阿哌沙班合成中的關(guān)鍵中間體和雜質(zhì)：阿哌沙班二醇酯的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明的目的涉及一種改進(jìn)的用于通過新的中間體制備阿哌沙班的方法，所述中間體經(jīng)歷更快的酰胺化反應(yīng)。本發(fā)明還鑒定和定量阿哌沙班的雜質(zhì)。
【專利說明】
阿哌沙班合成中的關(guān)鍵中間體和雜質(zhì):阿哌沙班二醇酯
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及一種通過新的關(guān)鍵中間體制備名為阿哌沙班的活性藥物成分的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 阿哌沙班是一種活性藥物成分，作為抗凝劑用于靜脈血栓栓塞事件的治療。
[0003] 阿哌沙班具有化學(xué)名稱卜^-甲氧基苯基)-7_氧代-6-[4-(2_氧代哌啶-1-基)苯 基]_4,5_二氫吡唑并[5,4_c]吡啶-3-甲酰胺，并具有以下化學(xué)式(I):
[0005] 阿哌沙班的某些溶劑合物是已知的，例如，已知阿哌沙班和甲酰胺或者和二甲基 甲酰胺的溶劑合物，兩者都具有化學(xué)計(jì)量比1:1。
[0006] 阿哌沙班二水合物，即每一個(gè)阿哌沙班具有兩個(gè)水分子的阿哌沙班水合物形式， 也是已知的。
[0007] 文獻(xiàn)中公開了阿哌沙班的一些合成途徑，特別地，在W02007/0001385中詳細(xì)說明 了在數(shù)千克規(guī)模上的阿哌沙班的首次工業(yè)合成。
[0008] PCT申請W02007/0001385在實(shí)施例6中公開了一種通過阿哌沙班乙酯在10千克規(guī) 模上的酰胺化反應(yīng)根據(jù)以下反應(yīng)方案制備阿哌沙班的方法：
[0010] 根據(jù)上述程序，使用在丙二醇中的無水氨，并在90°C下進(jìn)行反應(yīng)至少12小時(shí)，以 94.6 %的分離摩爾收率獲得阿哌沙班。
[0011] 在W02007/0001385的實(shí)施例6中公開的方法的最大優(yōu)點(diǎn)（也與實(shí)施例7和9比較)是 這種方法提供了具有名為N-1的多晶型的阿哌沙班，這種固體形式在同一申請的實(shí)施例9中 被明確表征并且是阿哌沙班的熱力學(xué)穩(wěn)定形式。
[0012] 根據(jù)由創(chuàng)始人提供的監(jiān)管信息，阿哌沙班形式N-1是目前市場上出售的形式，因 此，對于提供一種與創(chuàng)始人用于一般市場的形式具有完全相同的物理化學(xué)和治療特性的活 性藥物成分這樣一種目的來說，重要的是找到一種提供多晶型N-1的阿哌沙班的制備方法。
[0013] 在出版物J.Med.Chem.，2007，vol.50,22,第5339-5356頁中，根據(jù)以下反應(yīng)方案， 從阿哌沙班乙酯和5%氨水在乙二醇中加熱到120°C4小時(shí)，以76%的摩爾收率制備阿哌沙 班：
[0015] 令人遺憾的是，上述出版物沒有涉及由此方法制備阿哌沙班的固體形式。
[0016] 出版物Synthetic Communication，43，第72-79頁，（2013)公開了一種利用25%氨 水在甲醇中在65°C下5小時(shí)以91 %摩爾收率從中間體阿哌沙班乙酯制備阿哌沙班的方法。
[0017] 然而，可能是因?yàn)樵诩状贾卸皇窃诙既軇┲羞M(jìn)行，這種方法不提供阿哌沙班 形式N-1，實(shí)際上產(chǎn)物的熔點(diǎn)是171-173°C，這與形式N-1的熔點(diǎn)235-237°C不同。此外，沒有 提供關(guān)于所述產(chǎn)物的純度的數(shù)據(jù)。
[0018] 在專利公布W02013/119328的實(shí)施例2中，使用5%氨水在丙二醇中在100°C下過夜 從阿哌沙班乙酯進(jìn)行阿哌沙班的合成。不用形式N-1對該反應(yīng)混合物進(jìn)行接種，以致在加工 結(jié)束時(shí)，分離出一種不同的固體形式，稱為形式I。由此制備的阿哌沙班形式I是阿哌沙班1， 2_丙二醇半溶劑合物。
[0019]考慮到上述現(xiàn)有技術(shù)和我們的初步實(shí)驗(yàn)結(jié)果，盡管如W02007/0001385的實(shí)施例7 和9中，醇溶劑的存在看起來傾向于提供固體形式H2-2，但是，例如在W02007/0001385的實(shí) 施例6中，二醇溶劑的存在看起來促進(jìn)了多晶型N_1的制備。
[0020] 因此，為了制備阿哌沙班形式N-1，從二醇溶劑分離阿哌沙班看起來是方便的。
[0021] 然而，盡管W02007/0001385中公開的用于制備阿哌沙班形式N-1的工業(yè)方法已經(jīng) 使用了二醇溶劑，但是這種方法具有要求在高溫下長反應(yīng)時(shí)間的缺點(diǎn)，即，在90°C下至少12 小時(shí)，或者根據(jù)W020 13/1 19328在100 °C下過夜，或者在120 °C下4小時(shí)（參見上述 J.Med.Chem.(2007))。
【附圖說明】
[0022] 圖1顯示對比阿哌沙班二醇酯向阿哌沙班的轉(zhuǎn)化和阿哌沙班乙酯向阿哌沙班的轉(zhuǎn) 化的動(dòng)力學(xué)研究，兩種轉(zhuǎn)化在相同的酰胺化條件下進(jìn)行。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0023]因此，本發(fā)明解決的問題是提供一種改進(jìn)的用于制備阿哌沙班和其溶劑合物或者 水合物的方法，所述方法避免了長反應(yīng)時(shí)間和/或高溫。
[0024] 這個(gè)問題通過如權(quán)利要求書中所概述的用于制備阿哌沙班和其鹽的方法來解決， 權(quán)利要求書的定義構(gòu)成本說明書的一部分。
[0025] 本發(fā)明方法的其他特征和優(yōu)點(diǎn)源自于下文報(bào)告的對實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的實(shí)施例的描述， 所述實(shí)施例被提供作為對本發(fā)明的說明而不是作為對本發(fā)明的限制。
【具體實(shí)施方式】
[0026] 本發(fā)明的目的是一種通過式(II)的化合物的酰胺化反應(yīng)制備式（I)的阿哌沙班和 其溶劑合物或者水合物的方法：
[0029] 其中R選自直鏈或支鏈C2-C6烷基、-CH2-CH( OH) -CH2-和-(妒0) J?1-，其中R1是直鏈或 支鏈C2-C4烷基并且n是1~6的整數(shù)。
[0030] 已經(jīng)確實(shí)令人驚訝地發(fā)現(xiàn)，從式（II)的化合物開始，即從阿哌沙班的二醇酯開始， 將其轉(zhuǎn)化為阿哌沙班的酰胺化反應(yīng)比使用常規(guī)的阿哌沙班C1-C2烷基酯進(jìn)行得快得多。
[0031] 由本發(fā)明式（II)的化合物提供的效果可能是由自由氧烷基(oxydryl)引起的，所 述自由氧烷基以任何方式有利于由氨進(jìn)行的烷氧基取代，可能提供了一種鄰位促進(jìn)?；蛘撸?這樣的效果可能是由于另一種氧的存在引起的，所述氧的電負(fù)性提供了一種容易被氨取代 的酯。
[0032] 換言之，通過酰胺化反應(yīng)將式（II)的阿哌沙班的二醇酯轉(zhuǎn)化成阿哌沙班，比常規(guī) 的阿哌沙班酯容易得多或者快得多。
[0033]在比較的表1和圖1中，提供了由本發(fā)明方法提供的效果的明顯證據(jù)。
[0034]雖然在下列某些實(shí)施例中，酰胺化反應(yīng)進(jìn)行6小時(shí)（僅僅是為了完成實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)方 案），但是它們遠(yuǎn)在此時(shí)間之前就已完成。
[0035]實(shí)際上，提供阿哌沙班的式（II)的化合物的酰胺化反應(yīng)通常在80 °C和90 °C之間的 溫度下只持續(xù)3小時(shí)，達(dá)到99.0 %的轉(zhuǎn)化。
[0036]如表1所示，在完全相同的條件下，阿哌沙班乙酯轉(zhuǎn)化為阿哌沙班至少耗費(fèi)6小時(shí)。 [0037] 根據(jù)在W02007/0001385中公開的工業(yè)方法，所述轉(zhuǎn)化在90°C下持續(xù)至少12小時(shí)。
[0038] 因此，與已知的阿哌沙班酯的酰胺化反應(yīng)相比，本發(fā)明的方法需要更短的反應(yīng)時(shí) 間。
