噁唑烷酮類化合物及其合成方法與醫(yī)藥應用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設及嗯挫燒酬類化合物，并提供了該類化合物的合成方法及其在抗血栓方 面的應用。
【背景技術(shù)】 陽00引凝血因子Xa位于外源性凝血途徑和內(nèi)源性凝血途徑的交叉位置，可催化凝血酶 原轉(zhuǎn)化為凝血酶，抑制其活性可W有效的抑制凝血酶的產(chǎn)生和血栓的形成，所W凝血因子 Xa是目前抗凝血藥物研究的重要祀點。Xa因子抑制劑是一類新型的抗凝劑，臨床上用于治 療血栓栓塞等屯、腦血管疾病。隨著全球第一個口服Xa因子抑制劑利伐沙班的上市，嗯挫燒 酬類Xa因子抑制劑備受關(guān)注，其優(yōu)點在于生物利用度高、治療窗寬、量效關(guān)系穩(wěn)定、與食物 和藥物相互作用小、臨床使用方便等優(yōu)點。
[0003] Xa因子結(jié)構(gòu)中的S1 口袋是一個較深的狹窄裂縫，是Xa因子與底物特異性結(jié)合口 袋，底部有天冬氨酸殘基（Aspl89)和酪氨酸殘基（Tyr228)，其中Aspl89的簇基可與堿性基 團結(jié)合。利伐沙班結(jié)構(gòu)中含有強的親脂性氯嚷吩片段，能與Tyr228的芳香環(huán)相互作用，改 善藥物的脂溶性，提高口服生物利用度。在尋找新的嗯挫燒酬類藥物時，我們利用生物電子 等排原理對利伐沙班進行結(jié)構(gòu)改造：設想用含面素和不含面素的親脂性芳香基結(jié)構(gòu)取代利 伐沙班的氯嚷吩片段，期望通過芳香基保證藥物的脂溶性和口服生物利用度；同時增加堿 性基團，加強嗯挫燒酬類藥物與S1 口袋Aspl89簇基的結(jié)合，增強藥效。根據(jù)運一設想設計 并合成了 一系列嗯挫燒酬類化合物。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一系列新的具有抗凝作用的嗯挫燒酬類化合物。 陽〇化]本發(fā)明的另一目的在于提供運一系列化合物的合成方法。
[0006] 本發(fā)明的進一步目的在于提供上述化合物在血栓癥治療中的應用。
[0007] 為解決上述問題，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：
[0008] 通式（I)嗯挫燒酬類化合物：
[0009]
[0010] 其中Ri代表硝基或氨基，R2代表氨、面素、硝基、氯基、徑基、C1~Ce烷基、C1~C6 烷氧基、。~Ce面代烷基、C1~Ce面代烷氧基、無取代或單取代或雙取代的氨基、簇基、幾 基及其衍生物；
[0011] 上述R2在通式（I)的苯環(huán)上可W是單位取代、雙位取代或多位取代，雙位取代或 多位取代的Rz可W同時或分別是氨、面素、硝基、氛基、徑基、C1~Ce烷基、C1~Ce烷氧基、 。~Ce面代烷基、Cl~Ce面代烷氧基、無取代或單取代或雙取代的氨基、簇基、幾基及其衍 生物。
[0012] 通式（II)嗯挫燒酬類化合物：
[0013]
[0014] 其中R2的定義同上，R3代表了取代或無取代的烷基、雜環(huán)、芳香環(huán)或芳烷基，取代 基可W是面素、硝基、烷基、烷氧基、面代烷基、面代烷氧基、氯基、徑基、無取代或單取代或 雙取代的氨基、簇基、幾基及其衍生物。
[0015] 根據(jù)本發(fā)明，優(yōu)選的通式（I)和通式（II)的化合物包括：
[0016] Ii:做-4-(4-巧-(((4-硝基苯基）氨基）甲基）-2-氧代嗯挫嘟-3-基）苯基） 嗎嘟-3-酬
[0017] 12:(巧-4-(4-巧-(((2-氣-4-硝基苯基）氨基）甲基）-2-氧代嗯挫嘟-3-基） 苯基）嗎嘟-3-酬
[0018] 13:(巧-4-(4-巧-(((3-氣-4-硝基苯基）氨基）甲基）-2-氧代嗯挫嘟-3-基） 苯基）嗎嘟-3-酬
[0019] 14:(巧-4-(4-巧-(((2,4-二硝基苯基）氨基）甲基）-2-氧代嗯挫嘟-3-基）苯 基）嗎嘟-3-酬 柳2〇]Is:做-4-(4-巧-(((4-氨基苯基）氨基）甲基）-2-氧代嗯挫嘟-3-基）苯基）嗎嘟-3-酬
