本發(fā)明涉及一種加工肝素鈉領(lǐng)域，具體而言涉及一種加工肝素鈉粗品的方法。

背景技術(shù)：

肝素是一種天然抗凝血藥物，具有溶解血栓和阻止血液凝固的功能，也是世界上迄今為止已知的分子結(jié)構(gòu)最復(fù)雜的化合物。由于競(jìng)爭(zhēng)激烈，導(dǎo)致原料成本價(jià)位居高不下，而利用豬肺提取工藝由于傳統(tǒng)、落后的鹽解、沉淀技術(shù)使其純度無(wú)法提升，使其無(wú)法快速發(fā)展，也造成了大量的資源浪費(fèi)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種加工肝素鈉粗品的方法，本發(fā)明利用高速離心分離技術(shù)有效提取肝素鈉，從而大力提高生產(chǎn)效率，降低生產(chǎn)成本、提高產(chǎn)品品質(zhì)和獲得率的方法，有利于工業(yè)化生產(chǎn)。

本發(fā)明解決上述技術(shù)問(wèn)題的技術(shù)方案如下：一種肝素鈉粗品的提取方法，包括：將新鮮豬肺或解凍的豬肺經(jīng)剝離去除氣管、脂肪后絞成糊狀料，得豬肺漿料，向豬肺漿料中加入0.5倍豬肺漿料重量的去離子水，再分別加入占豬肺漿料重量0.2%的防腐劑及細(xì)胞活化劑，在35℃間歇攪拌反應(yīng)5小時(shí)后，得第一豬肺漿料液，向第一豬肺漿料液中加入2倍第一豬肺漿料液重量的去離子水，得第二豬肺漿料液，再加入占第二豬肺漿料液重量5%的氯化鈉，用氫氧化鈉溶液調(diào)pH至10，在30℃下間歇攪拌反應(yīng)5小時(shí)，得豬肺堿解液；將得到的豬肺堿解液緩慢加熱至45℃，加氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至9，加入占豬肺堿解液重量0.2%的蛋白復(fù)合酶，再加入氯化鈉使豬肺堿解液中氯化鈉的濃度為15%，攪拌5小時(shí)后再緩緩升溫至65℃，保溫、攪拌反應(yīng)5小時(shí)，得到豬肺酶解液；將得到的豬肺酶解液15分鐘快速升溫至80℃，保溫1.5h后加入占豬肺酶解液重量2%的蛋白沉淀劑，攪拌1小時(shí)，靜止沉淀，用150目尼龍袋過(guò)濾，收集清液；將得到的清液降溫至80℃，采用管式離心機(jī)液液蛋白分離設(shè)備處理，得到肝素鈉純漿液；向得到的肝素鈉純漿液中加入2倍體積的去離子水并升溫至60℃，再加入8%的樹(shù)脂，用氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至9，攪拌6小時(shí)使樹(shù)脂充分吸附，靜置1小時(shí)后用100目尼龍袋過(guò)濾收集所吸附的樹(shù)脂；向得到的樹(shù)脂中加入5倍樹(shù)脂重量的去離子水及與樹(shù)脂等重量的2.5mol/L的氯化鈉溶液，調(diào)pH至10，攪拌洗脫樹(shù)脂，用100目尼龍袋過(guò)濾收集濾液作為為第一次濾液，向過(guò)濾出的樹(shù)脂中再加入3倍樹(shù)脂重量的去離子水及1倍樹(shù)脂重量的2.5mol/L的氯化鈉溶液，再洗脫一次，得到第二次濾液，合并兩次濾液；向得到的濾液中加入2倍體積的80%預(yù)冷乙醇，攪拌30分鐘，靜置12小時(shí)后吸除乙醇，收集下層沉淀物，濾干，用無(wú)水乙醇沖洗脫水，再用丙酮脫水，在70℃下真空干燥得到肝素鈉粗品；所述防腐劑為苯甲酸、苯甲酸鈉、山梨酸、山梨酸鉀、脫氫乙酸鈉中一種或任意幾種的混合物；所述細(xì)胞活化劑為十二烷基磺酸鈉、十二烷基硫酸鈉、十六烷基三甲溴化銨、硫代硫酸鈉中一種或任意幾種的混合物；所述間歇攪拌為攪拌速度小于60轉(zhuǎn)/分，每小時(shí)攪拌2次，每次攪拌20分鐘，停止20分鐘；所述蛋白復(fù)合酶為胰蛋白酶、地衣芽孢桿菌堿性蛋白酶、枯草芽孢桿菌中性蛋白酶、木瓜蛋白酶中任意幾種的混合物；所述蛋白沉淀劑為硫酸銨、硫酸亞鐵、硫酸鋁、三氯化鐵、氯化鈣中的一種或幾種的混合物；所述樹(shù)脂是指強(qiáng)堿性陰離子交換樹(shù)脂。本發(fā)明方法在提取肝素鈉時(shí)，以細(xì)胞活化劑及酶解劑對(duì)豬肺原料進(jìn)行處理，使其細(xì)胞迅速降解、肝素從肺組織的肥大細(xì)胞中與纖維蛋白組織分離而獲得釋放，添加蛋白沉淀劑使其蛋白沉淀避免了強(qiáng)酸、強(qiáng)堿法除蛋白而損害肝素鈉活性，采用管式離心機(jī)技術(shù)，利用不同分子密度的沉降差異,有效分離去除大分子如：蛋白質(zhì)、脂類(lèi)、菌體、鞣質(zhì)等雜質(zhì)，解決了長(zhǎng)期以來(lái)肝素鈉與雜質(zhì)難以分離的困擾，降低了雜質(zhì)對(duì)樹(shù)脂吸附過(guò)程中的干擾，相對(duì)傳統(tǒng)工藝減少了樹(shù)脂用量，更便于后續(xù)樹(shù)脂的有效吸附、洗脫及有機(jī)溶劑沉淀、真空烘干的工藝處理，有效地提高了產(chǎn)品的質(zhì)量、產(chǎn)品效價(jià)和獲得率，同時(shí)，分離出的蛋白可作為化妝品或飼料的理想原料，分離出的氣管可作為軟骨素的生產(chǎn)原料，廢水可回收再利用，故無(wú)廢渣、廢水排放，有利于規(guī)?；a(chǎn)，社會(huì)、環(huán)保、經(jīng)濟(jì)效益顯著。