[0039] 本發(fā)明方法的進(jìn)一步的優(yōu)點(diǎn)是反應(yīng)的副產(chǎn)物是二醇，二醇可以是所述反應(yīng)的溶劑 介質(zhì)，從而避免了其它殘留溶劑的存在，并避免了醇例如乙醇作為副產(chǎn)物的存在，根據(jù) W02007/0001385的實(shí)施例7和9,醇例如乙醇看起來促進(jìn)了固體形式H2-2。
[0040] 所述酰胺化反應(yīng)可以使用無水氨，氨水，銨鹽例如氫氧化銨、氯化銨、溴化銨、硫酸 銨等進(jìn)行。
[0041] 本發(fā)明方法的酰胺化反應(yīng)可以在水性介質(zhì)和/或在有機(jī)溶劑中進(jìn)行。
[0042] 所述有機(jī)溶劑可以是醇、二醇、醚、酯、腈、烴、氯代烴等和其混合物。
[0043]所述有機(jī)溶劑可以是醇，例如甲醇、乙醇、異丙醇、丁醇等。
[0044]所述有機(jī)溶劑可以是醚例如叔丁基甲醚，酯例如乙酸乙酯或乙酸異丙酯，腈例如 乙腈、烴例如甲苯或二甲苯、氯代烴例如氯仿、二氯甲烷、氯苯等。
[0045] 二醇溶劑是優(yōu)選的，因?yàn)樗鼈兲峁┕腆w形式N-1的阿哌沙班，并且因?yàn)槭褂檬紿0-R-OH的二醇溶劑，其中R與式（II)的化合物中的R相同，反應(yīng)的副產(chǎn)物是與所述溶劑相同的 化合物，從而避免監(jiān)測到另外的殘留溶劑。
[0046] 所述有機(jī)溶劑可以是選自以下的二醇：乙二醇、1，2_丙二醇、1，3_丙二醇、二甘醇、 PEG200、聚丙二醇、甘油。
[0047]根據(jù)本發(fā)明方法的優(yōu)選實(shí)施方案，優(yōu)選的溶劑是乙二醇、1，2_丙二醇、1，3_丙二 醇、二甘醇。
[0048]在本發(fā)明方法中使用的式H0-R-OH的二醇溶劑可以具有與式（II)的化合物的R基 團(tuán)有相同含義的R基團(tuán)，或者可選地，R可以具有不同的含義。根據(jù)所述實(shí)施方案，式H0-R-OH 的二醇溶劑具有與式(II)的化合物的R基團(tuán)有相同含義的R基團(tuán)。
[0049] 在式（II)的化合物中，所述R基團(tuán)選自直鏈或支鏈C2_C6烷基、-〇1 2-〇1(01〇-〇12-、- (Ri) nR1-，其中R1是直鏈或支鏈C2-C4烷基，n是1~6的整數(shù)。
[0050] 所述直鏈或支鏈c2-c6烷基是選自以下的基團(tuán)：-01 2012-、-012012012-、-01 2(013)-CH2-、- (CH2) 4-、_CH( CH3) CH2CH2-、-CH2CH (CH3) CH2、-CH2CH2CH (CH3) -、- (CH2) 5-、- (CH2) 6-等。
[0051] 其中n是1~6的整數(shù)并且其中R1是直鏈或支鏈C2-C4烷基的基團(tuán)-(#0)#是選自以 下的基團(tuán)：_ (CH2CH2O)nCH2CH2-、_(CH2CH2CH2O) nCH2CH2CH2-、_ (CH(CH3) CH20)nCH(CH3) CH2-、_ (CH2CH (CH3) 0) nCH2CH (CH3) _、_ (CH2CH2CH2CH2O) nCH2CH2CH2CH2-等。
[0052] 根據(jù)一種優(yōu)選的實(shí)施方案，所述基團(tuán)-(妒0) nR1-是(CH2CH20) nCH2CH2-。
[0053]根據(jù)本發(fā)明的一種優(yōu)選的實(shí)施方案，式(II)的化合物是一種分離的化合物，即，一 種從用于制備所述化合物的反應(yīng)混合物中分離出來的化合物。因此，所述式（II)的化合物 通常是固體形式或者分離的油的形式。
[0054]根據(jù)本發(fā)明的一種優(yōu)選的實(shí)施方案，式（II)的化合物是一種具有高于80%的純度 的化合物，所述純度以HPLC A/A%測量，例如通過使用實(shí)施例13的分析方法測量。
[0055] 本發(fā)明的方法是在60 °C和140 °C之間、優(yōu)選在80 °C和120 °C之間、更優(yōu)選在80 °C和 90°C之間的溫度下進(jìn)行的。
[0056] 當(dāng)酰胺化反應(yīng)在80°C和90°C之間進(jìn)行時(shí)，反應(yīng)在大約3小時(shí)內(nèi)完成（即轉(zhuǎn)化高于 99%)〇
[0057]根據(jù)一種優(yōu)選的實(shí)施方案，本發(fā)明的方法進(jìn)一步包括利用式（III)的化合物的酯 交換反應(yīng)制備式(II)的化合物的步驟：
[0059] 其中R選自直鏈或支鏈C2-C6烷基、-CH2-CH( OH) -CH2-和-(妒0) J?1-，其中R1是直鏈或 支鏈C2-C4烷基，并且n是1~6的整數(shù)，
[0061 ] 其中，R2是直鏈或支鏈CrC6烷基。
[0062]因此，通過式（III)的化合物與二醇、與聚二醇或與甘油反應(yīng)來進(jìn)行所述式（III) 的化合物的酯交換以提供式(II)的化合物。
[0063] 所述酯交換反應(yīng)通過式0H-R-OH的二醇的反應(yīng)來進(jìn)行，其中R選自直鏈或支鏈&-〇5 烷基、-CH2-CH (OH) -CH2-和-(#0) J?1-，其中R1是直鏈或支鏈C2-C4烷基并且n是1~6的整數(shù)。 [0064] 優(yōu)選的二醇是乙二醇、1，2-丙二醇，1，3-丙二醇和二甘醇。
[0065] 優(yōu)選的聚二醇是聚乙二醇（200)(簡稱PEG200)和丙二醇SOCKPPGSOOhPEG具有以 下化學(xué)結(jié)構(gòu) H〇-(CH2CH2〇)nCH2CH2-〇H。
[0066] 所述酯交換反應(yīng)可在7.5~10.0之間的pH下、優(yōu)選在8.0~9.5之間的pH下進(jìn)行。 [0067]所述酯交換反應(yīng)可以在堿存在下進(jìn)行，所述堿優(yōu)選為無機(jī)堿，例如優(yōu)選NaHC03或 KH 2P〇4,即磷酸氫二鉀。
[0068]所述酯交換反應(yīng)優(yōu)選在磷酸氫二鉀存在下進(jìn)行，因?yàn)樗峁└吆透斓霓D(zhuǎn)化。 [0069] 所述酯交換反應(yīng)在60 °C和120 °C之間、優(yōu)選在70 °C和80 °C之間的溫度下、更優(yōu)選在 大約75 °C下進(jìn)行。
[0070] 所述酯交換反應(yīng)使用過量的反應(yīng)物二醇作為反應(yīng)溶劑來進(jìn)行。
[0071] 根據(jù)一種可選的合成途徑，式(II)的化合物可以通過式(IV)的化合物的內(nèi)環(huán)合來 制備：
[0073] 其中R選自直鏈或支鏈C2-C6烷基，-CH2-CH( OH) -CH2-和-(妒0) J?1-，其中R1是直鏈或 支鏈C2-C4烷基，并且n是1~6的整數(shù)。
[0074]式(IV)的化合物可以通過修改用于制備相應(yīng)的酯的已知的現(xiàn)有技術(shù)方法來制備， 以制備所述阿哌沙班二醇酯。使用該合成方法，可以制備式（II)的化合物，以避免之前式 (III)的阿哌沙班酯的制備。參見以下的反應(yīng)方案。
[0076]可以在堿例如t-BuOK存在下進(jìn)行式（IV)的化合物的環(huán)化，以提供式（II)的化合 物。
[0077] 此外，式（II)的化合物可以根據(jù)其他合成方法制備，然而，所述其他合成方法不一 定涉及式(I II)的化合物或者酯中間體的制備。
[0078] 在下面的反應(yīng)方案中描述了通過腙起始原料的二醇酯的反應(yīng)直接合成式（II)的 化合物的實(shí)施例。
[0080] 其中R選自直鏈或支鏈c2-c6烷基，-CH2-CH( OH) -CH2-和-(妒0) nR1-，其中R1是直鏈或 支鏈C2-C4烷基，并且n是1~6的整數(shù)。
[0081]根據(jù)優(yōu)選的實(shí)施方案，在本發(fā)明的用于制備阿哌沙班的方法中和/或在從式(III) 的化合物開始制備式（II)的化合物的進(jìn)一步的步驟中，式（II)的化合物中的R基團(tuán)選自-〇12〇12-、-〇1 2〇1(〇13)-、〇1(〇13)〇12-、-(〇1 2)3-和〇12〇120〇12〇1 2-，或者根據(jù)另外的實(shí)施方案， 所述R基團(tuán)選自-CH2CH2-、- (CH2) 3-和 CH2CH2OCH2CH2-。
[0082]所述式（II)的化合物可以方便地通過其中R例如為乙基的式（III)的化合物分別 與乙二醇、1，2_丙二醇、1，3_丙二醇和二甘醇或者根據(jù)另外的實(shí)施方案，分別與乙二醇、1， 3_丙二醇和二甘醇的酯交換而制備。
