5~1.5份、憐酸二氨鐘0.1~0.5份、組合 促進(jìn)劑0.7~2.0份加入到100份的水中經(jīng)加熱溶解再冷卻制得，組合促進(jìn)劑是葡萄糖和乳 糖中的一種或兩種的組合，增菌培養(yǎng)基按重量份數(shù)計(jì)還包括在細(xì)菌接種至母液培養(yǎng)3~4h 后添加至母液中的W抑制革蘭氏陰性菌生長的選擇性添加劑0.001~0.003份。需要說明的 是，組合促進(jìn)劑若同時(shí)選用葡萄糖和乳糖，則葡萄糖與乳糖的重量比為1:1。
[0016] 其中，蛋白腺和酵母浸粉提供細(xì)菌生長和代謝產(chǎn)酶所需的碳源和氮源，為各致病 菌的生長提供全面、均衡的營養(yǎng);較佳地，蛋白腺是膜蛋白腺和月示腺中的一種或兩種的組 合。需要說明的是，蛋白腺若同時(shí)選用膜蛋白腺和月示腺，則膜蛋白腺與月示腺的重量比為 1:1。
[0017] 氯化鋼提供一定的滲透壓;憐酸氨二鋼和憐酸二氨鐘為培養(yǎng)體系提供緩沖，調(diào)節(jié) 細(xì)菌生長過程中培養(yǎng)基抑。氯化鋼、憐酸氨二鋼和憐酸二氨鐘為各致病菌的生長提供適宜 的生長環(huán)境，適應(yīng)于各種致病菌同時(shí)生長。另外，組合促進(jìn)劑作為細(xì)菌的優(yōu)先使用碳源，能 促進(jìn)細(xì)菌生長和代謝產(chǎn)酶。
[0018] 較佳地，選擇性添加劑是糞晚酬酸鋼和叮晚黃素中的一種或兩種的組合。糞晚酬 酸鋼和叮晚黃素均可在一定程度上抑制革蘭氏陰性菌生長，使需要增菌的目標(biāo)致病菌能夠 有充足的生長營養(yǎng)和空間，并使各致病菌的相互生長處于平衡狀態(tài)，避免相互競爭。需要說 明的是，如果選擇性添加劑是糞晚酬酸鋼和叮晚黃素，則按糞晚酬酸鋼與叮晚黃素的重量 比為1:1的比例組合形成選擇性添加劑。
[0019] 較佳地，母液的pH為7.0~7.4。呈中性的母液為各致病菌的生長提供適宜的生長 環(huán)境，適應(yīng)于各種致病菌同時(shí)生長。
[0020] 上述增菌培養(yǎng)基的制備方法，其包括：
[0021] 按重量份計(jì)取氯化鋼1.5~3.0份、蛋白腺1.0~3.0份、酵母浸粉0.2~0.8份、憐酸 二氨鋼0.5~1.5份、憐酸二氨鐘0.1~0.5份、組合促進(jìn)劑0.7~2.0份加入至100份水中，加 熱攬拌溶解、經(jīng)滅菌后制得母液，得到母液。組合促進(jìn)劑是葡萄糖和乳糖中的一種或兩種的 組合。
[0022] 其中，在加熱攬拌溶解后，母液需經(jīng)過冷卻至室溫，然后調(diào)節(jié)母液的pH至7.0~ 7.4，W保證抑值的穩(wěn)定性;接著，將母液于120°C~122°C下高壓滅菌20~25min，冷卻至室 溫，得到無菌的母液。
[002引然后，按重量份計(jì)取抑制革蘭氏陰性菌生長的選擇性添加劑0.001~0.003份，用 于在致病菌接種至所述母液培養(yǎng)后添加至所述母液中。選擇性添加劑是糞晚酬酸鋼和叮晚 黃素中的一種或兩種的組合。
[0024] 優(yōu)選地，先將選擇性添加劑加入到水中，充分溶解，進(jìn)行過濾除菌，得到選擇性添 加劑溶液。使用時(shí)，直接將選擇性添加劑溶液直接添加到母液即可。
[0025] 一種增菌培養(yǎng)方法，其包括：
[0026] 先將致病菌接種至上述母液中培養(yǎng)，具體地，直接將待測(cè)樣本接種至母液中，進(jìn)行 培養(yǎng)；
[0027] 再往接種有致病菌的母液中加入W抑制革蘭氏陰性菌生長的上述選擇性添加劑。 [00%]較佳地，選擇性添加劑在致病菌接種至母液培養(yǎng)3-4h后添加至母液中。加入選擇 性添加劑后，革蘭氏陰性菌生長受到抑制，使得各致病菌的生長相互協(xié)調(diào)、平衡，其能夠得 到快速地繁殖，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)單次快速對(duì)多種致病菌的增菌效果。不用再對(duì)各致病菌進(jìn)行單獨(dú) 地增菌培養(yǎng)，進(jìn)而有助于提高檢驗(yàn)工作的效率。