具體實(shí)施方式

1.一種加工肝素鈉粗品的方法，其特征在于，包括：將新鮮豬肺或解凍的豬肺經(jīng)剝離去除氣管、脂肪后絞成糊狀料，得豬肺漿料，向豬肺漿料中加入0.5倍豬肺漿料重量的去離子水，再分別加入占豬肺漿料重量0.2%的防腐劑及細(xì)胞活化劑，在35℃間歇攪拌反應(yīng)5小時(shí)后，得第一豬肺漿料液，向第一豬肺漿料液中加入2倍第一豬肺漿料液重量的去離子水，得第二豬肺漿料液，再加入占第二豬肺漿料液重量5%的氯化鈉，用氫氧化鈉溶液調(diào)pH至10，在30℃下間歇攪拌反應(yīng)5小時(shí)，得豬肺堿解液；將得到的豬肺堿解液緩慢加熱至45℃，加氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至9，加入占豬肺堿解液重量0.2%的蛋白復(fù)合酶，再加入氯化鈉使豬肺堿解液中氯化鈉的濃度為15%，攪拌5小時(shí)后再緩緩升溫至65℃，保溫、攪拌反應(yīng)5小時(shí)，得到豬肺酶解液；將得到的豬肺酶解液15分鐘快速升溫至80℃，保溫1.5h后加入占豬肺酶解液重量2%的蛋白沉淀劑，攪拌1小時(shí)，靜 止沉淀，用150目尼龍袋過(guò)濾，收集清液；將得到的清液降溫至80℃，采用管式離心機(jī)液液蛋白分離設(shè)備處理，得到肝素鈉純漿液；向得到的肝素鈉純漿液中加入2倍體積的去離子水并升溫至60℃，再加入8%的樹(shù)脂，用氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至9，攪拌6小時(shí)使樹(shù)脂充分吸附，靜置1小時(shí)后用100目尼龍袋過(guò)濾收集所吸附的樹(shù)脂；向得到的樹(shù)脂中加入5倍樹(shù)脂重量的去離子水及與樹(shù)脂等重量的2.5mol/L的氯化鈉溶液，調(diào)pH至10，攪拌洗脫樹(shù)脂，用100目尼龍袋過(guò)濾收集濾液作為為第一次濾液，向過(guò)濾出的樹(shù)脂中再加入3倍樹(shù)脂重量的去離子水及1倍樹(shù)脂重量的2.5mol/L的氯化鈉溶液，再洗脫一次，得到第二次濾液，合并兩次濾液；向得到的濾液中加入2倍體積的80%預(yù)冷乙醇，攪拌30分鐘，靜置12小時(shí)后吸除乙醇，收集下層沉淀物，濾干，用無(wú)水乙醇沖洗脫水，再用丙酮脫水，在70℃下真空干燥得到肝素鈉粗品；所述防腐劑為苯甲酸、苯甲酸鈉、山梨酸、山梨酸鉀、脫氫乙酸鈉中一種或任意幾種的混合物；所述細(xì)胞活化劑為十二烷基磺酸鈉、十二烷基硫酸鈉、十六烷基三甲溴化銨、硫代硫酸鈉中一種或任意幾種的混合物；所述間歇攪拌為攪拌速度小于60轉(zhuǎn)/分，每小時(shí)攪拌2次，每次攪拌20分鐘，停止20分鐘；所述蛋白復(fù)合酶為胰蛋白酶、地衣芽孢桿菌堿性蛋白酶、枯草芽孢桿菌中性蛋白酶、木瓜蛋白酶中任意幾種的混合物；所述蛋白沉淀劑為硫酸銨、硫酸亞鐵、硫酸鋁、三氯化鐵、氯化鈣中的一種或幾種的混合物；所述樹(shù)脂是指強(qiáng)堿性陰離子交換樹(shù)脂。

以上對(duì)本發(fā)明的原理和特征進(jìn)行描述，所舉實(shí)例只用于解釋本發(fā)明，并非用于限定本發(fā)明的范圍。