[0083]通過與1，2-丙二醇的酯交換從式（III)的化合物制備的式（II)的化合物是具有1: 2比例的兩種同分異構(gòu)體的混合物，其中R是-CH( CH3) CH2，稱為同分異構(gòu)體A，或者R是-CH2CH (CH3)-，稱為同分異構(gòu)體B，即，所述兩種同分異構(gòu)體分別具有下列結(jié)構(gòu)：
[0085]已經(jīng)觀察到，根據(jù)實(shí)施例13中所述的分析方法，同分異構(gòu)體A( R = _CH( CH3) CH2_的 化合物（II))具有RRT = 1，18，同時(shí)根據(jù)同樣的分析方法，同分異構(gòu)體B (R=-CH2CH( CH3)-的 化合物（II))具有RRT = 1，16。
[0086] 優(yōu)選其中R是-CH2CH(CH3)_的式（II)的化合物，即同分異構(gòu)體B，因?yàn)檫@是通過式 (III)的化合物與1，2-丙二醇的酯交換反應(yīng)制備的主要的同分異構(gòu)體化合物。
[0087]相反，通過與乙二醇的酯交換從式（III)的化合物制備的式（II)的化合物只具有 下面的一種結(jié)構(gòu)：
[0089] 根據(jù)本發(fā)明方法的一種優(yōu)選的實(shí)施方案，所述式（II)的化合物的R取代基選自-CH2CH2- ^ -CH2CH( CH3) - ^ -CH (CH3) CH2- ^ - (CH2) 3-^P-CH2CH2〇CH2CH2- 0
[0090] 根據(jù)本發(fā)明方法的另一種優(yōu)選的實(shí)施方案，所述式(II)的化合物的R取代基選自- CH2CH2-、- (CH2) 3-和-CH2CH2OCH2CH2- 〇
[0091 ]因此，本發(fā)明的目的還在于式(II)的化合物：
[0093] 其中R選自直鏈或支鏈C2-C6烷基，其中R1是直鏈或支鏈C 2-C4烷基并且n是1~6的整 數(shù)的-(R1。) nR1-，和基團(tuán)-CH2-CH (OH) -CH2-。
[0094] 根據(jù)本發(fā)明式（II)化合物的一種優(yōu)選的實(shí)施方案，R選自-CH2CH2-、-CH2CH(CH 3)-、 CH( CH3) CH2-、_ (CH2) 3-和-CH2CH2OCH2CH2- 〇
[0095]根據(jù)本發(fā)明式(II)化合物的另一種優(yōu)選的實(shí)施方案，R選自-CH2CH2-、-(CH 2)3-和-CH2CH2OCH2CH2-0
[0096] 因此，本發(fā)明式（II)的化合物可以用于式（I)的阿哌沙班和其溶劑合物或水合物 的制備。
[0097] 根據(jù)本發(fā)明的一種實(shí)施方案，用于制備式（I)的阿哌沙班和其溶劑合物或水合物 的方法包括以下步驟：
[0099] a)式(III)的化合物的酯交換反應(yīng)：
[0101] 其中，R2是直鏈或支鏈&-C6烷基，
[0102] 以提供式(II)的化合物：
[0104] 其中R選自直鏈或支鏈C2-C6烷基，-CH2-CH( OH) -CH2-和-(妒0) J?1-，其中R1是直鏈或 支鏈C2-C4烷基，并且n是1~6的整數(shù)，
[0105] b)分離式(II)的化合物，
[0106] c)式(II)的化合物的酰胺化反應(yīng)：
[0108]以提供式（I)的阿哌沙班。
[0109] 根據(jù)本發(fā)明方法的上述實(shí)施方案，式（II)的化合物是一種對于阿哌沙班的制備有 用的中間體，其允許在通過阿哌沙班酯的直接酰胺化反應(yīng)進(jìn)行的已知的阿哌沙班合成中插 入一個(gè)另外的步驟。
[0110] 實(shí)際上，從式(III)的阿哌沙班酯開始制備和分離式（II)的化合物，能夠提高所述 式(II)的中間體的純度，由此提高最終阿哌沙班的純度。
[0111] 換句話說，與已知的將式(III)的阿哌沙班酯直接轉(zhuǎn)化成阿哌沙班的方法相比，根 據(jù)所述優(yōu)選的實(shí)施方案進(jìn)行本發(fā)明的方法，其中式（II)的中間體被分離，所述方法允許提 高最終產(chǎn)物阿哌沙班的純度。
[0112] 步驟(b)中式（II)的化合物的分離可以通過已知的有機(jī)合成技術(shù)(包括沉淀和過 濾或離心)或可選地通過相分離來進(jìn)行。
[0113] 在步驟(b)結(jié)束時(shí)，所述式（II)的化合物可以任選地在烘箱內(nèi)或在干燥過濾器內(nèi) 進(jìn)行干燥。
[0114] 此外，分離式（II)的化合物可用于滿足監(jiān)管機(jī)構(gòu)的要求，所述監(jiān)管機(jī)構(gòu)要求所述 方法由至少三個(gè)合成步驟組成。
[0115] 根據(jù)剛才提到的本發(fā)明方法的優(yōu)選實(shí)施方案，一種優(yōu)選的方法是其中式（III)的 化合物中的R2是乙基。
[0116] 根據(jù)剛才提到的本發(fā)明方法的優(yōu)選實(shí)施方案，一種優(yōu)選的方法是其中式(II)的化 合物中的 R選自-CH2CH2-、_CH2CH( CH3) _、CH (CH3) CH2-、_ (CH2) 3-和-CH2CH2OCH2CH2-。
[0117]根據(jù)剛才提到的本發(fā)明方法的優(yōu)選實(shí)施方案，另一種優(yōu)選的方法是其中式(II)的 化合物中的 R選自-CH2CH2-、- (CH2) 3-和-ch2ch2〇ch2ch2-。
[0118] 根據(jù)剛才提到的本發(fā)明方法的優(yōu)選實(shí)施方案，一種優(yōu)選的方法是其中式（III)的 化合物中的R2是乙基并且其中式（II)的化合物中的R選自-CH 2CH2-、-CH2CH( CH3) -、CH( CH3) CH2-、_ (CH2) 3-和-CH2CH2OCH2CH2-。
[0119] 根據(jù)剛才提到的本發(fā)明方法的優(yōu)選實(shí)施方案，另一種優(yōu)選的方法是其中式（III) 的化合物中的R2是乙基并且其中式（II)的化合物中的R選自-CH2CH2-、- (CH2) 3-和-CH2CH2OCH2CH2-0
[0120] 進(jìn)行剛才提到的本發(fā)明優(yōu)選實(shí)施方案的步驟(a)和(c)的條件與上面已經(jīng)描述的 用于本發(fā)明方法(包括其優(yōu)選的實(shí)施方案)的條件是相同的。
[0121] 正如利用化學(xué)合成獲得的任何化合物，阿哌沙班和其溶劑合物或水合物可能包含 少量被稱為雜質(zhì)的外來化合物。這些雜質(zhì)可能是原材料、合成中間體、反應(yīng)副產(chǎn)物和降解產(chǎn) 物等。
[0122] 所述阿哌沙班的雜質(zhì)正如任何其他的藥物活性成分或者相關(guān)藥物的雜質(zhì)(被稱為 "藥物雜質(zhì)"）可能影響藥物的效力和安全性兩者，在極端情況下，所述雜質(zhì)甚至可能對患者 是有害的。通過基于后面的化學(xué)反應(yīng)的生產(chǎn)方法生產(chǎn)的活性成分如阿哌沙班的純度對于商 業(yè)化來說是一種關(guān)鍵因素。美國食品藥品監(jiān)督管理局（US Food and Drug Administration) (FDA)和歐洲藥品管理局（European Medicinal Agency) (EMA)以及相關(guān) 的藥典要求雜質(zhì)保持在給定的限值之下。
[0123] 化學(xué)反應(yīng)的產(chǎn)物很少是一種具有足以滿足監(jiān)管標(biāo)準(zhǔn)的純度的單一化合物。由于反 應(yīng)中使用的試劑的二次反應(yīng)產(chǎn)生的副產(chǎn)物也可以存在于分離的產(chǎn)物中。在活性成分例如阿 哌沙班的生產(chǎn)方法的某些步驟中，通常利用高效液相色譜法(HPLC)、氣相色譜法(GC)或者 薄層色譜法(TLC)分析純度，用于明確它是否適合后來的治療并最終在藥物產(chǎn)品中使用。
[0124] 通常，通過光譜學(xué)方法鑒定雜質(zhì)，因此，色譜峰位置例如色譜圖的色譜峰位置或者 TCL板上的點(diǎn)與所述雜質(zhì)相關(guān)。
[0125] -旦將峰位置與特定的雜質(zhì)相關(guān)后，可以針對色譜圖中所述雜質(zhì)的相對峰位置在 樣品中鑒定所述雜質(zhì)，其中以在色譜柱中注入樣品與洗脫雜質(zhì)通過檢測器之間的分鐘數(shù)測 量色譜圖中的峰位置。色譜圖中的峰位置被稱為保留時(shí)間，保留時(shí)間之間的比率被稱為相 對保留時(shí)間。
