本發(fā)明涉及藥物化學(xué)領(lǐng)域，特別是涉及一種環(huán)丙基取代噻吩環(huán)烷胺類化合物及其應(yīng)用。

背景技術(shù)：

流行性感冒(以下簡(jiǎn)稱流感)是一種嚴(yán)重危害人類健康的急性呼吸道傳染病，由流感病毒引發(fā)，具有高患病率、流行廣泛、傳播迅速的特點(diǎn)。歷史上曾發(fā)生過(guò)多次世界范圍的流感大流行，其中以1918年的西班牙流感流行最為嚴(yán)重，有2000多萬(wàn)人被流感奪去了生命。2009年，由墨西哥爆發(fā)的“豬流感”嚴(yán)重威脅全球人類的生命，近年來(lái)，h7h9、h5n6禽流感也不斷爆發(fā)，給人類生命及社會(huì)經(jīng)濟(jì)帶來(lái)極大的損失。

目前預(yù)防和治療流感的主要手段是m2離子通道蛋白抑制劑、神經(jīng)氨酸酶抑制劑和流感疫苗(johnbeigel,mikebray.antiviralresearch.2008,78,91–102)，研究中的抗流感病毒手段有反義寡核苷酸、核酶和脫氧核酶抑制流感病毒復(fù)制或rna表達(dá)等(christopherf.basler.infectiousdisorders-drugtargets.2007,7,282-293)。目前臨床上只有兩類抗流感病毒藥物可供選擇(erikdeclercq.natrevdrugdiscov.2006,5(12):1015-25)：m2離子通道蛋白抑制劑，包括金剛烷胺(amantadine)和金剛乙胺(rimantadine)；和神經(jīng)氨酸苷酶抑制劑，包括奧司他韋(oseltamivir)和扎那米韋(zanamivir)及帕拉米韋(peramivir)。

m2抑制劑類藥物以流感病毒基質(zhì)蛋白m2為作用靶點(diǎn)，通過(guò)阻斷質(zhì)子通道來(lái)抑制流感病毒的復(fù)制(lawrenceh.pinto,androberta.lamb.jbiolchem.2006,281(14):8997-9000)，抑制病毒的脫殼和核酸釋放，從而起到抑制病毒復(fù)制和繁殖的作用，進(jìn)而達(dá)到抗流感病毒的目的。目前市面上僅有的兩個(gè)藥物都是金剛烷胺衍生物，其中，金剛烷胺在1966年被fda批準(zhǔn)在美國(guó)上市(束梅英,等.中國(guó)醫(yī)藥情報(bào),2000,6,6:39-40)，用于治療a型流感病毒性感染。金剛乙胺由roche公司研發(fā)，1987年被批準(zhǔn)上市，金剛乙胺口服制劑的藥效比金剛烷胺強(qiáng)4～6倍。這兩個(gè)藥物的主要優(yōu)點(diǎn)是價(jià)格低廉、口服生物利用度高，可以明顯減輕a型流感的癥狀，且金剛乙胺在兒童中的耐受性較好。

但是，該類藥物存在以下明顯缺點(diǎn)(schnelljr,choujj.nature.2008，451(7178):591-5)：(1)對(duì)b型流感病毒無(wú)效；(2)存在明顯副作用,引起明顯的胃腸道不良反應(yīng)；產(chǎn)生中樞神經(jīng)毒副作用，主要表現(xiàn)為失眠、注意力分散和神經(jīng)質(zhì)；(3)治療過(guò)程中易產(chǎn)生耐藥株。盡管從這兩個(gè)單一骨架的藥物上市至今已過(guò)去了幾十年，但并沒有任何新型結(jié)構(gòu)的藥物出現(xiàn)，研究中的藥物絕大部分抑制劑仍以金剛烷作為骨架。此外，由于流感病毒不斷爆發(fā)，神經(jīng)氨酸酶抑制劑類藥物也逐步產(chǎn)生耐藥性。因此急需尋找新型結(jié)構(gòu)的抑制劑。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

基于此，本發(fā)明提供了一種具有抗流感病毒作用的環(huán)丙基取代噻吩環(huán)烷胺類化合物。

具體技術(shù)方案如下：

具有式ⅰ結(jié)構(gòu)的環(huán)丙基取代噻吩環(huán)烷胺類化合物或者其藥學(xué)上可接受的鹽或者其立體異構(gòu)體或者其前藥分子：

其中，r1、r2分別獨(dú)立選自：氫、氰基、磺酰基、芳基、鹵素取代的芳基、環(huán)烷基、烷基、鹵素取代的烷基、雜芳基、烷氧基、雜環(huán)烷基、雜環(huán)烷基酮、脒基、胍基、胍脒基、咪唑基、?；⒎蓟〈耐榛?、雜芳基取代的烷基、芳并雜環(huán)基、芳硫基、芳硫基烷基，并且r1、r2不同時(shí)為氫。

在其中一些實(shí)施例中，r1、r2分別獨(dú)立選自：氫、氰基、甲磺?；?、苯磺?；?、苯基、鹵素取代的苯基、c3-c8環(huán)烷基、c1-c8烷基、鹵素取代的c1-c8烷基、五元雜芳基、六元雜芳基、c1-c6烷氧基、五元雜環(huán)烷基、六元雜環(huán)烷基、五元雜環(huán)烷基酮、六元雜環(huán)烷基酮。

