本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，具體而言，涉及th2細(xì)胞和細(xì)胞因子il-4作為腦卒中標(biāo)志物的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

腦卒中(stroke)是當(dāng)今世界危害人類生命健康的最主要疾病之一，其中缺血性腦卒中(ischemicstroke，is)是最常見(jiàn)的形式。缺血性腦卒中又可分為4種亞型，包括短暫性缺血性腦卒中(transientischaemicattack，tia)、可逆性缺血性神經(jīng)功能障礙(reversibleischemicneurologicaldeficit，rind)、進(jìn)展性卒中(strokeinprogression，sip)、完全性卒中(completestroke，cs)。

目前缺血性腦卒中發(fā)病越來(lái)越年輕化，最近的流行病學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，缺血性腦卒中中年患者的百分比約43％，然而在貧窮國(guó)家百分比高達(dá)51％，發(fā)達(dá)國(guó)家為34％，這可能是由于貧窮國(guó)家存在較高的心血管危險(xiǎn)因素。缺血性腦卒中年輕患者的發(fā)病逐年上漲，可能與吸煙、飲酒、肥胖、高血壓的增加有關(guān)。因此，弄清缺血性腦卒中的發(fā)病機(jī)制、尋找有效的治療手段至關(guān)重要。

生物標(biāo)志物是指通過(guò)化學(xué)或生物方法檢測(cè)血液或尿液來(lái)預(yù)測(cè)生理或病理狀態(tài)與疾病危險(xiǎn)程度的一類指示劑。生物標(biāo)志物是藥物研發(fā)過(guò)程中的有效工具，它提供了藥物性能及疾病進(jìn)程的相關(guān)信息，反映了具體的藥物治療效果。

目前，用于診斷和預(yù)測(cè)患者缺血性腦卒中預(yù)后的方法或手段主要依賴的是美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院卒中量表(thenationalinstitutesofhealthstrokescale，nihss)、barthel指數(shù)以及梗死面積的檢測(cè)來(lái)進(jìn)行。缺乏可簡(jiǎn)單快速地易于檢測(cè)的可用于反應(yīng)缺血性腦卒中病情的生物標(biāo)志物，這為弄清缺血性腦卒中的發(fā)病機(jī)制、尋找有效的治療手段以及藥物帶來(lái)諸多不便。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供th2細(xì)胞作為腦卒中標(biāo)志物的應(yīng)用。

本發(fā)明的另一目的在于提供細(xì)胞因子il-4作為腦卒中標(biāo)志物的應(yīng)用。

本發(fā)明的另一目的在于提供細(xì)胞因子il-4抗體的應(yīng)用。

本發(fā)明是這樣實(shí)現(xiàn)的：

th2細(xì)胞作為標(biāo)志物在制備腦卒中診斷試劑盒中的應(yīng)用。

th2細(xì)胞作為標(biāo)志物在制備預(yù)測(cè)腦卒中患者預(yù)后的試劑盒中的應(yīng)用。

細(xì)胞因子il-4作為標(biāo)志物在制備腦卒中診斷試劑盒或預(yù)測(cè)腦卒中患者預(yù)后的試劑盒中的應(yīng)用。

細(xì)胞因子il-4抗體在制備腦卒中診斷試劑盒或預(yù)測(cè)腦卒中患者預(yù)后的試劑盒中的應(yīng)用。

本發(fā)明具有以下有益效果：

本發(fā)明首次相對(duì)比較全面地獨(dú)立地研究了臨床病人外周血中th2細(xì)胞及其細(xì)胞因子與缺血性腦卒中的關(guān)系，結(jié)果顯示，外周血th2細(xì)胞百分比及其細(xì)胞因子il-4均與nihss評(píng)分呈反比，與barthel指數(shù)呈正相關(guān)，與腦卒中病人大腦梗死面積呈反比，以上結(jié)果表明th2細(xì)胞百分比及其細(xì)胞因子il-4與腦卒中尤其是缺血性腦卒中具有明顯的相關(guān)性，th2細(xì)胞及其細(xì)胞因子il-4可以作為腦卒中診斷和預(yù)后指示的生物標(biāo)志物，是一種全新的腦卒中標(biāo)志物；基于此，可將th2細(xì)胞或細(xì)胞因子il-4作為標(biāo)志物應(yīng)用于制備腦卒中診斷試劑盒或者在制備預(yù)測(cè)腦卒中患者預(yù)后的試劑盒中等領(lǐng)域，這為腦卒中診斷和預(yù)后提供了一種新的思路和手段，有利于加快腦卒中的發(fā)病機(jī)制研究進(jìn)程，也為快速篩選出治療腦卒中的藥物提供幫助。