[0126] 制藥領(lǐng)域的技術(shù)人員知曉相對純的化合物可以被用作參比標(biāo)準(zhǔn)品。參比標(biāo)準(zhǔn)品和 參比標(biāo)記物相似，區(qū)別在于后者不僅可以用于檢測雜質(zhì)，也可以用于定量活性成分樣品中 存在的雜質(zhì)的量這一事實(shí)。
[0127] 本領(lǐng)域技術(shù)人員知道，通過了解過程雜質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)、合成方法并例如用D0E確定 影響最終產(chǎn)物中雜質(zhì)的量的參數(shù)，顯著改進(jìn)了所述過程雜質(zhì)的管控。阿哌沙班的雜質(zhì)，包括 沒有完全反應(yīng)的中間體，原材料的雜質(zhì)、反應(yīng)副產(chǎn)物、降解產(chǎn)物以及其他產(chǎn)物，可以影響包 含阿哌沙班的藥物形式的品質(zhì)和效力。因此，需要一種確定阿哌沙班樣品中雜質(zhì)水平的方 法和用于移除雜質(zhì)或者限制其含量或者防止其形成的方法。
[0128] 作為本發(fā)明的另一方面，在開發(fā)用于制備阿哌沙班的方法期間，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)式（II) 的化合物傾向于殘留在產(chǎn)物阿哌沙班中，換句話說，式（II)的化合物既是根據(jù)本發(fā)明方法 合成阿哌沙班的起始原料或者中間體，又是阿哌沙班的一種雜質(zhì)。
[0129] 為了減少活性成分中雜質(zhì)的量，必須使用適當(dāng)?shù)姆治龇椒z測其存在，只有在能 夠方便地鑒定、定量雜質(zhì)的情況下，才能夠在之后提供一種能夠防止所述雜質(zhì)形成的合成 方法和/或提供一種用于去除所述雜質(zhì)的方法。然而，這實(shí)質(zhì)上要求提供這種雜質(zhì)的參比標(biāo) 準(zhǔn)品或參比標(biāo)記物。為此目的，可以利用上述方法方便地制備式（II)的化合物。
[0130] 因此，本發(fā)明式（II)的化合物可以用作參比標(biāo)記物或者參比標(biāo)準(zhǔn)品，用于鑒定和/ 或定量在阿哌沙班和其溶劑合物或水合物中的所述式(II)的化合物。
[0131]式（II)的化合物實(shí)際上可以根據(jù)下面的分析方法用于鑒定和/或定量在阿哌沙班 和其溶劑合物或水合物中的所述式(II)的化合物。
[0132] -種用于檢測或鑒定在阿哌沙班或其溶劑合物或水合物中的式（II)的化合物的 方法，包括：
[0133] a)向阿哌沙班樣品或其溶劑合物或水合物中加入已知量的式(II)的化合物，
[0134] b)進(jìn)行步驟a)的阿哌沙班樣品或其溶劑合物或水合物的HPLC分析，
[0135] c)檢測式（I)的化合物的HPLC峰；
[0136] 或，
[0137] a 1)利用HPLC分析式（II)的化合物，
[0138] bl)利用HPLC分析阿哌沙班樣品或其溶劑合物或水合物，
[0139] cl)通過比較保留時(shí)間或相對保留時(shí)間，檢測式(II)的化合物的HPLC峰。
[0140] 實(shí)質(zhì)上使用以上方法，其允許在阿哌沙班樣品或其溶劑合物或水合物的色譜圖中 鑒定關(guān)于式(II)的雜質(zhì)化合物的峰。該分析可能是HPLC類型的。
[0141] 除了鑒定在阿哌沙班或溶劑合物或水合物中的雜質(zhì)峰，一種用于定量在阿哌沙班 或其溶劑合物或水合物中的式(II)的化合物的方法，包括：
[0142] i)利用HPLC在具有未知量的式（II)的化合物的阿哌沙班或其溶劑合物或水合物 中測量與式(II)的化合物相對應(yīng)的峰面積；
[0143] ii)利用HPLC測量與含有已知量的式（II)的化合物的參比標(biāo)準(zhǔn)品相對應(yīng)的峰面 積；
[0144] iii)比較步驟a)中測量的面積與步驟ii)中測量的面積，確定阿哌沙班或其溶劑 合物或水合物中式(II)的化合物的量。
[0145] 由此可見，式（II)的化合物可以用作參比標(biāo)記物或者參比標(biāo)準(zhǔn)品，分別用于鑒定 和/或定量在阿哌沙班或其溶劑合物或水合物中的式(II)的化合物。
[0146] 特別地，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，根據(jù)本發(fā)明的方法生產(chǎn)并且用實(shí)施例13中所述的分析方法測 得具有RRT = 1.16的阿哌沙班的雜質(zhì)是下列結(jié)構(gòu)的同分異構(gòu)體B，而具有RRT = 1.18的雜質(zhì) 是下列結(jié)構(gòu)的同分異構(gòu)體A:
[0148] 作為與通過本發(fā)明方法生產(chǎn)的阿哌沙班的固體形式有關(guān)的一個(gè)方面，進(jìn)行一個(gè)研 究，所述研究的目的是制備阿哌沙班固體形式N-1。
[0149] 通過重復(fù)W02007/0001385的實(shí)施例6的實(shí)驗(yàn)，但不加入形式N-1的晶種，已獲得、制 備和表征了式(V)的阿哌沙班1，2_丙二醇半溶劑合物：
[0151] 式(V)的具有化學(xué)計(jì)量比（2:1)的阿哌沙班1，2_丙二醇溶劑合物是白色固體。
[0152] 之后，進(jìn)行一個(gè)研究，所述研究的目的是找到一種從式(V)的阿哌沙班1，2_丙二醇 半溶劑合物獲得N-1形式的方法。
[0153] 使用阿哌沙班1，2_丙二醇半溶劑合物(縮寫為APX ? PG)作為起始原料的篩選，在 所有情況下都使用形式N-1作為晶種進(jìn)行。使用ICH指南第3類溶劑(除了甲醇，ICH指南第2 類允許3000ppm的殘留溶劑)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。APX ? PG在常見工業(yè)溶劑中的低溶解度限制了結(jié)晶 的使用。
[0154] 在表1中收集了從APX ? PG提供阿哌沙班形式N-1的成功的實(shí)驗(yàn)。
[0155] 表1:從APX ? PG制備阿哌沙班形式N-1的方法：
[0157] 漿化看來是制備形式N-1的最好程序，因?yàn)樵诮Y(jié)晶中需要大量的溶劑（36-60體 積)。
[0158] 由于其更低的沸點(diǎn)和良好的工業(yè)接受性，選擇乙醇和異丙醇作為溶劑來將漿化實(shí) 驗(yàn)按比例放大到1克。通過XRro監(jiān)測轉(zhuǎn)化：
[0159] -在室溫下，在乙醇中所述轉(zhuǎn)化在1小時(shí)后完成。
[0160] _在異丙醇中，所述轉(zhuǎn)化慢得多：在50°C下5小時(shí)后，轉(zhuǎn)化沒有完成，但是在一夜之 后完成。
[0161] 通過1H-NMR在阿哌沙班形式N-1中沒有檢測到丙二醇。遺憾的是，在兩個(gè)實(shí)驗(yàn)中通 過 1H-NMR檢測到殘留溶劑(大約0.8重量％的乙醇和0.7重量％的異丙醇）AMR分析表明，當(dāng) 使用乙酸乙酯時(shí)也有0.7重量％的殘留溶劑。
[0162] 通過結(jié)晶和漿化在乙醇中獲得的形式N-1的1H-匪R分析表明，在結(jié)晶情況下殘留 溶劑的量更低(0.4重量％，而不是0.8重量％ )。制備方法看起來對最終殘留溶劑的量具有 某些影響(或許是由于聚集體的不同粒度或者種類）。
[0163] 通常，根據(jù)本發(fā)明方法制備的阿哌沙班形式N-1具有0.05%~0.1 %之間的水含 量。
[0164] 實(shí)驗(yàn)部分
[0165] 起始原料阿哌沙班乙酯可根據(jù)W02007/001385的實(shí)施例5制備。
[0166] 實(shí)施例1:從阿哌沙班乙酯制備式(V)的阿哌沙班1,2-丙二醇半溶劑合物。