[0021]Is:(巧-4-(4-巧-(((4-氨基-2-氣苯基）氨基）甲基）-2-氧代嗯挫嘟-3-基） 苯基）嗎嘟-3-酬
[0022] 1?:(巧-4-(4-巧-(((4-氨基-3-氣苯基）氨基）甲基）-2-氧代嗯挫嘟-3-基） 苯基）嗎嘟-3-酬
[0023]II1: (S)-2-氯-N-(4-(2-氯乙酷胺基）苯基）-N-((2-氧代-3-(4-(3-氧代嗎 嘟-4-基）苯基）嗯挫嘟-5-基）甲基）乙酷胺 1^0024]化:（S) -2-氯-N- (4- (2-氯乙酷胺基）-2-氣苯基）-N-((2-氧代-3- (4- (3-氧代 嗎嘟-4-基）苯基）嗯挫嘟-5-基）甲基）乙酷胺 1^0025]II3: (S) -2-氯-N- (4- (2-氯乙酷胺基）-3-氣苯基）-N-((2-氧代-3- (4- (3-氧代 嗎嘟-4-基）苯基）嗯挫嘟-5-基）甲基）乙酷胺
[0026]II4: (S)-N-(4-苯甲酯胺基苯基）-N-((2-氧代-3-(4-(3-氧代嗎嘟-4-基）苯 基）嗯挫嘟-5-基）甲基）苯甲酯胺
[0027]IIs:做-N-(4-苯甲酯胺基-2-氣苯基）-N-((2-氧代-3-(4-(3-氧代嗎嘟-4-基） 苯基）嗯挫嘟-5-基）甲基）苯甲酯胺 陽0測 lie:做-N-(4-苯甲酯胺基-3-氣苯基）-N-((2-氧代-3-(4-(3-氧代嗎嘟-4-基） 苯基）嗯挫嘟-5-基）甲基）苯甲酯胺
[0029] 通式（I)化合物的合成方法一：化合物la和通式扣在堿存在條件下發(fā)生取代反 應；反應的摩爾比為la:扣=1 : 1~10 ;所用溶劑為乙酸乙醋、乙臘、DMS0、DMF、丙酬、 四氨巧喃、二氧六環(huán)、甲苯、正下醇、異丙醇、乙二醇、水的一種或多種；la與溶劑的質(zhì)量體 積比為1 : 5~50 ;所用堿包括氨化鋼、甲醇鋼、乙醇鋼、叔下醇鋼、叔下醇裡、氨氧化鐘、氨 氧化裡、氨氧化鋼、碳酸鐘、碳酸鋼、碳酸氨鐘、碳酸氨鋼、憐酸鐘、憐酸氨二鐘；反應溫度為 25 ~15(TC;
[0030]
陽0川其中，R2定義同上，Y代表面素。
[0032] 上述合成方法可加入少量艦化亞銅做催化劑。
[0033]通式（I)化合物的合成方法二：由通式（I)化合物的合成方法一所得的通式Ic在 還原鐵粉及氯化錠的條件下進行還原反應；反應的摩爾比為Ic:Fe:氯化錠=1 : 3~ 15 : 1~5 ;所用溶劑為乙醇：水=1~10 : 1 ;Ic與溶劑的質(zhì)量體積比為1 : 20~50 ; 反應溫度為50~150°C;
[0034]
陽0對其中，R2定義同上。
[0036] 通式（II)的化合物的合成方法：由通式（I)化合物的合成方法二所得的通式 Ila，其與通式Ilb在堿性條件下進行取代反應；反應的摩爾比為Ila:IIb=l: 1~10; 所用溶劑包括二氯甲燒、二氧六環(huán)、甲苯、DMF、DMS0、四氨巧喃、乙臘、化晚；Ila與溶劑的質(zhì) 量體積比為1 : 5~50;所用堿包括Ξ乙胺、化晚、氨化鋼、氨氧化鐘、氨氧化裡、氨氧化鋼、 碳酸鐘、碳酸鋼、碳酸氨鐘、碳酸氨鋼；反應溫度為-10~120°C;
[0037]
陽〇3引其中，R2、R3和Y的定義同上。[0039]
[0040] 化合物對人凝血因子Xa的體外抑制實驗：
[0041] 本發(fā)明對合成的13個嗯挫燒酬類化合物進行藥理活性篩選。具體實驗方案可參 見（金麗媛，凝血因子Xa抑制劑的計算機輔助設計和藥理活性研究，碩±論文，天津醫(yī)科大 學，天津，2009)。 柳42] 1.實驗材料
[0043] 1. 1藥物和試劑 W44] 對照品利伐沙班，化合物Ii、12、13、心Is、le、17、化、化、化、&、&、He均由中 國藥科大學藥物化學教研室提供。人凝血因子Xa(FXa)酶聯(lián)免疫分析試劑盒，武漢華美生 物科技有限公司，產(chǎn)品編號CSB-E1269化。其他試劑均為分析純。
