本申請(qǐng)是申請(qǐng)日為2012年05月04日的題為“異戊烯化羥基二苯乙烯”的中國(guó)專利申請(qǐng)no.201280033556.x的分案申請(qǐng)。相關(guān)申請(qǐng)的引用本發(fā)明要求au2011901663的優(yōu)先權(quán)，其內(nèi)容通過(guò)引用并入本文。本發(fā)明涉及新型異戊烯化二苯乙烯化合物和此類化合物在治療疾病和醫(yī)學(xué)病癥(例如癌癥和皮膚衰老)中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：蜂巢蠟?zāi)z或所謂的蜂膠是由工蜂(西方蜜蜂(apismellifera))從某些樹木和灌木的嫩枝和芽的滲出物和分泌物中采集的復(fù)雜樹脂狀物質(zhì)。蜜蜂將其用于封接蜂巢中的裂縫和孔洞并防止微生物感染。蜂巢蠟?zāi)z是生物活性物質(zhì)的豐富來(lái)源，并且蜂巢蠟?zāi)z的藥用用途可以追溯到古代文明。目前，蜂巢蠟?zāi)z被廣泛用作天然保健產(chǎn)品，并且廣泛應(yīng)用于化妝品中。然而，其在藥物中的現(xiàn)代應(yīng)用是有限的，這主要是歸因于其化學(xué)組成有很大不同，這種不同是由于蜜蜂從不同的植物來(lái)源或植物來(lái)源的混合物進(jìn)行采集所造成的。蜂膠的組成取決于蜜蜂接觸的周邊植物群，并且同樣地，植物群的這種差異會(huì)導(dǎo)致蜂膠組成的差異。例如，已知類黃酮是歐洲蜂膠中的主要藥理活性化合物，聚異戊烯化二苯甲酮是古巴蜂膠和委內(nèi)瑞拉蜂膠中的主要物質(zhì)，并且異戊烯化肉桂酸衍生物在巴西蜂膠中占主要地位。對(duì)由蜜蜂產(chǎn)生的蜂膠的植物來(lái)源的識(shí)別能夠?qū)⒊蚕浞胖迷谟欣奈恢茫员銖膯我恢参飦?lái)源生產(chǎn)蜂膠，從而能夠制造高品質(zhì)和高療效的藥物。蜂膠的藥用唯一性是由蜜蜂的選擇性采集能力所決定的，因?yàn)樗鼈兡軌蜃R(shí)別相對(duì)非極性的并具有抗菌性能的天然材料。據(jù)報(bào)道，蜂膠的常見來(lái)源是葉和花芽的滲出物，其具有高抗生素特性，從而保護(hù)柔弱的生長(zhǎng)中的植物組織免受微生物的攻擊。也已經(jīng)報(bào)道了蜜蜂從受傷或患病的植物組織中采集滲出物。此種來(lái)源潛在地富含抗生素物質(zhì)，這是由植物響應(yīng)創(chuàng)傷或來(lái)自昆蟲、微生物和病毒的攻擊而產(chǎn)生的。從以往的研究中，尚不清楚蜜蜂是簡(jiǎn)單地采集已知為蜂膠的植物材料還是是否存在蜜蜂的代謝修飾或添加。但是，似乎沒(méi)有蜜蜂添加了大量材料的證據(jù)或代謝轉(zhuǎn)化的強(qiáng)有力證據(jù)。因此，需要更好地了解關(guān)于在特定的地理位置的蜂膠的組成，以能夠利用它來(lái)充分發(fā)揮其益處。在涉及本發(fā)明的工作中，本發(fā)明人對(duì)分離自袋鼠島(南澳大利亞)的蜂膠樣品進(jìn)行了調(diào)查，并且出乎意料地發(fā)現(xiàn)與通常含有類黃酮作為活性組分的其它蜂膠不同，袋鼠島蜂膠含有二苯乙烯，更具體地是新的異戊烯化多羥基二苯乙烯(pphos)，它們的核心結(jié)構(gòu)類似于白藜蘆醇(如下圖所示)。白藜蘆醇是紅葡萄酒中的成分，盡管高消耗非常豐富的食物，但是法國(guó)人認(rèn)為紅葡萄酒對(duì)心臟病發(fā)作的低發(fā)病率做出了貢獻(xiàn)。事實(shí)上，已經(jīng)證明了白藜蘆醇抑制ldl氧化，這種ldl氧化會(huì)導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化和冠狀動(dòng)脈心臟病。白藜蘆醇也是預(yù)防性抗衰老藥物中的主要化合物，并且已經(jīng)發(fā)現(xiàn)其具有抗癌和抗氧化活性。然而，除了其治療性能，白藜蘆醇顯示出非常差的口服生物利用度并且在腸和肝臟中快速地代謝為葡萄糖醛酸鹽/酯和磺酸鹽/酯的偶聯(lián)物。只在高濃度(可達(dá)5g)下或在直接給予的情況下(例如靜脈注射或局部應(yīng)用)觀察到了白藜蘆醇的體內(nèi)效力。最近，葛蘭素史克(gsk)藥業(yè)進(jìn)行了其白藜蘆醇(3-5g)的專利制劑srt501在治療多發(fā)性骨髓瘤中的iia期臨床試驗(yàn)；但是，該試驗(yàn)由于制劑僅提供極小的療效并且試驗(yàn)中的幾個(gè)病人患上了腎衰竭而中止。已經(jīng)報(bào)道在主要來(lái)自?？?桑樹科，包括桑(morusalba，桑樹)，和各種菠蘿蜜物種)和蝶形花科(豆科，包括花生(arachishypogaea))的植物中有異戊烯化羥基二苯乙烯。據(jù)報(bào)道該分離的化合物示出了抗炎癥、抗菌和抗氧化活性，從而暗示異戊烯基不會(huì)不利地影響羥基二苯乙烯的生物活性。實(shí)際上，異戊烯化羥基二苯乙烯基于其親脂性而能夠規(guī)避羥基二苯乙烯(例如白藜蘆醇)的生物利用度低的問(wèn)題。由于存在一個(gè)或多個(gè)異戊烯基，所述化合物也許能夠更容易穿過(guò)細(xì)胞膜并避免形成葡萄糖醛酸鹽/酯和磺酸鹽/酯的偶聯(lián)物，從而改善該化合物的生物利用度，并且更普遍地提供用于開發(fā)新治療劑的優(yōu)異候選藥物。先前已經(jīng)證明白藜蘆醇的四甲氧基衍生物能夠比白藜蘆醇更容易地穿過(guò)大鼠的血-腦屏障。因此，從袋鼠島的蜂膠樣品中分離出的新型pphos衍生物是用于開發(fā)在治療疾病(如癌癥)中使用的新治療劑的強(qiáng)有力候選物。包括于本說(shuō)明書中的對(duì)文獻(xiàn)、步驟、材料、裝置、物品等的任何論述都不能被視為承認(rèn)：任一或所有這些事項(xiàng)為現(xiàn)有技術(shù)基礎(chǔ)的組成部分或?yàn)楸旧暾?qǐng)各項(xiàng)權(quán)利要求的優(yōu)先權(quán)日之前存在的本發(fā)明相關(guān)領(lǐng)域的普通常識(shí)。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：在涉及本發(fā)明的工作中，本發(fā)明人已經(jīng)分離和合成了多種新型異戊烯化多羥基二苯乙烯(pphos)衍生物并且進(jìn)行了體外實(shí)驗(yàn)，其中這些新型化合物在癌細(xì)胞系的組中示出了高的效力和選擇性，特別是在白血病和黑色素瘤細(xì)胞系中。在其它初步實(shí)驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)了許多所述新型pphos衍生物調(diào)節(jié)sirt1酶的活性，這表明本發(fā)明的該新型pphos化合物可以是治療一系列疾病的主要治療劑。因此，本發(fā)明的第一方面，提供了一種治療癌癥的方法，其包括向需要其的患者給予治療有效量的式(i)的化合物、或者藥用鹽、溶劑化物或包含所述化合物的藥物組合物：其中：r1獨(dú)立地為h、oh、or4、ch2ch＝c(ch3)2、och2ch＝c(ch3)2、ch＝chch(ch3)2、ch＝chc(ch3)＝ch2、och＝chch(ch3)2或och＝chc(ch3)＝ch2，其中至少一個(gè)r1為ch2ch＝c(ch3)2、och2ch＝c(ch3)2、ch＝chch(ch3)2、ch＝chc(ch3)＝ch2、och＝chch(ch3)2或och＝chc(ch3)＝ch2；r2選自oh、or4、ch2ch＝c(ch3)2、och2ch＝c(ch3)2、ch＝chch(ch3)2、ch＝chc(ch3)＝ch2、och＝chch(ch3)2或och＝chc(ch3)＝ch2；r3選自h、oh、or4、ch2ch＝c(ch3)2、och2ch＝c(ch3)2、ch＝chch(ch3)2、ch＝chc(ch3)＝ch2、och＝chch(ch3)2或och＝chc(ch3)＝ch2；r4選自甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基或芐基；n是選自由1、2、3或4組成的組中的整數(shù)；并且a----b選自ch＝ch、ch2-ch2、ch＝chx或ch2-ch2x，其中x＝(ch2)pch2，并且p為選自由0、1、2或3組成的組中的整數(shù)；條件是當(dāng)r2為oh時(shí)，r3為h或oh，a----b為ch＝ch，n為3且兩個(gè)r1基團(tuán)為oh，則第三個(gè)r1基團(tuán)不是ch＝chch(ch3)2。在本發(fā)明的第二方面，提供了一種治療癌癥的方法，包括向需要其的患者給予治療有效量的式(i)的化合物、或者藥用鹽、溶劑化物或包括所述化合物的藥物組合物，其中：r1獨(dú)立地為h、oh、or4、ch2ch＝c(ch3)2、och2ch＝c(ch3)2、ch＝chch(ch3)2、ch＝chc(ch3)＝ch2、och＝chch(ch3)2或och＝chc(ch3)＝ch2，其中至少一個(gè)r1為ch2ch＝c(ch3)2、och2ch＝c(ch3)2、ch＝chch(ch3)2、ch＝chc(ch3)＝ch2、och＝chch(ch3)2或och＝chc(ch3)＝ch2；r2選自oh、or4、ch2ch＝c(ch3)2、och2ch＝c(ch3)2、ch＝chch(ch3)2、ch＝chc(ch3)＝ch2、och＝chch(ch3)2或och＝chc(ch3)＝ch2；r3選自h、oh、or4、ch2ch＝c(ch3)2、och2ch＝c(ch3)2、ch＝chch(ch3)2、ch＝chc(ch3)＝ch2、och＝chch(ch3)2或och＝chc(ch3)＝ch2；r4選自甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基或芐基；n是選自由1、2、3或4組成的組中的整數(shù)；并且a----b選自ch＝ch、ch2-ch2、ch＝chx或ch2-ch2x，其中x＝(ch2)pch2，并且p為選自由0、1、2或3組成的組中的整數(shù)。在第三方面，提供了一種根據(jù)第一或第二方面的式(i)的化合物或其藥物組合物作為藥物的應(yīng)用。在第四方面，提供了一種根據(jù)第一或第二方面的式(i)的化合物或其藥物組合物在治療中的應(yīng)用。在本發(fā)明的第五方面，提供了一種根據(jù)第一或第二方面的式(i)的化合物或其藥物組合物在治療癌癥中的應(yīng)用。在本發(fā)明的第六方面，提供了一種治療免疫抑制的方法，包括向需要其的患者給予治療有效量的根據(jù)第一或第二方面的式(i)的化合物或包括所述化合物的藥物組合物。在本發(fā)明的第七方面，提供了一種治療炎癥的方法，包含向需要治療的患者給予治療有效量的根據(jù)第一或第二方面的式(i)的化合物或包括所述化合物的藥物組合物。在本發(fā)明的第八方面，提供了一種治療細(xì)菌或真菌感染的方法，包括向需要其的患者給予治療有效量的根據(jù)第一或第二方面的式(i)的化合物或包括所述化合物的藥物組合物。在本發(fā)明的第九方面，提供了一種治療皮膚老化的方法，包括向需要其的患者給予治療有效量的根據(jù)第一或第二方面的式(i)的化合物或包括所述化合物的藥物組合物。在本發(fā)明的第十方面，提供了根據(jù)第一或第二方面的式(i)的化合物或其藥物組合物在制備用于治療癌癥的藥物中的應(yīng)用。在本發(fā)明的第十一方面，提供了根據(jù)第一或第二方面的式(i)的化合物或其藥物組合物在制備用于治療免疫抑制的藥物中的應(yīng)用。在本發(fā)明的第十二方面，提供了根據(jù)第一或第二方面的式(i)的化合物或其藥物組合物在制備用于治療炎癥的藥物中的應(yīng)用。在本發(fā)明的第十三方面，提供了根據(jù)第一或第二方面的式(i)的化合物或其藥物組合物在制備用于治療細(xì)菌或真菌感染的藥物中的應(yīng)用。在本發(fā)明的第十四方面，提供了根據(jù)第一或第二方面的式(i)的化合物或其藥物組合物在制備用于治療皮膚老化的藥物中的應(yīng)用。在本發(fā)明的進(jìn)一步方面，提供了包含如上定義的化合物或藥物組合物、和至少一種用于本文所述的方法和應(yīng)用的其它治療劑的組合。根據(jù)本發(fā)明的第十五方面，提供了一種式(ia)的化合物或者其藥用鹽或溶劑化物：其中：r1a、r1b、r1c和r1d各自獨(dú)立地為h、oh、or4、ch2ch＝c(ch3)2、och2ch＝c(ch3)2、ch＝chc(ch3)＝ch2、och＝chch(ch3)2或och＝chc(ch3)＝ch2，其中r1a-1d中的至少一個(gè)為ch2ch＝c(ch3)2、och2ch＝c(ch3)2、ch＝chc(ch3)＝ch2、och＝chch(ch3)2或och＝chc(ch3)＝ch2；r2選自oh、or4、ch2ch＝c(ch3)2、och2ch＝c(ch3)2、ch＝chc(ch3)＝ch2、och＝chch(ch3)2或och＝chc(ch3)＝ch2；r3選自h、oh、or4、ch2ch＝c(ch3)2、och2ch＝c(ch3)2、ch＝chc(ch3)＝ch2、och＝chch(ch3)2或och＝chc(ch3)＝ch2；r4選自甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基或芐基；并且a----b選自ch＝ch、ch2-ch2、ch＝chx或ch2-ch2x，其中x＝(ch2)pch2，并且p為選自由0、1、2或3組成的組中的整數(shù)；條件是：(i)當(dāng)r3為h且r2為oh或och2ch＝c(ch3)2時(shí)，r1b和r1d各自獨(dú)立地不是oh或och2ch＝c(ch3)2；(ii)當(dāng)r3為h、r1a-1d中的一個(gè)是h并且r1a-1d中的至少一個(gè)是ch2ch＝c(ch3)2時(shí)，a----b不是ch＝ch。本發(fā)明的第十六方面，提供了一種式(ia)的化合物或者其藥用鹽或溶劑化物：其中：r1a、r1b、r1c和r1d各自獨(dú)立地為h、oh、or4、ch2ch＝c(ch3)2、och2ch＝c(ch3)2、ch＝chc(ch3)＝ch2、och＝chch(ch3)2或och＝chc(ch3)＝ch2，其中r1a-1d中的至少一個(gè)為ch2ch＝c(ch3)2、och2ch＝c(ch3)2、ch＝chc(ch3)＝ch2、och＝chch(ch3)2或och＝chc(ch3)＝ch2；r2和r3各自獨(dú)立地選自oh、or4、ch2ch＝c(ch3)2、och2ch＝c(ch3)2、ch＝chc(ch3)＝ch2、och＝chch(ch3)2或och＝chc(ch3)＝ch2；r4選自甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基或芐基；并且a----b選自ch＝ch、ch2-ch2、ch＝chx或-ch2-ch2x，其中x＝(ch2)pch2且p為選自由0、l、2或3組成的組中的整數(shù)。在本發(fā)明的第十七方面，提供了一種藥物組合物，其包含根據(jù)第十五或十六方面的式(ia)的化合物或者其藥用鹽或溶劑化物，以及藥用賦形劑。根據(jù)第十八方面，提供了一種治療癌癥、免疫抑制、炎癥、細(xì)菌感染、真菌感染或皮膚老化的方法，包括向需要其的患者給予治療有效量的根據(jù)第十五或十六方面的式(ia)的化合物或包括所述化合物的藥物組合物。根據(jù)本發(fā)明的第十九方面，提供了根據(jù)第十五或十六方面的式(ia)的化合物或其藥物組合物在制備用于治療癌癥、免疫抑制、炎癥、細(xì)菌感染、真菌感染或皮膚老化的藥物中的應(yīng)用。