Foxm1肽和包含foxm1肽的藥劑的制作方法
【專利說明】F0XM1化和包含F(xiàn)0XM1化的藥劑
[0001] 本申請是中國申請200880112387. 2的分案申請，該母案的國際申請日為2008年 8月12日，本分案采用了與該母案一致的發(fā)明名稱。
技術(shù)領(lǐng)域
[0002] 本發(fā)明設(shè)及作為針對高表達(dá)叉頭框Ml(FOXM1)的癌癥（如膽管癌、肺癌和膜腺癌） 的疫苗有用的新膚，和包含該些膚的用于治療和預(yù)防腫瘤的藥物。
【背景技術(shù)】
[0003] 在日本，膽管癌（膽囊癌和膽管癌）死亡的數(shù)目正在增加，在2005年，有16,586 人死于此癌。在大多數(shù)膽管癌病例中，在早期不存在主觀癥狀。與消化道腔體內(nèi)形成的癌 癥（如胃癌和結(jié)腸癌）相比，膽管癌的準(zhǔn)確的顯示和診斷顯影（diagnosticimaging)是困 難的。因此，膽管癌難W早期檢測，當(dāng)膽管癌被發(fā)現(xiàn)時，癌癥往往已經(jīng)發(fā)展并無法切除。除 外科治療之外，還進(jìn)行放療和化療W治療膽管癌，但它們療效不佳，因此亟需建立新的治療 方法。
[0004] 在日本，肺癌死亡的數(shù)目也在增加，在2005年，有62, 063人死于此癌。目前日本 癌癥死亡中肺癌占19. 0%，并已成為2000年W來癌癥死亡的首要原因。吸煙被認(rèn)為是肺癌 發(fā)生的最大原因。除吸煙外，吸入石棉或氮?dú)庖脖徽J(rèn)為引起肺癌。作為預(yù)防肺癌的措施，人 們倡導(dǎo)戒煙和進(jìn)行健康檢查。然而，盡管吸煙人群在日本正在減少，但2005年仍估計(jì)有大 約3千萬人。此外，最近已證明，健康檢查中廣泛進(jìn)行的簡單胸部X-光顯影和疲液測試對 于肺癌的早期檢測無效，而且它們并不導(dǎo)致癌癥死亡的減少?？紤]到上述情況，預(yù)期肺癌死 亡的數(shù)目在未來會持續(xù)增加。
[0005] 肺癌的癥狀包括咳嗽、血疲、呼吸急促和胸痛，但在大多數(shù)情況下，癥狀在早期不 存在。在很多病例中當(dāng)癥狀出現(xiàn)時癌癥已經(jīng)發(fā)展。為此，當(dāng)最先發(fā)現(xiàn)癌癥時，一半W上的患 者是不能手術(shù)治療的，因此肺癌被看作難治性癌癥中的一種。手術(shù)后恢復(fù)率不像其他癌癥 那么好，而且手術(shù)后的總的五年存活率僅不及50%。在近年來，隨著W手術(shù)切除為中屯、，結(jié) 合放療、化療等的多科性治療的進(jìn)步，早期肺癌的五年存活率正在增加；然而，晚期肺癌的 治療效果沒有很大的改進(jìn)，而且亟需建立新的治療策略。
[0006] 在日本，膜腺癌死亡的數(shù)目正在增加，在2005年，有22, 927人死于此癌。目前，日 本癌癥死亡中膜腺癌占7. 0%，在肺癌、胃癌、結(jié)腸癌和肝癌后排名第五位。膜腺癌沒有特異 性的癥狀，而且在很多病例中，當(dāng)癥狀出現(xiàn)時，癌癥已經(jīng)發(fā)展。即使是診斷顯影發(fā)展的今天， 全日本膜腺癌患者中大約40%屬于具有遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移的晚期病例，而且發(fā)現(xiàn)很多患者具有不能 切除的局部發(fā)展的癌癥。因此，患者總的五年存活率是5%W下，而且診斷后的預(yù)后非常差。 由于診斷中的難度，膜腺癌發(fā)病作為癌癥死亡的原因特別是發(fā)達(dá)國家中正逐漸增加。當(dāng)先， 雖然W手術(shù)切除為中屯、，結(jié)合放療、化療等的多科性治療正在開展，但是在治療效果方面沒 有明顯的改進(jìn)，亟需建立新的治療策略。已顯示膜腺癌的發(fā)病要因設(shè)及多種因素，如生活習(xí) 慣（包括吸煙、肥胖、飲食、飲酒和喝咖啡），W及慢性膜腺炎、糖尿病、遺傳因素等。