在其中一些實(shí)施例中，r1、r2分別獨(dú)立選自：氫、氰基、甲磺?；⒈交酋；?、苯基、氟苯基、環(huán)丙基、甲基、乙基、三氟甲基、2-噻吩基、3-噻吩基、呋喃基、甲氧基、吡咯基、吡咯基酮。

在其中一些實(shí)施例中，r1選自：氫、氰基、甲磺?；?、苯磺?；?、氟苯基、環(huán)丙基、三氟甲基、3-噻吩基、甲氧基、吡咯基、吡咯基酮；r2選自：氫、氰基、氟苯基、環(huán)丙基、甲基、乙基。

在其中一些實(shí)施例中，r1為氫，r2選自：氰基、氟苯基、環(huán)丙基、甲基、乙基；或者r2為氫，r1選自：氰基、甲磺?；?、苯磺酰基、氟苯基、環(huán)丙基、三氟甲基、3-噻吩基、甲氧基、吡咯基、吡咯基酮。

在其中一些實(shí)施例中，r1、r2分別獨(dú)立選自：氫、氰基、鹵素取代的苯基、c1-c8烷基、鹵素取代的c1-c8烷基。

在其中一些實(shí)施例中，r1、r2分別獨(dú)立選自：氫、氰基、三氟苯基、甲基、乙基、三氟甲基。

在其中一些實(shí)施例中，所述環(huán)丙基取代噻吩環(huán)烷胺類化合物選自：

4-環(huán)丙基-5-(((1r,2r,3r,5s)-2,6,6-三甲基二環(huán)[3.1.1]庚烷-3-胺基)甲基)噻吩-2-乙腈、

(1r,2r,3r,5s)-n-((3-環(huán)丙基-5-(甲磺?；?噻吩-2-基)甲基)-2,6,6-三甲基二環(huán)[3.1.1]庚烷-3-胺、

(1r,2r,3r,5s)-n-((3-環(huán)丙基-5-(苯磺?；?噻吩-2-基)甲基)-2,6,6-三甲基二環(huán)[3.1.1]庚烷-3-胺、

(1r,2r,3r,5s)-n-((3-環(huán)丙基-5-(4-氟苯基)噻吩-2-基)甲基)-2,6,6-三甲基二環(huán)[3.1.1]庚烷-3-胺、

(1r,2r,3r,5s)-n-((3，5-二環(huán)丙基噻吩-2-基)甲基)-2,6,6-三甲基二環(huán)[3.1.1]庚烷-3-胺、

(1r,2r,3r,5s)-n-((3-環(huán)丙基-5-三氟甲基)噻吩-2-基)甲基)-2,6,6-三甲基二環(huán)[3.1.1]庚烷-3-胺、

(1r,2r,3r,5s)-n-((4-[2,3’-聯(lián)噻吩]-5-基)甲基)-2,6,6-三甲基二環(huán)[3.1.1]庚烷-3-胺、

(1r,2r,3r,5s)-n-((3-環(huán)丙基-5-甲氧基噻吩-2-基)甲基)-2,6,6-三甲基二環(huán)[3.1.1]庚烷-3-胺、

(1r,2r,3r,5s)-n-((3-環(huán)丙基-5-(1-吡咯烷基)噻吩-2-基)甲基)-2,6,6-三甲基二環(huán)[3.1.1]庚烷-3-胺、

1-(4-環(huán)丙基-5-((((1r,2r,3r,5s)-2,6,6-三甲基二環(huán)[3.1.1]庚烷-3-胺基)甲基)噻吩-2-基)-吡咯烷-2-酮、

(1r,2r,3r,5s)-n-((3-環(huán)丙基-4-甲基噻吩-2-基)甲基)-2,6,6-三甲基二環(huán)[3.1.1]庚烷-3-胺、

(1r,2r,3r,5s)-n-((3-環(huán)丙基-4-乙基噻吩-2-基)甲基)-2,6,6-三甲基二環(huán)[3.1.1]庚烷-3-胺、

(1r,2r,3r,5s)-n-((3-環(huán)丙基-4-(4-氟苯基)噻吩-2-基)甲基)-2,6,6-三甲基二環(huán)[3.1.1]庚烷-3-胺、

1r,2r,3r,5s)-n-((3，4-二環(huán)丙基噻吩-2-基)甲基)-2,6,6-三甲基二環(huán)[3.1.1]庚烷-3-胺、

4-環(huán)丙基-5-(((1r,2r,3r,5s)-2,6,6-三甲基二環(huán)[3.1.1]庚烷-3-胺基)甲基)噻吩-3-乙腈。

本發(fā)明還提供了上述化合物的應(yīng)用。

具體技術(shù)方案如下：

上述的環(huán)丙基取代噻吩環(huán)烷胺類化合物或者其藥學(xué)上可接受的鹽或者其立體異構(gòu)體或者其前藥分子在制備預(yù)防和治療流感病毒感染的藥物中的應(yīng)用。