附圖說(shuō)明

為了更清楚地說(shuō)明本發(fā)明實(shí)施例的技術(shù)方案，下面將對(duì)實(shí)施例中所需要使用的附圖作簡(jiǎn)單地介紹，應(yīng)當(dāng)理解，以下附圖僅示出了本發(fā)明的某些實(shí)施例，因此不應(yīng)被看作是對(duì)范圍的限定，對(duì)于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來(lái)講，在不付出創(chuàng)造性勞動(dòng)的前提下，還可以根據(jù)這些附圖獲得其他相關(guān)的附圖。

圖1為本發(fā)明實(shí)施例1提供的不同組病人外周血中的th2細(xì)胞百分比含量的流式細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果圖；

圖2為本發(fā)明實(shí)施例1提供的th2細(xì)胞百分比與nihss評(píng)分、barthel指數(shù)、梗死面積的相關(guān)性分析結(jié)果；

圖3為本發(fā)明實(shí)施例2提供的il-4水平與nihss評(píng)分、barthel指數(shù)、梗死面積的相關(guān)性分析結(jié)果。

具體實(shí)施方式

為使本發(fā)明實(shí)施例的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn)更加清楚，下面將對(duì)本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述。實(shí)施例中未注明具體條件者，按照常規(guī)條件或制造商建議的條件進(jìn)行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以通過(guò)市售購(gòu)買獲得的常規(guī)產(chǎn)品。

下面對(duì)本發(fā)明實(shí)施例的提供的th2細(xì)胞和細(xì)胞因子il-4作為腦卒中標(biāo)志物的應(yīng)用進(jìn)行具體說(shuō)明。

本發(fā)明的研究選取湖北省襄陽(yáng)市中心醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科2017年3月6日至2017年4月6日接收診治的53例缺血性腦卒中病人為研究對(duì)象，其中男36例，女17例，年齡43歲～82歲(61.7±11.4歲)；應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)各研究對(duì)象外周血中th2細(xì)胞百分比；elisa法檢測(cè)th2細(xì)胞因子il-4的濃度；使用nihss評(píng)分評(píng)估缺血性腦卒中患者入院后24小時(shí)內(nèi)的神經(jīng)功能損傷；barthel指數(shù)被用來(lái)評(píng)估缺血性腦卒中患者日常生活自理能力；利用mri或ct計(jì)算了各研究對(duì)象大腦梗死面積；應(yīng)用spass軟件分析各研究對(duì)象th2細(xì)胞百分比及其細(xì)胞因子水平與nihss評(píng)分、barthel指數(shù)及大腦梗死面積的相關(guān)性。

結(jié)果顯示：外周血th2細(xì)胞百分比及其細(xì)胞因子il-4均與nihss評(píng)分(評(píng)分分值越高，說(shuō)明神經(jīng)功能損傷越嚴(yán)重)呈負(fù)相關(guān)，與barthel指數(shù)(分值越高，生活自理能力越高)呈正相關(guān)，與腦卒中病人大腦梗死面積(梗死面積越大，病情越嚴(yán)重，預(yù)后越差)呈負(fù)相關(guān)。

以上結(jié)果表明th2細(xì)胞百分比及其細(xì)胞因子il-4與腦卒中尤其是缺血性腦卒中具有明顯的相關(guān)性，th2細(xì)胞百分比及其細(xì)胞因子il-4可以作為腦卒中診斷和預(yù)后指示的生物標(biāo)志物，是一種全新的腦卒中標(biāo)志物，二者具有廣泛的應(yīng)用前景。

基于此，一方面，本發(fā)明提供了th2細(xì)胞作為標(biāo)志物在制備腦卒中診斷試劑盒中的應(yīng)用。

進(jìn)一步地，在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中，所述th2細(xì)胞為外周血中的th2細(xì)胞。