根據(jù)本發(fā)明的第二十方面，提供了一種制備通式(ib)的化合物的方法，其包括下列步驟：(i)如下，用適合的試劑處理羧酸以提供酰氯；(ii)如下，使該相應(yīng)的酰氯與芳基烯烴縮聚；(iii)如下，脫保護(hù)乙酸酯基團(tuán)并烷基化；其中，r4、r5和r6各自獨(dú)立地選自基團(tuán)ome、oet、opr、oipr、obu、oibu、otbu、obn。在一個(gè)實(shí)施方式中，所述方法包含如下另外的步驟：(iv)如下的氫化反應(yīng)：其中r4、r5和r6如前述定義，條件是r4、r5或r6中的至少一個(gè)為obn；r7、r8和r9各自獨(dú)立地選自基團(tuán)oh、ome、oet、opr、oipr、obu、oibu、otbu。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該方法包括如下的兩個(gè)另外的步驟：(v)異戊烯基的重排，如下：(vi)以及如下所示的氫化反應(yīng)：其中，r4、r5和r6如前述的定義，條件是r4、r5或r6中的至少一個(gè)為obn；r7、r8和r9各自獨(dú)立地選自基團(tuán)oh、ome、oet、opr、oipr、obu、oibu、otbu。在本發(fā)明的第二十一方面，提供了一種如下表示的usyds15的化合物：還提供了一種藥物組合物，其包含根據(jù)第二十一方面的化合物usyds15或者其藥用鹽或溶劑化物以及藥用賦形劑。在本發(fā)明的第二十三方面，提供了根據(jù)第二十一方面的化合物或第二十二方面的組合物在制備用于治療癌癥、免疫抑制、炎癥、細(xì)菌或真菌感染、或用于治療皮膚老化的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式的說(shuō)明在本說(shuō)明書的自始至終，詞語(yǔ)“包含”或其變形如“包括”或“含有”應(yīng)該理解為是指包含所述的要素、整數(shù)或步驟，或者要素、整數(shù)或步驟的組，但是不排除任何其它要素、整數(shù)或步驟，或者要素、整數(shù)或步驟的組。雖然可以在治療中使用治療有效量的本文中定義的化合物或者其藥用鹽或溶劑化物，但是其可以作為主要產(chǎn)品給予；在本發(fā)明的一個(gè)方面，所述活性成分提供為藥物組合物。因此，在本發(fā)明的進(jìn)一步實(shí)施方式中，提供了一種藥物組合物，其包含根據(jù)第一、第二、第十五和第十六方面的式(i)或(ia)的化合物或者它們的藥用鹽或溶劑化物，并混合有一種或多種藥用載體、稀釋劑或賦形劑。在與制劑的其它成分的相容性以及不對(duì)其接受者造成損害的意義上來(lái)說(shuō)，所述載體、稀釋劑或賦形劑必需是可用的。當(dāng)適用時(shí)，本發(fā)明的化合物(包括式(i)或(ia)的化合物)可以為藥用鹽的形式和/或可以作為藥用鹽給予。本文所使用的術(shù)語(yǔ)“藥用鹽”是指用于毒理學(xué)上安全于全身給予的鹽。該藥用鹽可以選自堿金屬或堿土金屬鹽(包括鈉、鋰、鉀、鈣、鎂等)以及無(wú)毒的銨、季銨和胺陽(yáng)離子(包括，但不限于，銨、四甲基銨、四乙基銨、甲胺、二甲胺、三甲胺、三乙胺、乙胺、三乙醇胺等)。本文中所使用的術(shù)語(yǔ)“藥用賦形劑”是指可安全用于全身給予的固體或液體填料、稀釋劑或封裝物質(zhì)。取決于具體的給予途徑，也可以使用本領(lǐng)域中公知的各種載體。這些載體或賦形劑可以選自包括糖、淀粉、纖維素及其衍生物、麥芽、明膠、滑石粉、硫酸鈣、植物油、合成油、多元醇、海藻酸、磷酸鹽緩沖溶液、乳化劑、等滲鹽水和無(wú)熱原水的組。本文中所使用的術(shù)語(yǔ)“溶劑化物”是指由溶質(zhì)(在本發(fā)明中，式(i)或(ia)的化合物或者其鹽或其生理功能衍生物)與溶劑形成的可變化學(xué)計(jì)量的復(fù)合物。用于本發(fā)明目的的此種溶劑可以不干擾所述溶質(zhì)的生物活性。適合的溶劑的實(shí)例包括，但不限于，水、甲醇、乙醇和乙酸。特別地，所使用的溶劑是藥用溶劑。適合的藥用溶劑的實(shí)例包括，但不限于，水、乙醇、乙酸、甘油、液體聚乙二醇及它們的混合物。特別的溶劑是水。式(i)或(ia)的化合物可以以“前藥”的形式給予。前藥為無(wú)活性形式的化合物，其在體內(nèi)轉(zhuǎn)化為活性形式。適合的前藥包括活性形式化合物的酯類、膦酸酯類等。應(yīng)理解的是除了以上特別提及的成分之外，制劑還包括本領(lǐng)域中考慮到所討論的制劑類型的其它試劑。本發(fā)明的化合物可以適合于治療人類或動(dòng)物患者的疾病。在一個(gè)實(shí)施方式中，患者是哺乳動(dòng)物包括人、馬、狗、貓、羊、牛或靈長(zhǎng)類動(dòng)物。在一個(gè)實(shí)施方式中，患者是人類。在進(jìn)一步的實(shí)施方式中，患者不是人類。本文中所使用的術(shù)語(yǔ)“有效量”是指研究人員或臨床醫(yī)師所尋求的能夠引起組織、系統(tǒng)、動(dòng)物或人的生物學(xué)或醫(yī)學(xué)響應(yīng)的藥物或藥劑的量。另外，術(shù)語(yǔ)“治療有效量”是指任何量，與未接受該量的相應(yīng)受試者相比，其引起疾病、病癥、或副作用的改善的治療、治愈、預(yù)防或改善，或者其降低疾病或病癥的惡化進(jìn)度。該術(shù)語(yǔ)也包括在其范圍內(nèi)能有效地增強(qiáng)正常生理功能的量。本文中所使用的術(shù)語(yǔ)“治療”是指與未給予包含本發(fā)明的化合物的藥物組合物相比，預(yù)防或抑制癥狀、治療癥狀、延遲癥狀的顯現(xiàn)、降低癥狀惡化的嚴(yán)重程度、和/或減少個(gè)體患有的癥狀的數(shù)量和類型。術(shù)語(yǔ)治療涵蓋姑息性設(shè)置中的應(yīng)用。本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠理解在本發(fā)明的化合物的制備中，可以需要和/或期望保護(hù)分子中的一個(gè)或多個(gè)敏感性基團(tuán)以防止不希望的副反應(yīng)。適合用于本發(fā)明的保護(hù)基為本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知，并且可以以常規(guī)方法來(lái)使用。例如參見，t.w.greene和p.g.m.wuts的"protectivegroupsinorganicsynthesis"(johnwiley&sons1991)或pj.kocienski的"protectinggroups"(georgthiemeverlag1994)。合適的氨基保護(hù)基的實(shí)例包括?；捅Ｗo(hù)(例如甲酰基、三氟乙?；⒁阴；?、芳族尿烷型保護(hù)基(例如，芐氧基羰基(cbz)和取代的cbz)、脂肪族尿烷型保護(hù)基(例如，9-芴基甲氧基羰基(fmoc)、叔丁氧基羰基(boc)、異丙氧基羰基、環(huán)己氧基羰基)和烷基型保護(hù)基(例如，芐基、三苯甲基、氯代三苯甲基)。根據(jù)本發(fā)明的第一、第二或第十八方面，待治療的癌癥是白血病、非小細(xì)胞肺癌、結(jié)腸癌、cns癌、黑色素瘤、卵巢癌、腎癌、前列腺癌或乳腺癌。最優(yōu)選地，待治療的癌癥是白血病或黑色素瘤。在第一至第九方面的優(yōu)選實(shí)施方式中，根據(jù)式(i)的化合物具有式(ia)。根據(jù)本發(fā)明的第十或第十九方面，優(yōu)選地該藥物用于治療以下癌癥：白血病、非小細(xì)胞肺癌、結(jié)腸癌、cns癌、黑色素瘤、卵巢癌、腎癌、前列腺癌或乳腺癌。最優(yōu)選地，該藥物用于治療白血病或黑色素瘤。在第十至第十四方面的優(yōu)選實(shí)施方式中，根據(jù)式(i)的化合物具有式(ia)。本發(fā)明的化合物的抗腫瘤效果可以應(yīng)用為唯一的治療或可以包括除此之外的一種或多種其它物質(zhì)和/或治療劑。此種聯(lián)合治療(conjointtreatment)可以通過(guò)同時(shí)、順序或單獨(dú)給予所述治療的單個(gè)組分。在腫瘤醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，正常的做法是使用不同形式的治療劑的組合來(lái)治療患有癌癥的各患者，例如手術(shù)、放射療法和/或化學(xué)療法的組合。特別地，已知放射或利用抗血管生成和/或血管滲透性降低劑的治療可以提高腫瘤內(nèi)的缺氧組織的量。因此，本發(fā)明的化合物的效果可以通過(guò)與放射療法和/或利用抗血管生成劑的聯(lián)合治療來(lái)提高。此類組合的個(gè)體組分可以在療程的不同時(shí)間單獨(dú)地給予或同時(shí)地以分開或單一組合的形式給予。因此，本發(fā)明可以理解為包括所有此種同時(shí)或交替治療的方式，并且術(shù)語(yǔ)“給予”也進(jìn)行相應(yīng)的解釋。應(yīng)理解的是本發(fā)明的化合物與其它抗腫瘤劑的組合的范圍原則上包括與任何有用于治療癌癥的藥物組合物的組合。當(dāng)組合于同一制劑時(shí)，應(yīng)理解所述兩種化合物必需是穩(wěn)定的并且彼此相容，與制劑中的其它組分相容，并且可以配制用于給予。當(dāng)單獨(dú)配制時(shí)，它們可以提供為任何方便的制劑，方便地以本領(lǐng)域中公知的用于該化合物的方式。本發(fā)明的藥物組合物可以配制用于通過(guò)任何適合的途徑給予，例如通過(guò)口腔(包括頰或舌下)、直腸、鼻、局部(包括頰、舌下或透皮)、陰道或腸胃外(包括皮下、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)或皮內(nèi))途徑。因此，本發(fā)明的藥物組合物可以配制為例如片劑、膠囊劑、粉劑、顆粒劑、錠劑、乳膏劑或液體制劑，如口服或無(wú)菌非腸道溶液劑或懸浮液。此類藥物制劑可以通過(guò)制藥領(lǐng)域已知的任何方法來(lái)制備，例如使活性成分與載體或賦形劑聯(lián)合。此類藥物制劑可以制備為腸溶包衣的顆粒劑、片劑或膠囊劑，以適合于口服和延遲釋放制劑。當(dāng)化合物與針對(duì)相同疾病具有活性的第二治療劑組合使用時(shí)，各組分的劑量可以不同于當(dāng)化合物單獨(dú)使用時(shí)的量。合適的劑量是本領(lǐng)域技術(shù)人員容易理解的。在根據(jù)第十五方面的本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中，提供了一種式(ia)的化合物，其中r1a-r1d、r2、r3、r4和a----b如上文中的定義，條件是：(i)當(dāng)r3為h時(shí)，r1b和r1d各自獨(dú)立地不是oh或och2ch＝c(ch3)2；以及(ii)當(dāng)r3為h、r1a-ld中的一個(gè)為h且r1a-1d中的至少一個(gè)為ch2ch＝c(ch3)2時(shí)，a----b不是ch＝ch。根據(jù)第十五或十六方面，在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式中，r1a-1d的兩個(gè)為h。在其它優(yōu)選實(shí)施方式中，r1a-1d中的一個(gè)為h，且在其它實(shí)施方式中，r1a-1d都不為h。在優(yōu)選的實(shí)施方式中，r1a-1d中的至少一個(gè)為ch2ch＝c(ch3)2，并且在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，r1a-1d中的至少一個(gè)為och2ch＝c(ch3)2。在某些實(shí)施方式中，r1a-1d中的至少一個(gè)為羥基，并且在某些其它實(shí)施方式中，r1a-1d中的至少兩個(gè)為羥基。在另一個(gè)實(shí)施方式中，r1a-1d中的至少一個(gè)為or4且r4為甲基，并且在又一個(gè)實(shí)施方式中，r4為芐基。在根據(jù)第十五或十六方面的本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式中，r2或r3中的至少一個(gè)為羥基。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，r2和r3都為羥基。在另一個(gè)實(shí)施方式中，r2或r3中的至少一個(gè)為or4且r4為甲基，并且在又一個(gè)實(shí)施方式中，r4為芐基。在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式中，式(ia)中的基團(tuán)a----b為ch＝ch或ch＝chx-，其中x＝(ch2)pch2，并且p為選自由0、1、2或3組成的組中的整數(shù)。在本發(fā)明的其它實(shí)施方式中，式(ia)中的基團(tuán)a----b為ch2-ch2或ch2-ch2x，其中x＝(ch2)pch2，并且p獨(dú)立地為選自由0、1、2或3組成的組中的整數(shù)。在優(yōu)選的實(shí)施方式中，根據(jù)第十五或十六方面的式(ia)的化合物具有通式(ib)：其中r4、r5和r6各自獨(dú)立地選自基團(tuán)ome、oet、opr、oipr、obu、oibu、otbu、obn。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，根據(jù)第十五或十六方面的式(ia)的化合物具有式(ic)或(id)：其中r7、r8和r9各自獨(dú)立地選自基團(tuán)oh、ome、-oet、opr、oipr、obu、oibu、otbu。在又一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，根據(jù)第十五或十六方面的式(ia)的化合物具有通式(ie)或(if)：其中r7、r8和r9各自獨(dú)立地選自基團(tuán)oh、ome、oet、opr、oipr、obu、oibu、otbu。優(yōu)選地，根據(jù)第十五或十六方面的化合物或者其藥用鹽或溶劑化物選自由以下各項(xiàng)組成的組：更優(yōu)選地，根據(jù)第十五或十六方面的化合物或者其藥用鹽或溶劑化物選自由以下各項(xiàng)組成的組：在一個(gè)實(shí)施方式中，根據(jù)十五或十六方面的化合物或者其藥用鹽或溶劑化物選自由以下各項(xiàng)組成的組：在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，該化合物是usyds18：在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，根據(jù)第十五方面的化合物或者其藥用鹽或溶劑化物選自由以下各項(xiàng)組成的組：在研究異戊烯化多羥基二苯乙烯衍生物的初步體外試驗(yàn)中，本發(fā)明人觀察到所有衍生物usyds1至usyds7對(duì)癌細(xì)胞生長(zhǎng)的結(jié)構(gòu)依賴性抑制。這些化合物的大多數(shù)表現(xiàn)出強(qiáng)效抑制幾乎所有的白血病細(xì)胞系(ccrf-cem、hl-60(tb)、k-562、molt-4、rpmi-8226、sr)。在一些細(xì)胞系中，生長(zhǎng)在納米摩爾濃度下受到抑制。在抑制癌細(xì)胞的生長(zhǎng)上，usyds1表現(xiàn)出最有效的活性，然后是usyds10、usyds9、usyds2，再就是usyds14。也觀察到衍生物usyds10和14對(duì)癌細(xì)胞生長(zhǎng)的結(jié)構(gòu)依賴性抑制。