專利名稱:稠合的嘧啶衍生物和黃嘌呤氧化酶抑制劑的制作方法
本發(fā)明涉及黃嘌呤氧化酶抑制劑。
高尿酸血癥引起痛風(fēng)和腎機(jī)能不全，還被認(rèn)為是引起冠心病的一個(gè)因素。另外，認(rèn)為高尿酸血癥與成人疾病(例如高血壓)的發(fā)展密切相關(guān)。因此，高尿酸血癥的治療不僅可有效治療痛風(fēng)，而且還可有效預(yù)防與日常營(yíng)養(yǎng)相關(guān)和年齡增長(zhǎng)過程中發(fā)生的各種疾病。
目前，使用抑制尿酸(uremic acid)生成的抑制劑(例如別嘌呤醇)和排尿酸代謝的促進(jìn)劑(例如苯溴馬隆(benzbromalone))治療高尿酸血癥。然而，別嘌呤醇引起損傷、肝臟病和骨髓性疾病等副作用為人們所熟知。別嘌呤醇及其代謝產(chǎn)物(奧昔嘌醇)通過腎臟排泄。然而，如果尿酸的排泄降低，這些化合物的排泄也會(huì)降低，同時(shí)其在血中的濃度升高。因此，引起副作用的幾率增加。
有報(bào)道稱苯溴馬隆也引起肝臟病。相應(yīng)地，要求開發(fā)出新藥以便醫(yī)師可選擇最合適的藥物。
近來，有報(bào)道報(bào)導(dǎo)了下述沒有嘌呤核的黃嘌呤氧化酶抑制劑，例如TMX-67(Teijin Corporation，專利公開1WO 92/09279)、Y-700(Mitsubishi Wellpharma Corporation，專利公開2WO 98/18765)和KT651(Kotobuki Corporation，專利公開3JP-A-12-1431)
本發(fā)明人對(duì)具有與上述結(jié)構(gòu)不同的結(jié)構(gòu)的雙環(huán)稠合的雜環(huán)進(jìn)行了研究，并提交了專利申請(qǐng)(專利公開4WO 03/042185)。
本發(fā)明人做了進(jìn)一步研究并發(fā)現(xiàn)下述式(I)的化合物(4-羥基-2-苯基噻唑并[5，4-d]嘧啶或4-羥基-2-苯基唑并[5，4-d]嘧啶，其中其苯基在3-位具有氰基，并在4-位具有苯氧基等)具有黃嘌呤氧化酶抑制作用?；谠摪l(fā)現(xiàn)完成了本發(fā)明。
本發(fā)明的目的在于提供下述式(I)的具有黃嘌呤氧化酶(XOD)抑制作用的化合物。
本發(fā)明涉及下式(I)的化合物及其鹽 其中R1代表具有6-10個(gè)碳原子的芳基，或雜芳基，所述芳基或雜芳基可具有選自以下的取代基具有1-8個(gè)碳原子的烷基、具有1-8個(gè)碳原子的鹵素取代的烷基、具有1-8個(gè)碳原子的烷氧基、用具有1-8個(gè)碳原子的烷氧基取代的具有1-8個(gè)碳原子的烷氧基、具有2-8個(gè)碳原子的烷氧羰基、甲酰基、羧基、鹵素、羥基、硝基、氰基、氨基、具有6-10個(gè)碳原子的芳基以及具有6-10個(gè)碳原子的芳氧基；R2代表氰基、硝基、甲酰基、羧基、氨基甲酰基或具有2-8個(gè)碳原子的烷氧羰基；R3代表羥基、氨基、羧基、巰基、OR4或NHR5，其中R4和R5各自為具有1-8個(gè)碳原子的烷基，所述烷基可具有選自以下的取代基鹵素、羥基、硝基、氰基、氨基、具有6-10個(gè)碳原子的芳基以及具有6-10個(gè)碳原子的芳氧基；X代表氧、-N(R6)-或-S(O)n-，其中R6為氫、具有1-8個(gè)碳原子的烷基或R1的基團(tuán)，n為0-2的整數(shù)；和Y代表氧或硫。
另外，本發(fā)明涉及包含式(I)的化合物或其鹽并將其作為活性組分的黃嘌呤氧化酶抑制劑。
另外，本發(fā)明涉及包含式(I)的化合物或其鹽并將其作為活性組分的用于治療高尿酸血癥的藥劑。
下文對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的具體描述。
具有1-8個(gè)碳原子的烷基的實(shí)例包括甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基和戊基，所述烷基為式(I)中R4、R5、R6和R1具有6-10個(gè)碳原子的芳基或雜芳基的任選連接的取代基。
具有1-8個(gè)碳原子的鹵素取代的烷基的實(shí)例包括具有例如1-3個(gè)氟、氯、溴等取代基的甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基和戊基，所述鹵素取代的烷基為R1具有6-10個(gè)碳原子的芳基或雜芳基的任選連接的取代基。
具有1-8個(gè)碳原子的烷氧基的實(shí)例包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基、異丁氧基、叔丁氧基和戊氧基，所述烷氧基為R1具有6-10個(gè)碳原子的芳基或雜芳基的任選連接的取代基。
具有1-8個(gè)碳原子和具有烷氧基取代基(具有1-8個(gè)碳原子)的烷氧基的實(shí)例包括甲氧基甲氧基，所述烷氧基為R1具有6-10個(gè)碳原子的芳基或雜芳基的任選連接的取代基。
R2具有2-8個(gè)碳原子的烷氧羰基和具有2-8個(gè)碳原子的烷氧羰基(為R1具有6-10個(gè)碳原子的芳基或雜芳基的任選連接的取代基)的實(shí)例包括甲氧羰基、乙氧羰基和丙氧羰基。
鹵原子的實(shí)例包括氟、氯和溴，所述鹵原子為R1具有6-10個(gè)碳原子的芳基或雜芳基的任選連接的取代基，也是R4和R5具有1-8個(gè)碳原子的烷基的任選連接的取代基。
R1具有6-10個(gè)碳原子的芳基、具有6-10個(gè)碳原子的芳基(為R1的芳基或雜芳基的任選連接的取代基)以及具有6-10個(gè)碳原子的芳基(為R4和R5具有1-8個(gè)碳原子的烷基的任選連接的取代基)的實(shí)例包括苯基和萘基。
具有6-10個(gè)碳原子的芳氧基的實(shí)例包括苯氧基和萘氧基，所述芳氧基為R1具有6-10個(gè)碳原子的芳基或雜芳基的任選連接的取代基，也是R4和R5具有1-8個(gè)碳原子的烷基的任選連接的取代基。
R1雜芳基的實(shí)例包括呋喃基、吡咯基、噻吩基、咪唑基、嘧啶基、噻唑基、吡啶基、吲哚基和喹啉基。
優(yōu)選n為0。
式(I)的化合物可為藥學(xué)上可接受的鹽的形式。例如，堿金屬(例如鈉、鉀或鋰)鹽。
本發(fā)明優(yōu)選的化合物如下所述。
(1)式(I)的化合物及其鹽，其中R1代表苯基、萘基、呋喃基、吡咯基、噻吩基、咪唑基、嘧啶基、噻唑基、吡啶基、吲哚基或喹啉基，上述基團(tuán)可具有選自以下的取代基具有1-8個(gè)碳原子的烷基、具有1-8個(gè)碳原子的鹵素取代的烷基、具有1-8個(gè)碳原子的烷氧基、具有2-8個(gè)碳原子的烷氧羰基、甲酰基、羧基、鹵素、羥基、硝基、氰基、氨基、具有6-10個(gè)碳原子的芳基以及具有6-10個(gè)碳原子的芳氧基。
(2)式(I)的化合物及其鹽，其中R1代表苯基，所述苯基可具有選自以下的取代基具有1-8個(gè)碳原子的烷基、具有1-8個(gè)碳原子的鹵素取代的烷基、具有1-8個(gè)碳原子的烷氧基、具有2-8個(gè)碳原子的烷氧羰基、甲?；?、羧基、鹵素、羥基、硝基、氰基、氨基、具有6-10個(gè)碳原子的芳基以及具有6-10個(gè)碳原子的芳氧基。
(3)式(I)的化合物及其鹽，其中R1代表苯基，所述苯基可具有選自以下的取代基具有1-8個(gè)碳原子的烷基、具有1-8個(gè)碳原子的鹵素取代的烷基、具有1-8個(gè)碳原子的烷氧基、具有2-8個(gè)碳原子的烷氧羰基、甲?；Ⅳ然?、鹵素、苯基和苯氧基。
(4)式(I)的化合物及其鹽以及上述(1)-(3)的化合物及其鹽，其中R2代表氰基或硝基。
(5)式(I)的化合物及其鹽以及上述(1)-(3)的化合物及其鹽(5)式(I)的化合物及其鹽以及上述(1)-(3)的化合物及其鹽，其中R2代表氰基。
(6)式(I)的化合物及其鹽以及上述(1)-(5)的化合物及其鹽，其中R3代表羥基。
(7)式(I)的化合物及其鹽以及上述(1)-(6)的化合物及其鹽，其中R3連接在稠合(雙環(huán))雜環(huán)的4-位。
(8)式(I)的化合物及其鹽以及上述(1)-(7)的化合物及其鹽，其中X為氧、NH或硫。
(9)式(I)的化合物及其鹽以及上述(1)-(7)的化合物及其鹽，其中X為氧。
(10)式(I)的化合物及其鹽以及上述(1)-(9)的化合物及其鹽，其中Y為硫。
式(I)的化合物的制備方法如下所述。
[在該式中，Z為氯等鹵原子，R1、R2、R3和X各自具有上述相同的含義。]式(c)表示的本發(fā)明化合物可通過使式(a)表示的化合物與式(b)表示的2-苯基噻唑并[5，4-d]嘧啶衍生物反應(yīng)獲得。
在X＝O的情況，可在DMSO等溶劑中、室溫至60℃的溫度以及在堿(例如氫化鈉)存在下進(jìn)行反應(yīng)。
在X＝S的情況，可在溶劑(例如乙醇)中和堿(例如碳酸鉀)存在下通過加熱回流進(jìn)行反應(yīng)。
在X＝NH的情況，可在堿(例如氧化銅或碳酸鉀)存在下通過加熱回流進(jìn)行反應(yīng)。
可通過例如以下方法獲得起始化合物即式(b)表示的2-苯基噻唑并[5，4-d]嘧啶衍生物。
起始化合物的合成方法(1)
起始化合物的合成方法(2) (合成方法2)Y＝O的情況 其中R1、R2、R3和X各自與上述相同。
式(f)表示的本發(fā)明化合物可通過加熱式(d)的苯甲酸酐和式(e)的5-氨基-4-羥基嘧啶衍生物獲得。
可通過例如以下方法獲得起始化合物即式(d)的苯甲酸酐。
起始化合物的合成(3) 式(I)化合物的鹽(其中R3為OK)可通過在氯仿或甲醇等溶劑中使本發(fā)明的化合物(其中R3為羥基)和氫氧化鉀反應(yīng)獲得。
可通過上述合成方法1和2、下述實(shí)施例、專利公開1等的方法以及已知方法制備本發(fā)明的化合物。
通過這些方法制備的本發(fā)明化合物的實(shí)例見表1-10 表1-10對(duì)各個(gè)R1、R2、R3、X和Y進(jìn)行了描述。
表1
表2
表3
表4
表5
表6
表7
表8
表9
表10 本發(fā)明化合物的藥理作用如下所述。
如實(shí)施例50所述，本發(fā)明化合物的黃嘌呤氧化酶抑制作用(體外測(cè)試)通過測(cè)定黃嘌呤氧化酶對(duì)黃嘌呤氧化的抑制得到證實(shí)。從表11和12清楚可見，本發(fā)明化合物表現(xiàn)出優(yōu)異的黃嘌呤氧化酶抑制作用。
黃嘌呤氧化酶抑制作用通過在體內(nèi)測(cè)試中測(cè)定從口服本發(fā)明化合物的鼠獲得的血漿中的尿酸濃度得到進(jìn)一步證實(shí)。見實(shí)施例51、表11和12。
相應(yīng)地，希望本發(fā)明式(I)的化合物可用于預(yù)防或治療高尿酸血癥和痛風(fēng)。
本發(fā)明化合物可通過合適的給藥方式(例如口服和腸胃外給藥)給人體給藥。
可將本發(fā)明化合物制成已知的藥物制劑形式，例如丸劑、粒劑、粉劑、膠囊、懸浮液、注射液和栓劑。對(duì)于所述制劑，使用常規(guī)采用的賦形劑、崩解劑、粘合劑、潤(rùn)滑劑、染料、稀釋劑等。所述賦形劑可為乳糖、D-甘露醇、結(jié)晶纖維素或葡萄糖。所述崩解劑可為淀粉或羧甲基纖維素鈣(CMC-Ca)。所述潤(rùn)滑劑可為硬脂酸鎂或滑石。所述粘合劑可為羥丙基纖維素(HPC)、明膠或聚乙烯吡咯烷酮(PVP)。
本發(fā)明化合物的成人劑量如下當(dāng)以注射液形式給藥時(shí)，一般為約0.1-100mg/天，當(dāng)口服時(shí)，一般為約1-2,000mg/天?？梢罁?jù)年齡和臨床條件調(diào)整劑量。
下文通過以下非限定性的實(shí)施例和對(duì)照實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步描述。
[對(duì)照實(shí)施例1]4-氯-N-(4-氯-6-甲氧基-5-嘧啶基)-3-硝基苯甲酰胺將4-氯-3-硝基苯甲酸(30.2g，150mmol)懸浮在乙酸乙酯(150mL)中，并將亞硫酰氯(22mL，300mmol)加入所得懸浮液中。然后加熱回流所述懸浮液5小時(shí)。減壓濃縮所述反應(yīng)混合物。利用兩份無水苯和兩份二氯甲烷濃縮殘留物。將所得酰氯溶解在二氯甲烷(20mL)中，并將所得溶液加入5-氨基-4-氯-6-甲氧基嘧啶(16.0g，100mmol)的二氯甲烷(100mL)溶液中。加熱回流所得混合物16小時(shí)。然后將加熱的混合物冷卻至室溫，通過過濾收集析出的晶體產(chǎn)物，并用四份二氯甲烷(20mL)洗滌，得到34.3g(產(chǎn)率100％)標(biāo)題化合物的白色晶體產(chǎn)物。
1H-NMR(CDCl3)δ4.07(3H，s)，7.35(1H，s)，7.74(1H，d，J＝8Hz)，8.08(1H，dd，J＝2Hz，8Hz)，8.42(1H，d，J＝2Hz)，8.55(1H，s)。
2-(4-氯-3-硝基苯基)-4-甲氧基噻唑并[5，4-d]嘧啶將上述4-氯-N-(4-氯-6-甲氧基-5-嘧啶基)-3-硝基苯甲酰胺(150.6g，439mmol)和拉韋松試劑(133.4g，130mmol)置于THF(4.5L)中。加熱回流混合物8小時(shí)，然后減壓蒸干溶劑。向殘留物加入乙酸乙酯(1.3L)，并加熱回流混合物1小時(shí)。然后向混合物加入己烷(1.3L)，并將所得混合物冷卻至室溫。通過過濾收集析出的晶體產(chǎn)物，依次用乙酸乙酯/己烷(1/2)的混合溶劑(700mL)和己烷(500mL)洗滌，然后進(jìn)行硅膠柱層析(氯仿)。將所得晶體產(chǎn)物懸浮在乙酸乙酯/己烷(1/4)的混合溶劑(500mL)中。加熱回流所述懸浮液30分鐘后，冷卻至室溫。通過過濾收集晶體產(chǎn)物，用乙酸乙酯/己烷(1/4)的混合溶劑(50mL)洗滌，室溫減壓干燥得到33.3g(產(chǎn)率24％)標(biāo)題化合物的淺黃色晶體產(chǎn)物。