進(jìn)一步地，在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中，所述腦卒中為缺血性腦卒中。

另一方面，本發(fā)明提供了th2細(xì)胞作為標(biāo)志物在制備預(yù)測(cè)腦卒中患者預(yù)后的試劑盒中的應(yīng)用。

進(jìn)一步地，在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中，所述th2細(xì)胞為外周血的th2細(xì)胞。

進(jìn)一步地，在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中，所述腦卒中為缺血性腦卒中。

再一方面，本發(fā)明提供了細(xì)胞因子il-4作為標(biāo)志物在制備腦卒中診斷試劑盒或預(yù)測(cè)腦卒中患者預(yù)后的試劑盒中的應(yīng)用。

進(jìn)一步地，在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中，所述腦卒中為缺血性腦卒中。

進(jìn)一步地，在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中，所述細(xì)胞因子il-4為患者血清中的細(xì)胞因子il-4。

還有一方面，本發(fā)明提供了細(xì)胞因子il-4抗體在制備腦卒中診斷試劑盒或預(yù)測(cè)腦卒中患者預(yù)后的試劑盒中的應(yīng)用。

進(jìn)一步地，在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中，上述腦卒中診斷試劑盒或預(yù)測(cè)腦卒中患者預(yù)后的試劑盒為elisa試劑盒，其含有用于檢測(cè)細(xì)胞因子il-4的細(xì)胞因子il-4抗體。

還有一方面，本發(fā)明提供了cd4⁺抗體在制備腦卒中診斷試劑盒或預(yù)測(cè)腦卒中患者預(yù)后的試劑盒中的應(yīng)用。

進(jìn)一步地，在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中，上述腦卒中診斷試劑盒或預(yù)測(cè)腦卒中患者預(yù)后的試劑盒為elisa試劑盒，其含有用于檢測(cè)th2細(xì)胞的cd4⁺抗體。

容易理解，在基于本發(fā)明的研究結(jié)果的基礎(chǔ)上，任何可以特異性或非特異性結(jié)合細(xì)胞因子il-4的抗體，均可以用于制備腦卒中診斷試劑盒或預(yù)測(cè)腦卒中患者預(yù)后的試劑盒，該試劑盒通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定來(lái)自個(gè)體的樣品中的細(xì)胞因子il-4的水平，根據(jù)細(xì)胞因子il-4的水平對(duì)個(gè)體腦卒中的病情進(jìn)行診斷或預(yù)后判斷。

以下結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的特征和性能作進(jìn)一步的詳細(xì)描述。

實(shí)施例

1.1研究對(duì)象

選取湖北省襄陽(yáng)市中心醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科2017年3月6日至2017年4月6日接收診治的53例缺血性腦卒中病人為研究對(duì)象，其中男36例，女17例，年齡43歲至82歲(61.7±11.4歲)。根據(jù)1995年全國(guó)第四屆腦血管疾病會(huì)議和2007年《中國(guó)腦血管病防治指南》的is診斷標(biāo)準(zhǔn)，經(jīng)ct或mri檢查確診。該研究獲襄陽(yáng)市中心醫(yī)院道德倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，并且依據(jù)國(guó)家衛(wèi)生研究所機(jī)構(gòu)審查委員會(huì)條例實(shí)施，所有參與該研究的病人均簽署知情同意書(shū)。

美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院卒中量表(thenationalinstitutesofhealthstrokescale,nihss)被用來(lái)評(píng)估缺血性腦卒中病人入院后24小時(shí)內(nèi)的神經(jīng)功能損傷。nihss評(píng)分包括15個(gè)向度：意識(shí)程度、回答問(wèn)題能力、遵從指令的能力、眼球運(yùn)動(dòng)、視野、面部肌力、上肢運(yùn)動(dòng)功能、下肢運(yùn)動(dòng)功能、肢體協(xié)調(diào)、感覺(jué)功能、語(yǔ)言、構(gòu)音，感覺(jué)忽視。各個(gè)向度計(jì)分為3個(gè)到5個(gè)等級(jí)，評(píng)分范圍為0～42分，分?jǐn)?shù)越高表示神經(jīng)受損越嚴(yán)重。所有病人依據(jù)nihss評(píng)分劃分為3組：第一組，nihss≤5(男14例，女3例，年齡60.2±13.1歲)；第二組，5＜nihss＜15(男15例，女10例，年齡61.8±11.5歲)；第三組，15≤nihss(男7例，女4例，63.9±8.4歲)

barthel指數(shù)：被用來(lái)評(píng)估缺血性腦卒中患者日常生活自理能力，檢測(cè)項(xiàng)目包括大小便、進(jìn)食、修飾、轉(zhuǎn)移、活動(dòng)、穿衣、上下樓等。評(píng)分值為：輕度依賴，大于60分，可獨(dú)立完成部分日常活動(dòng)，但需要部分幫助；中度依賴，60～41分，需要較多幫助才能完成日常生活活動(dòng)；重度依賴，≤40分，絕大多數(shù)日常生活活動(dòng)都無(wú)法完成或需他人照顧。