[0029] 綜上，本發(fā)明的增菌培養(yǎng)基，依據(jù)食品中各致病菌的生長特性，種屬差異并結(jié)合食 品中致病菌易受損需修復(fù)等特點(diǎn)，針對(duì)性地對(duì)增菌培養(yǎng)基的組分進(jìn)行優(yōu)化設(shè)計(jì)和搭配。使 得本發(fā)明的增菌培養(yǎng)基可有效地對(duì)沙口氏菌、大腸埃希氏菌0157、阪崎腸桿菌、金黃色葡萄 球菌、志賀氏菌、霍亂弧菌、副溶血性弧菌和單增李斯特氏菌進(jìn)行增菌培養(yǎng)。節(jié)約了檢驗(yàn)時(shí) 間和工作量，為實(shí)現(xiàn)對(duì)食品的快速檢測(cè)提供了基礎(chǔ)。
[0030] W下結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的特征和性能作進(jìn)一步的詳細(xì)描述。
[0031] 實(shí)施例1
[0032] 本實(shí)施例提供了增菌培養(yǎng)基的制備方法W及由該制備方法所制得的增菌培養(yǎng)基。
[0033] 增菌培養(yǎng)基的制備方法包括：
[0034] 按母液的配方取氯化鋼1.5g、蛋白腺l.Og、酵母浸粉0.2g、憐酸二氨鋼0.5g、憐酸 二氨鐘o.lg、促進(jìn)劑〇.7g加入到蒸饋水100ml中，加熱攬拌至完全溶解。促進(jìn)劑是葡萄糖。 [00巧]冷卻至室溫后調(diào)節(jié)抑至7.2左右，于12TC高壓滅菌20min，冷卻至室溫，得到母液 100mlo
[0036] 取可抑制革蘭氏陰性菌生長的選擇性添加劑0.002g，加入到2ml蒸饋水中（蒸饋水 與選擇性添加劑體積質(zhì)量比為1000:1，在其他實(shí)施例中，該比例不作限定，其主要作用在于 提前溶解選擇性添加劑，確保在使用時(shí)選擇性添加劑能夠快速分散到母液中，只要每100ml 母液添加有O.OOlg~0.003g選擇性添加劑即可），充分溶解，得到選擇性添加劑溶液，選擇 性添加劑是糞晚酬酸鋼。。
[0037] 對(duì)選擇性添加劑溶液進(jìn)行過濾除菌，濾膜為0.22um，得到無菌的含有選擇性添加 劑的選擇性添加劑溶液2ml。該選擇性添加劑溶液可在致病菌接種至母液培養(yǎng)后再全部加 入到母液中。
[003引實(shí)施例2~7
[0039] 實(shí)施例2~7提供了增菌培養(yǎng)基的制備方法和由該制備方法得到的對(duì)應(yīng)的增菌培 養(yǎng)基，實(shí)施例2~7提供的增菌培養(yǎng)基的制備方法與實(shí)施例1基本相同，不同的是母液和選擇 性添加劑的成分，實(shí)施例2~7的母液核選擇性添加劑的成分組成W及用量見表1。
[0040] 表1.本發(fā)明實(shí)施例2-7的母液和選擇性添加劑的成分W及用量
[0041]
[0042] 注:表中各成分的用量單位為g，"-"代表未加入。
[0043] 實(shí)施例8
[0044] 本實(shí)施例對(duì)增菌培養(yǎng)方法進(jìn)行說明，所用的培養(yǎng)基為上述實(shí)施例1所制得的增菌 培養(yǎng)基，W含有致病菌的活化菌液來進(jìn)行說明。
[0045] 本實(shí)施例的增菌培養(yǎng)方法，包括：
[0046] 將各致病菌的活化菌液稀釋十倍后，一并加入到實(shí)施例1提供的母液中，于35°C、 150rpm條件下培養(yǎng)。并對(duì)稀釋十倍的活化菌液中的致病菌計(jì)數(shù)，作為增菌前的培養(yǎng)液中的 菌落總數(shù)。當(dāng)然，在具體實(shí)際工作過程中，進(jìn)行增菌時(shí)，也可W直接將待測(cè)樣本(固體）lmg接 種到母液中，進(jìn)行增菌。
[0047] 待培養(yǎng)至化，將實(shí)施例1提供的選擇性添加劑全部加入至接種培養(yǎng)后的母液中，繼 續(xù)培養(yǎng)12h。培養(yǎng)結(jié)束后，對(duì)培養(yǎng)液的致病菌類別和數(shù)量進(jìn)行檢測(cè)。檢測(cè)的方法可參考如下： 將培養(yǎng)液按十倍比例進(jìn)行梯度稀釋，將稀釋液用各種致病菌對(duì)應(yīng)的顯色培養(yǎng)基在35°C培養(yǎng) 12小時(shí)，采用平板計(jì)數(shù)方法進(jìn)行計(jì)數(shù)，計(jì)算出整個(gè)培養(yǎng)液中增菌后的菌落總數(shù)，結(jié)果如表2 所示。