m.p.235-238℃(分解)1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ4.28(3H，s)，7.71(1H，d，J＝9Hz)，8.22(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.61(1H，d，J＝2Hz)，8.72(1H，s)。
2-(4-氯-3-硝基苯基)-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶將上述2-(4-氯-3-硝基苯基)-4-甲氧基噻唑并[5，4-d]嘧啶(33.3g，103mmol)懸浮在二氯甲烷(3L)中，并向所述懸浮液滴加三溴化硼(39mL，413mmol)的二氯甲烷(330mL)溶液。室溫?cái)嚢杌旌衔?6小時(shí)，然后在37-38℃溫度攪拌13小時(shí)。向反應(yīng)混合物依次加入冰(600g)和飽和碳酸氫鈉水溶液直至混合物達(dá)到pH3-4。然后攪拌混合物30分鐘。通過過濾收集析出的晶體產(chǎn)物，依次用水(500mL)、二氯甲烷(500mL)、水(500mL)、二氯甲烷(500mL)和丙酮(200mL)洗滌，并在空氣中干燥。將晶體產(chǎn)物懸浮在乙酸乙酯(160mL)中，加熱回流所述懸浮液30分鐘，然后冷卻至室溫。通過過濾收集析出的晶體產(chǎn)物，用乙酸乙酯(80mL)洗滌，在50℃減壓干燥得到24.9g(產(chǎn)率78％)標(biāo)題化合物的淺黃色晶體產(chǎn)物。
m.p.325-327℃(分解)1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.96(1H，d，J＝8Hz)，8.2-8.4(2H，m)，8.65(1H，d，J＝2Hz)，12.95(1H，s)。
2-(4-氯-3-硝基苯基)-4-巰基噻唑并[5，4-d]嘧啶將4-氯-N-(4-氯-6-甲氧基-5-嘧啶基)-3-硝基苯甲酰胺(100mg，0.29mmol)和拉韋松試劑(80mg，0.20mmol)置于甲苯(2mL)中。加熱回流混合物5小時(shí)后，減壓蒸干溶劑。用硅膠柱層析(乙酸乙酯/己烷)純化殘留物得到10.2mg(產(chǎn)率11％)標(biāo)題化合物的黃色晶體產(chǎn)物。
1H-NMR(CD3OD/CDCl3(1/20)，400MHz)δ7.71(1H，d，J＝8Hz)，8.05(1H，s)，8.28(1H，dd，J＝2Hz，8Hz)，8.32(1H，s)，8.58(1H，d，J＝2Hz)。
2-[4-(4-氯苯硫基)-3-硝基苯基]-4-巰基噻唑并[5，4-d]嘧啶將上述2-(4-氯-3-硝基苯基)-4-巰基噻唑并[5，4-d]嘧啶(10.2mg，0.031mmol)、碳酸鉀(6.1mg，0.044mmol)和4-氯苯硫酚(47mg，0.032mmol)加入乙醇(2mL)中。加熱回流所得混合物2小時(shí)，然后減壓蒸干溶劑。向殘留物依次加入水(0.5mL)和1M的鹽酸水溶液直至含水混合物達(dá)到pH2。用乙酸乙酯對(duì)所得混合物進(jìn)行萃取。用無水硫酸鈉干燥提取液，減壓蒸干溶劑。用硅膠柱層析(乙酸乙酯/己烷)純化殘留物得到8.9mg(產(chǎn)率66％)標(biāo)題化合物的黃色晶體產(chǎn)物。
1H-NMR(CD3OD/CDCl3＝1/20，400MHz)δ7.07(1H，d，J＝9Hz)，7.6-7.8(4H，m)，8.17(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.32(1H，s)，8.81(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，14.31(1H，s)。
FAB-MS(m/e)433(M+1)。
2-[4-(4-氯苯硫基)-3-硝基苯基]-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶將前述2-(4-氯-3-硝基苯基)-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶(123mg，0.40mmol)、碳酸鉀(77mg，0.56mmol)、4-氯苯硫酚(64mg，0.44mmol)和乙醇(22mL)混合，在氮?dú)鈿夥罩屑訜峄亓魉龌旌衔?小時(shí)。然后在攪拌和冰浴冷卻下向混合物加入2M的鹽酸(1mL)，室溫?cái)嚢杷没旌衔?0分鐘。通過過濾收集析出的晶體產(chǎn)物，依次用兩份乙醇和三份水洗滌，得到32mg(產(chǎn)率79％)標(biāo)題化合物的黃色晶體產(chǎn)物。
1H-NMR(DMSO-d6)δ7.06(1H，d，J＝8Hz)，7.66(2H，d，J＝7Hz)，7.71(2H，d，J＝7Hz)，8.16(1H，d，J＝8Hz)，8.26(1H，s)，8.77(1H，s)，12.95(1H，s)。
FAB-MS(m/e)417(M+1)。
2-[4-(4-氯苯硫基)-3-硝基苯基]-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶鉀鹽將上述2-[4-(4-氯苯硫基)-3-硝基苯基]-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶(42mg，0.10mmol)溶解在氯仿(21mL)和甲醇(7mL)的混合物中。加入86％的氫氧化鉀(7mg，0.11mmol)的甲醇(3.5mL)溶液后，減壓濃縮混合物。依次用甲醇和氯仿洗滌殘留物得到24mg(產(chǎn)率53％)標(biāo)題化合物的黃色晶體產(chǎn)物。
1H-NMR(DMSO-d6)δ7.03(1H，d，J＝8Hz)，7.64(2H，d，J＝9Hz)，7.70(2H，d，J＝9Hz)，7.96(1H，s)，8.05(1H，dd，J＝2Hz，8Hz)，8.69(1H，d，J＝2Hz)。
4-羥基-2-(3-硝基-4-苯硫基苯基)噻唑并[5，4-d]嘧啶將前述2-(4-氯-3-硝基苯基)-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶(15mg，0.049mmol)、碳酸鉀(10mg，0.072mmol)和1％的苯硫酚的乙醇(0.7mL，0.064mmol)溶液加入乙醇(2mL)中，加熱回流混合物過夜。加入碳酸鉀(10mg，0.072mmol)和1％的苯硫酚的乙醇(0.7mL，0.064mmol)溶液后，加熱回流混合物5小時(shí)后，冷卻至室溫。向反應(yīng)混合物加入水(3.4mL)和1M的鹽酸水溶液直至混合物達(dá)到pH6-7。通過過濾收集析出的晶體產(chǎn)物，依次用乙醇和水(1/1)的混合物(1mL)以及水(0.5mL)洗滌，室溫減壓干燥得到12.8g(產(chǎn)率68％)標(biāo)題化合物的黃色晶體產(chǎn)物。
1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.01(1H，d，J＝9Hz)，7.5-7.6(3H，m)，7.6-7.8(2H，m)，8.15(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.26(1H，s)，8.78(1H，d，J＝2Hz)，12.94(1H，s)。
FAB-MS(m/e)383(M+1)。
2-[4-(4-氯苯氧基)-3-硝基苯基]-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶在冰浴冷卻下向4-氯苯酚(1.80g，14.0mmol)的DMSO(36mL)溶液加入60％的氫化鈉(1.17g，29.3mmol)，室溫?cái)嚢杌旌衔?0分鐘。加入前述2-(4-氯-3-硝基苯基)-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶(3.60g，11.7mmol)后，室溫?cái)嚢杌旌衔?4小時(shí)。向混合物加入冰-水(36mL)和1M的鹽酸水溶液直至混合物達(dá)到pH4。通過過濾收集析出的晶體產(chǎn)物，并用水(50mL×2)洗滌。將所得晶體產(chǎn)物懸浮在乙醇和水(1/1)的混合物(30mL)中，并室溫?cái)嚢杷鰬腋∫?0分鐘。收集析出的晶體產(chǎn)物，依次用乙醇和水(1/1)的混合物(20mL)以及水(50mL)洗滌，室溫減壓干燥。然后通過硅膠柱層析(甲醇/氯仿)重復(fù)地純化所述干燥的產(chǎn)物。將所得晶體產(chǎn)物懸浮在乙醇(140mL)中，加熱回流所述懸浮液10分鐘，然后冷卻至室溫。通過過濾收集晶體產(chǎn)物，用乙醇(20mL)洗滌，室溫減壓干燥得到2.65g(產(chǎn)率57％)標(biāo)題化合物的黃色晶體產(chǎn)物。
m.p.304-306℃(分解)1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.22-7.27(2H，m)，7.29(1H，d，J＝9Hz)，7.5-7.6(2H，m)，8.2-8.3(2H，m)，8.64(1H，d，J＝2Hz)，12.94(1H，s)。
IR(KBr)cm-13066，2924，2345，1695，1616，1570，1537，1481，1456，1419，1352，1304，1265，1248，1223，1196，1159，1151，1128，1084，1014，978，850。
FAB-MS(m/e)401(M+1)。
4-(4-氯苯硫基)-3-硝基苯甲酸乙酯將4-氯-3-硝基苯甲酸乙酯(1.10g，4.79mmol)、4-氯苯硫酚(0.72g，4.98mmol)和碳酸鉀(0.95g，6.78mmol)懸浮在乙醇(15mL)中，加熱回流所述懸浮液3小時(shí)。然后減壓蒸干混合物的溶劑。加入水(100mL)后，用乙酸乙酯(100mL×2)對(duì)混合物進(jìn)行萃取，并用無水硫酸鈉干燥。減壓蒸干干燥的提取液的溶劑。用硅膠柱層析(乙酸乙酯/己烷)純化殘留物得到767mg(產(chǎn)率47％)標(biāo)題化合物的黃色晶體產(chǎn)物。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.40(3H，t，J＝7Hz)，4.40(2H，q，J＝7Hz)，6.90(1H，d，J＝9Hz)，7.4-7.6(4H，m)，7.97(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.86(1H，d，J＝2Hz)。
4-(4-氯苯硫基)-3-硝基苯甲酸將上述4-(4-氯苯硫基)-3-硝基苯甲酸乙酯(760mg，2.25mmol)溶解在乙醇(5mL)和THF(10mL)的混合物中。加入2M的氫氧化鈉水溶液(2.25mL，4.50mmol)后，室溫?cái)嚢杌旌衔?小時(shí)后，減壓蒸干溶劑。向殘留物加入水(20mL)和2M的鹽酸水溶液直至混合物達(dá)到pH2。通過過濾收集析出的晶體產(chǎn)物，依次用水(5mL×3)、乙醇和水(1/4)的混合物(5mL)和己烷(5mL×2)洗滌，在40℃減壓干燥得到703mg(產(chǎn)率100％)標(biāo)題化合物的黃色晶體產(chǎn)物。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)6.85(1H，d，J＝9Hz)，7.4-7.6(4H，m)，7.96(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.82(1H，d，J＝2Hz)。
4-(4-氯苯硫基)-3-硝基苯甲酸酐將上述4-(4-氯苯硫基)-3-硝基苯甲酸(260mg，0.84mmol)懸浮在亞硫酰氯(2mL)中。加入DMF(一滴)后，加熱回流所述懸浮液1.5小時(shí)，減壓蒸干溶劑。將殘留物加入無水苯中，減壓蒸干混合物中的無水苯和剩余的亞硫酰氯。將殘留物溶解在無水THF(7mL)中。在冰浴冷卻下向溶液加入4-(4-氯苯硫基)-3-硝基苯甲酸(260mg，0.84mmol)和三乙胺(0.5mL，3.59mmol)。加熱回流所得混合物18小時(shí)，冷卻至室溫，減壓蒸干溶劑。將殘留物溶解在氯仿(50mL)中。用0.5M的鹽酸水溶液(10mL)、飽和碳酸氫鈉水溶液(10mL)和飽和氯化鈉水溶液(10mL)洗滌所述溶液，用無水硫酸鈉干燥，減壓蒸干溶劑得到417mg(83％)標(biāo)題化合物的褐色晶體產(chǎn)物。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ6.99(2H，d，J＝9Hz)，7.4-7.6(8H，m)，8.02(2H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.92(2H，d，J＝2Hz)。