排除標(biāo)準(zhǔn)：嚴(yán)格地排除外傷性腦出血、動(dòng)脈瘤或動(dòng)脈硬化、蛛網(wǎng)膜下腔出血、自身免疫性疾病、糖尿病、手術(shù)、創(chuàng)傷或采血2周內(nèi)任何形式的高燒(t＞36.8℃)、急慢性感染性疾病史；冠心病、先天性心臟病、高血壓性心臟病、心律失常等心腦血管疾病；甲狀腺功能低下或亢進(jìn)、血液系統(tǒng)疾病、神經(jīng)異常疾病等。

研究期間，部分病人接受阿司匹林抗血小板治療，另一部分病人接受噻氯匹啶或者氯吡格雷抗血小板治療治療，少部分病情輕微病人沒(méi)有接受任何治療。三組病人的基本情況如表1。

表1三組病人的基本情況

1.2材料

lymphocyteseparationmedium(淋巴細(xì)胞分離液)由mpbio公司生產(chǎn)；rpmi-1640培養(yǎng)基購(gòu)買于antgene公司；cellstimulationcocktai(細(xì)胞刺激劑)購(gòu)買于ebioscience公司；hucd4pe-cy5rpa-t4、huil-4pe8d4-8和cytofix/cytoperm(細(xì)胞固定/通透試劑盒)購(gòu)買于bdpmg公司；humanil-4elisa試劑盒購(gòu)買于neobioscience公司；phosphatebufferedsaline(pbs-20x)由cst公司生產(chǎn)；離心管、ep管、流式管由falcon公司生產(chǎn)；槍頭由gpl公司生產(chǎn)；流式細(xì)胞儀產(chǎn)自beckmancoulter公司。

1.3pbmc的收集

每一個(gè)病人在接收入院后，清晨空腹?fàn)顟B(tài)下采集3ml外周血(peripheralblood；pb)到肝素抗凝管中，輕輕搖勻，血樣采集應(yīng)在癥狀出現(xiàn)后24小時(shí)內(nèi)。在室溫條件下加入等體積的pbs稀釋，輕輕搖勻。取15ml離心管，吸取等體積的ficoll(淋巴細(xì)胞分離液)于離心管中，管傾斜45°，將稀釋后的pb在ficoll液面上方約1cm處沿管壁緩慢加至ficoll液上面。將處理好的血液放入4℃，2000r/min離心機(jī)中，離心30min后從管底到液面分四層，依次是紅細(xì)胞層、分層液層、外周血單核細(xì)胞層(peripheralbloodmononuclearcell，pbmc)、血漿層。先吸取2ml血漿至ep管中，放入-80℃冰箱，以備后續(xù)elisa分析。將移液管直接插入云霧層(pbmc層)，輕輕吸取云霧層，放入新的離心管中。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示；組間細(xì)胞因子濃度以及細(xì)胞百分比的差異采用t檢驗(yàn)加以評(píng)估。p＜0.05說(shuō)明差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；組間顯著地統(tǒng)計(jì)學(xué)差異用方差分析評(píng)估。