[0168] 在通過氮?dú)舛杌母邏焊醒b載阿哌沙班乙酯（15g，1.0當(dāng)量)和丙二醇（1，2_丙 二醇，135毫升），并且用氨在p = 4巴和T = 80/85°C下加壓該容器6小時(shí)。然后將混合物轉(zhuǎn)移 到圓底燒瓶中，冷卻到45/50°C并且用水(85毫升)稀釋。在T = 45/50°C下攪拌額外2小時(shí)后， 將懸浮液冷卻到20/25 °C持續(xù)10小時(shí)并過濾。將濕濾餅用水(2 X 30毫升)洗滌。將固體在T = 75°C下在真空下干燥8小時(shí)以提供式(V)的阿哌沙班1，2_丙二醇半溶劑合物（13.3g，0.86當(dāng) 量）< 3m.p.l95tC</H-Mffi(400MHz，CDCl3，ppm)，S:7.49(d，J = 9Hz，2H)、7.35(d，J = 8Hz，2H)、 7.28(d，J = 8Hz，2H)、6.95(d，J = 9Hz，2H)、6.91(s，lH)、5.91(s，lH)、4.13(t，J = 8Hz，2H)、 3.84化8,3肝0.51101丙二醇）、3.62(13111，211+0.511011丙二醇）、3.39(13111，了 = 8抱，211+0.511011 丙二醇），2,57化8,2肝111〇12丙二醇）、1.95卬8,410，1.14((1，了 = 6.4抱，1.511〇13丙二醇）。 13C NMR和DEPT 135NMR(100MHz，CDCl3，ppm)，S:170.3(C)、163.8(C)、159.9(C)、157.4(C)、 141?4(C)、140?7(C)、140?0(C)、133?4(C)、132.5(C)、126.8(CH)、126.2(CH)、126.5(CH)、 125.9(CH)、113.8(CH)、68.3(CH)、68.1(CH2)、55.6(CH 3)、51.6(CH2)、51.2(CH2)、32.8(CH2)、 23.5(012)、21.4(012)、21.3(012)、18.8(013)?！?1-]\^ m/z = 460([M+H] + )<JR(ATR，cm-4 : 3447、3145、2940、2860、1687、1631、1543、1512、1465、1441、1401、1380、1350、1326、1297、 1243、1170、1144、1111、1027、1016、982、945、831、812、761、705。父-1^)(29°):6.6°、7.6°、 8.1°、9.9°、11.7°、12.7°、13.7°、14.5°、15.1°、15.6°、16.3°、16.9°、17.2°、17.9°、18.2°、 19.5°、20.0°、20.5°、20.8°、21.4°、22.8°、23.8°、24.8°、25.5°、29.0°、31.2°、33.0°。
[0169] 對W02007/001385的實(shí)施例6進(jìn)行多次修改而不加入阿哌沙班形式N-l的晶種，始 終提供式(V)的阿哌沙班1，2-丙二醇半溶劑合物。
[0170] 這與專利公布W02013/119328的教導(dǎo)一致，在W02013/119328中，在沒有用形式N-1 接種的情況下獲得阿哌沙班形式I，即阿哌沙班1，2-丙二醇半溶劑合物。
[0171] 實(shí)施例2:從阿哌沙班1，2-丙二醇半溶劑合物制備阿哌沙班形式N-1 -一不用形式 N-1接種。
[0173]在圓底燒瓶中裝載阿哌沙班1，2_丙二醇半溶劑合物（10克，1.0當(dāng)量)和乙醇(400 毫升），將該混合物加熱到回流4小時(shí)。將懸浮液緩慢冷卻到20/25°C，在此溫度下攪拌8小 時(shí)，然后用乙醇（2 X 20毫升)過濾洗滌。將濕固體在75 °C下在真空下干燥8小時(shí)，提供8.1克 的阿哌沙班N-1 形式（0.87當(dāng)量hmp 237°C</H-匪R(400MHz，DMS0-d6，ppm)，S:7.74(s，lH)、 7.53(d，J=12Hz，2H)、7.47(s，lH)、7.37(d，J = 8Hz，2H)、7.30(d，J=12Hz，2H)、7.02(d，J = 8Hz，2H)、4.07(t，J = 8Hz，2H)、3.82(s，3H)，3.61(t，J = 4Hz，2H)、3.23(t，J = 8Hz，2H)、2.41 (t，J = 4Hz，2H)、1 ? 87(m，4H)。13C-NMR和DEPT 135NMR( 100MHz，DMS〇-d6，ppm)，S: 169 ? 3(C)、 163.7(C)、159.6(C)、157.1(C)、142.0(C)、141.9(C)、140.3(C)、133.5(C)、133.1(C)、127.3 (C)、126.8(CH)、126.5(CH)、125.7(CH)、113.9(CH)、56.0(CH 3)、51.3(CH2)、33.1(CH2)、23.5 (012)、21.5(012)、21.4(012)。￡51-]^ m/z = 460([M+H] + )。
[0174] 實(shí)施例3:阿哌沙班形式N-l的表征。
[0175] 通過幾種技術(shù)表征了通過在乙醇中結(jié)晶獲得的阿哌沙班形式N-l。
[0176] FT-IR
[0177] 利用配備有光束分離器KBr系統(tǒng)、35mW He-Ne激光器作為激發(fā)光源和DTGS KBr檢 測器的Thermo Nicolet Nexus 870FT-IR記錄FTIR光譜。所述光譜在4cm-1分辨率下在32次 掃描中獲得。
[0178] IR(KBr):v=3483(m)、3311(m)、2909(m)、2866(W)、1683(s)、1630(s)、1595(s)、 1519(m)、1295(m)、1256(m)、975(m)、848(s)、813(m)、668(m)、467(m)cm-H 參見圖 2)。
[0179] DSC
[0180] 利用Mettler DSC822e記錄DSC分析。將1.6770毫克的樣品稱取到具有針孔蓋的40 yL鋁坩堝中，并在氮?dú)?50毫升/分鐘）下，以10°C/分鐘從30°C加熱到300°C。
[0181] 形式N-1的特征是通過DSC分析（10 °C/分鐘）測量到的對應(yīng)于在235.68 °C (熔化焓-106.66J/g)開始的熔點(diǎn)的吸熱尖峰。
[0182] TGA
[0183] 在熱重分析儀MettlerTGA/SDTA85^中記錄熱重分析。將4.2206毫克的樣品稱取 到具有針孔蓋的70此氧化鋁坩堝中，并在氮?dú)猓?0毫升/分鐘）下，以10°C/分鐘從30°C加熱 至 |J400°C。
[0184] 形式N1的熱重分析顯示在熔點(diǎn)之前(在130 °C和230 °C之間）0.23 %的重量損失。這 個(gè)重量損失可能來自于乙醇痕量的消除。
[0185] X-RPD
[0186] 以布拉格-布倫塔諾（Bragg-Brentano )幾何學(xué)，使用具有Cu Ka福射的 PANalytical X'Pert衍射儀進(jìn)行XRPD分析。該系統(tǒng)配備有單維的實(shí)時(shí)的多條檢測器。在每 分鐘17.6°的掃描速率下從3°到40° (20)記錄衍射圖（參見圖5)。選擇的峰的列表（只顯示具 有大于或等于1 %的相對強(qiáng)度的峰）： 位置 相則強(qiáng)度 『。2Th，l [%] 8,4 9 10.0 4
[0187] 10.5 5 11.1 5 12.3 ：8 41 13.9 5.8 15.1 2 16.2 14 16.9 100 18.4 30 18.8 14 19.6 8 21,1 11 21.5 12 22,0 16 22.2 29 23.6 2. 24.0 4
[0188] 24.7 8 25.3 4 26,2 1 2M 8 27.7 5. 28.0 3 28.6 4 29,2 6 29.9 5 30.6 3 31，） 1 32.6 5 35.1 .3
[0189] 在專利US7396932B2中，形式N-1通過SCXR和13C SSNMR描述使用SCXR數(shù)據(jù)（晶胞， 對稱性和原子位置），利用Mercury程序模擬XRPD。將該模擬的XRH)與實(shí)施例2中獲得的實(shí)驗(yàn) 性XRH)進(jìn)行比較，證實(shí)了阿哌沙班N-1形式的形成。
[0190] 卡爾費(fèi)歇爾(Karl Fischer)
[0191] 用Metrohm 787KF Trinito記錄卡爾費(fèi)歇爾分析。將產(chǎn)品溶解在甲醇中。使用以下 反應(yīng)物分析兩個(gè)樣品：Hydranal_復(fù)合物5(Hydranal_Composite 5) (Riedel de.Ha§n. Ref. 34805)，Hydranal 快速甲醇（Hydranal Methanol Rapid) (Riedel deHaSn.Ref. 37817) 和Hydranal水標(biāo)準(zhǔn) 1.0(Hydranal Water Standard 1.0)(Riedel deHa&nRef.34828,用于 計(jì)算該因子）。
[0192] 在實(shí)施例2中制備的形式N-1的含水量是0.9%。
[0193] 實(shí)施例4:從阿哌沙班1，2-丙二醇半溶劑合物在更大規(guī)模上制備阿哌沙班形式N-1--用形式N-1接種。