結(jié)構(gòu)-活性研究顯示在3-位具有甲氧基且在2-位的c-異戊烯化表現(xiàn)出抑制癌癥細(xì)胞的最高效力。大多數(shù)本研究中的pthos具有基于已知天然存在的化合物白皮杉醇結(jié)構(gòu)的結(jié)構(gòu)，其示出廣譜的生物活性。由于其抑制各種腫瘤細(xì)胞(包括白血病、淋巴瘤；乳癌、前列腺癌、結(jié)腸癌和黑素瘤)的增殖的能力，其當(dāng)前因其抗癌特性而倍受關(guān)注。認(rèn)為其抗癌作用通過(guò)細(xì)胞周期停滯介導(dǎo)；上調(diào)bid、bax、bik、bok、fas；p21waf1下調(diào)bcl-xl；bcl-2、ciap、活化半胱天冬蛋白酶(caspase)、損耗線粒體膜電位和釋放細(xì)胞色素c。已經(jīng)證明白皮杉醇抑制一些轉(zhuǎn)錄因子的激活，這些轉(zhuǎn)錄因子包括nf-κβ(其在響應(yīng)由自由基、紫外線照射、細(xì)胞因子、或微生物抗原引起的細(xì)胞應(yīng)激中起著核心作用)、jak-1(在控制響應(yīng)細(xì)胞外因子的細(xì)胞活性的stat路徑中的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄物)。已經(jīng)觀察到在本研究中描述的pthos顯示的生物活性譜類似于由白皮杉醇所顯示的生物活性譜。另外，pthos(即usyds1，gi50值：0.02μμ-5μμ)在抑制幾乎所有類型的腫瘤細(xì)胞的增殖上與白皮杉醇(ic50值：5μμ-100μμ)相比，顯示出大約250倍以上的有效性。因此，本申請(qǐng)中提出的pthos將會(huì)是藥物研究和開發(fā)的極具吸引力的導(dǎo)向并作為進(jìn)一步了解癌癥的病理生理的生物工具。化合物usyds1和化合物usyds2的強(qiáng)效細(xì)胞毒性可以用它們的增加的疏水性來(lái)解釋，通過(guò)它們的計(jì)算得出的log分配系數(shù)(logp)值來(lái)表示。usyds1和usyds2具有的logp值幾乎是羥基二苯乙烯白藜蘆醇的兩倍。logp值對(duì)治療化合物的作用主要涉及組織穿透和分布。較高的logp值將使得化合物能夠更容易地穿過(guò)細(xì)胞膜和進(jìn)入細(xì)胞。在其它初步實(shí)驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)特定實(shí)例的o-異戊烯化羥基二苯乙烯衍生物和c-異戊烯化羥基二苯乙烯衍生物顯示出對(duì)sirt1酶的濃度依賴性抑制，該sirt1酶為sirtuin蛋白家族(沉默信息調(diào)節(jié)子2蛋白，sir2)的成員。sirtuin已經(jīng)成為模型生物體中用于衰老和長(zhǎng)壽的關(guān)鍵調(diào)節(jié)子。對(duì)sirtuin的遺傳學(xué)和生理學(xué)的研究證明這種酶家族在各種細(xì)胞過(guò)程中發(fā)揮了作用，包括基因沉默、細(xì)胞死亡、脂肪酸代謝、神經(jīng)元的保護(hù)和壽命延長(zhǎng)。為了不受任何特定的理論的約束，提出sirt1活性的調(diào)節(jié)可以致使治療疾病(包括癌癥、代謝綜合征、肥胖、神經(jīng)退行性疾病和衰老-相關(guān)性疾病)用治療劑的開發(fā)。在優(yōu)選的實(shí)施方式中，根據(jù)第十五或十六方面，式(ia)的化合物是化學(xué)合成的。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，式(ia)的化合物分離自蜂膠，其中所述蜂膠來(lái)源于鱗籽莎屬(lepidospermagenus)的植物。在又一個(gè)實(shí)施方式中，式(ia)的化合物分離自鱗籽莎屬的樹脂、樹膠或滲出物。根據(jù)本發(fā)明的第二十方面，在式(ib)、(ic)、(id)、(ie)或(if)的化合物的制備中，優(yōu)選地步驟(ii)中的縮聚反應(yīng)是在鈀催化劑的存在下進(jìn)行的。優(yōu)選地，鈀催化劑是乙酸鈀(ii)。優(yōu)選地，步驟(iii)中的烷基化反應(yīng)是在金屬氫化物和鹵代異戊烯基試劑的存在下進(jìn)行的。優(yōu)選地，所述金屬氫化物是氫化鈉；但是本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠理解其它已知的金屬氫化物也可以使用。最優(yōu)選的鹵代異戊烯基試劑是brch2ch＝c(ch3)2。在優(yōu)選的實(shí)施方式中，步驟(iv)或(vi)中的氫化反應(yīng)是在鈀催化劑的存在下在溶劑的混合物中進(jìn)行的。最優(yōu)選地，鈀催化劑是碳載鈀(palladiumoncarbon)，且溶劑的混合物包含1,4-環(huán)己二烯和乙醇。但是，本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠理解任何其它適合的試劑和溶劑也可以使用。在優(yōu)選的實(shí)施方式中，步驟(v)中的重排反應(yīng)是在硅酸鎂顆粒二氧化硅或氧化鋁顆粒的存在下進(jìn)行的。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述重排反應(yīng)可以在微波輻射或光的存在下進(jìn)行。在又一個(gè)實(shí)施方式中，步驟(v)中的重排反應(yīng)是在硅酸鎂顆粒二氧化硅或氧化鋁顆粒的存在下和在微波輻射或光的存在下進(jìn)行的。附圖說(shuō)明圖1為一些分離的和合成的異戊烯化多羥基二苯乙烯衍生物的總結(jié)。圖2為概述新型o-異戊烯化多羥基二苯乙烯衍生物和c-異戊烯化多羥基二苯乙烯衍生物的合成的流程圖。圖3顯示了對(duì)于各種細(xì)胞系，化合物usyds1對(duì)人類癌細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制的劑量響應(yīng)曲線。圖4顯示了對(duì)于各種細(xì)胞系，化合物usyds2對(duì)人類癌細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制的劑量響應(yīng)曲線。圖5顯示了對(duì)于各種細(xì)胞系，化合物usyds3對(duì)人類癌細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制的劑量響應(yīng)曲線。圖6顯示了對(duì)于各種細(xì)胞系，化合物usyds4對(duì)人類癌細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制的劑量響應(yīng)曲線。圖7顯示了對(duì)于各種細(xì)胞系，化合物usyds9對(duì)人類癌細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制的劑量響應(yīng)曲線。圖8顯示了對(duì)于各種細(xì)胞系，化合物usyds6對(duì)人類癌細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制的劑量響應(yīng)曲線。圖9顯示了對(duì)于各種細(xì)胞系，化合物usyds7對(duì)人類癌細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制的劑量響應(yīng)曲線。圖10用圖表示出了二苯乙烯化合物對(duì)自由基清除的效果。圖11用圖表示出了二苯乙烯化合物對(duì)nad-依賴性脫乙酰基酶sirtuin-2(sirt1)的濃度依賴性抑制。具體實(shí)施方式為了更好地理解本發(fā)明的本質(zhì)，現(xiàn)在將描述如下的若干實(shí)施例：材料將從莎草(鱗籽莎屬粘質(zhì)(lepidospermaviscidum))收集的觀察的蜜蜂捕獲在塑料管中，蓋上蓋子并冷凍。剪下并匯集帶有蜂膠的蜜蜂后腿的部分。收集來(lái)自植物的樹脂并存貯在-20℃直到分析。得到植物樣品并在40℃下在通風(fēng)烘箱(thermoline,nswaustralia)中干燥過(guò)夜以提供植物學(xué)者鑒定用的憑證標(biāo)本，a/profmurrayhenwood,johnraymuseum,universityofsydney,sydney,australia，并且登記為鱗籽莎屬粘質(zhì)(lepidospermaviscidum)化學(xué)型la，憑單號(hào)duke100222-42和鱗籽莎屬粘質(zhì)化學(xué)型2a，憑單號(hào)duke100221-21。使用76個(gè)由3個(gè)10-框架盒制成的蜂箱(每個(gè)蜂箱在蜂箱罩蓋下配有蜂膠墊)來(lái)收集蜂膠樣品。在位于袋鼠島中南部地區(qū)的蜂房場(chǎng)所的位置上使用獨(dú)立編號(hào)的蜂箱。正相短柱色譜(npscc)用的預(yù)涂有硅膠60f254和硅膠60h的薄層層析板購(gòu)自merck。用uvgl-58礦物光燈multibanduv-2544/366目測(cè)tlc板。在分離和合成中使用的所有化學(xué)品都購(gòu)自sigma-aldrichptyltd(castlehill,nsw,australia)，包括氘化的nmr溶劑(例如氯仿-d和甲醇-d4)、氘化的二甲基亞砜(d6-二甲基亞砜)。溶劑包括己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯、異丙醇、乙醇、甲醇和乙酸，都是分析純的并且購(gòu)自ajaxfinechem,tarenpoint,nsw,australia或asiapacificspecialtychemicalltd(aps)。使用rotavapor型r-114旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器以40-60℃范圍的水浴溫度來(lái)蒸發(fā)溶劑餾分。真空泵v-700或1684930_1.doc。使用具有真空控制器v-800或v-850的vacuubrandmd4cnt隔膜泵(vacuubrandgmbh,wertheim,germany)。使用directtorr真空泵(sargent-welch,buffalo,usa)通過(guò)napco5831真空烘箱(napco,saltlakecity,usa)進(jìn)行最終的干燥。制備性hplc是在反相柱(grace,alltimac185μμ22mmid×250mm)上的shimadzu制備梯度lc-8a系統(tǒng)上進(jìn)行的，注射體積500μl，用甲醇(75％)和水以10ml/min進(jìn)行洗脫，并且使用紫外-可見光檢測(cè)器(shimadzuspd-20a)在280nm下進(jìn)行檢測(cè)。分析hplc是在shimadzuuflc、lc-20ad泵、sil-20aht自動(dòng)進(jìn)樣器上利用hewlett-packard柱(nucleosil100c18,5μm,4mm×125mm)來(lái)進(jìn)行的，注射體積20μl，用甲醇-水-乙酸(70:29.8:0.2)在1ml/min下進(jìn)行洗脫，并且用紫外-可見光檢測(cè)器(shimadzuspd-20a)在230nm下進(jìn)行檢測(cè)。1h和13c核磁共振(nmr)分析是在具有sms自動(dòng)進(jìn)樣器的varian400mhz系統(tǒng)(paloalto,california,usa)上進(jìn)行的。nmr光譜以四甲基硅烷(tms)為參照物。質(zhì)譜是從thermofinnigantsq7000(lc-ms/ms系統(tǒng))和finniganpolarisiontrapms/ms系統(tǒng)(finnigan,sanjose,usa)使用xcalibur1.2數(shù)據(jù)系統(tǒng)來(lái)獲得的。植物和蜂膠樣本的1h-nmr化學(xué)概況(profile)的測(cè)定在室溫下將來(lái)自莖基部(0.1g)、蜜蜂后腿(0.1g)和蜂箱蜂膠(1.0g)的樹脂樣品用乙酸乙酯萃取15min。過(guò)濾萃取液，在減壓下干燥并通過(guò)1h-nmr和hplc分析。發(fā)現(xiàn)來(lái)自莎草-1型的樣品含有作為主要成分的異戊烯化羥基二苯乙烯和肉桂酸酯，而來(lái)自莎草-2型的那些樣品顯示只有異戊烯化二苯乙烯作為主要成分，如上所述。然后選擇蜂膠樣品以分離出所述組分。來(lái)自袋鼠島的蜂膠的異戊烯化多羥基二苯乙烯的分離和鑒定。一般方法在室溫下用二氯甲烷以攪拌1小時(shí)來(lái)萃取蜂膠(10g)。使用正相短柱色譜(npscc)純化萃取物。采用由二氯甲烷(dcm)和乙酸乙酯(etoac)組成的以0、1、2、4、8、10、15、20、50和100％組成的逐步梯度流動(dòng)相(2x100ml)來(lái)洗脫各組分，然后通過(guò)tlc和nmr分析。如果需要，隨后在相同的npscc上以不同的由乙烷和etoac或由己烷和異丙醇組成的流動(dòng)相進(jìn)一步純化化合物。當(dāng)需要進(jìn)一步純化化合物時(shí)，也采用正相制備hplc(shimadzulc-8a)。在室溫下，以含2％異丙醇的己烷為流動(dòng)相，以10ml/min的流速使化合物洗脫通過(guò)硅膠柱(silica10μm,10cmx250cm)。用uv檢測(cè)器(uv/visspd-20a)在280nm下監(jiān)控化合物的洗脫。通過(guò)1h-和13c-nmr和質(zhì)譜(包括高分辨質(zhì)譜)來(lái)表征這些純化合物的結(jié)構(gòu)和特性。當(dāng)需要時(shí)，也使用梯度異核多重鍵的相干性(ghmbc)通過(guò)2d-nmr來(lái)進(jìn)行分離的化合物的詳細(xì)結(jié)構(gòu)分析。分離的異戊烯化多羥基二苯乙烯衍生物：(e)-2-(3-甲基-2-丁烯-1-基)-4',5-二羥基-3,3'-二甲氧基二苯乙烯(usyds1)。淺黃色液體。c21h24o41hnmr(甲醇-d4400mhz):rt14.64min.δ7.16(d,j＝16hz,h),7.07(d,j＝4hz,h),6.94(dd,j＝8,4hz,h),6.86(d,j＝19hz,h),6.78(d,j＝8hz,h),6.63(d,j＝4hz,h),6.34(d,j＝4hz,h),5.06(m,h),3.89(s,3h),3.77(s,3h),3.39(m,2h),1.80(bs,3h),1.66(bs,3h).13c-nmr(cdcl3,100mhz)δ158.5,154.4,146.7,145.6,138.1,130.6,130.4,130.3,124.3,123.7,120.7,120.6,114.5,108.2,103.9,98.2,55.9,55.7,25.8,24.5,18.0；ci-ms:m/z339(m-1)-,hresims:m/z341.1749(m+h)+,c21h25o4的計(jì)算值341.1747.(e)-3-(-3-甲基-2-丁烯基氧基)-4’,5-二羥基-3’-甲氧基二苯乙烯(usyds2)。淺黃色液體。c20h22o41hnmr(甲醇-d4,400mhz):rt15.46min.