2-[4-(4-氯苯硫基)-3-硝基苯基]-4-羥基唑并[5，4-d]嘧啶在150℃加熱攪拌上述4-(4-氯苯硫基)-3-硝基苯甲酸酐(300mL，0.50mmol)和5-氨基-4，6-二羥基嘧啶鹽酸鹽(50mg，0.31mmol)1小時(shí)，然后冷卻至室溫。通過硅膠柱層析(甲醇/氯仿)純化所得殘留物。然后在氯仿(10mL)中攪拌所得粗產(chǎn)物30分鐘。通過過濾收集所得晶體產(chǎn)物，并用氯仿洗滌得到21mg(產(chǎn)率13％)標(biāo)題化合物的黃色晶體產(chǎn)物。
m.p.＞250℃1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.10(1H，d，J＝9Hz)，7.67(2H，d，J＝8Hz)，7.71(2H，d，J＝8Hz)，8.22(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.30(1H，s)，8.79(1H，d，J＝2Hz)，13.04(1H，s)。
IR(KBr)cm-13429，3076，1720，1612，1549，1522，1475，1458，1338，1298，1240，1207，1093，1066，1014，906，876，825，781，748，729。
FAB-MS(m/e)401(M+1)。
4-羥基-2-(3-硝基-4-苯氧基苯基)噻唑并[5，4-d]嘧啶在水冷下向60％的氫化鈉(360mg，9.00mmol)的DMSO(12mL)懸浮液加入苯酚(847mg，9.00mmol)。室溫?cái)嚢杷龌旌衔?，然后?0℃攪拌1小時(shí)。加入前述2-(4-氯-3-硝基苯基)-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶(926mg，3.00mmol)后，室溫?cái)嚢杌旌衔?小時(shí)。在攪拌和水冷下向反應(yīng)混合物加入2M的鹽酸(6mL)和水(18mL)，攪拌混合物30分鐘。通過過濾收集析出的晶體產(chǎn)物，用幾份水洗滌，在空氣中干燥過夜，再依次用三份乙醚(3mL)、三份氯仿(6mL)和兩份乙醇(9mL)洗滌得到880mg(產(chǎn)率80％)標(biāo)題化合物的黃色晶體產(chǎn)物。
m.p.278-281℃(分解)
1H-NMR(DMSO-d6)δ7.2-7.6(6H，m)，8.25(1H，s)，8.26(1H，dd，J＝2Hz，8Hz)，8.63(1H，d，J＝2Hz)，12.93(1H，s)。
IR(KBr)cm-13070，1697，1616，1589，1570，1537，1489，1456，1350，1304，1265，1246，1221，1192，1161，760。
FAB-MS(m/e)367(M+1)。
2-(3-硝基-4-苯氧基苯基)-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶鉀鹽將前述2-(3-硝基-4-苯氧基苯基)-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶(250mg，0.68mmol)懸浮在乙醇(10mL)中。加入包含0.5mol/L的氫氧化鉀的乙醇溶液(1.36mL，0.68mol)后，室溫?cái)嚢杷鰬腋∫?小時(shí)。通過過濾收集析出的固體產(chǎn)物，用乙醇洗滌，室溫減壓干燥得到227mg(產(chǎn)率82％)標(biāo)題化合物的黃色晶體產(chǎn)物。
m.p.＞260℃(分解)1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.2-7.3(4H，m)，7.4-7.5(2H，m)，7.95(1H，s)，8.15(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.52(1H，d，J＝2Hz)。
IR(KBr)cm-13421，1618，1577，1573，1481，1338，1294，1261，1192，1163，1081，1022，985，898，843，804，750，690。
FAB-MS(m/e)405(M+1)。
4-氯-3-氰基苯甲酸在0℃和攪拌下向包含3-氨基-4-氯苯甲酸(10.0g，57.1mmol)的濃硫酸(60mL)和水(95mL)的混合物加入亞硝酸鈉(10.0g，145mmol)。在0℃攪拌所述混合物2小時(shí)后，在不高于15℃的溫度和攪拌下將其加入到包含氰化銅(7.1g，79.3mmol)、氰化鉀(21.7g，333mmol)和碳酸鉀(285g，2.06mmol)的水(250mL)和苯(175mL)的混合物的混合物中。在80℃加熱攪拌所得混合物1小時(shí)，冷卻至室溫，冰浴冷卻攪拌，利用Celite過濾收集不溶物。用苯(100mL)和乙醚(100mL)洗滌所述不溶物。取出含水部分，并在攪拌和冰浴冷卻下通過加入濃鹽酸使其pH為2。用乙醚(200mL×2)對(duì)含水部分進(jìn)行萃取，用無水硫酸鈉干燥，減壓蒸干溶劑。用硅膠柱層析(乙酸乙酯/己烷)重復(fù)地純化殘留物得到2.0g(產(chǎn)率19％)標(biāo)題化合物的淺黃色晶體產(chǎn)物。
1H-NMR(CDCl3/CD3OD/＝20/1，400MHz)δ7.61(1H，d，J＝9Hz)，8.20(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.36(1H，d，J＝2Hz)。
4-氯-N-(4-氯-6-甲氧基-5-嘧啶基)-3-氰基苯甲酰胺向上述4-氯-3-氰基苯甲酸(1.20g，6.61mmol)的無水苯(10mL)懸浮液加入亞硫酰氯(0.58mL，7.95mmol)。加熱回流混合物4小時(shí)，然后減壓蒸干溶劑。向殘留物加入無水二氯甲烷(5mL)，減壓蒸干混合物中的無水苯和剩余的亞硫酰氯。將殘留物溶解在無水二氯甲烷(45mL)中。在冰浴冷卻下和5分鐘內(nèi)將所得溶液滴加至5-氨基-4-氯-6-甲氧基嘧啶(2.11g，13.2mmol)的無水二氯甲烷(45mL)溶液中。室溫?cái)嚢杌旌衔?15小時(shí)。通過過濾收集析出的晶體產(chǎn)物，用二氯甲烷(5mL×2)洗滌，減壓蒸干溶劑。用硅膠柱層析(甲醇/氯仿)重復(fù)地純化殘留物得到1.61g(產(chǎn)率75％)標(biāo)題化合物的淺褐色晶體產(chǎn)物。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ4.07(3H，s)，7.40(1H，s)，7.69(1H，d，J＝9Hz)，8.09(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.23(1H，d，J＝2Hz)，8.54(1H，s)。
2-(4-氯-3-氰基苯基)-4-甲氧基噻唑并[5，4-d]嘧啶在氮?dú)鈿夥罩?，將上?-氯-N-(4-氯-6-甲氧基-5-嘧啶基)-3-氰基苯甲酰胺(1.10g，3.40mmol)和拉韋松試劑(1.03g，2.55mmol)懸浮在無水苯(40mL)中，加熱回流所述懸浮液16小時(shí)。然后減壓蒸干懸浮液中的溶劑。用硅膠柱層析純化殘留物得到403mg(產(chǎn)率39％)標(biāo)題化合物的白色晶體產(chǎn)物。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ4.28(3H，s)，7.67(1H，d，J＝9Hz)，8.22(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.44(1H，d，J＝2Hz)，8.72(1H，s)。
2-(4-氯-3-氰基苯基)-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶在氮?dú)鈿夥罩校瑢⑸鲜?-(4-氯-3-氰基苯基)-4-甲氧基噻唑并[5，4-d]嘧啶(164mg，0.54mmol)懸浮在無水二氯甲烷(15mL)中。加入三溴化硼(0.3mL，3.17mmol)的無水二氯甲烷(15mL)溶液后，室溫?cái)嚢杌旌衔?6小時(shí)。加入三溴化硼(0.05mL，0.53mmol)的無水二氯甲烷(2.5mL)溶液后，室溫?cái)嚢杌旌衔?4小時(shí)。再向混合物加入三溴化硼(0.1mL，1.06mmol)的無水二氯甲烷(5mL)溶液。室溫?cái)嚢杷没旌衔?6小時(shí)，然后減壓蒸干溶劑。向殘留物加入冰-水(20mL)。通過過濾收集析出的晶體產(chǎn)物，并用水(5mL×3)洗滌。將由此得到的粗晶體產(chǎn)物懸浮在乙醇(20mL)中。然后減壓蒸干懸浮液中的溶劑。向殘留物加入氯仿(20mL)，室溫?cái)嚢杌旌衔?0分鐘。通過過濾收集析出的晶體產(chǎn)物，并用氯仿(5mL×3)洗滌得到149mg(產(chǎn)率96％)標(biāo)題化合物的淺褐色晶體產(chǎn)物。
1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.94(1H，d，J＝8Hz)，8.27(1H，d，J＝4Hz)，8.35(1H，dd，J＝2Hz，8Hz)，8.57(1H，d，J＝2Hz)，12.94(1H，s)。
IR(KBr)cm-13427，3028，2933，2233，1714，1676，1601，1585，1570，1491，1489，1466，1392，1356，1286，1252，1174，1138，1059，1024，978，903，893，856，806。
2-[4-(4-氯苯硫基)-3-氰基苯基]-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶在氮?dú)鈿夥罩?，將上?-(4-氯-3-氰基苯基)-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶(60mg，0.21mmol)、4-氯苯硫酚(34mg，0.24mmol)和碳酸鉀(41mg，0.30mmol)懸浮在無水乙醇(15mL)中，加熱回流所述懸浮液5小時(shí)。再向所述懸浮液加入4-氯苯硫酚(34mg，0.24mmol)、碳酸鉀(41mg，0.03mmol)和無水乙醇(15mL)，加熱回流所得混合物3小時(shí)。再向混合物加入4-氯苯硫酚(34mg，0.24mmol)和碳酸鉀(41mg，0.30mmol)。然后加熱回流所述混合物3小時(shí)，冷卻至室溫。在冰浴冷卻下向冷卻的混合物加入1M的鹽酸水溶液直至混合物達(dá)到pH3。通過過濾收集析出的晶體產(chǎn)物，用乙醇(5mL×2)和水(5mL×3)洗滌，在50℃減壓干燥得到60mg(產(chǎn)率75％)標(biāo)題化合物的淺褐色晶體產(chǎn)物。
1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.31(1H，d，J＝9Hz)，7.59(4H，s)，8.21(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.25(1H，s)，8.48(1H，d，J＝2Hz)，12.92(1H，s)。
IR(KBr)cm-13433，1680，1597，1572，1477，1462，1383，1356，1248，1178，1092，1059，1012，974，912，891，820，746，708。
FAB-MS(m/e)397(M+1)[實(shí)施例10]2-[4-(4-氯苯硫基)-3-氰基苯基]-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶鉀鹽將上述2-[4-(4-氯苯硫基)-3-氰基苯基]-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶(120mg，0.30mmol)懸浮在乙醇(6mL)中。加入0.5mol/L的氫氧化鉀的乙醇(0.7mL)溶液后，室溫?cái)嚢杷鰬腋∫?小時(shí)。通過過濾收集析出的晶體產(chǎn)物，用乙醇(5mL)洗滌，在50℃減壓干燥得到126mg(產(chǎn)率97％)標(biāo)題化合物的黃色晶體產(chǎn)物。
m.p.290-295℃(分解)1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.36(1H，d，J＝8Hz)，7.5-7.6(4H，m)，7.96(1H，s)，8.13(1H，dd，J＝2Hz，8Hz)，8.35(1H，d，J＝2Hz)。
IR(KBr)cm-13421，3394，2225，1576，1468，1396，1389，1329，1298，1211，1136，1093，1065，1011，984。
