本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種海桐果實提取物的制備方法與用途。

背景技術(shù)：

海桐(學(xué)名：pittosporumtobira),海桐花屬。生長于我國廣東、海南、福建、浙江等沿海地區(qū)，為我國傳統(tǒng)中藥材。海桐的果實能入藥，能澀腸，對黃疸、腎炎均有一定療效，并有消炎消腫、止咳喘的功效。研究表明海桐果實含有三萜和類胡蘿卜素類化合物,并且含有大量軟脂酸和油酸。截止目前，①尚未見到有關(guān)海桐果實提取物的揮發(fā)性化學(xué)成分的分析研究報道；②也未見到有關(guān)海桐果實提取物的揮發(fā)性化學(xué)成分抗內(nèi)毒素作用的研究報道。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

為克服上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：

一種海桐果實提取物的制備方法，步驟如下：

(1)稱取海桐果實，將稱取的海桐果實與95％乙醇混合；

(2)高溫下回流提取、抽濾，收集提取液，并將濾渣提取3次，合并提取液；

(3)將步驟(2)中的提取液真空減壓濃縮并干燥至恒重，得到海桐果實提取物。

優(yōu)選地，所述步驟(1)中海桐果實與95％乙醇的重量比為1：3，此時混合均勻，重復(fù)。

優(yōu)選地，所述步驟(2)中回流溫度為80攝氏度，時間為3h，此溫度下反應(yīng)最充分，提取最多。

優(yōu)選地，所述步驟(3)海桐果實提取物有效成分為c15h24，名稱為1r,4s,7s,11r-2,2,4,8-四甲基三環(huán)[5.3.1.0(4,11)]-8-稀，分子量為204。

所述的海桐果實提取物為有效成份制備抗毒素的用途。

有益效果：本發(fā)明制備方法設(shè)計簡單合理，可以有效地提取得到海桐果實的主要有效成分，其化合物的分子式為c15h24，名稱為1r,4s,7s,11r-2,2,4,8-四甲基三環(huán)[5.3.1.0(4,11)]-8-稀，分子量為204。由其分子式可知，碳數(shù)為15，因此得知此化合物為倍半萜類，作為醫(yī)藥、食品和化妝品等重要原料中，有一半以上的化合物均為倍半萜類，倍半萜類化合物多具有較強的香氣和生物學(xué)活性，很多具有重要的生物學(xué)功能和生理活性，更是具有有抗菌、抗病毒、細胞素、免疫抑制、抗腫瘤、植物毒、昆蟲激素、昆蟲拒食劑等活性。

附圖說明

圖1為海桐果實提取物的揮發(fā)性化學(xué)成分gc-ms分析的總離子流圖；

圖2為細菌內(nèi)毒素標準曲線與加入稀釋10倍、50倍果實提取液后的曲線。

具體實施方式

一種海桐果實提取物的制備方法，步驟如下：

(1)稱取海桐果實，將稱取的海桐果實與95％乙醇混合；

(2)高溫下回流提取、抽濾，收集提取液，并將濾渣提取3次，合并提取液；

(3)將步驟(2)中的提取液真空減壓濃縮并干燥至恒重，得到海桐果實提取物。

將海桐的果實浸膏物用甲醇進行超聲，用氣相色譜-質(zhì)譜(gc-ms)聯(lián)用儀對它的上清液進行分析，得到了以下的分析結(jié)果。

gc-ms分析的總離子流圖如下：

①色譜條件如下：

色譜柱：db-5ms，30m*0.25mm*0.25um，載氣he1.0ml/min。柱溫：40度*3min---10度/min---100度---6度/min---300度*5min

進樣口：280度，分流：50:1

傳輸線：280度

ei源：250度

m/z：33-650

②海桐果實提取物的揮發(fā)性化學(xué)成分gc-ms分析的總離子流圖如圖1所示：

③海桐果實提取物的揮發(fā)性化學(xué)成分gc-ms分析數(shù)據(jù)及結(jié)果見表1、表2(該表包括了各個化合物成分的保留時間、峰面積(即相對百分含量)，與前面的圖1中各化合物是相吻合的、相一致的)。

表1海桐果實提取物的揮發(fā)性化學(xué)成分gc-ms分析數(shù)據(jù)

表2海桐果實提取物的揮發(fā)性化學(xué)成分gc-ms分析結(jié)果

從gc-ms的譜圖可知，在保留時間為40.85min時出現(xiàn)了最高峰，由此可知此峰對應(yīng)下的化合物為海桐果實提取物的主要成分，其化合物的分子式為c15h24，名稱為1r,4s,7s,11r-2,2,4,8-四甲基三環(huán)[5.3.1.0(4,11)]-8-稀，分子量為204。由其分子式可知，碳數(shù)為15，因此得知此化合物為倍半萜類。作為醫(yī)藥、食品和化妝品等重要原料中，有一半以上的化合物均為倍半萜類。倍半萜類化合物多具有較強的香氣和生物學(xué)活性，很多具有重要的生物學(xué)功能和生理活性，更是具有有抗菌、抗病毒、細胞素、免疫抑制、抗腫瘤、植物毒、昆蟲激素、昆蟲拒食劑等活性。由gc-ms分析結(jié)果可知，海桐果實提取物的抗毒素作用與其有效成分為倍半萜有關(guān)。

針對果實提取液開展初步的抗毒素(主要針對內(nèi)毒素脂多糖)的作用機制的初步研究：

在濃度為0.1eu/ml和0.8eu/ml的細菌內(nèi)毒素標準溶液中加入稀釋10倍和50倍過后的果實提取液，并在波長為545nm時測量它們的吸光度值，由此得到了以下相互比較的結(jié)果如圖2所示。

由比較結(jié)果可知，細菌內(nèi)毒素標準溶液在加入稀釋10倍與稀釋50倍的果實提取液后，吸光度值均有下降的趨勢，吸光度值的下降說明了溶液中細菌內(nèi)毒素的濃度下降，因此，我們可以得出海桐果實提取液的抗毒素作用。

下面以具體實施例來說明本技術(shù)方案的實施。

實施例1

一種海桐果實提取物的制備方法，其特征在于步驟如下：

(1)稱取海桐果實800g，將稱取的海桐果實與95％乙醇以1:3重量比混合；

(2)80攝氏度的溫度下回流提取3h,抽濾，收集提取液，并將濾渣提取3次，合并提取液；

(3)將步驟(2)中的提取液真空減壓濃縮并干燥至恒重，得到海桐果實提取物。

海桐果實提取物為有效成分可制備抗毒素。