本發(fā)明還提供了一種預(yù)防和治療流感病毒感染的藥物。

具體技術(shù)方案如下：

一種預(yù)防和治療流感病毒感染的藥物，其活性成分包括有上述的環(huán)丙基取代噻吩環(huán)烷胺類化合物或者其藥學(xué)上可接受的鹽或者其立體異構(gòu)體或者其前藥分子。

本發(fā)明的發(fā)明人經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)研究獲得了一類環(huán)丙基取代噻吩環(huán)烷胺類化合物，此類新的化合物具有較強(qiáng)的抗流感病毒的作用，對(duì)金剛烷胺耐藥的流感病毒也具有較強(qiáng)的抑制作用。

以本發(fā)明的化合物作為藥物活性成分，與藥學(xué)上可接受的輔料或載體混合，可制備成各種劑型的藥物，能用于預(yù)防和治療流感病毒的感染，合適的劑形包括：口服劑、注射劑、直腸劑等，每日的劑量依賴于疾病的嚴(yán)重性、用藥方式和化合物本身。

具體實(shí)施方式

本發(fā)明所述的式i化合物，術(shù)語(yǔ)中“烷基”包括直鏈或支鏈烷基，如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、戊基、己基、庚基、辛基等；“環(huán)烷基”是指飽和的環(huán)烴基，如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基和環(huán)辛基等；“雜環(huán)烷基”是指含有一個(gè)或者多個(gè)選自n、o、s等雜原子作為環(huán)原子的飽和環(huán)烴基，如四氫吡咯基、四氫呋喃基、哌嗪基、嗎啡啉基等；“芳基”是指碳環(huán)芳烴，如苯基、萘基、蒽基或菲基等；“雜芳基”是指含有一個(gè)或者多個(gè)選自n、o、s等雜原子作為環(huán)原子的芳基，如吡咯基、吡唑基、咪唑基、三氮唑基、四氮唑基、呋喃基、噻吩基、噁唑基、吡啶基、噠嗪基、嘧啶基、吡嗪基等；“芳并雜環(huán)基”是指碳環(huán)芳烴(主要指苯環(huán)芳烴)并上含有一個(gè)或者多個(gè)選自n、o、s等雜原子作為環(huán)原子的飽和或不飽和雜環(huán)基，如吲哚基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、喹啉基、異喹啉基、苯并咪唑、苯并吡咯啉等。

所述藥學(xué)上可接受的鹽包括從適當(dāng)?shù)乃岬玫降柠}和從適當(dāng)?shù)膲A的得到的鹽。合適的酸的例子有鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、過(guò)氯酸、富馬酸、馬來(lái)酸、磷酸、乙醇酸、乳酸、水楊酸、琥珀酸、對(duì)甲苯酸磺酸、酒石酸、乙酸、檸檬酸、甲磺酸、甲酸、苯甲酸、丙二酸、苯磺酸或萘磺酸等。從適當(dāng)?shù)膲A得到的鹽包括堿金屬如鈉或鉀、堿土金屬如鎂或鈣、銨等得到的鹽。

下面通過(guò)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明。這些實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明，但不以任何方式限制本發(fā)明，在本發(fā)明的構(gòu)思前提下對(duì)本發(fā)明的簡(jiǎn)單改進(jìn)都屬于本發(fā)明要求保護(hù)的范圍。除非另有說(shuō)明，本發(fā)明中的百分?jǐn)?shù)是重量分?jǐn)?shù)。

以下所用中間體1(化合物1)的合成方法如下：

250ml圓底燒瓶中加入原料(1r,2r,3r,5s)-n-(2-(3-環(huán)丙基噻吩基)甲基)-2,6,6-三甲基二環(huán)[3.1.1]庚烷-3-胺(4.5g，15.54mmol)，(boc)2o(4.07g，18.65mmol)，三乙胺(7.78ml，55.92mmol)和二氯甲烷100ml，加畢，室溫反應(yīng)12h。加水100ml淬滅反應(yīng)，萃取，水相在用二氯甲烷洗滌兩次，合并有機(jī)相，經(jīng)飽和食鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾，減壓濃縮，殘留物經(jīng)硅膠柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯＝50:1)得到淡黃色液體(5.09g，84％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:7.01(d,j＝5.2hz,1h),6.53(d,j＝5.2hz,1h),4.67-4.52(m,2h),2.37-2.09(m,3h),1.94-1.92(m,1h),1.82-1.77(m,3h),1.53(s,9h),1.21(s,3h),1.08-0.87(m,7h),0.86-0.84(m,3h),0.64-0.62(m,2h)。

250ml圓底燒瓶中加入上步得到的化合物(5.09g，13mmol)，和干燥的dmf30ml，冰水浴冷卻。滴加nbs(2.43g，13.65mmol)的dmf溶液30ml。加畢，升至室溫反應(yīng)12h。加入100ml飽和的碳酸氫鈉溶液，攪拌30min。乙酸乙酯萃取，合并有機(jī)相，用水洗滌數(shù)次，并用飽和食鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾，減壓濃縮，殘留物經(jīng)硅膠柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯＝60:1)得到淡黃色液體，即為化合物1(4.37g，72％)。¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:6.64s,1h),4.61-4.45(m,2h),2.45(s,1h),2.30-2.10(m,2h),1.98-1.90(m,2h),1.80-1.74(m,2h),1.40(s,9h),1.20(s,3h),1.02(s,3h),0.91(d,j＝7.2hz,3h),0.87-0.81(m,4h),0.64-0.60(m,2h).lc/ms(esi)m/z:[m–boc+h]+calcdforc23h34brno2s,368.10；found,368.1。