[0045] 1. 2主要儀器
[0046] 酶標分析儀：Bio-Rad公司，型號：iMark。
[0047] 2.試驗方法
[0048] 2. 1標準品的制備：臨用前15min用樣品稀釋液將標準品稀釋至1ml，反復顛倒 震搖使其充分溶解，其濃度為20ng/ml，做系列倍比稀釋后，分別稀釋至10ng/ml，5ng/ml， 2. 5ng/ml，1. 25ng/ml，0. 625ng/ml，0. 312ng/ml，樣品稀釋液為標準濃度Ong/ml。
[0049] 2. 2樣品的制備：取Img對照品利伐沙班加0. 5mlDMSO溶解，并用水稀釋10倍至 200μg/ml。將嗯挫燒酬類系列樣品分別W0. 5mlDMS0溶解，并用水稀釋10倍至200μg/ ml。分別取對照品利伐沙班和嗯挫燒酬類系列樣品200μ1與5ng/ml標準酶溶液200μ1 混合，25°C溫育lOmin。
[0050] 2. 3工作液的配制：A工作液、B工作液和洗板液均按試劑盒說明書配制。
[0051] 2. 4加樣測值：
[0052] 2. 4. 1 在 96 孔酶聯(lián)板上分別加入 100μ1 的 20ng/ml，lOng/ml，5ng/ml，2. 5ng/ml， 1. 25ng/ml，0. 625ng/ml，0. 312ng/ml，0ng/ml的標準酶溶液各兩例，也分別加入100μ1溫 育后的樣品溶液各Ξ例，覆膜37°C解育120min。
[0053] 2. 4. 2棄去液體，甩干。每孔加A工作液100μ1，覆膜37°C解育60min。
[0054] 2. 4. 3棄去液體，甩干，用400μ1洗板液浸泡2min，共洗板3次，甩干。
[0055] 2. 4. 4每孔加B工作液100μ1，覆膜37°C解育60min。
[0056] 2. 4. 5棄去液體，甩干，用400μ1洗板液浸泡2min，共洗板5次，甩干。
[0057] 2. 4. 6依序每孔加入底物溶液90μ1，37°C避光顯色30min。
[0058]2. 4. 7依序每孔加入終止溶液50μ1，終止反應。終止液的加入順序要與底物溶液 的加入順序一致。
[0059] 2. 4. 8用酶標儀在450nm處依次測量各孔的光密度0D值。 W60] 3.實驗結(jié)果：
[0061] 如表1所示，標準酶量為5ng/ml時，與對照品利伐沙班相比，化合物I,表現(xiàn)出比 利伐沙班更好的FXa抑制作用，化合物14和II3的體外FXa抑制作用與對照品利伐沙班相 當，其他化合物的體外FXa抑制作用較利伐沙班差。
[0062] 表1 :化合物對FXa因子的抑制作用（標準酶5ng/ml)
[0063]
具體實施方案 柳64] 實施例1 :做-4-(4-巧-(((4-硝基苯基）氨基）甲基）-2-氧代嗯挫嘟-3-基） 苯基）嗎嘟-3-酬化） 陽0化]將（S)-4-(4-(5-(氨基甲基）-2-氧代嗯挫燒-3-基）苯基）嗎嘟-3-酬鹽酸鹽 (la) (2g，6. 12mmol)、對氣硝基苯（1. 73g，12. 23mmol)、碳酸鐘（2. 54g，18. 36mmol)、乙酸乙 醋（40ml)加入到反應瓶中，加熱至回流，攬拌24h后，反應混合液過濾，濾餅用水洗涂，得 濾餅。濾液分出有機層，有機層用飽和食鹽水洗涂（30mlX3)，無水硫酸鋼干燥，過濾，濾液 硅膠柱層析（乙酸乙醋：石油酸，40 : 1)得黃色固體，合并兩部分固體即得產(chǎn)品（1.90g， 75. 4%)，mp190 ~192°C。
[0066] 其結(jié)構(gòu)鑒定數(shù)據(jù)如下：
[0067] ESI-MS(m/z) ：435. 10[M+23]"
[0068]iH-NMR(300MHz，CDCI3)δ:8.03 (d，J= 9.0Hz，2H，Ar-H) ,7.49 (d，J= 8. 9Hz， 2H，Ar-H)，7. 28(d，J= 8. 8Hz，2H，Ar-H)，6. 56(d，J= 9. 0Hz，2H，Ar-H)，4. 82(s，lH，CH)， 4. 28 (s，2H，OCH2CO)，3. 92 ~4.