δ7.12(d,j＝4hz,1h),7.01(d,j＝16hz,1h),6.97(dd,j＝8,4hz,1h),6.88(d,j＝16hz,1h),6.78(d,j＝8hz,2h,6.56(m,1h),6.24(m,1h),5.46(m,1h),4.52(d,j＝4hz,2h),3.90(s,3h),1.79(bs,3h),1.76(bs,3h).13c-nmr(cdcl3,100mhz)δ160.2,156.9,146.7,145.5,139.9,138.6,129.9,129.2,126.2,120.6,119.4,114.7,108.4,105.9,105.4,101.5,65.0,55.9,25.8,18.2；ci-msm/z325(μ-1)-,hresimsm/z327.15938(m+h)+,c20h23o4的計(jì)算值327.1591.(e)-4-(3-甲基-2-丁烯-1-基)-3,3’,5-三羥基-4’-甲氧基二苯乙烯(usyds3)。淺黃色液體。c20h22o41hnmr(甲醇-d4,400mhz):rt11.46min.δ7.08(d,j＝4hz,1h),6.93(dd,j＝8,4hz,1h),6.91(d,j＝16hz,1h),6.78(d,j＝16hz,1h),6.77(d,j＝8hz,1h),6.46(s,2h),5.23(m,1h),3.89(s,3h),3.28(m,2h),1.76(bs,3h),1.65(bs,3h)；ci-ms:m/z325(m-l)-；hrms:325.14453[m-1]-,(c20h21o4的計(jì)算值325.14398).(e)-3-(3-甲基-2-丁烯氧基)-3',4',5-三羥基二苯乙烯(usyds4)。淺黃色液體。c19h20o41hnmr(甲醇-d4,400mhz):rt18.62min.δ6.98(d,j＝4hz,1h),6.94(d,j＝16hz,1h),6.85(dd,j＝8,4hz,1h),6.80(d,j＝16hz,1h),6.74(d,j＝8hz,1h),6.53(m,2h),6.23(m,1h),5.46(m,1h),4.51(d,j＝4hz,2h),1.79(bs,3h),1.76(bs,3h)；13cnmr(甲醇-d4,100mhz):δ160.2,158.2,145.2,145.1,139.8,136.9,129.5,128.5,125.5,119.9,118.8,114.9,112.4,105.2,103.8,100.7,64.4,24.4,16.8；ci-ms:m/z311(m-l)-；hreims:m/z335.1252(m+na)+,c19h20o4na的計(jì)算值335.1259.(e)-2,4-二(3-甲基-2-丁烯-1-基)-3,4',5-三羥基二苯乙烯(usyds6)?；野咨腆w。c24h28o31hnmr(甲醇-d4,400mhz):rt9.35min.δ7.30(d,j＝8hz,2h),7.11(d,j＝16hz,1h),6.80(d,j＝16hz,1h),6.76(d,j＝8hz,2h),6.63(s,1h),5.21(m,1h),5.10(m,1h),3.41(m,2h),3.35(m,2h),1.81(bs,3h),1.78(bs,3h),1.68(bs,6h)；ci-ms:m/z363(m-1)-.(e)-2,4-二(3-甲基-2-丁烯-1-基)-3,3',4',5-四羥基二苯乙烯(usyds7)。灰白色固體。c24h28o41hnmr(甲醇-d4,400mhz):rt10.46min.δ7.07(d,j＝16hz,1h),6.94(d,j＝4hz,1h),6.79(dd,j＝8,4hz,1h),6.73(d,j＝16hz,1h),6.71(d,j＝8hz,1h),6.62(s,1h),5.21(m,1h),5.10(m,1h),3.41(m,2h),3.35(m,2h),1.81(bs,3h),1.78(bs,3h),1.68(bs,6h)；ci-ms:m/z379(m-l)-；hrms:379.19148[m-1]-,(c24h27o4的計(jì)算值379.19092).(e)-2-(3-甲基-2-丁烯-1-基)-3,3',4',5-四羥基二苯乙烯(usyds8)。c19h20o41hnmr(丙酮-d6,400mhz):δ7.07(d,j＝2hz,1h),7.15(d,j＝16hz,1h),6.89(dd,j＝8,2hz,1h),6.81(d,j＝8hz,1h),6.80(d,j＝16hz,1h),6.63(d,j＝2hz,1h),6.35(d,j＝2hz,1h),5.15(t,j＝7hz,1h),3.42(d,j＝7hz,2h),1.81(s,3h),1.65(s,3h).13cnmr(丙酮-d6,100mhz):δ155.9,155.8,145.4,145.3,138,4,130.1,129.7,129.4,124.5,123.9,117.4,119.0,115.4,112.9,103.4,101.6,24.0,25.0,17.2.hresims:(m/z)313.1434(m+h)+,c19h21o4的計(jì)算值313.1440.(e)-2-(3-甲基-2-丁烯-1-基)-3',4',5-三羥基-3-甲氧基二苯乙烯(usyds9)。c20h22o41hnmr(丙酮-d6,400mhz):δ7.16(d,j＝16hz,1h),7.07(d,j＝2hz,1h),6.90(dd,j＝8,2hz,1h),6.85(d,j＝16hz,1h),6.82(d,j＝8hz,1h),6.71(d,j＝2hz,1h),6.39(d,j＝2.3hz,1h),5.09(1h,t,j＝7hz,1h),3.78(s,3h),3.40(d,j＝7hz,2h),1.80(s,3h),1.64(s,3h).13cnmr(丙酮-d6,100mhz):δ158.5,156.3,145.3(2c),138.0,130.1,130.0,129.6,123.7,124.2,119.1,118.9,115.3,112.9,103.7,98.1,55.0,25.0,23.9,17.2.hresims:m/z327.1592(m+h)+,c20h23o4的計(jì)算值327.1596.(e)-2-(3-甲基-2-丁烯-1-基)-3,4',5-三羥基-3'-甲氧基二苯乙烯(usyds10)。c20h22o41hnmr(丙酮-d6,400mhz):δ7.13(d,j＝16hz,1h)7.02(dd,j＝8,2hz,1h),7.00(s,1h),6.92(d,j＝8hz,1h),6.85(d,j＝16hz,1h),6.66(d,j＝2hz,1h),6.30(d,j＝2hz,1h),5.20(t,＝7hz,1h),3.95(s,3h),3.43(d,j＝7hz,2h),1.84(s,3h),1.75(s,3h).13cnmr(丙酮-d6,100mhz):δ155.4,154.4,146.7,145.7,138.8,133.6,131.2,130.1,124.2,122.5,120.5,117.7,114.6,108.4,105.3,102.5,55.9,25.8,25.1,18.0.hresims:m/z349.1411(m+na)+,c20h22o4na的計(jì)算值349.1416.(e)-3-(3-甲基-2-丁烯氧基)-4',5-二羥基二苯乙烯(usyds11)。c19h22o31hnmr(cdcl3,400mhz):δ7.38(dd,j＝7,2hz,2h),7.00(d,j＝16hz,1h),6.84(d,j＝16hz,1h),6.82(dd,j＝7,2hz,2h),6.64(t,j＝2hz,1h),6.56(t,j＝2hz,1h),6.33(t,j＝2hz,1h),5.50(t,j＝7hz,1h),4.51(d,j＝7hz,2h),1.81(s,3h),1.76(s,3h).13cnmr(cdcl3,100mhz):δ160.4,156.7,155.4,139.9,138.4,130.1,128.8,128.0(2c),126.3,119.5,115.6(2c),105.6,105.5,101.3,64.9,25.8,18.2.4-(3-甲基-2-丁烯-1-基)-3,4',5-三羥基二氫二苯乙烯(usyds12)。c19h22o41hnmr(cd3od,400mhz)δ6.97(d,j＝8hz,2h),6.66(d,j＝8hz,2h),6.13(s,2h),5.22(t,j＝7hz,1h),3.24[d,j＝7hz,2h),2.72(m,2h),2.64(m,2h),1.74(s,3h),1.64(s,3h).13cnmr(cd3od,100mhz):δ155.5(2c),154.9,140.3,132.9,129.4,128.9(2c),123.6,114.6(2c),112.3,106.5(2c),38.0,36.8,24.5,21.7,16.5.(e)-2-(3-甲基-2-丁烯-1-基)-3-(3-甲基-2-丁烯氧基)-3',4',5-三羥基二苯乙烯(usyds14)。無(wú)色固體，產(chǎn)量12mg。esi-ms:m/z379[m-1]-,1h-nmr(甲醇-d4,400mhz):δ7.07(d,j＝16hz,1h),6.96(d,j＝4hz,1h),6.80(dd,j＝8,4hz,1h),6.79(d,j＝16hz,1h),6.74(d,j＝8hz,1h),6.61(d,j＝4hz,1h),6.32(d,j＝4hz,1h),5.47(m,1h),5.06(m,1h),4.48(m,2h),3.37(m,2h),1.78(m,6h),1.75(m,3h),1.66(m,3h).13c-nmr(100mhz,cd3od):δ16.75,16.80,23.84,24.45,24.54,64.86,99.04,103.41,112.39,114.96,118.71,119.14,120.14,123.54,123.97,129.51,129.70,130.01,136.78,137.95,145.08,145.09,155.59,157.47.hrms:379.19148[m-1]-,(c24h27o4的計(jì)算值379.19092).(e)-2,6-二(3-甲基-2-丁烯-1-基)-3,3',5,5'-四羥基二苯乙烯usyds15無(wú)色固體，產(chǎn)量9mg。esi-ms:m/z379[m-1]-,1hnmr(400mhz,cd3od):δ6.91(s,1h),6.82(d,j＝16hz,1h),6.73(s,1h),6.72(s,1h),6.28(s,1h),6.27(d,j＝16hz,1h),5.12(m,1h),3.26(m,2h),1.65(m,6h),1.59(m,6h).13c-nmr(100mhz,cd3od):δ16.75(2c),24.53(2c),25.60(2c),100.93,112.27,114.86,117.66(2c),118.24,124.06,124.63(2c),128.93(2c),130.20,133.33,139.41,144.73,144.97,153.04(2c).hrms:379.19149[m–1]-,(c24h27o4的計(jì)算值379.19092).(e)-2,6-二(3-甲基-2-丁烯-1-基)-3,4',5-三羥基-3'-甲氧基二苯乙烯usyds18產(chǎn)量5mg。esi-ms:m/z393[m-1]-.1hnmr:(cd3od,400mhz)δ7.03(d,j＝2hz,1h),6.87(d,j＝17hz,1h),6.85(dd,j＝8,2hz,1h),6.77(d,j＝8hz,1h),6.33(d,j＝17hz,1h),6.30(s,1h),5.14(brt,j＝6hz,2h),3.88(s,3h),3.26{brd,j＝6hz,4h),1.66{brs,6h),1.60(brs,6h).13cnmr(cd3od,100mhz):δ18.37.(2c),26.12(2c),27.20(2c),56.53,102.58,110.27,116.42,119.23(2c),121.03,126.02(2c),126.31,130.41(2c),131.7,134.87,140.95,147.51,149.26,154.65(2c).hrms:417.20363[m+23]+,(c25h30o4na的計(jì)算值417.20418).異戊烯化多羥基二苯乙烯的化學(xué)改性及合成a.o-異戊烯基多羥基二苯乙烯至c-異戊烯基多羥基二苯乙烯的重排在微波反應(yīng)器(cemdiscovermicrowave)中于120℃將usyds2(5mg)和florisil(5mg)在二甲苯(2ml)中的混合物加熱30min。在減壓下干燥產(chǎn)物并使用npscc純化。檢測(cè)到兩種重排產(chǎn)物，組合產(chǎn)率為約30％。檢測(cè)到的主產(chǎn)物為(e)-4-(3-甲基-2-丁烯-l-基)-3,4',5-三羥基-3'-甲氧基二苯乙烯(usdys13)：檢測(cè)到的次產(chǎn)物為(e)-2-(3-甲基-2-丁烯-l-基)-3,4',5-三羥基-3'-甲氧基二苯乙烯(usyds10)。b.異戊烯化多羥基二苯乙烯的合成1.3,5-二羥基苯甲酸甲酯(1)的制備向3,5-二羥基苯甲酸(10g,64.9mmol)的無(wú)水甲醇(150ml)溶液中滴加乙酰氯(2ml,28.1mmol)。在n2下將混合物加熱回流17小時(shí)。蒸去溶劑并將殘留物溶解于乙酸乙酯(100ml)中，然后用飽和碳酸氫鈉(3x100ml)洗滌。用水(2x100ml)洗滌合并的有機(jī)層，用硫酸鈉干燥，過(guò)濾并真空濃縮得到作為無(wú)色固體的2(9.80g,90％)：mp167-168℃(lit.1mp168-169℃)；1hnmr(400mhz,丙酮-d6)δ8.66(s,2h),7.00(d,j＝2.4hz,2h),6.59(t,j＝2.4hz,2h),3.83(s,3h)。2.3-羥基-5-芐氧基苯甲酸甲酯(2)的制備在0℃在n2下，向nah(60％分散于礦物油中，3.3g，137.3mmol)的無(wú)水n,n-二甲基甲酰胺(dmf)(100ml)的懸浮液中加入2(10g，59.5mmol)的無(wú)水dmf(30ml)溶液，然后滴加芐基溴(6.4ml，53.8mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2小時(shí)，用冷水(50ml)冷激，用冷的1mhc1(20ml)酸化并且使用二乙醚(3x50ml)萃取。用水(2x50ml)洗滌合并的有機(jī)萃取物，用硫酸鈉干燥，過(guò)濾并真空濃縮。使用npscc使用由氯仿/乙醇組成的逐步梯度純化產(chǎn)物得到灰白色固體的2(4.5g，60％)2：mp97-98℃(lit.3mp98℃)；c15h14o41′hnmr(400mhz,cdc13)δ8.01(s,1h),7.43-7.33(m,5h),7.24(dd,j＝2.0,1.2hz,1h),7.20(dd,j＝2.0,1.2hz,1h),6.70(t,j＝2.0hz,1h),5.07(s,2h),3.90(s,3h)。3.3-羥基-5-芐氧基苯甲酸(3)的制備向2(4.5g，16.7mmol)的甲醇(30ml)溶液中加入1mnaoh(60ml60mmol)。在45℃在n2下，將所得到的反應(yīng)混合物攪拌4小時(shí)，然后加入1mhc1(50ml)以酸化該溶液，然后用乙酸乙酯(3x40ml)萃取。用水(2x30ml)洗滌合并的有機(jī)萃取液并用硫酸鈉干燥。在真空下蒸發(fā)出溶劑得到作為灰白色固體的3(4.02g，94％)：mp196-198℃；c14h12o41′hnmr(400mhz,丙酮-d6)δ7.42-7.33(m,5h),7.21(dd，j＝2.4,1.2hz,1h),7.11(dd,j＝2.4,1.2hz,1h),6.68(t,j＝2.4hz,1h),5.07(s,2h)。4.3-羥基-5-甲氧基苯甲酸(4)的制備使用甲基碘代替芐基溴如上所述來(lái)制備標(biāo)題化合物，得到作為灰白色固體的4，mp199-200℃(lit.4mp.199-200℃)；c8h8o41hnmr(400mhz,丙酮-d6)δ8.01(s,2h),7.16(t,j＝1.2hz,1h),7.13(t,j＝1.2hz,1h),6.15(t,j＝2.4hz,1h),3.82(s,3h)。