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一種加工肝素鈉粗品的方法與流程

文檔序號(hào):12777024閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種加工肝素鈉粗品的方法,其特征在于,包括:將新鮮豬肺或解凍的豬肺經(jīng)剝離去除氣管、脂肪后絞成糊狀料,得豬肺漿料,向豬肺漿料中加入0.5倍豬肺漿料重量的去離子水,再分別加入占豬肺漿料重量0.2%的防腐劑及細(xì)胞活化劑,在35℃間 歇攪拌反應(yīng)5小時(shí)后,得第一豬肺漿料液,向第一豬肺漿料液中加入2倍第一豬肺漿料液重量的去離子水,得第二豬肺漿料液,再加入占第二豬肺漿料液重量5%的氯化鈉,用氫氧化鈉溶液調(diào)pH至10,在30℃下間歇攪拌反應(yīng)5小時(shí),得豬肺堿解液;將得到的豬肺堿解液緩慢加熱至45℃,加氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至9,加入占豬肺堿解液重量0.2%的蛋白復(fù)合酶,再加入氯化鈉使豬肺堿解液中氯化鈉的濃度為15%,攪拌5小時(shí)后再緩緩升溫至65℃,保溫、攪拌反應(yīng)5小時(shí),得到豬肺酶解液;將得到的豬肺酶解液15分鐘快速升溫至80℃,保溫1.5h后加入占豬肺酶解液重量2%的蛋白沉淀劑,攪拌1小時(shí),靜止沉淀,用150目尼龍袋過(guò)濾,收集清液;將得到的清液降溫至80℃,采用管式離心機(jī)液液蛋白分離設(shè)備處理,得到肝素鈉純漿液;向得到的肝素鈉純漿液中加入2倍體積的去離子水并升溫至60℃,再加入8%的樹(shù)脂,用氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至9,攪拌6小時(shí)使樹(shù)脂充分吸附,靜置1小時(shí)后用100目尼龍袋過(guò)濾收集所吸附的樹(shù)脂;向得到的樹(shù)脂中加入5倍樹(shù)脂重量的去離子水及與樹(shù)脂等重量的2.5mol/L的氯化鈉溶液,調(diào)pH至10,攪拌洗脫樹(shù)脂,用100目尼龍袋過(guò)濾收集濾液作為為第一次濾液,向過(guò)濾出的樹(shù)脂中再加入3倍樹(shù)脂重量的去離子水及1倍樹(shù)脂重量的2.5mol/L的氯化鈉溶液,再洗脫一次,得到第二次濾液,合并兩次濾液;向得到的濾液中加入2倍體積的80%預(yù)冷乙醇,攪拌30分鐘,靜置12小時(shí)后吸除乙醇,收集下層沉淀物,濾干,用無(wú)水乙醇沖洗脫水,再用丙酮脫水,在70℃下真空干燥得到肝素鈉粗品;所述防腐劑為苯甲酸、苯甲酸鈉、山梨酸、山梨酸鉀、脫氫乙酸鈉中一種或任意幾種的混合物;所述細(xì)胞活化劑為十二烷基磺酸鈉、十二烷基硫酸鈉、十六烷基 三甲溴化銨、硫代硫酸鈉中一種或任意幾種的混合物;所述間歇攪拌為攪拌速度小于60轉(zhuǎn)/分,每小時(shí)攪拌2次,每次攪拌20分鐘,停止20分鐘;所述蛋白復(fù)合酶為胰蛋白酶、地衣芽孢桿菌堿性蛋白酶、枯草芽孢桿菌中性蛋白酶、木瓜蛋白酶中任意幾種的混合物;所述蛋白沉淀劑為硫酸銨、硫酸亞鐵、硫酸鋁、三氯化鐵、氯化鈣中的一種或幾種的混合物;所述樹(shù)脂是指強(qiáng)堿性陰離子交換樹(shù)脂。

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