[0195] 向配備有溫度計(jì)和機(jī)械攪拌器的三頸圓底燒瓶中加入如在實(shí)施例1中制備的式 (V)的阿哌沙班1，2-丙二醇半溶劑合物（85.1克；171毫摩爾），和乙醇/水（2 :1)的混合物 (850毫升，10體積）。將得到的懸浮液用形式N-1 (如在實(shí)施例2中制備的)接種，并將它在50 °C下加熱。將該混合物在50°C下保持2.5小時(shí)，然后將它冷卻到室溫。將該漿料在室溫下攪 拌2~3小時(shí)。將固體用燒結(jié)漏斗(孔隙率2-非常好的過濾)過濾，用乙醇:水(2:1)(170毫升， 2體積）、水（170毫升，2體積)洗滌，并在50°C下在真空下干燥過夜。得到作為灰白色粉末的 阿哌沙班形式N-1 (65.4克，83 %收率）。咕-NMR分析顯示該產(chǎn)品含有0.13 %的殘留乙醇。 K.F. 0.1 %。通過HPLC測定化學(xué)純度:99.4%。起始的阿哌沙班1，2-丙二醇半溶劑合物具有 98.3%的純度。
[0196] 重復(fù)上述程序，從具有95.2 %純度的阿哌沙班1，2-丙二醇半溶劑合物起始，制備 的阿哌沙班形式N-1具有99.5%的純度。
[0197] 實(shí)施例5:合成式(II)的化合物，其中R是-CH2CH2_。
[0199] 將阿哌沙班乙酯（10.0克，1.0當(dāng)量）、磷酸氫二鉀(K2HP〇4,17.8克，5.0當(dāng)量)和乙二 醇（1，2 -乙二醇，7 0毫升）的混合物加熱到T = 7 5 °C 10小時(shí)，然后冷卻至室溫。裝入水（7 0毫 升)和二氯甲烷(70毫升），將由此產(chǎn)生的兩相溶液在室溫下攪拌10分鐘。一旦將相分開后， 將有機(jī)層用分子篩處理以移除殘留的水，然后在減小的壓力下濃縮成殘?jiān)?。使用由此產(chǎn)生 的固體而無需進(jìn)一步純化(9.0克，0.87 當(dāng)量）</H-NMR(400MHz，DMS0-d6，ppm)，S:7.52(d，J = 12Hz，2H)、7.37(d，J = 8Hz，2H)、7.30(d，J = 8Hz，2H)、7.03(d，J=12Hz，2H)、4.98(t，J = 4Hz，lH)，4.35(t，J = 4Hz，2H)、4.09(t，J = 4Hz，2H)、3.82(s，3H)，3.74(dd，Ji = 4Hz，J2 = 4Hz，2H)、3.60(t，J = 4Hz，2H)、3.24(t，J = 4Hz，2H)、2.40(t，J = 4Hz，2H)、1.85(m，4H)</3C-NMR和DEPT 135匪R(100MHz，DMS〇-d6，ppm)，S: 169.4(C)、162.0(C)、159.8(C)、156.9(C)、 141?9(C)、140?2(C)、139?0(C)、133?5(C)、132.9(C)、127.4(CH)、127.2(CH)、126.8(CH)、 126.5(CH)、114.0(CH)、66.8(CH2)、59.5(CH2)、56.0(CH 3)、51.3(CH2)、51.2(CH2)、33.1 (012)、23.5(012)、21.6(012)、21.4(012)?！?1-]\^ m/z = 505([M+H] + )。
[0200] 實(shí)施例6:合成式（II)的化合物，其中R是-CH( CH3) 2CH2-和-CH2CH (CH3)-。
[0202] 將阿哌沙班乙酯(30.0克，1.0當(dāng)量）、磷酸氫二鉀(K2HP〇4,53.4克，5.0當(dāng)量)和丙二 醇（1，2_丙二醇，210毫升）的混合物加熱到T = 75°C10小時(shí)，然后冷卻至室溫。裝入水(210毫 升)和二氯甲烷(210毫升），將由此產(chǎn)生的兩相溶液在室溫下攪拌10分鐘。一將相分開后，將 有機(jī)層用分子篩處理以移除殘留的水，然后在減小的壓力下濃縮成殘?jiān)?。由此產(chǎn)生的固體 是兩種同分異構(gòu)體(在 1H-NMR表征中分別稱為同分異構(gòu)體A和同分異構(gòu)體B)的1:2混合物， 使用該固體而無需進(jìn)一步純化（25.2g，0.79當(dāng)量VH-NMRGOOMHzJMSO-dhppm)』：？』〗 (111，311(211同分異構(gòu)體4和211同分異構(gòu)體8))、7.37(111，311(211同分異構(gòu)體4和211同分異構(gòu)體 8))、7.30(111，311(211同分異構(gòu)體4和211同分異構(gòu)體8))、7.03(111，311(211同分異構(gòu)體4和211同分 異構(gòu)體幻）、5.12(111，0.511(111同分異構(gòu)體4)、4.96(111，1.511(111同分異構(gòu)體4和111同分異構(gòu)體 B))、4.20(m，2H(2H同分異構(gòu)體B))、4.11 (m，3H(2H同分異構(gòu)體A和2H同分異構(gòu)體B))、3.98 (111，111(111同分異構(gòu)體8))、3.83(111，4.511(311同分異構(gòu)體六和311同分異構(gòu)體8))、3.61(111，311(211 同分異構(gòu)體A和2H同分異構(gòu)體B))，3.26(m，3H(2H同分異構(gòu)體A和2H同分異構(gòu)體B))，1.88(m， 6H(4H同分異構(gòu)體A和4H同分異構(gòu)體B))，1.29(d，J = 4Hz，1.5H(3H同分異構(gòu)體A))，1.17(d，J =4泡，311(311同分異構(gòu)體8))。13(：-匪1?(1001泡，0150-(16，口？111)，5 :169.4、161.8、161.6、 159.8、156.9、141.9、140.2、139.3、139.0、133.5、133.0、127.3、127.2、126.8、126.5、 114.0、72.7、69.9、64.5、64.1、56.0、51.3、51.2、33.1、23.5、21.7、21.4、20.5、16.9(觀察到 兩種同分異構(gòu)體的一些信號(hào)重疊）JSI-MS m/z = 519( [M+H] + )。
[0203] IR(ATR, cm-1)：3329^2934^2839^1708^1673^1627^1592^151U1438^1403^1372^ 1325、1301、1252、1172、1144、1054、1021、988、949、832、788、699。父-1^)(29°):6.7°、8.2°、 8.5°、8.9°、10.5°、11.1°、11.6°、12.1°、13.0°、15.3°、15.9°、16.8°、17.2°、17.9°、19.3°、 20.1°、20.4°、21.3°、22.8°、23.2°、23.8°、24.5°、25.4°、27.9°、30.3°。
[0204] 實(shí)施例7:合成式（II)的化合物，其中R是-CH2CH2OCH2CH 2-。
[0206] 將阿哌沙班乙酯（10.0克，1.0當(dāng)量）、磷酸氫二鉀(K2HP〇4,17.8克，5.0當(dāng)量)和二甘 醇(70毫升）的混合物加熱到T = 75°C10小時(shí)，然后冷卻至室溫。裝入水(70毫升)和二氯甲烷 (70毫升），將由此產(chǎn)生的兩相溶液在室溫下攪拌10分鐘。一旦將相分開后，將有機(jī)層用分子 篩處理以移除殘留的水，然后在減小的壓力下濃縮成殘?jiān)Ｊ褂糜纱水a(chǎn)生的固體而無需進(jìn) 一步純化（10.5克，0.93當(dāng)量）。 111-匪1?(4001〇^，0150-(16，口口111)，5:7.53((1，了 = 8抱，21〇、7.37 (d，J = 8Hz，2H)、7.30(d，J = 8Hz，2H)、7.03(d，J = 8Hz，2H)、4.65(t，J = 4Hz，lH)、4.45(m， 2H)、4.10(d，J = 4Hz，2H)、3.83(s，3H)、3.77(m，2H)、3.53(m，4H)、7.53(d，J = 8Hz，2H)、3.24 (d，J = 8Hz，2H)、2 ? 41 (m，2H)、1 ? 86(m，4H)。13C-NMR和DEPT 135NMR( 100MHz，DMS〇-d6，ppm)， 5:169.4(C)、161.8(C)、159.8(C)、156.9(C)、141.9(C)、140.2(C)、138.8(C)、133.5(C)、 132?9(C)、127?5(C)、127?2(CH)、126.8(CH)、126.5(CH)、114.0(CH)、72.8(CH2)、68.7(CH2)、 64.3(CH2)、60.7(CH2)、56.0(CH 3)、51.3(CH2)、51.2(CH2)、33.1(CH2)、23.5(CH2)、21.6(CH2)、 21.4(CH 2)〇ESI-MS m/z = 549([M+H] + )〇KF = 0.06%〇