5.3-乙酰氧基-5-芐氧基苯甲酸(5)的制備向3(4.02g，17.6mmol)的乙酸酐(20ml，21.6mmol)溶液中加入吡啶(10％，0.15ml，1.76mmol)。將該混合物在室溫下攪拌4小時(shí)，用水(30ml)冷激，通過(guò)0.1mhcl(10ml)酸化并且使用乙酸乙酯(3x40ml)萃取。用水(2x30ml)洗滌合并的有機(jī)萃取液，用硫酸鈉干燥并且過(guò)濾。真空蒸去溶劑并且在己烷/乙酸乙酯的(1:1)混合物中重結(jié)晶得到作為粉紅色晶體的5(3.86g，96％)5：mp133-134℃；c16h14o51hnmr(400mhz,cdc13)δ7.59(dd,j＝2.4,1.2hz,1h),7.45(dd,j＝2.4,1.2hz,1h),7.43-7.34(m,5h),6.99(t,j＝2.4hz,1h),5.1(s,2h),2.32(s,3h)。6.3-乙酰氧基-5-甲氧基苯甲酸(6)的制備如5中所述的制備標(biāo)題化合物，得到作為灰白色固體的6：mp151-153℃；c10h10o51hnmr(400mhz,cdc13)δ7.50(dd,j＝2.0,1.4hz,1h),7.43(dd,j＝2.0,1.4hz,1h),6.90(t,j＝2.0hz,1h),3.86(s,3h),2.32(s,3h)。7.3-甲氧基-4-芐氧基苯甲醛(7)的制備在0℃在n2下，通過(guò)注射器向nah(60％分散于礦物油中，1.6g，66.6mmol)的無(wú)水dmf(50ml)的懸浮液中緩慢加入香草醛(4-羥基-3-甲氧基苯甲醛，4g，26.3mmol)的無(wú)水dmf(20ml)溶液，然后逐滴加入芐基溴(3ml，25.2mmol)。將該混合物在室溫下攪拌4小時(shí)，用冷水(30ml)冷激，用冷的1mhcl(15ml)酸化并且使用二乙醚(3x40ml)萃取。用水(2x30ml)洗滌合并的有機(jī)萃取液，用硫酸鈉干燥并且減壓干燥得到作為無(wú)色固體的7(6g,92％)：mp60-62℃(lit.6mp61-62℃)；c15h14o31hnmr(400mhz,cdcl3)δ9.84(s,1h)),7.43-7.31(m,7h)),7.00(d,j＝8.4hz,1h)),5.25(s,2h)),3.95(s,3h))。8.4-甲氧基-3-芐氧基苯甲醛(8)的制備如7中所述的制備標(biāo)題化合物，得到作為無(wú)色固體的8：mp61-63℃(lit.7mp61-63℃)；ci5h14o31hnmr(400mhz,cdcl3)δ9.80(s,1h)),7.49-7.31(m,7h))，7.00(d,j＝8.1hz,1h)),5.20(s,2h)),3.97(s,3h))。9.4-乙烯基-2-甲氧基-1-芐氧基苯(9)的制備在0℃在n2下，向甲基三苯基溴化膦(6.5g，18.2mmol)的無(wú)水四氫呋喃(thf)(15ml)的懸浮液中加入叔丁醇鉀(2.3g，20.5mmol)，并且將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝?。逐滴地加入芐基香草醛(7)(4g，16.5mmol)的無(wú)水thf(15ml)溶液并攪拌2小時(shí)，然后用冷水(20ml)冷激，用0.1mhcl(20ml)酸化，并且使用乙酸乙酯(3x40ml)萃取。用20％氯化鈉水溶液(20ml)洗滌合并的有機(jī)萃取液，然后減壓干燥。使用npscc使用由己烷/乙酸乙酯組成的逐步梯度流動(dòng)相純化產(chǎn)物，得到作為無(wú)色固體的9(3.37g，85％)；mp53-54℃(lit.8mp50-51℃)；c16h16o21hnmr(400mhz,cdc13)δ7.45-7.28(m,5h),6.99(d,j＝2hz,1h),6.90(dd,j＝4,1hz,1h),6.83(d,j＝4hz,1h),6.68(dd,j＝17,1hz,1h),5.64(dd,j＝17,1hz,1h),5.17(s,2h),5.14(d,j＝1hz,1h),3.92(s,3h)。10.5-乙烯基-2-甲氧基-1-芐氧基苯(10)的制備如9中所述的制備標(biāo)題化合物，得到作為灰白色固體的10；mp68-69℃(lit.9mp68-69℃)；c16h16o21hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.48-7.31(m,5h),7.01(d,j＝2hz,1h),6.97(dd,j＝8,2hz,1h),6.85(d,j＝8hz,1h),6.64(dd,j＝17,1hz,1h),5.56(dd,j＝17,1hz,1h),5.17(s,2h),5.12(d,j＝1hz,1h),3.92(s,3h)。11.e-1-[3-乙酰氧基-5-芐氧基苯基]-2-[3-甲氧基-4-芐氧基苯基]乙烯(11)的制備:在n2下在室溫下，向n,n-二(2,6-二異丙基)二氫氯化咪唑(0.093g，10％，0.217mmol)和pd(oac)2(0.048g，10％，0.217mmol)的二甲苯(3ml)溶液中加入5的酰氯(0.7g，2.17mmol)的二甲苯溶液2ml，隨后加入4-乙基嗎啉(0.04ml，0.316mmol)和試劑9(0.627g，2.61mmol)的二甲苯(3ml)溶液。將該混合物在130℃加熱18-22小時(shí)。真空蒸去溶劑并且使用npscc(己烷/乙酸乙酯3:1作為流動(dòng)相)純化該產(chǎn)物得到作為黃色油狀物的11(0.33g，31.6％)；c31h28o51hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.45-7.28(m,13h),7.06(d,j＝2.0hz,1h),7.02(d,j＝17hz,1h),6.97(dd,j＝6,2hz,1h),6.89(m,1h),6.62(t,j＝2hz,1h),5.18(s,2h),5.07(s,2h),3.94(s,3h),2.30(s,3h)；13cnmr(100mhz,cdcl3)δ169.39,159.78,151.81,149.79,148.32,139.82,137.00,136.57,130.48,129.78,128.63(2c),128.58(2c),128.10,127.88,127.55(2c),127.24(2c),126.02,119.98,113.95,112.02,110.50,109.48,107.28,71.0,70.27,56.02,21.19；ci-msm/z(％):481(m+1)+,503(m+na)+；hrms:m/z503.1828(m+na)+,c31h28o5na的計(jì)算值503.1834。12.e-1-[3-乙?；?5-芐氧基苯基]-2-[3-芐氧基-4-甲氧基苯基]乙烯(12)的制備如11中所述的將5的酰氯與試劑10縮聚來(lái)制備標(biāo)題化合物。從己烷/甲苯的混合物(2:1)中對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行重結(jié)晶得到微黃色針狀結(jié)晶；c31h28o5mp133-134℃；1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.49-7.29(m,10h),7.07(d,j＝2hz,1h),7.05(dd,j＝8,2hz,1h),6.97(d,j＝16hz,1h),6.95(t,j＝2hz,1h),6.89(d,j＝8hz,1h),6.84(t,j＝2hz,1h),6.82(d,j＝16hz,1h),6.62(t,j＝2hz,1h),5.18(s,2h),5.07(s,2h),3.94(s,3h),2.30(s,3h)；13cnmr(100mhz,cdcl3)δ169.39,159.76,151.80,149.90,148.34,139.83,137.05,136.58,129.94,129.78,128.64(2c),128.60(2c),128.11,127.94,127.58(2c),127.38(2c),125.88,120.59,112.00,111.91,111.81,110.52,107.22,71.16,70.27,56.06,21.18(ch3co)；ci-msm/z481(m+1)+,503(m+na)+；hrmsm/z503.1832(m+na)+,c31h28o5na的計(jì)算值503.1834。13.e-1-[3-乙酰氧基-5-甲氧基苯基]-2-[3-甲氧基-4-芐氧基苯基]乙烯(13)的制備如11中所述的將6的酰氯與試劑9縮聚來(lái)制備標(biāo)題化合物，得到作為灰白色固體的標(biāo)題化合物；mp104-106℃；c25h24o51hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.45-7.30(m,8h),7.07(d,j＝2hz,1h),7.03(d,j＝16hz,1h),6.98(dd,j＝8,2hz,1h),6.90(d,j＝16hz,1h),6.88(m,1h),5.18(s,2h),3.95(s,3h),3.83(s,3h),2.31(s,3h)；13cnmr(100mhz,cdcl3)δ169.41,160.58,151.83,149.78,148.31,139.76,137.00,130.49,129.72,128.58(2c),127.88,127.24(2c),126.07,119.97,113.94,111.73,109.67,109.46,106.54,71.01,56.02,55.50,21.18；ci-msm/z405[m+1]+；hrmsm/z405.1695(m+h)+,c25h25o5的計(jì)算值405.1702。14.e-1-[3-羥基-5-芐氧基苯基]-2-[3-甲氧基-4-芐氧基苯基]乙烯(14)的制備在0℃在n2下，向二苯乙烯11(0.04g，0.083mmol)在混合溶劑(meoh/thf/h2o，3/3/3ml)的溶液中加入naoh(0.02g，0.35mmol)。將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝夭⑶覕嚢?小時(shí)。用0.1mhcl(5ml)將溶液酸化并且使用乙酸乙酯(3x20ml)萃取。用20％氯化鈉水溶液(10ml)洗滌合并的有機(jī)相，用硫酸鈉干燥和真空蒸發(fā)。使用npscc(己烷/乙酸乙酯的流動(dòng)相)純化產(chǎn)物，然后重結(jié)晶得到作為無(wú)色固體的14(0.016g，44.5％)；mp114-115℃；c29h26o41hnmr(400mhz,甲醇-d4)δ7.45-7.28(m,10h),7.06(d,j＝2hz,1h),7.00(d,j＝16hz,1h),6.98(dd,j＝8,2hz,1h),6.87(d,j＝8hz,1h),6.86(d,j＝16hz,1h),6.71(t,j＝2.0hz,1h),6.59(t,j＝2hz,1h),6.38(t,j＝2hz,1h),5.18(s,2h),5.07(s,2h),3.95(s,3h)；13cnmr(100mhz,甲醇-d4)δ160.29,156.78,149.76,148.19,139.92,136.98,136.84,130.65,129.20,128.61(2c),128.57(2c),128.02,127.88,127.49(2c),127.26(2c),126.54,119.94,113.96,109.45,105.97,105.69,101.54,71.02,70.01,56.03；ci-ms:461(m+na)+,439(m+1)+；hrmsm/z439.1908(m+h)+,c29h27o4的計(jì)算值439.1909。15.e-1-[3-羥基-5-芐氧基苯基]-2-[3-芐氧基-4-甲氧基苯基]乙烯(15)的制備如對(duì)化合物14所述的對(duì)12進(jìn)行堿性水解得到作為無(wú)色固體的標(biāo)題化合物；mp117-119℃；c29h26o41hnmr(400mhz,甲醇-d4)δ7.49-7.30(m,10h),7.07(d,j＝2.0hz,1h),7.06(dd,j＝8.4,2.0hz,1h),6.96(d,j＝16.0hz,1h),6.87(d,j＝8.0hz,1h),6.79(d,j＝16.4hz,1h),6.99(t,j＝1.6hz,1h),6.57(t,j＝2.0hz,1h),6.38(t,j＝2.4hz,1h),5.19(s,2h),5.07(s,2h),3.90(s,3h)。13cnmr(100mhz,甲醇-d4)δ160.20,158.30,149.68,148.25,139.70,137.41,137.31,130.62,128.16,128.07(2c),128.05(2c),127.52,127.41(3c),127.15(2c),126.62,120.35,111.95(2c),105.67,104.09,101.11,70.88,69.56,55.10；ci-ms:m/z461(m+na)+,439(m+1)+；hrmsm/z439.1907(m+h)+,c29h27o4的計(jì)算值439.1909。16.e-1-[3-羥基-5-甲氧基苯基)-2-[3-甲氧基-4-芐氧基苯基]乙烯(16)的制備如對(duì)化合物14所述的對(duì)13進(jìn)行堿性水解得到作為淡黃色固體的標(biāo)題化合物；mp110-112℃；c23h22o41hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.45-7.28(m,5h),7.07(d,j＝2hz,1h),7.00(d,j＝16hz,1h),6.98(dd,j＝8,2hz,1h),6.87(d,j＝17hz,1h),6.85(d,j＝8hz,1h),6.62(t,j＝2hz,1h),6.57(t,j＝2hz,1h),6.31(t,j＝2hz,1h),5.17(s,2h),3.94(s,3h),3.81(s,3h)；13cnmr(100mhz,cdcl3)δ161.08,156.86,149.73,148.16,139.85,136.96,130.69,129.11,128.57(2c),127.90,127.29(2c),126.61,119.95,113.97,109.47,105.72,104.73,100.72,71.03,56.03,55.36；ci-ms,m/z384(m+na)+,363(m+1)+；hrmsm/z363.1592(m+h)+,c23h23o4的計(jì)算值363.1596。17.e-1-[3-(3-甲基-2-丁烯氧基)-5-芐氧基苯基]-2-[3-甲氧基-4-芐氧基苯基]乙烯(17)的制備在0℃在n2下，向nah(60％分散于礦物油中，0.0051g，0.213mmol)的無(wú)水dmf(5ml)懸浮液中逐滴加入二苯乙烯14(0.04g，0.091mmol)的dmf(3ml)溶液，然后逐滴加入3,3-二甲基烯丙基溴(0.011ml，0.091mmol)2。將該混合物在室溫下攪拌2-3小時(shí)，然后用冷水(5ml)冷激，用冷的0.1mhcl(5ml)酸化并且使用二乙醚(3x10ml)萃取。用水(2x10ml)洗滌合并的有機(jī)萃取液并且減壓干燥。