FAB-MS(m/e)435(M+1)[實(shí)施例11]2-[4-(4-氯-1-萘氧基)-3-硝基苯基]-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶向60％的氫化鈉(20mg，0.50mmol)的DMSO(3mL)懸浮液加入4-氯-1-萘酚(71mg，0.40mmol)。室溫?cái)嚢杌旌衔?0分鐘。向所得深綠色溶液加入前述2-(4-氯-3-硝基苯基)-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶(31mg，0.10mmol)。依次在室溫、50℃和60℃攪拌混合物30分鐘、16小時(shí)和24小時(shí)。在冰浴冷卻下向反應(yīng)混合物加入冷水(2.5mL)和2M的鹽酸(0.5mL)。攪拌混合物10分鐘。通過過濾收集析出的晶體產(chǎn)物，依次用水和乙醇洗滌，用氯仿進(jìn)行萃取。減壓濃縮氯仿提取液得到55mg褐色固體產(chǎn)物。通過硅膠柱層析處理所述褐色固體產(chǎn)物，并用己烷和乙酸乙酯(1/2)的混合物洗脫得到14mg(產(chǎn)率31％)標(biāo)題化合物的褐色晶體產(chǎn)物。
1H-NMR(CDCl3)δ6.95(1H，d，J＝9Hz)，7.10(1H，d，J＝8Hz)，7.59(1H，d，J＝9Hz)，7.6-7.8(2H，m)，8.1-8.2(2H，m)，8.14(1H，s)，8.34(1H，d，J＝8Hz)，8.71(1H，d，J＝2Hz)，11.68(1H，s)。
FAB-MS(m/e)451(M+1)[實(shí)施例12]2-[4-(4-氟苯氧基)-3-硝基苯基]-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶在氮?dú)鈿夥罩?，?-氟苯酚(1.09g，9.72mmol)溶解在DMSO(25mL)中，在冰浴冷卻下向所述溶液加入60％的氫化鈉(810mg，20.3mmol)。室溫?cái)嚢杷没旌衔?0分鐘。在冰浴冷卻下向所述混合物加入前述2-(4-氯-3-硝基苯基)-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶(2.50g，8.10mmol)。然后室溫?cái)嚢杌旌衔?4小時(shí)。向混合物加入冰-水(75mL)和1M的鹽酸水溶液直至混合物達(dá)到pH4。通過過濾收集析出的晶體產(chǎn)物，并用水(25mL×2)洗滌。將由此獲得的粗晶體產(chǎn)物懸浮在乙醇/水(1/1，75mL)中，室溫?cái)嚢杷鰬腋∫?0分鐘。通過過濾收集析出的晶體產(chǎn)物，減壓干燥，然后通過硅膠柱層析(甲醇/氯仿)和甲醇與氯仿混合物的反復(fù)洗滌純化。將所得晶體產(chǎn)物懸浮在乙醇(93mL)中，室溫?cái)嚢?小時(shí)，通過過濾收集，用乙醇(20mL×2)洗滌，在40℃減壓干燥得到2.03g(產(chǎn)率59％)標(biāo)題化合物的黃色晶體產(chǎn)物。
m.p.282-284℃(分解)1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.19(1H，d，J＝9Hz)，7.2-7.4(4H，m)，8.25(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.26(1H，s)，8.62(1H，d，J＝2Hz)，12.92(1H，s)。
IR(KBr)cm-12798，2345，1682，1618，1574，1535，1500，1470，1354，1265，1223，1184，1084，1014，970，908，839，837，816，766，708。
FAB-MS(m/e)385(M+1)[實(shí)施例13]2-[4-(4-氟苯氧基)-3-硝基苯基]-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶鉀鹽將上述2-[4-(4-氟苯氧基)-3-硝基苯基]-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶(250mg，0.65mmol)懸浮在乙醇(10mL)中。加入0.5mol/L的氫氧化鉀的乙醇(1.3mL，0.65mmol)溶液后，室溫?cái)嚢杷鰬腋∫?.5小時(shí)。通過過濾收集析出的固體產(chǎn)物，用乙醇洗滌，室溫減壓干燥得到257mg(產(chǎn)率94％)標(biāo)題化合物的黃色晶體產(chǎn)物。
m.p.＞260℃(分解)1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.16(1H，d，J＝9Hz)，7.3-7.4(4H，m)，7.95(1H，s)，8.13(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.51(1H，d，J＝2Hz)。
IR(KBr)cm-13398，1620，1570，1537，1500，1479，1340，1294，1267，1227，1221，1184，899，850，818，816，764，760。
FAB-MS(m/e)423(M+1)[實(shí)施例14]2-[4-(4-甲氧基苯氧基)-3-硝基苯基]-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶在冰浴冷卻下向4-甲氧基苯酚(19mg，0.15mmol)的DMSO(2mL)溶液加入60％的氫化鈉(10mg，0.25mmol)。室溫?cái)嚢杌旌衔?0分鐘。然后向混合物加入前述2-(4-氯-3-硝基苯基)-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶(40mg，0.13mmol)。室溫?cái)嚢杷没旌衔?1小時(shí)。加入4-甲氧基苯酚(10mg，0.081mmol)和60％的氫化鈉(5mg，0.13mmol)后，室溫繼續(xù)攪拌混合物18小時(shí)。向混合物加入冰-水(5mL)和1M的鹽酸水溶液直至混合物達(dá)到pH4。通過過濾收集析出的晶體產(chǎn)物，依次用水(5mL)和乙醚(5mL)洗滌，室溫減壓干燥。用硅膠柱層析(甲醇/氯仿)純化由此獲得的晶體產(chǎn)物得到18.8mg(產(chǎn)率37％)標(biāo)題化合物的黃色晶體產(chǎn)物。
1H-NMR(CD3OD/CDCl3＝1/10，400MHz)δ3.85(3H，s)，6.9-7.0(2H，m)，7.01(1H，d，J＝9Hz)，7.06-7.11(2H，m)，8.03(1H，s)，8.15(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.60(1H，d，J＝2Hz)。
FAB-MS(m/e)397(M+1)。
2-[4-(4-甲氧基苯氧基)-3-硝基苯基]-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶鉀鹽將上述2-[4-(4-甲氧基苯氧基)-3-硝基苯基]-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶(700mg，1.77mmol)懸浮在乙醇(40mL)中。加入0.5mol/L的氫氧化鉀的乙醇(3.53mL，1.77mmol)溶液后，室溫?cái)嚢杷鰬腋∫哼^夜。通過過濾收集析出的固體產(chǎn)物，用乙醇洗滌，室溫減壓干燥得到730mg(產(chǎn)率95％)標(biāo)題化合物的黃色晶體產(chǎn)物。
m.p.＞260℃(分解)1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ3.78(3H，s)，7.04(2H，dd，J＝2Hz，7Hz)，7.05(1H，d，J＝9Hz)，7.17(2H，dd，J＝2Hz，7Hz)，7.93(1H，s)，8.10(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.47(1H，d，J＝2Hz)。
IR(KBr)cm-11620，1571，1535，1502，1481，1344，1342，1295，1240，1191，1034，829，827，804。
FAB-MS(m/e)435(M+1)[實(shí)施例16]4-羥基-2-[3-硝基-4-[4-(三氟甲基)苯氧基]苯基]噻唑并[5，4-d]嘧啶向60％的氫化鈉(20mg，0.50mmol)的DMSO(3mL)懸浮液加入4-(三氟甲基)苯酚(65mg，0.40mmol)，室溫?cái)嚢杌旌衔?小時(shí)。加入前述2-(4-氯-3-硝基苯基)-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶(31mg，0.10mmol)后，在50℃攪拌混合物41小時(shí)。在冰浴冷卻和攪拌下向反應(yīng)混合物加入冷水(2.5mL)和2M的鹽酸(0.5mL)，攪拌混合物30分鐘。通過過濾收集析出的晶體產(chǎn)物，依次用水、乙醇、氯仿、乙醚和己烷洗滌得到3mg(產(chǎn)率7％)標(biāo)題化合物的黃色晶體產(chǎn)物。
1H-NMR(DMSO-d6)δ7.37(2H，d，J＝9Hz)，7.47(1H，d，J＝9Hz)，7.83(2H，d，J＝9Hz)，8.27(1H，s)，8.33(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.70(1H，d，J＝2Hz)，12.95(1H，s)。
FAB-MS(m/e)435(M+1)[實(shí)施例17]2-[4-(3-氯苯氧基)-3-硝基苯基]-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶在冰浴冷卻下向3-氯苯酚(20mg，0.16mmol)的DMSO(2mL)溶液加入60％的氫化鈉(10mg，0.25mmol)。室溫?cái)嚢杌旌衔?0分鐘。加入前述2-(4-氯-3-硝基苯基)-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶(40mg，0.13mmol)后，室溫?cái)嚢杌旌衔?1小時(shí)。加入3-氯苯酚(10mg，0.081mmol)和60％的氫化鈉(5mg，0.13mmol)后，室溫繼續(xù)攪拌混合物17小時(shí)。向混合物加入冰-水(5mL)和1M的鹽酸水溶液直至混合物達(dá)到pH4。通過過濾收集由此析出的晶體產(chǎn)物，依次用水(5mL)和乙醚(5mL)洗滌，室溫減壓干燥。用硅膠柱層析(甲醇/氯仿)純化晶體產(chǎn)物得到10.1mg(產(chǎn)率19％)標(biāo)題化合物的淺橙色無定形產(chǎn)物。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ7.0-7.1(1H，m)，7.1-7.2(1H，m)，7.14(1H，d，J＝9Hz)，7.2-7.3(1H，m)，7.37(1H，t，J＝8Hz)，8.11(1H，s)，8.23(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.64(1H，d，J＝2Hz)。
FAB-MS(m/e)401(M+1)
2-[4-(2-氯苯氧基)-3-硝基苯基]-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶在冰浴冷卻下和5分鐘內(nèi)向60％的氫化鈉(1.54g，38.5mmol)的DMSO(60mL)懸浮液加入2-氯苯酚(2.97g，23.1mmol)。在冰浴冷卻下攪拌混合物30分鐘，然后室溫?cái)嚢?小時(shí)。在冰浴冷卻下和5分鐘內(nèi)加入前述2-(4-氯-3-硝基苯基)-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶(4.75g，15.4mmol)后，在冰浴冷卻下攪拌混合物2小時(shí)，然后室溫?cái)嚢?5小時(shí)。在冰浴冷卻和攪拌下加入冷水(60mL)后，攪拌反應(yīng)混合物30分鐘。在冰浴冷卻、攪拌下和5分鐘內(nèi)向混合物滴加2M的鹽酸(20mL)，在冰浴冷卻下攪拌混合物1小時(shí)。通過過濾收集析出的晶體產(chǎn)物，用五份水(40mL)、兩份乙醚(20mL)和兩份己烷(20mL)洗滌得到5.6g黃色晶體產(chǎn)物。通過硅膠柱層析處理所述晶體產(chǎn)物，并用甲醇和氯仿(1/20-1/5)的混合物洗脫得到5.2g黃色晶體產(chǎn)物。將由此獲得的晶體產(chǎn)物懸浮在甲醇和氯仿(1/10)的混合物(52mL)中，室溫?cái)嚢?小時(shí)，通過過濾收集，用兩份氯仿洗滌，然后懸浮在乙醇(50mL)中。室溫?cái)嚢杷鰬腋∫?小時(shí)并過濾，得到4.70g標(biāo)題化合物的黃色晶體產(chǎn)物。合并甲醇-氯仿洗滌液和乙醇洗滌液，減壓濃縮得到0.5g黃色晶體產(chǎn)物。將由此得到的晶體產(chǎn)物懸浮在乙醇(50mL)中。加熱回流所述懸浮液幾分鐘，然后室溫?cái)嚢?小時(shí)。通過過濾收集析出的晶體產(chǎn)物，用兩份乙醇(1mL)洗滌，得到0.43g標(biāo)題化合物的黃色晶體產(chǎn)物?？偭?.13g(產(chǎn)率83％)。
m.p.283-288℃(分解)1H-NMR(DMSO-d6)δ7.08(1H，d，J＝9Hz)，7.3-7.5(3H，m)，7.70(1H，d，J＝9Hz)，8.25(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.26(1H，s)，8.66(1H，d，J＝2Hz)，12.93(1H，s)。