[0048] 表2.實(shí)施例1提供的增菌培養(yǎng)基對(duì)致病菌增菌培養(yǎng)的結(jié)果
[0049]
[0050] 由表2可W，采用本發(fā)明提供的增菌培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)后的致病菌的菌落總數(shù)已能 滿足檢測(cè)要求，且能夠增菌培養(yǎng)的致病菌的類別較多，包括有沙口氏菌、出血性大腸埃希氏 菌0157、阪崎腸桿菌、金黃色葡萄球菌、志賀氏菌、霍亂弧菌、副溶血性弧菌和單增李斯特氏 -tt： 園〇
[0051 ]此外，在實(shí)際的檢測(cè)過程，如果增菌培養(yǎng)后，需要進(jìn)一步的分子檢測(cè)，可參考如下 方法進(jìn)行:對(duì)待測(cè)樣本進(jìn)行增菌培養(yǎng)時(shí)，將待測(cè)樣本分為相同質(zhì)量的兩份(例如每份待測(cè)樣 本1~5mg)，分別接種至相同的母液A和母液B中（母液A和母液B的成分及用量與本發(fā)明任意 實(shí)施例提供的母液相同）。培養(yǎng)3~4h后，往母液A中添加選擇性添加劑，母液B不加選擇性添 加劑。培養(yǎng)結(jié)束后，分別提取母液A中的致病菌基因組DNA和母液B中的致病菌基因組DNA，將 兩份基因組DNA混合，再用于后續(xù)的多重PCR等分子檢測(cè)中，運(yùn)樣檢測(cè)出的結(jié)果更準(zhǔn)確和可 靠。
[0化2] 實(shí)施例9
[0053] 采用實(shí)施例2~7的增菌培養(yǎng)基進(jìn)行增菌培養(yǎng)基，增菌培養(yǎng)方法和步驟同實(shí)施例8。 實(shí)施例2~7的增菌培養(yǎng)基增菌培養(yǎng)基的結(jié)果見表3。
[0054] 表3.實(shí)施例2~7提供的增菌培養(yǎng)基對(duì)致病菌增菌培養(yǎng)的結(jié)果
[0化5]
[0056] 由表3可W，采用本發(fā)明實(shí)施例2~7提供的增菌培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)后的致病菌的菌 落總數(shù)同意能滿足檢測(cè)要求。由此表明，采用本發(fā)明提供的增菌培養(yǎng)基能夠同時(shí)對(duì)沙口氏 菌、出血性大腸埃希氏菌0157、阪崎腸桿菌、金黃色葡萄球菌、志賀氏菌、霍亂弧菌、副溶血 性弧菌和單增李斯特氏菌進(jìn)行增菌培養(yǎng)。
[0057] 綜上，采用本發(fā)明提供的培養(yǎng)基可同時(shí)對(duì)沙口氏菌、大腸埃希氏菌0157、阪崎腸桿 菌、金黃色葡萄球菌、志賀氏菌、霍亂弧菌、副溶血性弧菌和單增李斯特氏菌等致病菌進(jìn)行 復(fù)合增菌，避免各自增菌的繁瑣程序提高了工作效率;增菌后的培養(yǎng)基可W直接做目標(biāo)菌 的分離培養(yǎng)和生物鑒定實(shí)驗(yàn)，也可W直接用于PCR檢測(cè)。
[005引 W上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例而已，并不用于限制本發(fā)明，對(duì)于本領(lǐng)域的技 術(shù)人員來說，本發(fā)明可W有各種更改和變化。凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修 改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種增菌培養(yǎng)基，其特征在于，其包括母液，所述母液由按重量份數(shù)計(jì)的氯化鈉1.5 ~3.0份、蛋白胨1.0~3.0份、酵母浸粉0.2~0.8份、磷酸二氫鈉0.5~1.5份、磷酸二氫鉀 0.1~0.5份、組合促進(jìn)劑0.7~2.0份加入到100份的水中經(jīng)加熱溶解再冷卻制得，所述組合 促進(jìn)劑是葡萄糖和乳糖中的一種或兩種的組合，所述增菌培養(yǎng)基按重量份數(shù)計(jì)還包括在細(xì) 菌接種至所述母液培養(yǎng)后添加至所述母液中的以抑制革蘭氏陰性菌生長的選擇性添加劑 0.001 ~0.003份。