所用中間體2(化合物2)的合成方法如下：

(1)100ml圓底燒瓶中加入3,4-二溴噻吩-2-甲醛(5.00g，19mmol)，環(huán)丙基硼酸鉀(2.88g，19mmol)，碳酸鉀(7.88g，57mmol)，pd(dppf)cl2·ch2cl2(310mg，0.38mmol)，甲苯30ml和蒸餾水10ml，氬氣保護(hù)，超聲除去溶劑中的空氣。密封，加熱到100℃反應(yīng)20h。加水淬滅反應(yīng)，乙酸乙酯萃取(80ml×3)，合并有機(jī)相，飽和食鹽水(100ml×3)洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾，濾液濃縮，殘留物經(jīng)硅膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯＝80:1)得到淡黃色液體1.70g，產(chǎn)率40％。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:10.29(s,1h),7.57(s,1h),1.93-1.86(m,1h),1.20-1.15(m,2h),0.87-0.82(m,2h)。

(2)500ml圓底燒瓶中加入蒎胺(10.00g，64.5mmol)，步驟1所得淡黃色液體產(chǎn)物(14.9g，64.5mmol)，1,2-二氯乙烷200ml和催化量的冰乙酸，室溫?cái)嚢杈鶆?。分批加入三乙酰氧基硼氫化鈉(27.3g，128.9mmol)。加畢，室溫反應(yīng)5h。用飽和碳酸氫鈉溶液淬滅反應(yīng)，二氯甲烷萃取，合并有機(jī)相，飽和食鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾，濾液濃縮，殘留物經(jīng)硅膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯＝60:1)得到黃色液體即為目標(biāo)化合物2。(16.3g，68％)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ:7.07(s,1h),4.03(s,2h),2.96-2.91(m,1h),2.46–2.29(m,2h),1.98-1.43(m,1h),1.80(t,j＝5.6hz,2h),1.67-1.57(m,2h),1.44(s,1h),1.21(s,3h),1.11(d,j＝7.2hz,3h),1.00–0.91(m,6h),0.69-0.65(m,2h).lc/ms(esi)m/z:[m+1]+calcdforc18h26brns,367.10；found,367.1。

實(shí)施例1：4-環(huán)丙基-5-(((1r,2r,3r,5s)-2,6,6-三甲基二環(huán)[3.1.1]庚烷-3-胺基)甲基)噻吩-2-乙腈鹽酸鹽的制備

50ml反應(yīng)封管中加入化合物1(1.4g，3mmol)，cucn(550mg，6mmol)和dmf25ml，氮?dú)獗Ｗo(hù)。加熱至150℃，電磁攪拌反應(yīng)過(guò)夜。冷卻至室溫，加水100ml淬滅反應(yīng)，用乙酸乙酯萃取(50ml×3)，合并有機(jī)相，依次用水和飽和食鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鎂干燥，過(guò)濾，減壓濃縮，殘留物經(jīng)硅膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯＝40:1-15:1)純化得到4-環(huán)丙基-5-(((1r,2r,3r,5s)-2,6,6-三甲基二環(huán)[3.1.1]庚烷-3-胺基)甲基)噻吩-2-乙腈無(wú)色油狀物462mg，產(chǎn)率37.2％。

50ml圓底燒瓶中加入上述步驟得到的4-環(huán)丙基-5-(((1r,2r,3r,5s)-2,6,6-三甲基二環(huán)[3.1.1]庚烷-3-胺基)甲基)噻吩-2-乙腈游離堿，加入乙酸乙酯溶解，然后滴加入飽和的氯化氫乙酸乙酯溶液成鹽，減壓蒸除溶劑，加入適量乙醚，過(guò)濾，濾餅經(jīng)真空干燥，得到4-環(huán)丙基-5-(((1r,2r,3r,5s)-2,6,6-三甲基二環(huán)[3.1.1]庚烷-3-胺基)甲基)噻吩-2-乙腈的鹽酸鹽化合物。

¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.79(s,1h),9.33(s,1h),7.60(s,1h),4.58-4.49(m,2h),3.47(s,1h),3.17(s,1h),2.45–2.35(m,1h),2.32–2.23(m,1h),2.18-2.12(m,2h),2.05–1.93(m,2h),1.80(t,j＝5.6hz,1h),1.38(d,j＝10.0hz,1h),1.21(s,3h),1.14(d,j＝7.2hz,3h),1.01(dd,j＝8.3,2.2hz,2h),0.91(s,3h),0.81-0.72(m,2h)；¹³cnmr(126mhz,dmso-d6)δ:147.4,136.9,135.6,114.6,109.1,56.2,47.5,40.9,40.8,38.9,32.3,31.1,27.7,23.7,21.1,9.9,9.4,9.2.hrms(m/z):[m+h]⁺calculatedforc19h27n2scl,315.1889；found,315.1888。