IR(KBr)cm-13078，1697，1618，1570，1535，1506，1473，1450，1348，1340，1306，1254，1246，1227，1225，1159，758。
FAB-MS(m/e)401(M+1)
2-[4-(2-氯苯氧基)-3-硝基苯基]-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶鉀鹽向上述2-[4-(2-氯苯氧基)-3-硝基苯基]-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶(800mg，2.00mol)的乙醇(32mL)懸浮液加入0.5mol/L的氫氧化鉀/乙醇溶液(6mL)和乙醇(8mL)。室溫?cái)嚢杷没旌衔?2小時(shí)。通過過濾收集析出的晶體產(chǎn)物，用乙醇(6mL)洗滌，室溫減壓干燥得到870mg(產(chǎn)率99％)標(biāo)題化合物的橙色晶體產(chǎn)物。
m.p.195-205℃(分解)1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.07(1H，d，J＝9Hz)，7.3-7.4(2H，m)，7.4-7.5(1H，m)，7.6-7.7(1H，m)，7.96(1H，s)，8.15(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.55(1H，d，J＝2Hz)。
IR(KBr)cm-13629，3388，3213，2347，1618，1578，1537，1508，1473，1338，1265，752。
FAB-MS(m/e)439(M+1)[實(shí)施例20]2-[4-(3-氟苯氧基)-3-硝基苯基]-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶在冰浴冷卻下向3-氟苯酚(18mg，0.16mmol)的DMSO(2mL)溶液加入60％的氫化鈉(13mg，0.33mmol)。室溫?cái)嚢杌旌衔?0分鐘。加入前述2-(4-氯-3-硝基苯基)-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶(40mg，0.13mmol)后，室溫?cái)嚢杌旌衔?6小時(shí)。然后向混合物加入冰-水(5mL)和1M的鹽酸水溶液直至混合物達(dá)到pH4。通過過濾收集析出的晶體產(chǎn)物，依次用水(5mL)和乙醚(5mL)洗滌，室溫減壓干燥。用硅膠柱層析(甲醇/氯仿)純化晶體產(chǎn)物得到40.3mg(產(chǎn)率66％)標(biāo)題化合物的淺黃色晶體產(chǎn)物。
1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.05(1H，dd，J＝2Hz，8Hz)，7.1-7.2(2H，m)，7.35(1H，d，J＝9Hz)，7.4-7.6(1H，m)，8.27(1H，s)，8.30(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.66(1H，d，J＝2Hz)，12.94(1H，s)。
FAB-MS(m/e)385(M+1)
2-[4-(2-氟苯氧基)-3-硝基苯基]-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶在氮?dú)鈿夥罩?，?-氟苯酚(1.47g，16.0mmol)溶解在DMSO(41mL)中，在冰浴冷卻下向所述溶液加入60％的氫化鈉(1.33g，33.3mmol)。室溫?cái)嚢杷没旌衔?5分鐘。在冰浴冷卻下向所述混合物加入前述2-(4-氯-3-硝基苯基)-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶(4.10g，13.3mmol)。然后室溫?cái)嚢杌旌衔?0小時(shí)。向混合物加入冰-水(123mL)和1M的鹽酸水溶液直至混合物達(dá)到pH3。通過過濾收集析出的晶體產(chǎn)物，并用水(123mL)洗滌。減壓干燥由此獲得的粗晶體產(chǎn)物，并通過硅膠柱層析(甲醇/氯仿)和甲醇與氯仿混合物的反復(fù)洗滌純化。在40℃減壓干燥所得晶體產(chǎn)物得到2.31g(產(chǎn)率59％)標(biāo)題化合物的黃色晶體產(chǎn)物。
m.p.279-281℃(分解)1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.19(1H，d，J＝9Hz)，7.3-7.6(4H，m)，8.25(1H，s)，8.26(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.65(1H，d，J＝2Hz)，12.93(1H，s)。
IR(KBr)cm-13039，2372，2345，1689，1622，1572，1535，1498，1473，1350，1284，1236，1176，1103，1080，1016，970，910，845，843，781，762，708。
FAB-MS(m/e)385(M+1)[實(shí)施例22]2-[4-(2-氟苯氧基)-3-硝基苯基]-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶鉀鹽將上述2-[4-(2-氟苯氧基)-3-硝基苯基]-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶(206mg，0.54mmol)懸浮在乙醇(8mL)中。加入0.5mol/L的氫氧化鉀的乙醇(1.6mL)溶液和乙醇(2mL)后，室溫?cái)嚢杷鰬腋∫?7小時(shí)。通過過濾收集析出的晶體產(chǎn)物，用乙醇(6mL)洗滌，室溫減壓干燥得到219mg(產(chǎn)率96％)標(biāo)題化合物的黃色晶體產(chǎn)物。
m.p.175-185℃(分解)
1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.17(1H，d，J＝9Hz)，7.3-7.4(3H，m)，7.4-7.5(1H，m)，7.95(1H，s)，8.15(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.53(1H，d，J＝2Hz)。
IR(KBr)cm-13629，3107，1620，1574，1539，1498，1481，1346，1342，1282，1242，758。
FAB-MS(m/e)423(M+1)[實(shí)施例23]2-[4-(4-氯苯氧基)-3-氰基苯基]-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶在氮?dú)鈿夥罩?，將前?-(4-氯-3-氰基苯基)-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶(30mg，0.10mmol)和4-氯苯酚(20mg，0.16mmol)懸浮在DMSO(5mL)中。在冰浴冷卻下加入60％的氫化鈉(12mg，0.30mmol)后，室溫?cái)嚢杷鰬腋∫?8小時(shí)。在冰浴冷卻下再加入4-氯苯酚(15mg，0.12mmol)、DMSO(3mL)和60％的氫化鈉(10mg，0.25mmol)后，室溫?cái)嚢杷鰬腋∫?8小時(shí)。在冰浴冷卻下再加入4-氯苯酚(15mg，0.12mmol)、DMSO(3mL)和60％的氫化鈉(10mg，0.25mmol)后，室溫?cái)嚢杷鰬腋∫?8小時(shí)。向懸浮液加入冰-水(10mL)和1M的鹽酸水溶液直至懸浮液達(dá)到pH2。通過過濾收集析出的晶體產(chǎn)物，并用水(5mL×3)洗滌。用硅膠柱層析(甲醇/氯仿)純化由此獲得的粗晶體產(chǎn)物得到9mg(產(chǎn)率23％)標(biāo)題化合物的白色晶體產(chǎn)物。
1H-NMR(CD3OD/CDCl3＝1/10，400MHz)δ6.95(1H，d，J＝9Hz)，7.1-7.2(2H，m)，7.4-7.5(2H，m)，8.05(1H，s)，8.18(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.38(1H，d，J＝2Hz)。
FAB-MS(m/e)381(M+1)。
2-[4-(4-氯苯氧基)-3-氰基苯基]-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶鉀鹽將上述2-[4-(4-氯苯氧基)-3-氰基苯基]-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶(100mg，0.26mmol)懸浮在乙醇(2mL)中。加入0.5mol/L的氫氧化鉀的乙醇(0.53mL，0.26mmol)溶液后，室溫?cái)嚢杷鰬腋∫哼^夜。通過過濾收集析出的固體產(chǎn)物，用乙醇洗滌，在空氣中干燥得到89mg(產(chǎn)率81％)標(biāo)題化合物的黃色晶體產(chǎn)物。
m.p.245℃(分解)1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.09(1H，d，J＝9Hz)，7.30(2H，d，J＝9Hz)，7.56(2H，d，J＝9Hz)，8.07(1H，s)，8.21(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.41(1H，d，J＝2Hz)。
IR(KBr)cm-12229，1697，1606，1568，1483，1456，1390，1333，1269，1198，1161，1130，1086，1014，982，895，849，825，802，694，590，555，515，490。
FAB-MS(m/e)419(M+1)[實(shí)施例25]4-羥基-2-[4-(4-甲氧羰基苯氧基)-3-硝基苯基]噻唑并[5，4-d]嘧啶向60％的氫化鈉(40mg，1.00mmol)的DMSO(2mL)懸浮液加入4-羥基苯甲酸甲酯(122mg，0.80mmol)，室溫?cái)嚢杌旌衔?小時(shí)。加入前述2-(4-氯-3-硝基苯基)-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶(62mg，0.20mmol)后，室溫?cái)嚢杌旌衔?.5小時(shí)，然后在50℃攪拌42小時(shí)。在水浴冷卻下向反應(yīng)混合物依次加入2M的鹽酸(0.5mL)和水(1.5mL)，并在水浴冷卻下攪拌混合物1小時(shí)。通過過濾收集析出的晶體產(chǎn)物，依次用水和乙醚洗滌得到73mg(產(chǎn)率85％)標(biāo)題化合物的淺褐色晶體產(chǎn)物。
1H-NMR(CDCl3)δ3.93(3H，s)，7.13(2H，d，J＝9Hz)，7.18(1H，d，J＝9Hz)，8.10(1H，s)，8.11(2H，d，J＝9Hz)，8.27(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.67(1H，d，J＝2Hz)，10.33(1H，s)。
IR(KBr)cm-13412，2927，1718，1685，1601，1572，1537，1502，1466，1433，1352，1282，1163，1117，766。
FAB-MS(m/e)425(M+1)[實(shí)施例26]2-[4-(4-羧基苯氧基)-3-硝基苯基]-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶將前述4-羥基-2-[4-(4-甲氧羰基苯氧基)-3-硝基苯基]噻唑并[5，4-d]嘧啶(42mg，0.10mmol)懸浮在甲醇(4mL)中。加入1M的氫氧化鈉水溶液(1mL)后，室溫?cái)嚢杷鰬腋∫?9小時(shí)。加入水(3mL)后，室溫繼續(xù)攪拌所述懸浮液4小時(shí)。用乙酸乙酯洗滌反應(yīng)混合物，將2M的鹽酸(1mL)加入混合物中。通過過濾收集析出的晶體產(chǎn)物，依次用水、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、熱氯仿和己烷洗滌得到20mg(產(chǎn)率48％)標(biāo)題化合物的褐色晶體產(chǎn)物。
1H-NMR(DMSO-d6)δ7.25(2H，d，J＝9Hz)，7.44(1H，d，J＝9Hz)，8.02(2H，d，J＝9Hz)，8.27(1H，s)，8.33(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.69(1H，d，J＝2Hz)，12.95(1H，s)。
FAB-MS(m/e)411(M+1)[實(shí)施例27]2-[4-(4-羧基苯氧基)-3-硝基苯基]-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶二鉀鹽將上述2-[4-(4-羧基苯氧基)-3-硝基苯基]-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶(300mg，0.73mmol)懸浮在乙醇(10mL)中。加入0.5mol/L的氫氧化鉀/乙醇溶液(3.0mL)和乙醇(3mL)后，室溫?cái)嚢杷鰬腋∫?小時(shí)。通過過濾收集析出的晶體產(chǎn)物，用乙醇(10mL)洗滌，室溫減壓干燥得到345mg(產(chǎn)率97％)標(biāo)題化合物的橙色晶體產(chǎn)物。