[0007] 在另一個方面，分子生物學(xué)和腫瘤免疫學(xué)的近期發(fā)展闡明，細(xì)胞毒性（殺傷）T細(xì) 胞和輔助T細(xì)胞可識別癌細(xì)胞中特異性高表達(dá)的蛋白質(zhì)被降解而產(chǎn)生、并經(jīng)由HLA分子被 呈遞到癌細(xì)胞或抗原呈遞細(xì)胞的表面的膚，并引起免疫反應(yīng)W破壞癌細(xì)胞。此外，已經(jīng)鑒定 了許多源自該些細(xì)胞的、能刺激該樣的免疫反應(yīng)W攻擊癌癥的腫瘤抗原蛋白質(zhì)和膚，而且 抗原特異性腫瘤免疫治療正在得到臨床應(yīng)用。
[000引 HLAI類分子在身體的所有有核細(xì)胞的表面上表達(dá)。它結(jié)合于細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞核中 產(chǎn)生的蛋白質(zhì)在胞內(nèi)降解所產(chǎn)生的膚，并表達(dá)在細(xì)胞表面。在正常細(xì)胞的表面，源自正常自 體蛋白質(zhì)的膚結(jié)合于HLAI類分子，并且不被免疫系統(tǒng)的T細(xì)胞識別和破壞。在另一個方 面，在形成癌癥的過程中，癌細(xì)胞有時大量表達(dá)在正常細(xì)胞中幾乎不表達(dá)或略微表達(dá)的蛋 白質(zhì)。此時HLAI類分子結(jié)合于癌細(xì)胞內(nèi)特異性高表達(dá)的蛋白質(zhì)胞內(nèi)降解而產(chǎn)生的膚，然后 在癌細(xì)胞的表面上表達(dá)膚，于是殺傷T細(xì)胞識別并僅破壞癌細(xì)胞。通過將所述癌癥-特異 性抗原或膚施用于個體，可破壞癌細(xì)胞且可抑制癌生長而不傷害正常細(xì)胞。該稱為使用癌 癥-特異性抗原的癌癥免疫療法。HLAII類分子主要在抗原呈遞細(xì)胞的表面上表達(dá)。所述 分子結(jié)合于源自癌癥-特異性抗原的膚，其通過胞內(nèi)降解由細(xì)胞外并入抗原-呈遞細(xì)胞的 癌癥-特異性的抗原而產(chǎn)生，然后在細(xì)胞的表面上表達(dá)膚。識別它們的輔助T細(xì)胞被活化， 并通過產(chǎn)生活化其他免疫活性細(xì)胞的多個細(xì)胞因子來誘導(dǎo)或增強(qiáng)針對腫瘤的免疫反應(yīng)。
[0009] 因此，如果開發(fā)祀向在癌癥中特異性高表達(dá)的抗原的免疫療法，該樣的療法可有 效地僅僅消滅癌癥，而不引起對正常自體組織的任何有害事件。還期望的是療法可用于其 他治療均無能為力的任何末期癌癥患者。此外，通過將癌癥特異性抗原和膚作為疫苗預(yù)先 施用于具有發(fā)生癌癥的高風(fēng)險(xiǎn)的個體，可預(yù)防癌癥的發(fā)生。
[0010] 本發(fā)明人首先使用cDNA微陣列對27, 648個人基因進(jìn)行了全基因組基因表達(dá)分 析，W研究該些基因在25個肝內(nèi)膽管癌病例中和在多個正常器官（包括它們在胚胎期） 的表達(dá)譜（expressionprofile)。結(jié)果，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)叉頭框Ml(FOXMl)(GenBank登錄 號NM_202003)在許多肝內(nèi)膽管癌病例的組織中非常高度表達(dá)。類似于且除肝內(nèi)膽管癌 之外，還發(fā)現(xiàn)F0XM1在幾乎所有的肺癌、膀脫癌和膜腺癌病例中高度表達(dá)。此外，F(xiàn)0XM1 的高表達(dá)見于多種癌癥如子宮頸癌（cervicalcancer)、卵巢癌、惡性淋己瘤（malignant lymphoma)、乳腺癌、胃癌、食道癌、前列腺癌、肝細(xì)胞癌、結(jié)腸癌和慢性髓細(xì)胞性白血病的 40 %W上病例中。該些事實(shí)提示F0XM1可在多種癌癥中作為癌癥-特異性抗原。F0XM1在胚 胎肝中并在正常成人器官中表達(dá)，其在消化道如胃、小腸和大腸、胸腺和睪丸中輕微表達(dá)； 然而，表達(dá)水平明顯低于癌部分。
[0011] 提示F0XM1與癌癥發(fā)病和細(xì)胞增殖調(diào)節(jié)有關(guān)的文件的實(shí)例包括非專利文件1至 10。然而，該些文件都沒有描述F0XM1作為針對癌癥的疫苗的用途。
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