技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及熱穩(wěn)定性提高的谷氨酸脫羧酶突變體及其應(yīng)用，屬于生物工程領(lǐng)域。本發(fā)明突變體主要是將谷氨酸脫羧酶氨基酸序列的第5?7位的谷氨酰胺Q、纈氨酸V和蘇氨酸T進行飽和突變，篩選獲得高穩(wěn)定突變體Q5E/V6S/T7V、Q5Y/V6R/T7K、Q5N/V6Y/T7V。本發(fā)明獲得的谷氨酸脫羧酶突變體的半失活溫度為45?50.5℃，比野生型提高了4.9?10.2℃；在45℃下的半衰期為76?129min，比野生型(24min)提高了3.2?4.3倍。以重組大腸桿菌合成的谷氨酸脫羧酶突變體全細胞轉(zhuǎn)化谷氨酸12h，可得到260?350g/L的γ?氨基丁酸(GABA)，摩爾轉(zhuǎn)化率為76.6％?97.8％。本發(fā)明所得到的谷氨酸脫羧酶突變體熱穩(wěn)定性明顯提高，更利于γ?氨基丁酸的生產(chǎn)需求，為高效合成γ?氨基丁酸奠定了基礎(chǔ)。

技術(shù)研發(fā)人員：趙黎明;范立強;李明偉;秦臻;陳啟明;邱勇雋
受保護的技術(shù)使用者：華東理工大學
文檔號碼：201710196715
技術(shù)研發(fā)日：2017.03.29
技術(shù)公布日：2017.05.31