使用npscc(己烷/乙酸乙酯作為流動(dòng)相)對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行純化得到作為淡黃色油狀物的17(0.02g，43.3％)；c34h34o41hnmr(400mhz,cdc13)δ7.46-7.28(m,10h),7.07(d,j＝2hz,1h),7.01(d,j＝16hz,1h),6.96(d,j＝2hz,1h),6.90(d,j＝16hz,1h),6.87(d,j＝8hz,1h),6.73(t,j＝2hz,1h),6.68(t,j＝2hz,1h),6.48(t,j＝2hz,1h),5.52(m,1h),5.17(s,2h),5.07(s,2h),4.52(d,j＝7hz,2h),3.95(s,3h),1.80(d,j＝1hz,3h),1.76(d,j＝1hz,3h)；13cnmr(100mhz,cdcl3)δ160.21,160.12,149.78,148.14,139.49,138.35,137.03,136.94,130.76,128.94,128.59(2c),128.56(2c),127.94,127.86,127.54(2c),127.24(2c),126.97,119.87,119.53,113.98,109.43,105.38,105.32,101.14,71.01,70.09,64.84,56.03,25.85,18.22；ci-ms:m/z529(m+na)+,507(m+1)+；hrmsm/z507.2528(m+h)+,c34h35o4的計(jì)算值507.2535。18.e-l-[3-(3-甲基-2-丁烯氧基)-5-芐氧基苯基]-2-[3-芐氧基-4-甲氧基苯基]乙烯(18)的制備如對(duì)化合物17所述的對(duì)15進(jìn)行異戊烯化得到作為灰白色固體的標(biāo)題化合物；mp88-90℃；c34h34o41hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.49-7.32(m,10h),7.08(d,j＝2hz,1h),7.06(dd,j＝8,2hz,1h),6.97(d,j＝16hz,1h),6.89(d,j＝8hz,1h),6.82(d,j＝16hz,1h),6.71(t,j＝2hz,1h),6.66(t,5j＝2hz,1h),6.47(t,j＝2hz,1h),5.53(m,1h),5.20(s,2h),5.07(s,2h),4.52(d,j＝6hz,2h),3.91(s,3h),1.80(d,j＝1hz,3h),1.75(d,j＝1hz,3h)；13cnmr(100mhz,cdcl3)δ161.04,160.95,150.51,149.11,140.24,139.03,137.81,137.67,130.91,129.57,129.27(4c),128.66,128.58,128.22(2c),128.05(2c),127.50,121.10,120.20,112.48,112.40,105.95,105.86,101.60,71.55,70.47,65.18,56.36,026.00,18.33；ci-ms:m/z529(m+na)+,507(m+1)+；hrmsm/z507.2530(m+h)+,c34h35o4的計(jì)算值507.2535。19.e-1-[3-(3-甲基-2-丁烯氧基)-5-甲氧基苯基]-2-[3-甲氧基-4-芐氧基苯基]乙烯(19)的制備如對(duì)化合物17所述的對(duì)16進(jìn)行異戊烯化得到作為灰白色晶體的標(biāo)題化合物；mp66-69℃；c28h30ο41hnmr(400mhz,cdcl3)57.45-7.28(m,5h),7.08(d,j＝2hz,1h),7.02(d,j＝16hz,1h),6.98(d,j＝2hz,01h),6.90(d,j＝16hz,1h),6.87(d,j＝8hz,1h),6.67(t,j＝2hz,1h),6.64(t,j＝2hz,1h),6.40(t,j＝2hz,1h),5.53(m,1h),5.17(s,2h),4.53(d,j＝7hz,2h),3.96(s,3h),3.81(s,3h),1.81(d,j＝1hz,3h),1.76(d,j＝1hz,3h)；13cnmr(100mhz,cdcl3)δ160.91,160.23,149.76,148.14,139.46,138.35,137.04,130.78,128.90,128.56(2c),127.87,127.25(2c),127.02,119.86,119.56,113.98,109.44,5104.96,104.49,100.37,71.02,64.82,56.04,55.36,25.86,18.22；ci-ms:m/z453(m+na)+；hrmsm/z453.2036(m+na)+,c28h30o4na的計(jì)算值453.2042。20.(e)-3-(3-甲基-2-丁烯氧基)-4',5-二羥基-3'-甲氧基二苯乙烯(20，相當(dāng)于usyds2)的制備向17(0.02g，0.035mmol)的無(wú)水乙醇(8ml)溶液中加入1,4-環(huán)己二烯(3ml，0.030mmol)和pd-c(10％，0.002g)。在n2下攪拌該混合物并且在80℃下回流4小時(shí)。將溶液過(guò)濾并且在減壓下干燥得到油狀殘留物，將其通過(guò)高效液相色譜法(hplc)進(jìn)行純化得到作為淡黃色油狀物的20；c20h22o41hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.02(d,j＝2hz,1h),7.00(d,j＝16hz,1h),6.99(d,j＝2hz,1h),6.91(dd,j＝8,1hz,1h),6.85(d,j＝16hz,1h),6.64(t,j＝2hz,1h),6.56(t,j＝2hz,1h),6.33(t,j＝2hz,1h),5.53(m,1h),4.52(d,j＝7hz,2h),3.95(s,3h),1.82(d,j＝1hz,3h),1.76(d,j＝1hz,3h)；13cnmr(100mhz,cdcl3)δ160.38,156.70,146.67,145.69,139.87,138.37,129.73,129.29,126.15,120.63,119.49,114.54,108.24,105.58,105.38,101.29,64.85,55.92,25.85,18.22；ci-ms:m/z325(m-l)-；hrmsm/z327.1588(m+h)+,c20h23o4的計(jì)算值327.1596。21.3-(3-甲基-2-丁烯氧基)-4',5-二羥基-3'-甲氧基二氫二苯乙烯(21)的制備在脫除化合物20上的芐基的過(guò)程中，通過(guò)氫化橋連c＝c獲得標(biāo)題化合物。得到的標(biāo)題化合物為淺黃色油狀物；c20h24o41hnmr(400mhz,cdcl3)δ6.84(d,j＝8hz,1h),6.69(dd,j＝8,2hz,1h),6.62(d,j＝2hz,1h),6.34(t,j＝2hz,1h),6.26(t,j＝2.0hz,1h),6.24(t,j＝2hz,1h),),5.46(m,lh),5.46(s,1h),4.68(s,1h),4.53(d,j＝7hz,2h),3.84(s,3h),2.85(m,4h),1.80(d,j-0.4hz,3h),1.73(d,j＝0.5hz,3h)；13cnmr(100mhz,cdcl3)δ160.11,156.44,146.22,144.46,143.73,138.23,133.61,120.95,119.55,114.15,111.10,107.89,107.58,99.62,64.72,55.84,38.29,37.23,25.84,18.18；ci-ms:m/z351(m+na)+；hrmsm/z351.1566(m+na)+,c20h24o4na的計(jì)算值351.1572。22.(e)-3-(3-甲基-2-丁烯氧基)-3’,5-二羥基-4’-甲氧基二苯乙烯(22)的制備如對(duì)化合物20所述的脫除18的芐基得到作為淺黃色油狀物的標(biāo)題化合物；c20h22o41nmr(400mhz,cdc13)δ7.13(d,j＝2hz,1h),6.98(d,j＝16hz,1h),6.97(dd,j＝8,2hz,1h),6.86(d,j＝8hz,1h),6.86(d,j＝16hz,1h),6.64(t,j＝2hz,1h),6.57(t,j＝2hz,1h),6.33(t,j＝2hz,1h),5.60(s,lh),5.52(m,1h),4.77(s,1h),4.52(d,j＝9hz,2h),3.91(s,3h),1.82(d,j＝1hz,3h),1.76(d,j＝1hz,3h)；13cnmr(100mhz,cdc13)δ160.37,156.69,146.51,145.75,139.83,138.36,130.87,128.92,126.78,119.51,119.40,111.84,110.62,105.66,105.48,101.33,65.18,56.36,26.00,18.33；ci-ms:m/z349.1408(m+na)+,c20h22o4na的計(jì)算值349.1416。23.3-(3-甲基-2-丁烯氧基)-3',5-二羥基-4'-甲氧基二氫二苯乙烯(23)的制備在脫除化合物18上的芐基的過(guò)程中，通過(guò)氫化側(cè)鏈上的雙鍵獲得標(biāo)題化合物。所獲得的標(biāo)題化合物為淺黃色油狀物；c20h24o41hnmr(400mhz,cdcl3)δ6.79(d,j＝2hz,1h),6.77(d,j＝4hz,1h),6.66(dd,j＝8,2hz,1h),6.35(t,j＝2hz,1h),6.27(m,1h),5.56(s,1h),5.50(m,1h),4.74(s,1h),4.46(d,j＝7hz,2h),3.88(s,3h),2.80(m,4h),1.80(d,j＝1hz,3h),1.74(d,j＝1hz,3h)；13cnmr(100mhz,cdc13)δ160.11,156.42,145.41,144.80,144.51,138.18,135.07,119.73,119.59,114.59,110.55,107.81,107.49,99.64,64.73,55.00,38.05,36.89,25.83,18.18；ci-ms:m/z351(m+na)+；hrmsm/z351.1566(m+na)+,c20h24o4na的計(jì)算值351.1572。24.e-l-[2-(3-甲基-2-丁烯基)-5-羥基-3-芐氧基苯基]-2-[3-甲氧基-4-芐氧基苯基]乙烯(24)的制備向17(0.024g，0.061mmol)的甲苯(30ml)溶液中加入100-200目florisil(0.24g，10x)并且在110℃在n2下加熱4小時(shí)。將反應(yīng)混合物過(guò)濾，真空蒸發(fā)并且使用npscc(己烷/乙酸乙酯作為流動(dòng)相)對(duì)紅棕色殘留物進(jìn)行純化得到微褐色固體(0.014g，58.3％)。在己烷/乙酸乙酯(3:1)混合物中對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行重結(jié)晶得到作為灰白色固體的24；mp145-150℃；c34h34o41hnmr(400mhz,cdc13)δ7.46-7.28(m,10h),7.20(d,j＝16hz,1h),7.06(d,j＝2hz,1h),6.97(dd,j＝8,2hz,1h),6.88(d,j＝16hz,1h),6.87(d,j＝8hz,1h),6.68(d,j＝2hz,1h),6.40(d,j＝2hz,1h),5.18(s,2h),5.17(m,1h),5.05(s,2h),4.69(s,1h),3.94(s,3h),3.48(d,j＝7hz,2h),1.73(d,j＝1hz,3h),1.67(d,j＝1hz,3h)；13cnmr(100mhz,cdcl3)δ157.60,154.27,149.76,148.08,138.31,137.14,137.04,131.18,130.59,130.35,128.56(2c),128.49(2c),127.86,127.78,127.23(2c),127.21(2c),124.74,123.63,121.13,119.85,113.99,109.47,104.31,99.53,71.03,70.29,55.98,25.77,24.69,18.01。25.e-1-[2-(3-甲基-2-丁烯基)-5-羥基-3-甲氧基苯基]-2-[3-甲氧基-4-芐氧基苯基]乙烯(25)的制備如對(duì)化合物24所述的對(duì)19進(jìn)行重排得到粉紅色固體：mp161-162℃；c28h30o41hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.46-7.28(m,5h),7.19(d,j＝16hz,1h),7.06(d,j＝2hz,1h),6.97(dd,j＝8,2hz,1h),6.88(d,j＝16hz,1h),6.87(d,j＝8hz,1h),6.66(t,j＝2hz,1h),6.40(t,j＝2hz,1h),5.18(s,2h),5.13(m,1h),4.64(s,1h),3.94(s,3h),3.80(s,3h),3.42(d,j＝6hz,2h),1.80(d,j＝1hz,3h),1.68(d,j＝1hz,3h)；13cnmr(100mhz,cdcl3)δ158.56,154.35,149.76,148.07,138.11,137.04,131.21,130.63,130.24,128.56(2c),127.86,127.22(2c),124.73,123.61,120.78,119.84,113.99,109.42,103.88,98.21,71.03,55.97,55.68,25.77,24.46,17.98；ci-ms:m/z453(m+na)+,431(m+l)+；hrmsm/z431.2217(m+l)+,c28h31o4的計(jì)算值431.2222。26.(e)-2-(3-甲基-2-丁烯-1-基)-3,4',5-三羥基-3'-甲氧基二苯乙烯(26，相當(dāng)于usyds10)的制備向24(0.02g，0.035mmol)的純乙醇(6ml)的溶液中加入1,4-環(huán)己二烯(3ml)和pd-c(10％，0.0035mmol)。在n2下攪拌該混合物并且在80℃下加熱4小時(shí)。將溶液過(guò)濾并真空蒸發(fā)得到油狀殘留物，使用npscc(己烷/乙酸乙酯作為流動(dòng)相)對(duì)其進(jìn)行純化，然后用正相hplc(2:1己烷/異丙醇為流動(dòng)相)進(jìn)行純化得到淺黃色油狀的標(biāo)題化合物：數(shù)據(jù)類似于usyds10。27.(e)-2-(3-甲基-2-丁烯-1-基)-5,4'-二羥基-3',3-二甲氧基二苯乙烯(27，相當(dāng)于usyds1)的制備使用如對(duì)化合物25所述的程序制備標(biāo)題化合物，得到作為淺黃色油狀物的27；c21h24o41hnmr(400mhz,cdc13)δ7.17(d,j＝16hz,1h),7.01(dd,j＝12,2hz,1h),7.0(d,j＝2hz,1h),6.91(d,j＝8hz,1h),6.87(d,j＝16hz,1h),6.66(t,j＝2hz,1h),6.36(t,j＝2hz,1h),5.15(m,1h),4.64(s,1h),3.94(s,3h),3.80(s,3h),3.42(d,j＝7hz,2h),1.81(d,j＝1hz,3h),1.68(d,j＝1hz,3h)；13cnmr(100mhz,cdc13)δ158.57,154.37,146.68,145.60,138.18,130.61,130.44,130.27,124.28,123.67,120.73,120.58,114.55,108.26,103.88,98.18,55.88,55.71,25.79,24.48,17.98；ci-ms:m/z339(m-l)-；hrmsm/z363.1566(m+na)+,c21h24o4na的計(jì)算值363.1572。