m.p.270℃(分解)1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.02(2H，d，J＝8Hz)，7.17(1H，d，J＝9Hz)，7.91(2H，d，J＝8Hz)，7.96(1H，s)，8.14(1H，dd，J＝1Hz，9Hz)，8.51(1H，d，J＝1Hz)。
IR(KBr)cm-13381，3278，2345，1614；1564，1537，1481，1392，1350，1279，1227，1192，1161。
FAB-MS(m/e)487(M+1)[實(shí)施例28]2-[3-硝基-4-(4-苯氧基苯氧基)苯基]-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶在氮?dú)鈿夥罩?，?-苯氧基苯酚(32mg，0.17mmol)溶解在DMSO(3mL)中，在冰浴冷卻下加入60％的氫化鈉(13mg，0.33mmol)后，室溫?cái)嚢杷萌芤?0分鐘。然后，加入2-(4-氯-3-硝基苯基)-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶(40mg，0.13mmol)后，室溫?cái)嚢枞芤?8小時(shí)。向溶液加入冰-水(10mL)和1M的鹽酸水溶液直至溶液達(dá)到pH3。通過過濾收集析出的晶體產(chǎn)物，并用水(5mL×5)和乙醚(5mL×5)洗滌。用硅膠柱層析(甲醇/氯仿)純化由此獲得的粗晶體產(chǎn)物得到35mg(產(chǎn)率59％)標(biāo)題化合物的黃色晶體產(chǎn)物。
1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.0-7.3(8H，m)，7.4-7.5(2H，m)，8.25(1H，s)，8.26(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.62(1H，d，J＝2Hz)，12.92(1H，s)。
IR(KBr)cm-13423，3064，2927，2372，1686，1618，1572，1535，1487，1483，1466，1350，1267，1236，1186，1084，860，692。
FAB-MS(m/e)459(M+1)[實(shí)施例29]2-(3-硝基-4-苯基氨基苯基)-4-羥基-噻唑并[5，4-d]嘧啶加熱回流苯胺(0.5mL，5.5mmol)、2-(4-氯-3-硝基苯基)-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶(31mg，0.10mmol)、碳酸鉀(28mg，0.20mmol)和氧化銅(1mg)2小時(shí)。將混合物冷卻至室溫。接著，向混合物加入冰-水(10mL)和1M的鹽酸水溶液直至混合物達(dá)到pH3。通過過濾收集析出的晶體產(chǎn)物，用水(3mL×5)和乙醚(3mL×2)洗滌，在50℃減壓干燥得到33mg(產(chǎn)率89％)標(biāo)題化合物的褐色晶體產(chǎn)物。
1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.26(1H，d，J＝9Hz)，7.3-7.5(5H，m)，8.06(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.21(1H，d，J＝4Hz)，8.68(1H，d，J＝2Hz)，9.77(1H，s)，12.85(1H，s)。
IR(KBr)cm-13408，3064，2372，1686，1624，1595，1568，1533，1497，1475，1352，1263，1215，1153，1072，972，760，694。
FAB-MS(m/e)366(M+1)
4-羥基-2-[4-(4-異丙基苯氧基)-3-硝基苯基]噻唑并[5，4-d]嘧啶向60％的氫化鈉(10mg，0.25mmol)的DMSO(2mL)懸浮液加入4-異丙基苯酚(21mg，0.15mmol)。室溫?cái)嚢钁腋∫?小時(shí)。然后，加入前述2-(4-氯-3-硝基苯基)-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶(31mg，0.1mmol)后，室溫?cái)嚢钁腋∫?1小時(shí)。在冰浴冷卻下加入1M的鹽酸(0.5mL)和水(1.5mL)后，攪拌反應(yīng)混合物30分鐘。通過過濾收集析出的晶體產(chǎn)物，依次用水、乙醚和己烷洗滌得到32mg(產(chǎn)率78％)標(biāo)題化合物的黃色晶體產(chǎn)物。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.23(6H，d，J＝7Hz)，2.9-3.0(1H，m)，7.14(2H，d，J＝9Hz)，7.19(1H，d，J＝9Hz)，7.36(2H，d，J＝9Hz)，8.25(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.26(1H，s)，8.62(1H，d，J＝2Hz)，12.92(1H，s)。
IR(KBr)cm-12958，1697，1618，1599，1568，1537，1504，1454，1352，1302，1267，1248，1225，1200，1167，1165，850。
FAB-MS(m/e)409(M+1)[實(shí)施例31]4-羥基-2-[3-硝基-4-(4-苯基苯氧基)苯基]噻唑并[5，4-d]嘧啶向60％的氫化鈉(10mg，0.25mmol)的DMSO(2mL)懸浮液加入4-苯基苯酚(26mg，0.15mmol)。然后室溫?cái)嚢钁腋∫?小時(shí)。加入前述2-(4-氯-3-硝基苯基)-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶(31mg，0.1mmol)后，室溫?cái)嚢钁腋∫?0小時(shí)。然后，在冰浴冷卻下加入1M的鹽酸(0.5mL)和水(1.5mL)后，攪拌反應(yīng)混合物30分鐘。通過過濾收集析出的晶體產(chǎn)物，依次用水、乙醚和己烷洗滌得到34mg(產(chǎn)率77％)標(biāo)題化合物的黃色晶體產(chǎn)物。
1H-NMR(DMSO-d6)δ7.3-7.5(6H，m)，7.69(2H，d，J＝8Hz)，7.78(2H，d，J＝8Hz)，8.26(1H，s)，8.29(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.66(1H，d，J＝2Hz)，12.93(1H，s)。
IR(KBr)cm-13059，1676，1672，1618，1600，1571，1535，1514，1485，1466，1350，1250，1167，766。
FAB-MS(m/e)443(M+1)[實(shí)施例32]4-羥基-2-[3-硝基-4-(3-吡啶氧基)苯基]噻唑并[5，4-d]嘧啶向60％的氫化鈉(26mg，0.65mmol)的DMSO(1mL)懸浮液加入3-羥基吡啶(62mg，0.65mmol)。然后室溫?cái)嚢钁腋∫?小時(shí)。加入前述2-(4-氯-3-硝基苯基)-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶(100mg，0.32mmol)后，室溫?cái)嚢钁腋∫?1.5小時(shí)。向反應(yīng)混合物依次加入冰-水(0.1mL)和1mol/L的鹽酸直至混合物達(dá)到pH7。通過過濾收集析出的晶體產(chǎn)物，并用水(3mL)洗滌。用硅膠柱層析(甲醇/氯仿)純化由此獲得的粗晶體產(chǎn)物得到100mg(產(chǎn)率85％)標(biāo)題化合物的黃色晶體產(chǎn)物。
m.p.276-280℃(分解)1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.34(1H，d，J＝9Hz)，7.53(1H，dd，J＝5Hz，8Hz)，7.6-7.7(1H，m)，8.26(1H，s)，8.29(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.5-8.6(1H，m)，8.55(1H，d，J＝3Hz)，8.67(1H，d，J＝2Hz)。
IR(KBr)cm-13055，2648，1701，1699，1616，1572，1570，1537，1466，1427，1350，1269，1219，1217，1215，1140。
FAB-MS(m/e)368(M+1)[實(shí)施例33]4-羥基-2-[3-硝基-4-(3-吡啶氧基)苯基]噻唑并[5，4-d]嘧啶鉀鹽向上述4-羥基-2-[3-硝基-4-(3-吡啶氧基)苯基]噻唑并[5，4-d]嘧啶(50mg，0.14mol)的乙醇(2mL)懸浮液加入0.5mol/L的氫氧化鉀的乙醇(0.34mL)溶液。室溫?cái)嚢钁腋∫?小時(shí)。通過過濾收集析出的晶體產(chǎn)物，用乙醇(0.5mL×2)洗滌，室溫減壓干燥得到50.5mg(產(chǎn)率89％)標(biāo)題化合物的淺黃色晶體產(chǎn)物。
m.p.236-240℃(分解)1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)7.32(1H，d，J＝9Hz)，7.50(1H，dd，J＝5Hz，8Hz)，7.6-7.7(1H，m)，7.95(1H，s)，8.18(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.48(1H，dd，J＝1Hz，5Hz)，8.53(1H，d，J＝3Hz)，8.56(1H，d，J＝2Hz)。
IR(KBr)cm-13358，3064，1618，1574，1539，1477，1425，1344，1302，1296，1269，1207。
FAB-MS(m/e)406(M+1)[對(duì)照實(shí)施例12]4-甲氧基甲氧基苯酚將60％的氫化鈉(1.80g，45.0mmol)和無水THF(20mL)的混合物冷卻至-20℃。加入對(duì)苯二酚(2.00g，18.2mmol)的THF(30mL)溶液后，室溫?cái)嚢杌旌衔?小時(shí)，然后再次冷卻至-20℃。滴加氯甲基甲基醚(1.3mL，18.0mmol)后，將冷卻的混合物慢慢升溫至10℃，室溫?cái)嚢?小時(shí)后，倒入碎冰(500g)中。向所得混合物加入3mol/L的鹽酸水溶液直至混合物達(dá)到pH4-5。接著，用二氯甲烷(100mL×2)對(duì)混合物進(jìn)行萃取。用水(100mL×2)和飽和氯化鈉水溶液(100mL)洗滌提取液，用無水硫酸鈉干燥，減壓蒸干溶劑。用硅膠柱層析(乙酸乙酯/己烷)純化殘留物得到581mg(產(chǎn)率21％)標(biāo)題化合物的淺黃色油狀物。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ3.47(3H，s)，5.09(2H，s)，6.7-6.8(2H，m)，6.9-7.0(2H，m)。
4-羥基-2-[4-(4-甲氧基甲氧基苯氧基)-3-硝基苯基]噻唑并[5，4-d]嘧啶向60％的氫化鈉(26mg，0.65mmol)的DMSO(1mL)懸浮液加入上述4-甲氧基甲氧基苯酚(100mg，0.65mmol)。室溫?cái)嚢钁腋∫?0分鐘。加入前述2-(4-氯-3-硝基苯基)-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶(100mg，0.32mmol)后，室溫?cái)嚢钁腋∫?2.5小時(shí)。向反應(yīng)混合物加入冰-水(1mL)和1mol/L的鹽酸直至混合物達(dá)到pH7。通過過濾收集析出的晶體產(chǎn)物，并用水(3mL)洗滌。用硅膠柱層析(甲醇/氯仿)純化由此獲得的粗晶體產(chǎn)物得到126mg(產(chǎn)率92％)標(biāo)題化合物的黃色晶體產(chǎn)物。
m.p.235-236℃1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ3.41(3H，s)，5.21(2H，s)，7.1-7.3(5H，m)，8.2-8.3(2H，m)，8.61(1H，d，J＝1Hz)，12.91(1H，s)。
4-羥基-2-[4-(4-羥基苯氧基)-3-硝基苯基]噻唑并[5，4-d]嘧啶向上述4-羥基-2-[4-(4-甲氧基甲氧基苯氧基)-3-硝基苯基]噻唑并[5，4-d]嘧啶(75mg，0.18mmol)的THF(18mL)懸浮液加入4mol/L的鹽酸的二氧六環(huán)和水(五滴)溶液(0.6mL，2.40mmol)。室溫?cái)嚢杷鰬腋∫?1小時(shí)，在50℃攪拌2小時(shí)，加熱回流攪拌1小時(shí)，然后減壓蒸干溶劑。向殘留物加入乙醇(1.5mL)。通過過濾收集析出的晶體產(chǎn)物，用乙醇(0.5mL)和己烷(2mL)洗滌，在50℃減壓干燥1小時(shí)得到67mg(產(chǎn)率97％)標(biāo)題化合物的黃色晶體產(chǎn)物。