[0207] 實(shí)施例8:從式(II)的化合物合成阿哌沙班形式N-l，其中R是-CH2CH2_。
[0209]在通過氮?dú)舛杌母邏焊醒b載實(shí)施例5的化合物（式（II)的化合物，其中1?是_ CH2CH2-，8.0克，1.0當(dāng)量）和丙二醇（1，2-丙二醇，80毫升），將該容器在p = 4巴和T = 80/85°C 下用氨加壓6小時(shí)。然后將混合物轉(zhuǎn)移到圓底燒瓶中，加熱以溶解并且用水（16毫升)稀釋。 在T = 95/100°C下攪拌額外2小時(shí)后，加入更多的水(48毫升），并將溶液用阿哌沙班N-1形式 (如實(shí)施例2或4中制備的）接種。將懸浮液在T = 95/100 °C下攪拌2小時(shí)，冷卻至室溫，并用乙 醇（16毫升)稀釋。在T = 20/25°C下攪拌3小時(shí)后，過濾漿料，并用水(2X8毫升)洗滌濕濾餅。 將固體在T = 65°C下在真空下干燥8小時(shí)，提供阿哌沙班N-1形式（6.7克，0.92當(dāng)量）。 lH)、7.37(d，J = 8Hz，2H)、7.30(d，J=12Hz，2H)、7.02(d，J = 8Hz，2H)、4.07(t，J = 8Hz，2H)、 3.82(s，3H)，3.61(t，J = 4Hz，2H)、3.23(t，J = 8Hz，2H)、2.41(t，J = 4Hz，2H)、1.87(m，4H)。 13C-匪R和DEPT 135匪R(100MHz，DMS〇-d6，ppm)，S : 169.3(C)、163.7(C)、159.6(C)、157.1 (C)、142?0(C)、141?9(C)、140?3(C)、133?5(C)、133?1(C)、127.3(C)、126.8(CH)、126.5 (CH)、125.7(CH)、113.9(CH)、56.0(CH3)、51.3(CH2)、33.1(CH2)、23.5(CH2)、21.5(CH2)、21.4 (OfchESI-MS 111/2 = 460([]\1+11] + )。肝=0.08%。
[0210] 實(shí)施例9 :從式（II)的化合物合成阿哌沙班形式N-l，其中R是-CH(CH3)2CH2-和- ch2ch(ch3)-〇
[0212] 在通過氮?dú)舛杌母邏焊醒b載實(shí)施例6的化合物(式(II)的化合物，其中R是-CH (CH3)2CH 2-和-CH2CH(CH3)-，11克，1.0當(dāng)量)和丙二醇（1，2-丙二醇，100毫升），將該容器在p =4巴和T = 80/85°C下用氨加壓6小時(shí)。然后將混合物轉(zhuǎn)移到圓底燒瓶中，加熱以溶解并用 水(20毫升)稀釋。在T = 95/100°C下攪拌額外2小時(shí)后，加入更多的水(60毫升），并將溶液用 阿哌沙班N-1形式接種。將懸浮液在T = 95/100 °C下攪拌2小時(shí)，冷卻至室溫，并用乙醇(20毫 升)稀釋。在T = 20/25°C下攪拌3小時(shí)后，過濾漿料，并用水(2X10毫升)洗滌濕濾餅。將固體 在T = 65°C下在真空下干燥8小時(shí)，提供阿哌沙班N-1形式(8.6克，0.88當(dāng)量）p.237°C。 1H-NMR(400MHz,DMS0-d6,ppm),8：7.74(saH)^7.53(dJ=12Hz,2H)^7.47(saH)^7.37(dJ = 8Hz，2H)、7.30(d，J=12Hz，2H)、7.02(d，J = 8Hz，2H)、4.07(t，J = 8Hz，2H)、3.82(s，3H)， 3.61(^ = 4抱，21〇、3.23(^ = 8抱，21〇、2.41(^ = 4抱，21〇、1.87(111，41〇。13(：-匪1?和 DEPT 135匪R(100MHz，DMS〇-d6，ppm)，S : 169.3(C)、163.7(C)、159.6(C)、157.1(C)、142.0(C)、 141?9(C)、140?3(C)、133?5(C)、133?1(C)、127?3(C)、126.8(CH)、126.5(CH)、125.7(CH)、 113.9(0〇、56.0(013)、51.3(012)、33.1(012)、23.5(012)、21.5(012)、21.4(012)?！?1-]\^ m/ 2 = 460([]?+11] + )。肝=0.05%。
[0213] 實(shí)施例10:從式(II)的化合物合成阿哌沙班形式N-l，其中R是-CH2CH2OCH 2CH2-〇
[0215] 在通過氮?dú)舛杌母邏焊醒b載實(shí)施例7的化合物（式（II)的化合物，其中1?是_ CH2CH2OCH 2CH2-，9.0克，1.0當(dāng)量)和丙二醇（1，2-丙二醇，105毫升），將該容器在p = 4巴和T = 80/85°C下用氨加壓6小時(shí)。然后將混合物轉(zhuǎn)移到圓底燒瓶中，加熱以溶解并且用水(20毫 升)稀釋。在T = 95/100°C下攪拌額外2小時(shí)后，加入更多的水(60毫升），并將溶液用阿哌沙 班N-1形式接種。將懸浮液在T = 95/100°C下攪拌2小時(shí)，冷卻至室溫，并用乙醇（20毫升)稀 釋。在T = 20/25°C下攪拌3小時(shí)后，過濾漿料，并用水(2X10毫升)洗滌濕濾餅。將固體在T = 65 °C下在真空下干燥8小時(shí)，提供阿哌沙班N-1形式(6.5克，0.86當(dāng)量）mp 237 °C。匪R (400MHz，DMS0-d6，ppm)，S:7.74(s，lH)、7.53(d，J=12Hz，2H)、7.47(s，lH)、7.37(d，J = 8Hz，2H)、7.30(d，J = 12Hz，2H)、7.02(d，J = 8Hz，2H)、4.07(t，J = 8Hz，2H)、3.82(s，3H)， 3.61(^ = 4抱，21〇、3.23(^ = 8抱，21〇、2.41(^ = 4抱，21〇、1.87(111，41〇。13(：-匪1?和 DEPT 135匪R(100MHz，DMS〇-d6，ppm)，S : 169.3(C)、163.7(C)、159.6(C)、157.1(C)、142.0(C)、 141?9(C)、140?3(C)、133?5(C)、133?1(C)、127?3(C)、126.8(CH)、126.5(CH)、125.7(CH)、 113.9(0〇、56.0(013)、51.3(012)、33.1(012)、23.5(012)、21.5(012)、21.4(012)?！?1-]\^ m/ 2 = 460([]?+11] + )。肝=0.06%。
[0216] 實(shí)施例11 :從式（III)的化合物合成阿哌沙班形式N-l，其中R是-CH2CH3(W02007/ 0001385的實(shí)施例6)-比較例
[0218]在通過氮?dú)舛杌母邏焊醒b載阿哌沙班乙酯(65克，1.0當(dāng)量)和丙二醇（1，2_丙 二醇，455毫升），將該容器在p = 4巴和T = 80/85°C下用氨加壓6小時(shí)。然后將混合物轉(zhuǎn)移到 圓底燒瓶中用丙二醇(65毫升)洗滌高壓釜，加熱以溶解并用水（130毫升)稀釋。在T = 95/ 100°C下攪拌額外2小時(shí)后，加入更多的水(390毫升），并將溶液用阿哌沙班N-1形式接種。將 懸浮液在T = 95/100 °C下攪拌2小時(shí)，冷卻至室溫，并用乙醇（130毫升)稀釋。在T = 20/25 °C 下攪拌3小時(shí)后，過濾漿料，并用水(2X130毫升)洗滌濕濾餅。將固體在T = 65°C下在真空下 干燥 8小時(shí)，提供阿哌沙班 N-1 形式(56 ? 0克，0 ? 917 當(dāng)量）。111.?.237°(：。111-匪1?(4001〇^，0150-d6，ppm)，S:7.74(s，lH)、7.53(d，J=12Hz，2H)、7.47(s，lH)、7.37(d，J = 8Hz，2H)、7.30(d，J = 12Hz，2H)、7.02(d，J = 8Hz，2H)、4.07(t，J = 8Hz，2H)、3.82(s，3H)，3.61(t，J = 4Hz，2H)、 3.23(t，J = 8Hz，2H)、2.41(t，J = 4Hz，2H)、1.87(m，4H)<313C-Mfl^PDEPT135Mffi(100MHz， DMS〇-d6，ppm)，S:169.3(C)、163.7(C)、159.6(C)、157.1(C)、142.0(C)、141.9(C)、140.3 (C)、133?5(C)、133?1(C)、127?3(C)、126?8(CH)、126?5(CH)、125.7(CH)、113.9(CH)、56.0 (01 3)、51.3(012)、33.1(012)、23.5(012)、21.5(012)、21.4(012)?！?1-]\^ m/z = 460([M+H ] + )〇KF = 0.08%〇