1.5th2細(xì)胞百分比與與nihss評(píng)分、barthel指數(shù)及梗死面積的相關(guān)性

1.5.1細(xì)胞染色及流式細(xì)胞檢測(cè)th2細(xì)胞百分比

加入至少pbmc體積3倍的pbs于離心管中，4℃、2000r/min離心5min，棄上清，加入1mlrpmi-1640培養(yǎng)基(含10％胎牛血清)，吹打混勻。再加入2ul細(xì)胞刺激劑于培養(yǎng)基中，將該培養(yǎng)基放入37℃、5％co2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。刺激培養(yǎng)4h之后，4℃、2000r/min離心5min，棄上清，再加每100ul體系10ul的cd4⁺抗體，4℃避光染色半小時(shí)，每10分鐘輕彈一次。將充分反應(yīng)后的體系用pbs洗滌，棄上清，cytofixbuffer固定。半小時(shí)后，加入2mlpbs，4℃、2000r/min離心5min，清洗2遍，棄上清，permeabilizationbuffer打孔。半小時(shí)后，加入2mlpbs，4℃、2000r/min離心5min，棄上清。再加每100ul體系10ul的il-4抗體染色，4℃避光染色半小時(shí)，每10分鐘輕彈一次。pbs清洗后加250ul的pbs重懸。放入流式細(xì)胞儀中檢測(cè)th2細(xì)胞百分比。

結(jié)果如圖1所示(圖中：a為各組病人代表性的流式細(xì)胞圖，陽(yáng)性細(xì)胞的百分比在各組圖中均有顯示；b為三組病人的th2細(xì)胞表達(dá)的比較結(jié)果，其中，***p<0.0001,*p<0.01)，由第一組到第三組，總體觀察發(fā)現(xiàn)th2細(xì)胞百分比逐漸減少。

1.5.2梗死面積的檢測(cè)

所有觀察對(duì)象均在入院后24h至48h內(nèi)接受ct或者mri影像學(xué)檢查，為了確保準(zhǔn)確性，選取核磁共振彌散加權(quán)成像來(lái)測(cè)量梗死面積。當(dāng)無(wú)法獲得磁共振彌散加權(quán)成像時(shí)，采用增強(qiáng)ct來(lái)替代。人為地在每張ct或mri上畫(huà)出梗死水腫區(qū)域，并且這些區(qū)域都用cm²表示。如果梗死區(qū)域出現(xiàn)出血改變，那么出血區(qū)域就包含到梗死帶中。

1.5.3th2細(xì)胞百分比與nihss評(píng)分、barthel指數(shù)及梗死面積的相關(guān)性分析

對(duì)各個(gè)患者進(jìn)行nihss評(píng)分，評(píng)估患者的神經(jīng)功能損傷(評(píng)分分值越高說(shuō)明神經(jīng)功能損傷越嚴(yán)重)，并分析th2細(xì)胞百分比與其的相關(guān)性，結(jié)果如圖2所示(圖中：a為th2百分比與nihss評(píng)分的相關(guān)性；b為th2百分比與barthel指數(shù)的相關(guān)性，c為th2細(xì)胞百分比與梗死面積的相關(guān)性分析)。

圖2的結(jié)果顯示：nihss評(píng)分隨著th2百分比的增加而減小，說(shuō)明th2細(xì)胞百分比與nihss評(píng)分呈負(fù)相關(guān)(圖2-a，r＝-0.599,p<0.0001)；

barthel指數(shù)(分值越高生活自理能力越高)隨著th2百分比的增加而增加，說(shuō)明th2細(xì)胞百分比與barthel指數(shù)呈正相關(guān)(圖2-b，r＝0.646,p<0.0001)；

缺血性腦卒中病人大腦梗死面積在一定程度上反映著病情的嚴(yán)重程度以及預(yù)后，使用ct或mri對(duì)腦卒中病人大腦梗死面積進(jìn)行了測(cè)量，圖2顯示，梗死面積隨著th2細(xì)胞百分比的增加而縮小，說(shuō)明th2細(xì)胞百分比與梗死面積呈負(fù)相關(guān)性(圖2-c，r＝-0.593,p<0.0001)，即th2細(xì)胞百分比越高，患者梗死面積越低。

實(shí)施例2

il-4水平與nihss評(píng)分、barthel指數(shù)及梗死面積的相關(guān)性

2.1elisa法檢測(cè)th2細(xì)胞因子

酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(enzymelinkedimmunosorbentassay,elisa)被用來(lái)檢測(cè)血清中th2細(xì)胞因子il-4的水平。采用il-4elisa試劑盒，依照說(shuō)明書(shū)稀釋一支標(biāo)準(zhǔn)品，在標(biāo)準(zhǔn)孔中加入50ul標(biāo)準(zhǔn)品，待測(cè)孔中加40ul樣品稀釋液及10ul待測(cè)血清。封板膜封板后37℃溫育，30min后棄液體，甩干，每孔加滿洗滌液，30s后棄去，重復(fù)5次，拍干。除空白孔外，每孔加酶標(biāo)試劑50ul，再如上溫育、洗滌。每孔先加顯色劑a50ul，再加顯色劑b50ul，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色。15min后每孔加終止液。空白調(diào)零后，在450nm波長(zhǎng)下依次測(cè)量各孔吸光度，并計(jì)算細(xì)胞因子il-4濃度。