實(shí)施例2：(1r,2r,3r,5s)-n-((3-環(huán)丙基-5-(甲磺?；?噻吩-2-基)甲基)-2,6,6-三甲基二環(huán)[3.1.1]庚烷-3-胺鹽酸鹽的制備

50ml玻璃封管中加入化合物1(407mg,0.87mmol)，甲烷亞磺酸鈉，碘化亞酮(184mg，0.96mmol)，l-脯氨酸(111mg，0.96mmol)，碳酸鉀(133mg，0.96mmol)和dmso20ml。氮?dú)獗Ｗo(hù)下，80℃反應(yīng)12h。冷卻至室溫，加入100ml乙酸乙酯稀釋，用水洗滌，水層再用乙酸乙酯萃取，合并有機(jī)相，飽和食鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓濃縮，殘留物經(jīng)硅膠柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯＝30:1-6:1)得到白色泡沫狀固體(380mg，93％)。將該白色泡沫狀固體用飽和鹽酸乙酸乙酯溶液脫boc保護(hù)并成鹽，過(guò)濾并真空干燥得到白色固體：(1r,2r,3r,5s)-n-((3-環(huán)丙基-5-(甲磺?；?噻吩-2-基)甲基)-2,6,6-三甲基二環(huán)[3.1.1]庚烷-3-胺的鹽酸鹽。

¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.91(s,1h),9.41(s,1h),7.40(s,1h),4.56-4.46(m,2h),3.48(s,1h),2.41(t,j＝11.2hz,1h),2.30–2.25(m,1h),2.19-2.12(m,2h),2.05–1.97(m,2h),1.80(t,j＝5.6hz,1h),1.43(d,j＝10.0hz,1h),1.21(s,3h),1.15(d,j＝7.2hz,3h),1.02-0.99(m,2h),0.91(s,3h),0.82–0.73(m,2h).¹³cnmr(126mhz,dmso-d6)δ:147.50,142.58,135.09,130.88,56.33,47.47,41.10,40.86,38.90,32.28,31.20,27.74,23.67,21.09,10.05,9.34,9.16.hrms(m/z):[m+h]⁺calculatedforc19h30clno2s2,368.1712；found,368.1710。

實(shí)施例3：(1r,2r,3r,5s)-n-((3-環(huán)丙基-5-(苯磺酰基)噻吩-2-基)甲基)-2,6,6-三甲基二環(huán)[3.1.1]庚烷-3-胺鹽酸鹽的制備

制備方法同實(shí)施例2，不同在于將用實(shí)施例2中的甲烷亞磺酸鈉替換為苯基亞磺酸鈉。收率36％。

¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.74(s,1h),9.27(s,1h),7.98(d,j＝7.6hz2h),7.77–7.62(m,3h),7.48(s,1h),4.58–4.38(m,2h),3.45(s,1h),2.36(t,j＝11.2hz,1h),2.30–2.20(m,1h),2.16–2.04(m,2h),1.98-1.90(m,2h),1.77(t,j＝5.2hz,1h),1.36(d,j＝10.0hz,1h),1.19(s,3h),1.09(d,j＝7.2hz,3h),0.97(d,j＝8.4hz,2h),0.88(s,3h),0.82–0.74(m,2h).¹³cnmr(126mhz,dmso-d6)δ147.7,142.6,141.7,136.8,134.4,131.7,130.3,127.4,56.4,47.4,41.2,40.8,38.8,32.3,31.2,27.7,23.6,21.0,10.0,9.3,9.2.hrms(m/z):[m+h]⁺calculatedforc24h33clno2s2,430.1869；found,430.1867。

實(shí)施例4：(1r,2r,3r,5s)-n-((3-環(huán)丙基-5-(4-氟苯基)噻吩-2-基)甲基)-2,6,6-三甲基二環(huán)[3.1.1]庚烷-3-胺鹽酸鹽的制備

50ml封管中加入化合物1(500mg，1.07mmol)，對(duì)氟苯硼酸(449.1mg，3.21mmol)，碳酸鈉(567.1mg，5.35mmol)，pd(dppf)cl2·ch2cl2(43mg，0.053mmol)，乙二醇二甲醚8ml和蒸餾水4ml，氬氣保護(hù)，超聲除去溶劑中的空氣。密封，加熱到120℃反應(yīng)20h。加水淬滅反應(yīng)，乙酸乙酯萃取(50ml×3)，合并有機(jī)相，飽和食鹽水(100ml×3)洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾，濾液濃縮，殘留物經(jīng)硅膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯＝50:1)得到無(wú)色液體400mg，產(chǎn)率77％。將所得無(wú)色液體產(chǎn)物用飽和鹽酸乙酸乙酯溶液脫boc保護(hù)并成鹽，過(guò)濾并真空干燥得到目標(biāo)化合物(1r,2r,3r,5s)-n-((3-環(huán)丙基-5-(4-氟苯基)噻吩-2-基)甲基)-2,6,6-三甲基二環(huán)[3.1.1]庚烷-3-胺的鹽酸鹽。

¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.77(s,1h),9.20(s,1h),7.68(dd,j＝8.4,5.6hz,2h),7.26(t,j＝8.8hz,2h),7.08(s,1h),4.45-4.38(m,2h),3.42(s,1h),2.45–2.21(m,2h),2.17-2.09(m,1h),2.05-1.97(m,1h),1.92-1.89(m,1h),1.81–1.69(m,2h),1.41(d,j＝10.0hz,1h),1.20(s,3h),1.19(s,3h),1.12(t,j＝7.2,3h),0.99-0.97(m,2h),0.86-0.74(m,2h)。¹³cnmr(126mhz,dmso-d6)δ:163.3(d,j＝244.1hz),147.7,143.0,130.4,127.8(d,j＝8.1hz),126.1,122.0,116.5(d,j＝21.7hz),55.5,49.2,47.3,41.8,40.9,38.9,38.6,33.4,33.0,32.4,31.2,27.9,27.7,23.6,21.0,20.6,10.2,9.3,9.1.hrms(m/z):[m+h]⁺calculatedforc24h31fnscl,384.2156；found,384.2152。

實(shí)施例5：(1r,2r,3r,5s)-n-((3，5-二環(huán)丙基噻吩-2-基)甲基)-2,6,6-三甲基二環(huán)[3.1.1]庚烷-3-胺鹽酸鹽的制備

制備方法同實(shí)施例4，不同在于將實(shí)施例4中的對(duì)氟苯硼酸替換成環(huán)丙基硼酸。收率20％。

¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.33(s,1h),4.20(m,2h),3.70-3.81(m,2h),2.89(m,1h),2.34-2.26(m,3h),2.20(m,2h),2.04-2.01(m,4h),1.90(s,1h),1.77-1.72(m,4h),1.28(d,j＝8.0hz,1h),1.45(m,2h),1.19(s,3h),1.13-1.11(m,3h),0.91(s,3h).esi-ms：calculatedforc21h31ns，329.55；found，329.22。

實(shí)施例6：(1r,2r,3r,5s)-n-((3-環(huán)丙基-5-三氟甲基)噻吩-2-基)甲基)-2,6,6-三甲基二環(huán)[3.1.1]庚烷-3-胺鹽酸鹽的制備

制備方法同實(shí)施例4，不同在于將實(shí)施例4中的對(duì)氟苯硼酸替換成三氟硼酸鉀。收率21％

¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.68(s,1h),9.19(br,1h),4.58-4.26(m,3h),3.17(s,1h),2.41-2.28(m,2h),2.36-2.27(m,2h),2.15-2.00(m,2h),1.97(s,3h),1.79(s,1h),1.12(s,6h),1.10-0.96(m,2h),0.94-0.74(m,3h).esi-ms：calculatedforc19h26f3ns,357.48；found，357.15。

實(shí)施例7：(1r,2r,3r,5s)-n-((4-[2,3’-聯(lián)噻吩]-5-基)甲基)-2,6,6-三甲基二環(huán)[3.1.1]庚烷-3-胺鹽酸鹽的制備

制備方法同實(shí)施例4，不同在于將實(shí)施例4中的對(duì)氟苯硼酸替換成3-噻吩苯硼酸。收率45％

esi-ms：calculatedforc22h29ns2，371.17；found，371.6。

實(shí)施例8：(1r,2r,3r,5s)-n-((3-環(huán)丙基-5-甲氧基噻吩-2-基)甲基)-2,6,6-三甲基二環(huán)[3.1.1]庚烷-3-胺鹽酸鹽的制備

制備方法同實(shí)施例1，不同在于將實(shí)施例1中的cucn替換為甲醇。收率15％

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ5.60(s,1h),4.57(s,2h),3.79(s,3h),2.36-2.31(m,1h),2.21-2.18(m,2h),1.94-1.93(m,2h),1.85-1.77(m,4h),1.21(s,3h),1.07(s,3h),1.02-1.00(m,3h),0.87-0.56(m,3h),0.60-0.56(m,2h).esi-ms:calculatedforc19h29nos，319.51；found，319.20。

實(shí)施例9：(1r,2r,3r,5s)-n-((3-環(huán)丙基-5-(1-吡咯烷基)噻吩-2-基)甲基)-2,6,6-三甲基二環(huán)[3.1.1]庚烷-3-胺鹽酸鹽的制備

制備方法同實(shí)施例1，不同在于將實(shí)施例1中的cucn替換為吡咯烷。收率15％

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ5.30(s,1h),4.47-4,44(m,2h),3.18-3.15(m,4h),2.32-2.28(m,3h),1.98-1.88(m,6h),1.79-1.76(m,2h),1.58(s,2h),1.21(s,4h),1.06(s,3h),1.01-1.00(m,3h),0.84-0.81(m,2h),0.63-0.61(m,2h).esi-ms:calculatedforc22h34n2s，358.59；found，358.20。

實(shí)施例10：1-(4-環(huán)丙基-5-((((1r,2r,3r,5s)-2,6,6-三甲基二環(huán)[3.1.1]庚烷-3-胺基)甲基)噻吩-2-基)-吡咯烷-2-酮鹽酸鹽的制備