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的增菌培養(yǎng)基，其特征在于，所述選擇性添加劑是萘啶酮酸鈉和 吖啶黃素中的一種或兩種的組合。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的增菌培養(yǎng)基，其特征在于，所述母液的pH為7.0~7.4。4. 根據(jù)權(quán)利要求1~3中任一項(xiàng)所述的增菌培養(yǎng)基，其特征在于，所述蛋白胨是胰蛋白 胨和月示胨中的一種或兩種的組合。5. -種增菌培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于，其包括： 按重量份計(jì)取氯化鈉1.5~3.0份、蛋白胨1.0~3.0份、酵母浸粉0.2~0.8份、磷酸二氫 鈉0.5~1.5份、磷酸二氫鉀0.1~0.5份、組合促進(jìn)劑0.7~2.0份加入至100份水中，加熱溶 解、經(jīng)滅菌后制得母液，所述組合促進(jìn)劑是葡萄糖和乳糖中的一種或兩種的組合； 按重量份計(jì)取抑制革蘭氏陰性菌生長的選擇性添加劑0.001~0.003份，在致病菌接種 至所述母液培養(yǎng)后，將所述選擇性添加劑添加至所述母液中。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的增菌培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于，將所述氯化鈉、所述蛋 白胨、所述酵母浸粉、所述磷酸二氫鈉、所述磷酸二氫鉀、所述組合促進(jìn)劑加入至所述水中 后，經(jīng)加熱攪拌溶解，再經(jīng)第一次冷卻處理冷卻至室溫后調(diào)節(jié)pH至7.0~7.4。7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的增菌培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于，調(diào)節(jié)pH至7.0~7.4之 后，于120 °C~122 °C下滅菌20~25min，再經(jīng)第二次冷卻處理冷卻至室溫。8. -種增菌培養(yǎng)方法，其特征在于，其包括:先將致病菌接種至母液中培養(yǎng)，再往接種 有所述致病菌的所述母液中加入以抑制革蘭氏陰性菌生長的選擇性添加劑，所述母液由按 重量份數(shù)計(jì)的氯化鈉1.5~3.0份、蛋白胨1.0~3.0份、酵母浸粉0.2~0.8份、磷酸二氫鈉 0.5~1.5份、磷酸二氫鉀0.1~0.5份、組合促進(jìn)劑0.7~2.0份加入到100份的水中經(jīng)加熱溶 解再冷卻制得，所述組合促進(jìn)劑是葡萄糖和乳糖中的一種或兩種的組合，所述選擇性添加 劑按重量份數(shù)計(jì)為〇. 001~〇. 003份。9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的增菌培養(yǎng)方法，其特征在于，所述選擇性添加劑在所述致病菌 接種至所述母液培養(yǎng)3-4h后添加至所述母液中。10. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的增菌培養(yǎng)方法，其特征在于，所述選擇性添加劑是萘啶酮酸 鈉和吖啶黃素中的一種或兩種的組合。
【文檔編號(hào)】C12N1/20GK106047781SQ201610705290
【公開日】2016年10月26日
【申請(qǐng)日】2016年8月22日
【發(fā)明人】張紅光, 劉菲, 彭麗萍, 于世強(qiáng), 謝長江, 黃廣平
【申請(qǐng)人】四川華漢三創(chuàng)生物科技有限公司