[0219]實(shí)施例12:與從阿哌沙班乙酯合成阿哌沙班相比，從式（II)的化合物合成阿哌沙 班的反應(yīng)速率。本發(fā)明的效果。
[0220]阿哌沙班可以從式（II)的化合物獲得（如實(shí)施例9、實(shí)施例10或者實(shí)施例11中所 述），或根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)的方法，從阿哌沙班乙酯獲得（如比較例11中所述）（參見W02007/ 0001385的實(shí)施例6)。
[0221] 然而，當(dāng)從式（II)的化合物例如其中R是-CH2CH(CH3)_和CH(CH 3)2CH2-的化合物 (11)(在圖1和表1中稱為丙二醇酯)開始時(shí)反應(yīng)速率快得多。
[0222] 如圖1所示，采用丙二醇酯作為起始原料，在3小時(shí)內(nèi)達(dá)到反應(yīng)完成(轉(zhuǎn)化率>99%) (圖1中的三角形），然而在完全相同的反應(yīng)條件下，至少需要6小時(shí)從阿哌沙班乙酯達(dá)到相 同的轉(zhuǎn)化值(圖1中的圓形）。
[0223] 此外，比較6小時(shí)后收集的數(shù)據(jù)，當(dāng)從丙二醇酯制備阿哌沙班時(shí)，阿哌沙班的量更 高（99.25%對98.95%)。
[0224] 表1中收集了關(guān)于丙二醇酯轉(zhuǎn)化成阿哌沙班和阿哌沙班乙酯轉(zhuǎn)化成阿哌沙班的動(dòng) 力學(xué)研究的詳細(xì)數(shù)據(jù)。
[0225] 表1:比較性動(dòng)力學(xué)研究
[0227] 用HPLC轉(zhuǎn)化率表示數(shù)據(jù)。
[0228] 實(shí)施例13:用于鑒定和定量式（II)的化合物的HPLC方法，其中R是-CH(CH3)2CH 2-(同分異構(gòu)體A)和-CH2CH(CH3)-(同分異構(gòu)體B)，它們是典型的過程中間體和雜質(zhì)。
[0229] 如實(shí)施例10中所提到的，式（II)的化合物，特別是其中R是-CH2CH(CH 3)-和-CH (CH3)2CH2-的式（II)的化合物，也是在通過上述實(shí)施例中描述的方法獲得的分離的阿哌沙 班產(chǎn)物中發(fā)現(xiàn)的典型的雜質(zhì)。
[0230] 可以通過下面的HPLC方法鑒定和監(jiān)測該物質(zhì)：
[0231] 色譜條件： 色譜柱： XIMdge .C:18_ 15:0x.4J_ 毫米 3_..5 微米 色譜柱溫度： 40V 流動(dòng)相A:: 水M:miQ/甲醇_/10 流動(dòng)相B: :乙腈/甲醇_/10 梯度： 時(shí)側(cè)（分鐘）％A %B Q 83,5 16.5 20 5.5 94.5
[0232] 25. 5.5 94.5 后運(yùn)行時(shí)間: 7分鐘 流速： 1.0毫升/分鐘 檢測器: 紫外252納米 注射體積： 5微升 運(yùn)行時(shí)間： 25:分鐘 樣品稀釋液： 二氯甲烷/乙醇/水1:5:4
[0233] 應(yīng)用上述的條件，預(yù)期的保留時(shí)間如下所示：
[0235]式(II)的化合物轉(zhuǎn)化為阿哌沙班的量以面積百分比來確定。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 用于通過式（II)的化合物的酷胺化反應(yīng)制備式（I)的阿贓沙班和其溶劑合物或者水 合物的方法：其中R選自直鏈或者支鏈C2-C6烷基、-C出-CH( 0H) -C出-和-(r1〇 ) nRi-，其中R1是直鏈或者 支鏈C2-C4烷基，并且η是1~6的整數(shù)。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述酷胺化反應(yīng)利用無水氨、氨水或者錠鹽進(jìn)行。3. 根據(jù)權(quán)利要求1~2任一項(xiàng)所述的方法，其中所述酷胺化反應(yīng)在二醇溶劑中進(jìn)行。4. 根據(jù)權(quán)利要求1~3任一項(xiàng)所述的方法，其中所述酷胺化反應(yīng)在大約3小時(shí)內(nèi)、在80°C 和90°C之間的溫度下進(jìn)行。5. 根據(jù)權(quán)利要求1~4任一項(xiàng)所述的方法，其還包括利用式（III)的化合物的醋交換反 應(yīng)制備式(II)的化合物的步驟：其中R選自直鏈或者支鏈C2-C6烷基、-C出-CH( 0H) -C出-和-(Ri〇) nRi-，其中Ri是直鏈或者 支鏈C2-C4烷基，并且η是1~6的整數(shù)，其中R2是直鏈或者支鏈Ci-C6烷基。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其中所述醋交換反應(yīng)在憐酸氨二鐘或化H(X)3存在下進(jìn) 行。7. 根據(jù)權(quán)利要求1~6任一項(xiàng)所述的方法，其包括W下步驟： a) 式(III)的化合物的醋交換反應(yīng)：其中R2是直鏈或者支鏈C1-C6烷基， W提供式(II)的化合物：其中R選自直鏈或者支鏈C2-C6烷基、-C出-CH( 0H) -C出-和-(Ri〇) nRi-，其中Ri是直鏈或者 支鏈C2-C4烷基，并且η是1~6的整數(shù)， b) 分離式(II)的化合物， C)式(II)的化合物的酷胺化反應(yīng)：W提供式(I)的阿贓沙班。8. 根據(jù)權(quán)利要求1~7任一項(xiàng)所述的方法，其中式（II)的化合物的R取代基選自- C出C出-、-C出CH畑3) -、-CH畑3) C出-、-畑2)廠和-C出C出0C出C出-。9. 式(II)的化合物：其中R選自直鏈或者支鏈C2-C6烷基、-C出-CH( 0H) -C出-和-(r1〇 ) nRi-，其中R1是直鏈或者 支鏈C2-C4烷基，并且η是1~6的整數(shù)。10. 根據(jù)權(quán)利要求9所述的式（II)的化合物，其中R選自-CH2C出-、-CH2CH(C出）-、-CH (CH3) CH2-、- (C出）3-和-CH2C出 OC出 CH2-。11. 利用式（III)的化合物的醋交換反應(yīng)制備根據(jù)權(quán)利要求9~10任一項(xiàng)所述的式(II) 的化合物的方法：其中R2是直鏈或者支鏈C2-C6烷基。12. 根據(jù)權(quán)利要求9~10任一項(xiàng)所述的式(II)的化合物在制備式（I)的阿贓沙班和其溶 劑合物或水合物中的應(yīng)用。13. 根據(jù)權(quán)利要求9~10任一項(xiàng)所述的式（II)的化合物作為參比標(biāo)記物或者參比標(biāo)準(zhǔn) 品在鑒定和/或定量阿贓沙班和其溶劑合物或水合物中的所述式(II)的化合物中的應(yīng)用。14. 一種用于在阿贓沙班或其溶劑合物或水合物中檢測根據(jù)權(quán)利要求9~10任一項(xiàng)所 述的式(II)的化合物的方法，所述方法包括： a) 向阿贓沙班樣品或其溶劑合物或水合物中加入已知量的式(II)的化合物； b) 進(jìn)行步驟a)的阿贓沙班樣品或其溶劑合物或水合物的HPLC分析； C)檢測式(I)的化合物的HPLC峰； 或， a 1)利用HPLC分析式(II)的化合物， bl)利用HPLC分析所述阿贓沙班樣品或其溶劑合物或水合物， cl)通過比較保留時(shí)間或相對保留時(shí)間，檢測式(II)的化合物的HPLC峰。15. 用于在阿贓沙班或其溶劑合物或水合物中定量根據(jù)權(quán)利要求9~10任一項(xiàng)所述的 式(II)的化合物的方法，所述方法包括： i) 利用HPLC在具有未知量的式（II)的化合物的阿贓沙班樣品或其溶劑合物或水合物 中測量與式(II)的化合物相對應(yīng)的峰面積； ii) 利用HPLC測量與包含已知量的式(II)的化合物的參比標(biāo)準(zhǔn)品相對應(yīng)的峰面積； iii) 比較在步驟a)中測量的面積與步驟ii)中測量的面積，確定在阿贓沙班或其溶劑 合物或水合物中式(II)的化合物的量。
【文檔編號(hào)】C07D471/04GK105849106SQ201580003432
【公開日】2016年8月10日
【申請日】2015年2月18日
【發(fā)明人】埃萊娜·布拉索拉, 菲利波·托馬西
【申請人】意大利合成制造有限公司