制備方法同實(shí)施例1，不同在于將實(shí)施例1中的cucn替換為2-吡咯烷酮。收率10％

¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.12(s,1h),4.45-3.96(m,5h),3.70-3.65(m,2h),2.50-2.30(m,1h),1.98-1.91(m,1h),1.77-1.70(m,1h),1.37(s,1h),1.19-1.11(m,3h),0.92-0.85(m,4h),0.53(s,2h).esi-ms:calculatedforc22h32n2os，372.57；found，372.22。

實(shí)施例11：(1r,2r,3r,5s)-n-((3-環(huán)丙基-4-甲基噻吩-2-基)甲基)-2,6,6-三甲基二環(huán)[3.1.1]庚烷-3-胺鹽酸鹽的制備

20ml封管中加入化合物2(500mg，1.36mmol)，甲基硼酸(244mg，4.07mmol)，碳酸鈉(722mg，6.8mmol)，pd(dppf)cl2·ch2cl2(116mg，0.14mmol)，10mldme/h2o(2:1)溶液，氬氣保護(hù)。油浴120℃反應(yīng)20h。冷卻至室溫，加入飽和nahco3溶液，二氯甲烷萃取。合并有機(jī)相，飽和食鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾，濾液濃縮，殘留物經(jīng)硅膠柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯＝30:1)得到游離堿，收率為約15％。用飽和鹽酸乙酸乙酯溶液成鹽，減壓除去溶劑并真空干燥，得到目標(biāo)產(chǎn)物(1r,2r,3r,5s)-n-((3-環(huán)丙基-4-甲基噻吩-2-基)甲基)-2,6,6-三甲基二環(huán)[3.1.1]庚烷-3-胺的鹽酸鹽。

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:6.72(s,1h),4.12–3.94(m,2h),2.98(dt,j＝10.0,5.5hz,1h),2.45–2.31(m,2h),2.25(s,3h),2.00-1.96(m,1h),1.85-1.80(m,2h),1.71-1.66(m,1h),1.61-1.44(m,1h),1.23(s,3h),1.13(d,j＝7.2hz,3h),0.98(s,3h),0.93–0.86(m,3h),0.62-0.58(m,2h).¹³cnmr(126mhz,dmso-d6)δ:142.9,139.1,130.5,122.5,56.0,47.5,41.9,40.9,38.9,32.2,31.2,27.7,23.7,21.2,15.6,8.6,5.8,5.7.hrms(m/z):[m+h]⁺calculatedforc19h30clns,304.2093；found,304.22091。

實(shí)施例12：(1r,2r,3r,5s)-n-((3-環(huán)丙基-4-乙基噻吩-2-基)甲基)-2,6,6-三甲基二環(huán)[3.1.1]庚烷-3-胺鹽酸鹽的制備

制備方法同實(shí)施例11，不同在于將實(shí)施例11中的甲基硼酸替換為乙基硼酸。收率10％。

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:6.75(s,1h),4.08–4.00(m,2h),3.01-2.96(m,1h),2.71–2.65(m,2h),2.46–2.33(m,2h),2.01-1.97(m,1h),1.88–1.81(m,2h),1.73-1.68(m,1h),1.62-1.55(m,1h),1.28(t,j＝7.2hz,3h),1.24(s,3h),1.14(d,j＝7.2hz,3h),1.00(s,3h),0.92-0.88(m,3h),0.63-0.59(m,2h).¹³cnmr(126mhz,dmso-d6)δ:145.7,142.4,130.6,121.3,56.1,47.5,42.1,40.9,38.9,32.2,31.3,27.7,23.7,22.5,21.2,14.3,8.5,5.8,5.8.hrms(m/z):[m+h]⁺calculatedforc20h32nscl,318.2250；found,318.2251。

實(shí)施例13：(1r,2r,3r,5s)-n-((3-環(huán)丙基-4-(4-氟苯基)噻吩-2-基)甲基)-2,6,6-三甲基二環(huán)[3.1.1]庚烷-3-胺鹽酸鹽的制備

制備方法同實(shí)施例11，不同在于將實(shí)施例11中的甲基硼酸替換為對(duì)氟苯硼酸。收率55％。

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:7.42(dd,j＝8.4,5.6hz,2h),7.08(d,j＝8.8hz,2h),7.01(s,1h),4.16–4.07(m,2h),3.07-3.02(m,1h),2.50–2.34(m,2h),2.02-1.98(m,1h),1.89-1.83(m,1h),1.76-1.71(m,2h),1.25(s,3h),1.17(d,j＝7.2hz,3h),1.00(s,3h),0.76-0.72(m,2h),0.30–0.26(m,2h).¹³cnmr(126mhz,dmso-d6)δ:161.8(d,j＝242.4hz),142.9,142.1,133.2(d,j＝2.9hz),132.5,130.8(d,j＝8.0hz),124.4(d,j＝21.1hz),115.4,56.4,47.5,42.2,40.9,38.9,32.2,31.4,27.8,23.8,21.3,9.0,7.7,7.6.hrms(m/z):[m+h]⁺calculatedforc24h31fnscl,384.2156；found,384.2152。