2.2nihss評(píng)分、barthel指數(shù)及梗死面積的計(jì)算同實(shí)施例1

2.3il-4水平與nihss評(píng)分、barthel指數(shù)及梗死面積的相關(guān)性分析，結(jié)果見(jiàn)圖3(圖中：a為il-4水平與nihss評(píng)分的相關(guān)性；b為il-4水平與barthel指數(shù)的相關(guān)性，c為il-4水平與梗死面積的相關(guān)性分析)。

圖3的結(jié)果顯示：nihss評(píng)分隨著il-4水平的增加而減小，說(shuō)明il-4水平與nihss評(píng)分呈負(fù)相關(guān)(圖3-a，r＝-0.622,p<0.0001)；

barthel指數(shù)隨著il-4水平的增加而增加，說(shuō)明il-4水平與barthel指數(shù)呈正相關(guān)(圖3-b，r＝0.611,p<0.0001)；

梗死面積隨著il-4水平的增加而縮小，說(shuō)明il-4水平與梗死面積呈負(fù)相關(guān)性(圖3-c，r＝-0.599,p<0.0001)。

綜上，本發(fā)明系統(tǒng)檢測(cè)了各研究對(duì)象外周血單核細(xì)胞中th2細(xì)胞百分比，由于nihss評(píng)分是反映病人入院后24小時(shí)內(nèi)的神經(jīng)功能損傷程度的常用指標(biāo)，而barthel指數(shù)是反映患者日常生活自理能力的常用指標(biāo)，本發(fā)明又評(píng)估了各研究對(duì)象nihss評(píng)分及barthel指數(shù)，并且分析了th2細(xì)胞與二者的相關(guān)性。il-4是th2細(xì)胞主要的細(xì)胞因子，因此檢測(cè)了各研究對(duì)象外周血血清中il-4的水平，并且分析了il-4水平與nihss評(píng)分及barthel指數(shù)的相關(guān)性，從細(xì)胞因子水平進(jìn)一步驗(yàn)證th2細(xì)胞對(duì)腦卒中的保護(hù)作用。腦卒中病人大腦梗死面積能直接反應(yīng)病情嚴(yán)重程度，故本研究利用mri或ct計(jì)算了各研究對(duì)象大腦梗死面積，分別分析了th2細(xì)胞、il-4水平與其相關(guān)性。結(jié)果顯示，th2細(xì)胞百分比及其細(xì)胞因子il-4均與nihss評(píng)分(評(píng)分分值越高，說(shuō)明神經(jīng)功能損傷越嚴(yán)重)呈反比，與barthel指數(shù)(分值越高，生活自理能力越高)呈正相關(guān)，與腦卒中病人大腦梗死面積(梗死面積越大，病情越嚴(yán)重，預(yù)后越差)呈反比。

這就表明，th2細(xì)胞百分比及其細(xì)胞因子il-4與腦卒中尤其是缺血性腦卒中具有明顯的相關(guān)性，th2細(xì)胞百分比及其細(xì)胞因子il-4可以作為腦卒中診斷和預(yù)后指示的生物標(biāo)志物，是一種全新的腦卒中標(biāo)志物；基于此，可將th2細(xì)胞或細(xì)胞因子il-4作為標(biāo)志物應(yīng)用于制備腦卒中診斷試劑盒或者在制備預(yù)測(cè)腦卒中患者預(yù)后的試劑盒中等領(lǐng)域，以及細(xì)胞因子il-4抗體和cd4⁺抗體也可用于腦卒中診斷試劑盒或預(yù)測(cè)腦卒中患者預(yù)后的試劑盒等領(lǐng)域，這為腦卒中診斷和預(yù)后提供了一種新的思路和手段，有利于加快腦卒中的發(fā)病機(jī)制研究進(jìn)程，也為快速篩選出治療腦卒中的藥物提供幫助。

以上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例而已，并不用于限制本發(fā)明，對(duì)于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，本發(fā)明可以有各種更改和變化。凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。