m.p.＞300℃(分解)1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ6.8-6.9(2H，m)，7.0-7.1(3H，m)，8.21(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.25(1H，s)，8.59(1H，d，J＝2Hz)，9.59(1H，s)，12.91(1H，s)。
IR(KBr)cm-13207，2893，1682，1622，1570，1537，1508，1468，1443，1344，1306，1252，1228，1194，1101，1018，831。
FAB-MS(m/e)383(M+1)[實(shí)施例36]2-[3-氰基-4-(4-氟苯氧基)苯基]-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶向60％的氫化鈉(122mg，3.05mmol)的DMSO(4mL)懸浮液加入4-氟苯酚(342mg，3.05mmol)，室溫?cái)嚢钁腋∫?小時(shí)。加入前述2-(4-氯-3-氰基苯基)-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶(400mg，1.39mmol)后，室溫?cái)嚢钁腋∫?6小時(shí)，然后在60℃攪拌9小時(shí)。在冰浴冷卻下向懸浮液加入1mol/L的鹽酸直至懸浮液達(dá)到pH3。通過過濾收集析出的晶體產(chǎn)物，依次用水(10mL×3)、乙醇(5mL)和乙醚(6mL×2)洗滌，在50℃減壓干燥1小時(shí)得到466mg(產(chǎn)率92％)標(biāo)題化合物的褐白色晶體產(chǎn)物。
m.p.＞290℃(分解)1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.03(1H，d，J＝9Hz)，7.3-7.4(4H，m)，8.2-8.3(2H，m)，8.50(1H，d，J＝2Hz)，12.91(1H，s)。
IR(KBr)cm-12235，1678，1608，1577，1498，1477，1369，1354，1263，1221，1186，1111，1103，1016，972，906，854，841，839，796，794，764，710，677，648，611，565，507。
2-[3-氰基-4-(4-氟苯氧基)苯基]-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶鉀鹽向上述2-[3-氰基-4-(4-氟苯氧基)苯基]-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶(466mg，1.28mmol)的乙醇(14mL)懸浮液加入0.5mol/L的氫氧化鉀的乙醇溶液(2.8mL)，室溫?cái)嚢杷鰬腋∫?小時(shí)。通過過濾收集析出的晶體產(chǎn)物，用乙醇(6mL)洗滌，室溫減壓干燥得到411mg(產(chǎn)率80％)標(biāo)題化合物的淺黃色晶體產(chǎn)物。
m.p.257-262℃(分解)1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.01(1H，d，J＝9Hz)，7.3-7.4(4H，m)，7.93(1H，s)，8.16(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.33(1H，d，J＝2Hz)。
IR(KBr)cm-12227，1641，1566，1481，1390，1331，1292，1275，1227，1188，1138，1107，1026，831，829。
FAB-MS(m/e)403(M+1)。
4-(4-氟苯氧基)-3-硝基苯甲酸酐加熱回流包含4-(4-氟苯氧基)-3-硝基-苯甲酸(8.0g，28.9mmol)、亞硫酰氯(10.3g，86.6mmol)、DMF(兩滴)和二氯甲烷(80mL)的溶液3小時(shí)。接著，減壓蒸干溶液中的溶劑，加入苯和甲苯后，濃縮至干。向殘留物加入二氯甲烷(50mL)和4-(4-氟苯氧基)-3-硝基苯甲酸(8.0g，28.9mmol)。在冰浴冷卻和攪拌下向所得混合物滴加三乙胺(5.84g，57.7mmol)的二氯甲烷(30mL)溶液，室溫?cái)嚢杌旌衔镞^夜。接著，減壓蒸干混合物中的溶劑。向殘留物加入水。通過過濾收集析出的固體產(chǎn)物，減壓干燥得到12.6g(產(chǎn)率81％)標(biāo)題化合物的黃色晶體產(chǎn)物。
將由此獲得的產(chǎn)物直接用于以下反應(yīng)。
2-[4-(4-氟苯氧基)-3-硝基苯基]-4-羥基唑并[5，4-d]嘧啶在油浴(加熱至155℃)和氮?dú)饬髦屑訜?-氨基-4，6-二羥基嘧啶鹽酸鹽(500mg，3.06mmol)和上述4-(4-氟苯氧基)-3-硝基苯甲酸酐(8.2g，15.3mmol)的混合物1.5小時(shí)。加入氯仿后，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)混合物過夜。接著，濾除不溶物，并減壓蒸干濾液中的溶劑。重復(fù)該過程兩次。將所得粗產(chǎn)物進(jìn)行硅膠柱層析，并用氯仿/甲醇(100/1)洗脫，收集一部分標(biāo)題化合物。濃縮收集的部分，并用乙醚洗滌得到420mg(產(chǎn)率82％)標(biāo)題化合物的白色晶體產(chǎn)物。
1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.18(1H，d，J＝9Hz)，7.3-7.4(4H，m)，8.30(1H，s)，8.31(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.66(1H，d，J＝2Hz)，13.04(1H，s)。
2-[4-(4-氟苯氧基)-3-硝基苯基]-4-羥基唑并[5，4-d]嘧啶鉀鹽向上述2-[4-(4-氟苯氧基)-3-硝基苯基]-4-羥基唑并[5，4-d]嘧啶(400mg，1.09mmol)的乙醇(8mL)懸浮液加入0.5mol/L的氫氧化鉀的乙醇溶液(2.17mL，1.09mmol)，室溫?cái)嚢杷鰬腋∫?小時(shí)。通過過濾收集析出的固體產(chǎn)物，用乙醇洗滌，在40℃減壓干燥過夜得到420mg(產(chǎn)率95％)標(biāo)題化合物的黃色晶體產(chǎn)物。
m.p.＞260℃(分解)1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.17(1H，d，J＝9Hz)，7.2-7.4(4H，m)，7.88(1H，s)，8.22(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.56(1H，d，J＝2Hz)。
IR(KBr)cm-11625，1506，1533，1349，1275，1228，1188，1161，1014，908，848，817，815，782，727。
2-[3-氰基-4-(4-氟苯氧基)苯基]-4-甲氧基噻唑并[5，4-d]嘧啶向55％的氫化鈉(64mg，1.47mmol)的DMSO(2mL)懸浮液加入4-氟苯酚(163mg，1.45mmol)，室溫?cái)嚢钁腋∫?小時(shí)。加入前述2-(4-氯-3-氰基苯基)-4-甲氧基噻唑并[5，4-d]嘧啶(400mg，1.32mmol)和DMSO(2mL)后，室溫?cái)嚢钁腋∫?.5小時(shí)，然后在50℃攪拌16小時(shí)。在冰浴冷卻下向所述懸浮液加入水(40mL)。通過過濾收集析出的晶體產(chǎn)物，并用水(10mL)洗滌。用硅膠柱層析(乙酸乙酯/己烷)純化所得粗晶體產(chǎn)物。用乙酸乙酯和己烷的混合物以及己烷洗滌由此純化的晶體產(chǎn)物，在空氣中室溫干燥得到450mg(產(chǎn)率90％)標(biāo)題化合物的褐白色晶體產(chǎn)物。
m.p.205.6-206.6℃1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ4.27(3H，s)，6.89(1H，d，J＝9Hz)，7.1-7.2(4H，m)，8.15(1H，dd，J＝2Hz，8Hz)，8.44(1H，d，J＝2Hz)，8.83(1H，s)。
IR(KBr)cm-12239，1612，1608，1568，1529，1500，1475，1414，1396，1534，1323，1263，1190，1163，1111，1109，1043。
FAB-MS(m/e)379(M+1)。
2-[3-氰基-4-(4-氟苯硫基)苯基]-4-甲氧基噻唑并[5，4-d]嘧啶將前述2-(4-氯-3-氰基苯基)-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶(200mg，0.66mmol)、碳酸鉀(110mg，0.80mmol)、4-氟苯硫酚(0.084mL，0.78mmol)和乙醇(4mL)混合，并在氮?dú)鈿夥罩屑訜峄亓?小時(shí)。然后減壓蒸干混合物的溶劑。向殘留物加入水(10mL)。通過過濾收集析出的晶體產(chǎn)物，并用硅膠柱層析(乙酸乙酯/己烷，甲醇/氯仿)純化。用乙酸乙酯和己烷的混合物以及己烷依次洗滌由此處理的晶體產(chǎn)物，在空氣中干燥得到209mg(產(chǎn)率80％)標(biāo)題化合物的淺黃色晶體產(chǎn)物。
m.p.215℃1H-NMR(CDCl3，400MHz)4.28(3H，s)，7.01(1H，d，J＝9Hz)，7.1-7.3(2H，m)，7.5-7.7(2H，m)，8.01(1H，dd，J＝2Hz，8Hz)，8.40(1H，d，J＝2Hz)，8.82(1H，s)。
2-[3-氰基-4-(4-氟苯硫基)苯基]-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶在上述2-[3-氰基-4-(4-氟苯硫基)苯基]-4-甲氧基噻唑并[5，4-d]嘧啶(200g，0.51mmol)的二氯甲烷(8mL)懸浮液中滴加三溴化硼(0.15mL，1.59mmol)。然后在40℃攪拌所述懸浮液4小時(shí)，并向所述懸浮液加入冰-水(8.5mL)。通過過濾收集析出的晶體產(chǎn)物，依次用二氯甲烷(4mL)和水(20mL)洗滌，室溫減壓干燥得到155mg(產(chǎn)率80％)標(biāo)題化合物的淺黃色晶體產(chǎn)物。
m.p.326-331℃1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.16(1H，d，J＝8Hz)，7.3-7.5(2H，m)，7.6-7.8(2H，m)，8.18(1H，dd，J＝2Hz，8Hz)，8.25(1H，d，J＝3Hz)，8.46(1H，d，J＝2Hz)，12.92(1H，s)。
2-[3-氰基-4-(4-氟苯硫基)苯基]-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶鉀鹽向上述2-[3-氰基-4-(4-氟苯硫基)苯基]-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶(120mg，0.32mmol)的乙醇(6mL)懸浮液加入0.5mol/L的氫氧化鉀的乙醇溶液(0.7mL)，室溫?cái)嚢杷鰬腋∫?2小時(shí)。通過過濾收集析出的晶體產(chǎn)物，用乙醇(5mL)洗滌，室溫減壓干燥得到127mg(產(chǎn)率89％)標(biāo)題化合物的淺黃色晶體產(chǎn)物。
m.p.293-298℃(分解)1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.21(1H，d，J＝9Hz)，7.3-7.4(2H，m)，7.6-7.7(2H，m)，7.94(1H，s)，8.09(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.31(1H，d，J＝2Hz)。
IR(KBr)cm-13396，3047，2227，1919，1653，1591，1567，1491，1470，1398，1329，1298，1225，1157，1065，984，827。
FAB-MS(m/e)419(M+1)。
2-[3-氰基-4-(2-氟苯氧基)苯基]-4-甲氧基噻唑并[5，4-d]嘧啶向55％的氫化鈉(24mg，0.55mmol)的DMSO(0.7mL)懸浮液加入2-氟苯酚(62mg，0.55mmol)，室溫?cái)嚢钁腋∫?0分鐘。加入前述2-(4-氯-3-氰基苯基)-4-甲氧基噻唑并[5，4-d]嘧啶(150mg，0.50mmol)和DMSO(0.7mL)后，在50℃攪拌懸浮液15小時(shí)。向所述懸浮液加入2-氟苯酚(31mg，0.27mmol)、55％的氫化鈉(12mg，0.27mmol)和DMSO(0.4mL)，然后在50℃攪拌懸浮液8小時(shí)。在冰浴冷卻下再向所述懸浮液加入水(9mL)。通過過濾收集析出的晶體產(chǎn)物，用水(4mL)洗滌，用硅膠柱層析(乙酸乙酯/己烷)純化得到174mg(產(chǎn)率84％)標(biāo)題化合物的白色晶體產(chǎn)物。