實(shí)施例14：(1r,2r,3r,5s)-n-((3，4-二環(huán)丙基噻吩-2-基)甲基)-2,6,6-三甲基二環(huán)[3.1.1]庚烷-3-胺鹽酸鹽的制備

制備方法同實(shí)施例11，不同在于將實(shí)施例11中的甲基硼酸替換為環(huán)丙基硼酸。收率36％。

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ6.50(s,1h),4.01-4.00(m,2h),2.97-2.95(m,1h),2.41-2.31(m,2h),1.99-1.95(m,2h),1.85-1.78(m,2h),1.69-1.65(m,2h),1.55(s,2h),1.22(s,3h),1.11-1.10(m,3h),0.92-0.85(m,8h),0.70-0.67(m,2h),0.59-0.55(m,2h).esi-ms:calculatedforc21h31ns，329.95；found，329.22

實(shí)施例15：4-環(huán)丙基-5-(((1r,2r,3r,5s)-2,6,6-三甲基二環(huán)[3.1.1]庚烷-3-胺基)甲基)噻吩-3-乙腈鹽酸鹽的制備

制備方法同實(shí)施例11，不同在于將實(shí)施例11中的甲基硼酸替換為氰基硼酸。收率23％。

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ:7.70(s,1h),4.03(s,2h),2.95-2.90(m,1h),2.45–2.32(m,2h),2.00-1.95(m,1h),1.82–1.73(m,3h),1.67-1.61(m,1h),1.22(s,3h),1.11(d,j＝7.2hz,3h),1.03–0.98(m,2h),0.95(s,3h),0.82–0.79(m,2h)；¹³cnmr(126mhz,dmso-d6)δ:144.4,139.1,132.9,115.4,111.3,56.5,47.5,41.1,40.9,38.9,32.2,31.3,27.7,23.7,21.2,8.7,6.4,6.3.hrms(m/z):[m+h]⁺calculatedforc19h27n2scl,315.1889；found,315.1888。

實(shí)施例16：抗流感病毒活性實(shí)驗(yàn)

材料：dmem培養(yǎng)基、pbs、胰酶、hanks液、10cm培養(yǎng)皿、移液器、96孔板、移液管、狗腎上皮細(xì)胞(mdck)細(xì)胞和甲型h1n1流感病毒a/wsn/33，h1n1)。

實(shí)驗(yàn)步驟：

1)稀釋流感病毒1:10000，用事先準(zhǔn)備好的病毒感染液稀釋流感病毒，每塊板以6ml為宜。

2)送試藥物溶解用10000轉(zhuǎn)/min離心1分鐘，把藥物離心至管底部，然后加入100μldmso，再用含1.5μg/mltpck的dmem培養(yǎng)液溶解至待測(cè)濃度，dmso終濃度為0.5％。

3)稀釋化合物，用病毒感染液稀釋化合物，以每孔100μl計(jì)算，每種濃度化合物須做2個(gè)復(fù)孔，用ose作陽(yáng)性對(duì)照，設(shè)為加化合物的對(duì)照孔，不加流感病毒的對(duì)照孔，從50μm開始3倍梯度稀釋。

4)洗板，把實(shí)驗(yàn)用的鋪有mdck細(xì)胞的96孔板培養(yǎng)上清吸掉，每孔加100ulhanks液，輕輕拍打，然后吸掉上清，再加入100μlhanks液。

5)吸掉hanks液，把稀釋的流感病毒以每孔50μl加到96孔板中，37℃孵箱培養(yǎng)120min。

6)每孔加入50μl稀釋好的化合物，在振蕩器上混勻5min,然后放到37℃孵箱培養(yǎng)48h。

7)在顯微鏡下觀察細(xì)胞病變，如果對(duì)照組細(xì)胞已全部死亡，表示流感病毒完全感染細(xì)胞，引起細(xì)胞病變。拍打細(xì)胞培養(yǎng)板，然后小心用吸液器吸掉培養(yǎng)基，加入1:10的cck8檢測(cè)試劑，每孔50μl。然后放到37℃孵箱培養(yǎng)1h和2h，分別測(cè)其a450吸收值。

用reed-muench法計(jì)算藥物對(duì)病毒的半數(shù)抑制濃度(ic50)。結(jié)果見表1。

表1化合物體外抗流感病毒的活性

以上所述實(shí)施例的各技術(shù)特征可以進(jìn)行任意的組合，為使描述簡(jiǎn)潔，未對(duì)上述實(shí)施例中的各個(gè)技術(shù)特征所有可能的組合都進(jìn)行描述，然而，只要這些技術(shù)特征的組合不存在矛盾，都應(yīng)當(dāng)認(rèn)為是本說(shuō)明書記載的范圍。

以上所述實(shí)施例僅表達(dá)了本發(fā)明的幾種實(shí)施方式，其描述較為具體和詳細(xì)，但并不能因此而理解為對(duì)發(fā)明專利范圍的限制。應(yīng)當(dāng)指出的是，對(duì)于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干變形和改進(jìn)，這些都屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。因此，本發(fā)明專利的保護(hù)范圍應(yīng)以所附權(quán)利要求為準(zhǔn)。