28.2-(3-甲基-2-丁烯-1-基)-5,4'-二羥基-3',3-二甲氧基二氫二苯乙烯(28)的制備在脫除化合物27上的芐基的過(guò)程中，通過(guò)氫化側(cè)鏈上的雙鍵獲得標(biāo)題化合物。所獲得的標(biāo)題化合物為淺黃色油狀物；c21h26o41hnmr(400mhz,cdc13)δ6.86(d,j＝8hz,1h),6.70(dd,j＝8,2hz,1h),6.64(d,j＝2hz,1h),6.30(d,j＝2hz,1h),6.24(d,j＝2hz,1h),5.48(s,1h),5.07(m,1h),4.67(s,1h),3.85(s,3h),3.78(s,3h),3.28(d,j-6hz,2h),2.82(m,4h),1.74(d,j＝1hz,3h),1.66(d,j＝1hz,3h)；,3cnmr(100mhz,cdc13)δ158.63,154.23,146.23,143.73,142.01,133.93,130.59,123.87,120.92,120.67,114.21,111.02,107.96,96.90,55.84,55.60,37.19,35.49,25.76,24.38,17.95；ci-ms:m/z365(m+na)+；hrmsm/z365.1723(m+na)+,c21h26o4na的計(jì)算值365.1729。異戊烯化多羥基二苯乙烯衍生物的生物學(xué)評(píng)價(jià)1.異戊烯化多羥基二苯乙烯衍生物的抗癌活性a)在美國(guó)國(guó)家癌癥研究所(nationalcancerinstitute,nci)中，針對(duì)60種細(xì)胞系，評(píng)價(jià)七種異戊烯化多羥基二苯乙烯衍生物(即，usyds1至usyds7)在一系列濃度(1x10-8-1xl0-4m)濃度下對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制，如下表1中所示。體外癌癥篩選的方法：nci所采用的一般方法將人類腫瘤細(xì)胞系生長(zhǎng)于含有5％牛胎血清和2mml-谷氨酰胺的rpmi1640培養(yǎng)基中。對(duì)于典型實(shí)驗(yàn)，取決于個(gè)體細(xì)胞系的倍增時(shí)間，以5000-40000細(xì)胞/孔范圍內(nèi)的接種密度，以100μl將細(xì)胞接種到96孔微量滴定板中。在細(xì)胞接種后，將該微量滴定板在37℃、5％co2、95％空氣和100％相對(duì)濕度的條件下溫育24小時(shí)，然后加入藥物。24h后，用三氯乙酸(tca)原位固定兩個(gè)板的各細(xì)胞系，以表示在加入藥物時(shí)各細(xì)胞系的細(xì)胞群的測(cè)量。以400倍于所需的最終最大測(cè)試濃度將實(shí)驗(yàn)藥物溶解于二甲基亞砜(dmso)中，并且在使用前冷凍保存。在藥物添加時(shí)，解凍等分試樣的冷凍濃縮物，并且用含有50μg/ml慶大霉素的完全培養(yǎng)基將其稀釋至兩倍于所需的最終最大測(cè)試濃度。將100μl等分試樣的藥物加入到已經(jīng)含有100μl培養(yǎng)基的適合微滴板孔中，得到所需的最終藥物濃度。在加入藥物后，將板在37℃、5％co2、95％空氣和100％相對(duì)濕度的條件下再溫育48h。對(duì)于貼壁細(xì)胞，通過(guò)添加冷的tca來(lái)終止實(shí)驗(yàn)。通過(guò)溫和添加50μl冷的50％(w/v)tca(最終濃度，10％tca)來(lái)原位固定細(xì)胞，并且在4℃下溫育60分鐘。棄去上清液，用自來(lái)水將板洗滌五次并風(fēng)干。向每個(gè)孔中加入0.4％(w/v)處于1％乙酸中的磺基羅丹明b(srb)溶液(100μl)，并且將板在室溫下溫育10分鐘。染色后，用1％的乙酸洗滌五次去除未結(jié)合的染料，并且將板風(fēng)干。隨后用10mmtrizma堿溶解結(jié)合的染劑，并且在自動(dòng)酶標(biāo)儀上在515nm的波長(zhǎng)下讀取吸光度。對(duì)于懸浮細(xì)胞，方法是一樣的，除了實(shí)驗(yàn)是通過(guò)溫和地添加50μl80％的tca(最終濃度，16％tca)而將沉降的細(xì)胞固定在孔的底部來(lái)終止的，并在在自動(dòng)酶標(biāo)儀上在515nm的波長(zhǎng)下讀取吸光度。計(jì)算usyds1-usyds7各自的gi50值(細(xì)胞生長(zhǎng)的50％抑制所需的濃度)、tgi值(細(xì)胞生長(zhǎng)的完全抑制所需的濃度)和lc50值(50％細(xì)胞致死率或死亡所需的濃度)，結(jié)果如以下表1-3所示。表1：pphosusyds1、usyds2、和usyds3對(duì)人類癌癥細(xì)胞生長(zhǎng)的影響表2：pphosusyds4至usyds6對(duì)人類癌癥細(xì)胞生長(zhǎng)的影響表3：pphosusyds7對(duì)人類癌癥細(xì)胞生長(zhǎng)的影響概括來(lái)說(shuō)，所有的異戊烯化多羥基二苯乙烯衍生物usyds1至usyds7都示出了對(duì)癌細(xì)胞生長(zhǎng)的結(jié)構(gòu)依賴性抑制。在一些細(xì)胞系中，生長(zhǎng)在納摩爾濃度下受到抑制。在抑制癌細(xì)胞生長(zhǎng)方面，usyds1表現(xiàn)出了最有效的活性，然后是usyds5，再是usyds2。測(cè)試的其它pphos化合物被證明是中度的抑制劑。圖3-圖9所示為對(duì)于上表中所示的各細(xì)胞系，化合物usyds1至usyds7對(duì)人類癌細(xì)胞生長(zhǎng)的劑量響應(yīng)曲線。值得注意的是，相對(duì)于抑制細(xì)胞生長(zhǎng)所需的濃度(gi50值)，這些pphos需要至少10倍的過(guò)量濃度才能導(dǎo)致細(xì)胞死亡(lc50值)或?qū)е聣乃馈＿@表明所述pphos可能會(huì)引起癌細(xì)胞經(jīng)受程序性細(xì)胞死亡(凋亡)或細(xì)胞周期停滯。b)美國(guó)國(guó)家癌癥研究所(nci)，針對(duì)所述細(xì)胞系在一系列濃度(1x10-8-1x10-4m)下，評(píng)價(jià)了兩種異戊烯化多羥基二苯乙烯衍生物(即usyds10和usyds14)對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制，如下表4a和4b所示。表4a：usyds10對(duì)癌細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制效果表4b：usyds14對(duì)癌生長(zhǎng)的抑制效果概括來(lái)說(shuō)，所有的異戊烯化多羥基二苯乙烯衍生物usyds10和usyds14都顯示出了對(duì)癌細(xì)胞生長(zhǎng)的結(jié)構(gòu)依賴性抑制。2.各種羥基二苯乙烯的計(jì)算的log分配系數(shù)(logp)值usyds1和usyds2以及已知的羥基二苯乙烯的計(jì)算的logp值如下表5所示。表5.各種羥基二苯乙烯的計(jì)算的logppphos化合物(例如usyds1和usyds2)的有效抑制可以依據(jù)它們?cè)黾拥氖杷詠?lái)說(shuō)明，通過(guò)它們的計(jì)算的log分配系數(shù)(logp)值來(lái)表示。usyds1和usyds2具有的logp值幾乎是羥基二苯乙烯白藜蘆醇的兩倍。logp對(duì)治療化合物的作用主要涉及組織穿透和分布。較高的logp值將使得化合物能夠更加容易地穿過(guò)細(xì)胞膜并進(jìn)入細(xì)胞。3.異戊烯化多羥基二苯乙烯衍生物對(duì)經(jīng)uv-輻射的人類皮膚細(xì)胞的影響在12-孔培養(yǎng)板中將正常成年人類角質(zhì)細(xì)胞(nhk)(invitrogen,vic,australia)培養(yǎng)于角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基epilife中直到達(dá)到亞匯合狀態(tài)，所述培養(yǎng)基補(bǔ)充鈣和人類角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)增補(bǔ)物(hkgs，含有0.2ngegf每ml，5mg胰島素每ml，5mg鐵傳遞蛋白每ml，0.18mg氫化可的松每ml和0.2％牛垂體提取物)(invitrogen,vic,australia)。在37℃下在具有5％二氧化碳的增濕培養(yǎng)箱中，在24-孔板中將細(xì)胞培養(yǎng)24h至密度為5x103細(xì)胞每ml/孔，并且根據(jù)以下所述的方法來(lái)測(cè)試：uv輻射的最佳劑量的測(cè)定使用pbs(磷酸鹽緩沖液)將如上所述的密度接種的細(xì)胞洗滌兩次，然后使用一系列公知為med(最小紅斑量，1med＝25.43/光強(qiáng)度)的uva和uvb劑量進(jìn)行輻射。將細(xì)胞更換生長(zhǎng)培養(yǎng)基并且在37℃于具有5％二氧化碳的增濕培養(yǎng)箱中溫育約24h。使用mts檢測(cè)((celltiteraqueous單溶液細(xì)胞增殖檢測(cè))(promega,vicaustralia)測(cè)量細(xì)胞活力。救援(rescue)檢測(cè)用pbs將細(xì)胞洗滌兩次，用pbs薄層進(jìn)行更換，然后用如所確定的最佳劑量的uva和uvb進(jìn)行輻射。在輻射后，立即地用含有一系列濃度的測(cè)試樣品的新鮮培養(yǎng)基對(duì)細(xì)胞進(jìn)行更換，并且在增濕的co2培養(yǎng)箱中在37℃下再溫育24小時(shí)。收集上清液并且保持在-80℃直到使用elisa試劑盒測(cè)量pge2和細(xì)胞因子(il1、il6、il8、il10和il12)的濃度。防護(hù)檢測(cè)用pbs將細(xì)胞洗滌兩次，用含有不同濃度的測(cè)試化合物的pbs薄層進(jìn)行更換，然后使用如上所確定的最佳劑量的uva和uvb進(jìn)行輻射。在輻射后，立即用新鮮培養(yǎng)基對(duì)細(xì)胞進(jìn)行更換，并且在增濕的co2培養(yǎng)箱中在37℃下再溫育24小時(shí)。收集上清液并且保持在-80℃直到使用elisa試劑盒測(cè)量pge2和細(xì)胞因子(il1、il6、il8、il10和il12)的濃度。同樣的對(duì)假處理的對(duì)照培養(yǎng)物進(jìn)行處理，但是不進(jìn)行uv輻射。二苯乙烯化合物包括usyds1、usyds2、usyds3、usyds5和usyds7并且蜂膠在0.1、1和10μμ或μg/ml進(jìn)行測(cè)試。測(cè)量最佳劑量的uv輻射的結(jié)果顯示在1med的uva和uvb輻射下，對(duì)細(xì)胞活力沒(méi)有顯著影響。因此，選擇該條件用于研究二苯乙烯和蜂膠提取物對(duì)救援測(cè)試中細(xì)胞因子的水平的影響。在對(duì)uv輻射的人類表皮角質(zhì)細(xì)胞(hek)中細(xì)胞因子生產(chǎn)的調(diào)節(jié)的初步研究中，觀察到usyds1和usyds2的混合物適度地抑制il-6、tgfα、g-csf和gm-csf的生產(chǎn)(2-3倍)。然而，發(fā)現(xiàn)該異戊烯化多羥基二苯乙烯衍生物顯著地增加uv輻射的細(xì)胞對(duì)il-8和il-1rα的生產(chǎn)(4-5倍)。已知il-8在免疫響應(yīng)的發(fā)病中發(fā)揮作用。另一方面，il-1rα(天然存在的細(xì)胞因子受體拮抗劑)在抑制炎癥過(guò)程中il-1的有毒效應(yīng)中發(fā)揮作用。因此，這些初步結(jié)果表明本發(fā)明的異戊烯化多羥基二苯乙烯衍生物可以是用于治療與免疫抑制和炎癥相關(guān)的病癥的優(yōu)良候選物。4.二苯乙烯和蜂膠提取物的抗氧化活性1,1-二苯基-2-苦肼基(dpph)清除活性檢測(cè)(l,l-二苯基-2-苦肼基)dpph檢測(cè)通常用于測(cè)試化合物或天然產(chǎn)物的提取物的自由基清除能力，其在517nm下測(cè)量dpph*自由基的減少。以其自由基形式的dpph*由于其奇電子而在517nm下顯示出強(qiáng)大的吸收。一旦被抗氧化劑或自由基清除劑減少，該吸收即消失并且通過(guò)清除自由基所產(chǎn)生的脫色與吸收的電子數(shù)量成化學(xué)計(jì)量關(guān)系(dpph*+ah→dpph:h+a*)。該dpph檢測(cè)是以如下所述的程序逐步進(jìn)行的。在室溫下在暗容器中將dpph(0.1mm)的甲醇溶液攪拌20min。在400-750nm之間掃描該溶液以獲得最大波長(zhǎng)(λmax，約510nm)。用甲醇調(diào)節(jié)dpph溶液的濃度以得到約1.0的最大吸光度。將不同濃度的測(cè)試樣品和標(biāo)準(zhǔn)抗氧化劑溶液(0.05ml)加入到比色杯中的0.95ml甲醇dpph溶液中。所述測(cè)試樣品的最終濃度為0.1、1、10、50、100和200μμ。劇烈振搖所述混合物并且在室溫下將其在暗處?kù)o置30min。在最大波長(zhǎng)(約510nm)下測(cè)量所得溶液的吸光度。吸光度的降低指示所述測(cè)試樣品的自由基清除效果。建立所述測(cè)試樣品的劑量響應(yīng)曲線以研究它們的ic50值(顯示uv吸光度減少50％的濃度)。結(jié)果除了usyds7顯示出了強(qiáng)烈的效果外，本研究中的pphos化合物顯示出中度至微弱的自由基清除效果。這些結(jié)果顯示在圖10中。5.二苯乙烯衍生物對(duì)煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(nad)-依賴性脫乙酰酶sirtuin-2(sirt1)的影響sirt1是sir2家族(iii類)的成員，其是nad-依賴性組蛋白脫乙酰酶。sirt1酶的脫乙酰基作用可以靶向許多底物，包括組蛋白、腫瘤抑制因子p53、叉頭轉(zhuǎn)錄因子(foxo)、過(guò)氧化物酶體增殖物-激活受體-γ(pparγ)和共-活化因子-1α(pga-1α)。10已經(jīng)證明sirt1參與許多病理生理過(guò)程的調(diào)控，如炎癥、細(xì)胞衰老、細(xì)胞凋亡/增殖、代謝和細(xì)胞周期調(diào)控(chung,yaoetal.2010)。因此，調(diào)節(jié)sirt1的活性可能是靶向控制許多疾病如癌癥、代謝綜合征、肥胖、神經(jīng)退行性疾病、骨骼肌功能障礙和與衰老相關(guān)的疾病的潛在治療11。sirt1檢測(cè)試劑盒(caymanchemical,annarbor,michigan,usa)提供了一種基于熒光的用于篩選sirt1抑制劑或活化劑的方法。該檢測(cè)是根據(jù)來(lái)自制造商的說(shuō)明進(jìn)行的。簡(jiǎn)單地說(shuō)，該檢測(cè)由兩步組成，該兩步都是在相同的板中進(jìn)行的。在第一步中，用人類重組體sirt1和其輔助底物nad+一起溫育包含p53序列arg-his-lys-lys(ε-乙?；?-amc(7-氨基-4-甲基香豆素)的底物。脫乙?；饔妹艋孜镆允乖诘诙街惺褂蔑@影劑的處理能夠釋放出熒光產(chǎn)物，使用熒光酶標(biāo)儀在350-360nm的激發(fā)波長(zhǎng)和450-165nm的發(fā)射波長(zhǎng)下分析該熒光產(chǎn)物。在三個(gè)濃度(1、10和100μμ)下檢測(cè)了二苯乙烯。