m.p.250.4-253.4℃1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ4.27(3H，s)，6.85(1H，dd，J＝1Hz，9Hz)，7.2-7.4(4H，m)，8.15(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.45(1H，d，J＝2Hz)，8.69(1H，s)。
2-[3-氰基-4-(2-氟苯氧基)苯基]-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶向上述2-[3-氰基-4-(2-氟苯氧基)苯基]-4-甲氧基噻唑并[5，4-d]嘧啶(160g，0.42mmol)的二氯甲烷(6.4mL)懸浮液滴加三溴化硼(0.12mL，1.27mmol)，在40℃攪拌懸浮液18小時(shí)。加入乙酸乙酯(0.2mL)后，在相同溫度攪拌所述懸浮液8小時(shí)。然后，加入冰-水(2mL)后，減壓蒸干所述懸浮液中的溶劑。向殘留物加入水(20mL)，室溫?cái)嚢韬旌衔?小時(shí)。通過過濾收集析出的晶體產(chǎn)物，用水(10mL)洗滌，室溫減壓干燥。將所得晶體產(chǎn)物懸浮在乙醇(15mL)中，室溫?cái)嚢?小時(shí)，并通過過濾收集。用乙醇(5mL)洗滌收集得到的晶體產(chǎn)物，室溫減壓干燥得到128mg(產(chǎn)率80％)標(biāo)題化合物的褐白色晶體產(chǎn)物。
m.p.288-293℃1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.04(1H，d，J＝9Hz)，7.3-7.6(4H，m)，8.25(1H，d，J＝4Hz)，8.28(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.53(1H，d，J＝2Hz)，12.91(1H，s)。
2-[3-氰基-4-(2-氟苯氧基)苯基]-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶鉀鹽向上述2-[3-氰基-4-(2-氟苯氧基)苯基]-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶(127mg，0.33mmol)的乙醇(3.5mL)懸浮液加入0.5mol/L的氫氧化鉀的乙醇溶液(0.73mL)，室溫?cái)嚢杷鰬腋∫?小時(shí)。通過過濾收集析出的晶體產(chǎn)物，用乙醇(2mL)洗滌，室溫減壓干燥得到117mg(產(chǎn)率88％)標(biāo)題化合物的白色晶體產(chǎn)物。
m.p.235-240℃(分解)1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.00(1H，d，J＝9Hz)，7.3-7.6(4H，m)，7.94(1H，s)，8.17(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.35(1H，d，J＝2Hz)。
IR(KBr)cm-13115，2233，1570，1500，1483，1458，1412，1329，1279，1248，1186，1124，1105，1028，987。
FAB-MS(m/e)403(M+1)。
2-(3-氰基-4-苯氧基苯基)-4-甲氧基噻唑并[5，4-d]嘧啶向苯酚(93mg，0.99mmol)的無水DMSO(20mL)溶液加入60％的氫化鈉(40mg，0.99mmol)，在50℃攪拌所述溶液20分鐘。向所述溶液加入前述2-[4-氯-3-氰基苯基]噻唑并[5，4-d]嘧啶(150mg，0.50mmol)的無水DMSO(4mL)溶液。室溫?cái)嚢杷没旌衔?小時(shí)，在50℃繼續(xù)攪拌3小時(shí)。向反應(yīng)混合物加入水。通過過濾收集由此析出的固體產(chǎn)物，用水洗滌，在空氣中干燥得到152mg(產(chǎn)率85％)標(biāo)題化合物的白色晶體產(chǎn)物。
1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ4.15(3H，s)，7.04(1H，d，J＝9Hz)，7.3-7.6(5H，m)，8.35(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.60(1H，d，J＝2Hz)，8.76(1H，s)。
2-(3-氰基-4-苯氧基苯基)-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶向上述2-[3-氰基-4-苯氧基苯基]-4-甲氧基噻唑并[5，4-d]嘧啶(150mg，0.42mmol)的無水二氯甲烷(10mL)懸浮液加入三溴化硼(313mg，1.25mmol)，室溫?cái)嚢钁腋∫?6小時(shí)。加入乙酸乙酯(3mL)后，在50℃繼續(xù)攪拌所述懸浮液3小時(shí)。向反應(yīng)混合物加入冰-水。通過過濾收集由此析出的固體產(chǎn)物，用水和乙酸乙酯洗滌，在空氣中干燥得到87mg(產(chǎn)率61％)標(biāo)題化合物的白色晶體產(chǎn)物。
1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.03(1H，d，J＝9Hz)，7.2-7.6(5H，m)，8.2-8.3(1H，m)，8.27(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.50(1H，d，J＝2Hz)，12.90(1H，s)。
2-(3-氰基-4-苯氧基苯基)-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶鉀鹽向上述2-(3-氰基-4-苯氧基苯基)-4-羥基噻唑并[5，4-d]嘧啶(85mg，0.25mmol)的乙醇(2mL)懸浮液加入0.5mol/L的氫氧化鉀的乙醇溶液(0.49mL，0.25mmol)，室溫?cái)嚢杷鰬腋∫哼^夜。通過過濾收集析出的固體產(chǎn)物，用乙醇洗滌，在空氣中干燥得到72mg(產(chǎn)率77％)標(biāo)題化合物的黃色晶體產(chǎn)物。
m.p.＞260℃(分解)1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.02(1H，d，J＝9Hz)，7.2-7.6(5H，m)，8.01(1H，s)，8.18(1H，dd，J＝2Hz，9Hz)，8.37(1H，d，J＝2Hz)。
IR(KBr)cm-12231，1668，1560，1481，1392，1331，1263，1192，1163，1113，1072，1020，984，895，858，804，787，690。
FAB-MS(m/e)385(M+1)。
藥理試驗(yàn)1(體外測(cè)試方法)(測(cè)試過程)1.試樣的制備將受試化合物溶解在二甲亞砜中，并用50mM的磷酸鹽緩沖液(pH7.5)稀釋得到預(yù)定濃度的溶液。
2.測(cè)試將125μL不同濃度的受試化合物溶液分別加入1mL黃嘌呤(SIGMA，250μM)的含磷緩沖液(50mM，pH7.5)溶液中。然后在30℃預(yù)溫育所述混合物5分鐘。接著，向預(yù)溫育的混合物加入125μL用50mM的磷酸鹽緩沖液(pH7.5)稀釋至70mU/mL的牛奶黃嘌呤氧化酶(Roche)，所述混合物在30℃反應(yīng)10分鐘。然后，向反應(yīng)混合物加入1N的鹽酸(200μL)以終止反應(yīng)。接著利用分光光度計(jì)(ShimadzuUV-160A)測(cè)出在OD 290nm的吸光度以得到抑制率。測(cè)得的抑制率用于獲取IC50。
依據(jù)下式計(jì)算抑制率抑制率(％)＝[1-(B-C)/(A-C)]×100A對(duì)照物的吸光度B測(cè)得的包含受試化合物的樣品的吸光度C空白的吸光度
(測(cè)試結(jié)果)測(cè)試結(jié)果見表11和12。
從表11和12清楚可見，本發(fā)明化合物在體外藥理測(cè)試中表現(xiàn)出了優(yōu)異的黃嘌呤氧化酶抑制作用。
藥理試驗(yàn)2(體內(nèi)測(cè)試)(測(cè)試方法)通過強(qiáng)迫單次口服以0.3mg/kg或3mg/kg的量給予未禁食的ICR鼠(7W)以懸浮在1％的甲基纖維素溶液中的受試化合物。給藥1小時(shí)后，從處于醚麻醉狀態(tài)的鼠的主動(dòng)脈收集血液。通過傳統(tǒng)方法從收集得到的血液分離血漿。然后利用自動(dòng)分析儀(7060E)通過酶法對(duì)所述血漿進(jìn)行尿酸值的測(cè)定，得到給藥試樣組的血漿尿酸值-抑制率(相對(duì)于從正常組獲得的比值)。
基于所得血漿尿酸抑制率，得到活性值(％)(相對(duì)于從使用TMX-67(0.3mg/kg)或別嘌呤醇(3mg/kg)同時(shí)進(jìn)行的測(cè)試所得的活性值)。
(測(cè)試結(jié)果)測(cè)試結(jié)果見表11和12。
從表11和12清楚可見，本發(fā)明化合物在體內(nèi)藥理測(cè)試中表現(xiàn)出了優(yōu)異的黃嘌呤氧化酶抑制作用。
表11
所述實(shí)施例編號(hào)對(duì)應(yīng)于前述實(shí)施例。
表12
所述實(shí)施例編號(hào)對(duì)應(yīng)于前述實(shí)施例。
權(quán)利要求
1.下式(I)的化合物或其鹽 其中R1代表具有6-10個(gè)碳原子的芳基，或雜芳基，所述芳基或雜芳基可具有選自以下的取代基具有1-8個(gè)碳原子的烷基、具有1-8個(gè)碳原子的鹵素取代的烷基、具有1-8個(gè)碳原子的烷氧基、用具有1-8個(gè)碳原子的烷氧基取代的具有1-8個(gè)碳原子的烷氧基、具有2-8個(gè)碳原子的烷氧羰基、甲?；?、羧基、鹵素、羥基、硝基、氰基、氨基、具有6-10個(gè)碳原子的芳基和具有6-10個(gè)碳原子的芳氧基；R2代表氰基、硝基、甲酰基、羧基、氨基甲?；蚓哂?-8個(gè)碳原子的烷氧羰基；R3代表羥基、氨基、羧基、巰基、OR4或NHR5，其中R4和R5各自為具有1-8個(gè)碳原子的烷基，所述烷基可具有選自以下的取代基鹵素、羥基、硝基、氰基、氨基、具有6-10個(gè)碳原子的芳基和具有6-10個(gè)碳原子的芳氧基；X代表氧、-N(R6)-或-S(O)n-，其中R6為氫、具有1-8個(gè)碳原子的烷基或R1的基團(tuán)，n為0-2的整數(shù)；和Y代表氧或硫。
2.權(quán)利要求
1的化合物或其鹽，其中R1代表苯基、萘基、呋喃基、吡咯基、噻吩基、咪唑基、嘧啶基、噻唑基、吡啶基、吲哚基或喹啉基，上述基團(tuán)可具有選自以下的取代基具有1-8個(gè)碳原子的烷基、具有1-8個(gè)碳原子的鹵素取代的烷基、具有1-8個(gè)碳原子的烷氧基、具有2-8個(gè)碳原子的烷氧羰基、甲?；Ⅳ然?、鹵素、羥基、硝基、氰基、氨基、具有6-10個(gè)碳原子的芳基和具有6-10個(gè)碳原子的芳氧基。
3.權(quán)利要求
1的化合物或其鹽，其中R1代表苯基，所述苯基可具有選自以下的取代基具有1-8個(gè)碳原子的烷基、具有1-8個(gè)碳原子的鹵素取代的烷基、具有1-8個(gè)碳原子的烷氧基、具有2-8個(gè)碳原子的烷氧羰基、甲?；Ⅳ然?、鹵素、羥基、硝基、氰基、氨基、具有6-10個(gè)碳原子的芳基和具有6-10個(gè)碳原子的芳氧基。
4.權(quán)利要求
1的化合物或其鹽，其中R1代表苯基，所述苯基可具有選自以下的取代基具有1-8個(gè)碳原子的烷基、具有1-8個(gè)碳原子的鹵素取代的烷基、具有1-8個(gè)碳原子的烷氧基、具有2-8個(gè)碳原子的烷氧羰基、甲?；?、羧基、鹵素、苯基和苯氧基。
5.權(quán)利要求
1-4中任一項(xiàng)的化合物或其鹽，其中R2代表氰基或硝基。
6.權(quán)利要求
1-4中任一項(xiàng)的化合物或其鹽，其中R2代表氰基。
7.權(quán)利要求
1-6中任一項(xiàng)的化合物或其鹽，其中R3代表羥基。
8.權(quán)利要求
1-7中任一項(xiàng)的化合物或其鹽，其中R3連接到稠合雜環(huán)的4-位。
9.權(quán)利要求
1-8中任一項(xiàng)的化合物或其鹽，其中X為氧、NH或硫。
10.權(quán)利要求
1-8中任一項(xiàng)的化合物或其鹽，其中X為氧。
11.權(quán)利要求
1-10中任一項(xiàng)的化合物或其鹽，其中Y為硫。
12.一種黃嘌呤氧化酶抑制劑，所述抑制劑包含權(quán)利要求
1-11中任一項(xiàng)的化合物或其鹽作為活性成分。
13.一種用于治療高尿酸血癥的藥劑，所述藥劑包含權(quán)利要求
1-11中任一項(xiàng)的化合物或其鹽作為活性成分。
專利摘要
本發(fā)明公開以右通式(I)的化合物，其中R
文檔編號(hào)A61K31/519GK1993367SQ200580026739
公開日2007年7月4日 申請(qǐng)日期2005年6月13日
發(fā)明者吉田慎一, 小林邦夫, 望月信孝, 山川富雄, 小林正, 筱原從子 申請(qǐng)人:日本化學(xué)醫(yī)藥株式會(huì)社導(dǎo)出引文BiBTeX, EndNote, RefMan