數(shù)據(jù)表示兩個(gè)獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)，每個(gè)實(shí)驗(yàn)重復(fù)進(jìn)行三次。結(jié)果除了白藜蘆醇，所有的二苯乙烯都顯示出了對(duì)sirt1的濃度依賴性抑制，如圖11中的a和圖11中的b中所示。對(duì)sirt1活性的調(diào)節(jié)能夠使得對(duì)用于治療疾病包括癌癥、代謝綜合癥、肥胖、神經(jīng)退行性疾病、和衰老相關(guān)性疾病的治療劑的開發(fā)。6.usyds1、usyds2和莎草1型蜂膠的乙醇提取物的抗菌活性概要使用14種菌株和4種化合物進(jìn)行最小抑制濃度(mic)篩選。根據(jù)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化研究所(clinicalandlaboratorystandardsinstitute，clsi)指南的肉湯稀釋法測(cè)定mic。在含有64-0.06μg/ml的2倍稀釋系列的化合物的96-孔板上進(jìn)行mic篩選。使用來(lái)自適當(dāng)?shù)沫傊桨迳吓囵B(yǎng)菌在陽(yáng)離子調(diào)節(jié)的muellerhinton培養(yǎng)基肉湯中制備細(xì)菌接種，所述瓊脂平板每周都新制。在每個(gè)檢測(cè)板中都包括生長(zhǎng)對(duì)照和無(wú)菌對(duì)照。在環(huán)境空氣的培養(yǎng)箱中在35±2℃將所述檢測(cè)板溫育16-20小時(shí)(對(duì)于mrsa溫育24小時(shí))，觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)。mic篩選中的參照化合物左氧氟沙星的所有mic都處于clsis100-a20中描述的標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)。3個(gè)測(cè)試樣品的效力的順序?yàn)閡syds1>usyds2>乙醇蜂膠提取物。1.材料1.1.菌株用于mic篩選的細(xì)菌組1公知的抗藥性；2公知存在質(zhì)粒縮寫：tsa，胰酶大豆瓊脂；camhb，陽(yáng)離子調(diào)節(jié)的muellerhinton肉湯；htm，嗜血桿菌試驗(yàn)培養(yǎng)基；amp，氨芐西林；azt，氨曲南；cfx，頭孢西丁；cpd，頭孢泊肟；caz，頭孢他啶；chl，氯霉素；pip，哌拉西林；tet，四環(huán)素；imi，亞胺培南；van，萬(wàn)古霉素；pen，青霉素；ery，紅霉素；met，甲氧西林；oxa，苯唑西林；lev，左氧氟沙星；cli，克林霉素。1.2.培養(yǎng)基和試劑胰酶大豆瓊脂(bd211043)，陽(yáng)離子調(diào)節(jié)的muellerhinton肉湯(bd212322)，嗜血桿菌試驗(yàn)培養(yǎng)基(fluka51295)，氯化血紅素(fluka51280)，β-nad(fluka43410)，左氧氟沙星(sigma28266)，羊血(quadfive630-500)，溶解的馬血(quadfive205-500)，0.5mcfarland硫酸鋇標(biāo)準(zhǔn)，無(wú)菌0.85％nacl(w/v)。2.方法2.1制備細(xì)菌菌株a.在進(jìn)行mic篩選的兩天前從冷凍保存(-80℃)中將細(xì)菌菌株復(fù)活。劃線至適合瓊脂平板的表示上，并且將板在35±2℃于合適的氣氛中溫育20-24小時(shí)。鏈球菌屬：tsaii，5％co2腸球菌：tsaii，環(huán)境空氣流感嗜血桿菌：巧克力瓊脂，5％co2組中的其它菌株：tsa，環(huán)境空氣b.使用無(wú)菌環(huán)選擇5-10孔形態(tài)相似的孤立菌落并且重新劃線至新鮮的瓊脂平板上。如上所述將板在35±2℃于合適的氣氛中溫育20-24小時(shí)。2.2.制備化合物板在進(jìn)行mic篩選的當(dāng)天在100％dmso中制備化合物的儲(chǔ)備液，并且立即使用?；衔飪?chǔ)備濃度＝[(最高測(cè)試濃度)x103μl/3μl](例如，如果在測(cè)試板中所需的最高測(cè)試濃度為64μg/ml，則儲(chǔ)備濃度＝64x103/3＝2.2mg/ml)。除非另有說(shuō)明，否則將測(cè)試化合物的效力設(shè)為100％，而根據(jù)制造商的分析數(shù)據(jù)來(lái)計(jì)算參照化合物的效力。每種化合物制備11個(gè)2倍稀釋，然后轉(zhuǎn)移3μl至測(cè)試板的各孔中。dmso在mic篩選中的最終濃度為約3％。2.3.制備細(xì)菌接種物a.從4℃冰箱中取出培養(yǎng)基肉湯并使其濕熱至室溫。b.用無(wú)菌環(huán)從新鮮培養(yǎng)板中將菌落轉(zhuǎn)移至5ml鹽水中并且混合均勻。使用濁度計(jì)測(cè)量并調(diào)節(jié)其濁度至0.5mcfarland硫酸鋇標(biāo)準(zhǔn)?；蛘撸D(zhuǎn)移1-2個(gè)菌落至500μl鹽水中并且使用酶標(biāo)儀調(diào)節(jié)od625至約0.1。c.對(duì)革蘭氏陽(yáng)性和偏好性菌株以1:280且對(duì)于革蘭氏陰性菌株以1:400將細(xì)菌接種物稀釋至相應(yīng)的培養(yǎng)基肉湯(camhb，camhb+3％溶解的馬血，htm)中(例如35.6μl接種物至10ml的camhb或25μl接種物至10ml的camhb)。流感嗜血桿菌：htm鏈球菌屬：camhb+3％溶解的馬血組中的其它菌株：camhb2.4.制備檢測(cè)板a.除了孔b12、d12、f12和h12之外，各所述化合物板的每個(gè)孔中加入100μl的細(xì)菌接種物。b.向所述化合物板的孔b12、d12、f12和h12中加入100μl的培養(yǎng)基肉湯。c.將四個(gè)板堆疊在一起并蓋上無(wú)菌板蓋。在環(huán)境空氣培養(yǎng)箱中在35±2℃下溫育16-20小時(shí)(對(duì)于mrsa溫育24小時(shí))。2.5.進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)a.在鹽水溶液中將細(xì)菌接種物(0.5mcfarland)稀釋至10-1至10-7的系列(例如，100μl細(xì)胞接種物+900μl鹽水)。b.將100μl各稀釋液(10-4、10-5、10-6和10-7)散布在camha板上，每個(gè)稀釋液各三份，使液體滲入至瓊酯中10分鐘，反轉(zhuǎn)該瓊脂平板并在35±2℃下溫育24小時(shí)。2.6.記錄mic并計(jì)算cfua.打開化合物板，定位在化合物管理系統(tǒng)中，并且檢查檢測(cè)板的條形碼。b.將所述檢測(cè)板放置在mic讀數(shù)器的上部，并且調(diào)節(jié)放大倍率鏡以讀取各孔，記錄生長(zhǎng)狀態(tài)作為原始數(shù)據(jù)。(可選的)使用高速高分辨率掃描儀記錄各測(cè)試板的圖像。c.根據(jù)clsi指南確定mic折點(diǎn)。d.計(jì)數(shù)菌落并計(jì)算細(xì)菌接種物的cfu。3.結(jié)果3.1.mic匯總表使用14個(gè)細(xì)菌菌株(11個(gè)atcc菌株和3個(gè)臨床分離株)和4種化合物(usyds1、usyds2和蜂膠的乙醇提取物和參照化合物左氧氟沙星)進(jìn)行mic篩選。所述mic匯總于以下表6中。在本研究中獲得的參照化合物左氧氟沙星的mic值處于s100-a20[2]中描述的標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)。dmso在mic篩選中的最終濃度為約3％，并且不會(huì)抑制大多數(shù)微生物的生長(zhǎng)。表6.usyds1、usyds2和蜂膠的乙醇提取物針對(duì)14種細(xì)菌菌株的mic(μg/ml)。左氧氟沙星是參照化合物。4.討論異戊烯化四羥基二苯乙烯usyds1和usyds2顯示出中度的抗菌活性，其效力等級(jí)為usyds1>usyds2>蜂膠的乙醇提取物。7.usyds1、usyds2和usyds10化合物對(duì)激酶活性的影響以下為該研究中的激酶列表。實(shí)驗(yàn)材料·激酶-glo(plus)/adp-glo檢測(cè)緩沖液25mmhepes，10mmmgcl2，0.01％tritonx-100，100μg/mlbsa，2.5mmdtt，ph7.4。·caliper檢測(cè)緩沖液100mmhepes，10mmmgcl2，100μι/lbrij35(30％)，1mmdtt，ph7.4。檢測(cè)底物·mbp蛋白、未活化的mekl、rb蛋白均購(gòu)自signalchem。聚(glu:tyr)(4:l)購(gòu)自sigma。pip2購(gòu)自cayman。肽底物是在hdbiosciences,china合成的。atp購(gòu)自sigma。激酶gloplus試劑、激酶glo試劑和adpglo試劑均購(gòu)自promega。檢測(cè)工序—caliper形式在96-孔檢測(cè)板中混合激酶、底物、atp和化合物，總體積為50μl。在30℃下將所述檢測(cè)板溫育1小時(shí)。加入20μl的35mmedta停止反應(yīng)并且轉(zhuǎn)移26μl停止的反應(yīng)物至384-孔檢測(cè)板中。在酶標(biāo)儀上讀取該檢測(cè)板。檢測(cè)工序—adp-glo形式在384-孔檢測(cè)板中混合激酶、底物、atp和化合物，總體積為10μl。在30℃下將所述檢測(cè)板溫育1小時(shí)。向檢測(cè)板中加入10μl/孔的adpglo試劑，在27℃下溫育40min。向所述檢測(cè)板中加入20μl/孔的檢測(cè)試劑，在27℃下溫育30min。在酶標(biāo)儀上讀取該檢測(cè)板。檢測(cè)工序—激酶-glo(plus)形式在384-孔檢測(cè)板中混合激酶、底物、atp和化合物，總體積為10μl。在30℃下將所述檢測(cè)板溫育1小時(shí)。向反應(yīng)混合物中加入10μl/孔的激酶glo(plus)試劑，然后在27℃下溫育20min。在酶標(biāo)儀上讀取該檢測(cè)板?！ぴ跊](méi)有化合物和酶但含有atp和底物的條件下，產(chǎn)生了100％的效果。·在沒(méi)有化合物但含有atp、底物和酶的條件下，產(chǎn)生了0％的效果?！b202190為激酶p38β的參照化合物；十字孢堿(stsp)為其余激酶的參照化合物。結(jié)果被抑制多于60％的激酶匯總于下表中。有趣的是注意到所有這三個(gè)化合物都抑制激酶trka和pi3kδ和ρι3kγ。針對(duì)所述激酶，usyds1和usyds10似乎表現(xiàn)出類似的抑制活性。8.usyds1的急性毒性研究方法給單個(gè)的小鼠進(jìn)行400mg/kg的單一ip注射；第二只小鼠接受200mg/kgip的劑量且第三只小鼠接受100mg/kgip的單一劑量。觀察小鼠2周。如果它們失去多于20％的體重或者如果有其它顯著毒性的體征，就將它們殺死。如果所有3只小鼠都必須殺死，則以類似的方式進(jìn)行下一個(gè)3劑量水平(50、25、12.5mg/kg)。重復(fù)該過(guò)程直到找到耐受劑量。則該劑量標(biāo)示為最大耐受劑量(mtd)，并且將其用于計(jì)算抗腫瘤測(cè)試期間給予實(shí)驗(yàn)小鼠的材料的量。可以使小鼠自由采食喂食和水。將藥物以200mg/ml的濃度溶解于100％dmso中。結(jié)果組劑量(mg/kg/劑量)途徑死亡天數(shù)存活/總天數(shù)15注射體積1100ip無(wú)1/10.5μl/gm體重2200ip10/11μl/gm體重3400ip10/12μl/gm體重usyds1的mtd被確定為100mg/kg。這個(gè)濃度表示對(duì)哺乳動(dòng)物毒性低，并且用于進(jìn)一步的抗腫瘤測(cè)試。usyds1的中空纖維檢測(cè)(bec/c)正在進(jìn)行中。該中空纖維檢測(cè)是它們?cè)谛∈螽惙N移植模型中的評(píng)價(jià)之前，用于評(píng)價(jià)新穎推測(cè)的化療化合物針對(duì)一系列癌癥細(xì)胞系的初步快速篩選。與常規(guī)異種移植模型相比，中空纖維模型具有更短的評(píng)價(jià)時(shí)間和減少的化合物需求。該模型還使得在異種移植中能夠有效選擇癌癥細(xì)胞的類型。產(chǎn)生作為異戊烯化多羥基二苯乙烯衍生物的來(lái)源的樹脂的植物的化學(xué)型通過(guò)定量1h-nmr(q-nmr)分析從來(lái)自不同位置的鱗籽莎屬的植物中獲得的樹脂、樹膠和滲出物以分析異戊烯化多羥基二苯乙烯含量，其包括c-異戊烯化的和o-異戊烯化的、o-甲基化的和非o-甲基化的衍生物。來(lái)自樹脂的這些異戊烯化多羥基二苯乙烯的不同比例相應(yīng)地形成對(duì)植物分類的基礎(chǔ)。迄今已經(jīng)鑒定出鱗籽莎屬植物至少有3個(gè)不同的化學(xué)型，并且這些植物的每一種又顯示為若干亞化學(xué)型。類型1是最常見的植物，其含有大約相等比例的c-異戊烯化的和o-異戊烯化的衍生物。類型2植物僅含有c-異戊烯化的衍生物。而類型3植物不含有o-甲基化的異戊烯化多羥基二苯乙烯衍生物。本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠理解，在不脫離概括描述的本發(fā)明的范圍的條件下，可以對(duì)如具體實(shí)施方式中所示的發(fā)明進(jìn)行多種變化和/或改變。因此，本發(fā)明的實(shí)施方式在所有方面都應(yīng)被認(rèn)為是示例性的而不是限制性的。參考文獻(xiàn)(1)denmark,e.；regens,c.s.；tetsuya,k.j.ofam.chem.soc.2007,129,2774-2276.(2)ali,i.a.i；fathalla,wheteroatomchemistry2006,17,280-288.(3)krohn,k.；thiem,j.j.chem.soc,perkintrans.11977,1186-1190.(4)soerme,p.；arnoux,p.；kahl-knutsson,b.；leffler,h.；rini,j.m.；nilsson,u.j.j.am.chem.soc.2005,127,1737-1743.(5)andrus,m.b.；liu,j.；meredith,e.l.；nartey,e.tetrahedronlett.2003,44,4819-4822.(6)rao,m.l.n.；awasthi,d.k.；banerjee,d.tetrahedronlett.2010,51,1979-1981.(7)yang,p.-y.；zhou,y.-g.tetrahedronasymmetry2004,15,1145-1149.(8)rooney,j.m.journalofmacromolecularscience,parta1986,23,823-829.(9)batsomboon,p.；phakhodee,w.；ruchirawat,s.；ploypradith,p.j.org.chem.2009,74,4009-4012.(10)michan,s.；sinclaird.biochem.j.2007,404,1-13.(11)yamamotoh.；schoonjansk.；auwerxj.mol.endocrinol.2007,21,1745-1755。當(dāng)前第1頁(yè)12