本發(fā)明屬于化學(xué)定量分析技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種吡唑醚菌酯標準品的制備方法，尤其是涉及一種高純度的吡唑醚菌酯標準品的制備方法。
背景技術(shù)：
吡唑醚菌酯(pyraclostrobin)又名唑菌胺酯，是含有吡唑結(jié)構(gòu)的甲氧基丙烯酸酯類新型廣譜殺菌劑，該品種低毒，高效，對多種作物，包括麥類，葡萄，果樹，蔬菜的多種病害有效。隨著環(huán)境保護的日益重視，農(nóng)藥原藥質(zhì)量標準也逐步提高。為了對吡唑醚菌酯原藥生產(chǎn)進行監(jiān)控，并對原藥產(chǎn)品進行全組分分析，需要制備其合格的標準品，目前購買的國外有證吡唑醚菌酯標準品的純度為99.0％，國內(nèi)尚沒有企業(yè)或單位銷售經(jīng)過認證的該農(nóng)藥合格標準品。
農(nóng)藥標準品可由其原藥純化制備，原藥能否通過簡單的純化手段得到高純度的標準品，不僅取決于純化工藝的有效性及穩(wěn)定性，而且還取決于原藥中雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)及含量。而原藥生產(chǎn)工藝的不同，生產(chǎn)廠家的不同，甚至生產(chǎn)批次的不同，這些因素均能導(dǎo)致雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)及含量存在差異。對于如何得到更高純度吡唑醚菌酯標準品是本領(lǐng)域的研究重點。
通過對三種品牌市售吡唑醚菌酯原藥的雜質(zhì)進行分析，其含量較高的主要雜質(zhì)結(jié)構(gòu)如下表所示：
由于不同品牌市售吡唑醚菌酯原藥的雜質(zhì)不同，對其純化的難易不同，雜質(zhì)種類以及含量的多少均會影響其作為標準品時對化學(xué)定量分析的影響。
因此，在本領(lǐng)域中除了需要優(yōu)化重結(jié)晶方法，還需要篩選出可以制備高純度吡唑醚菌酯標準品的原藥樣品，這是本領(lǐng)域亟待解決的問題。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
針對現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明的目的在于提供一種吡唑醚菌酯標準品的制備方法，該方法可以得到純度在99.5％以上的吡唑醚菌酯標準品，為精確定量吡唑醚菌酯原藥含量和監(jiān)控該品種生產(chǎn)過程提供了堅實的基礎(chǔ)。
為達此目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：
本發(fā)明提供一種吡唑醚菌酯標準品的制備方法，所述方法包括以下步驟：
(1)將吡唑醚菌酯原藥，加醇類溶劑溶解，過濾除去不溶物，得到的濾液備用；
(2)將步驟(1)得到的濾液加熱，攪拌下加入去離子水中，降至室溫，再用冰水浴降溫，溶液分層，析出油狀物，分出上層清液，下層油狀物備用；
(3)將步驟(2)得到的油狀物加入醇類溶劑中，加熱熱溶，攪拌下降溫至析出固體，過濾得固體備用；
(4)將步驟(3)得到的固體加入醇類溶劑中，重復(fù)步驟(3)，直至析出的晶體中吡唑醚菌酯純度在99.5％以上時停止重結(jié)晶，經(jīng)烘干后得所述吡唑醚菌酯標準品。
在本領(lǐng)域中，對于標準品期望是純度越高越有利于化學(xué)定量分析工作，在目前吡唑醚菌酯標準品中，現(xiàn)有技術(shù)很難做到將純度提高至高于99％，甚至高于99.5％，而本發(fā)明通過重結(jié)晶的方法可以將吡唑醚菌酯標準品的純度提高至99.5％以上，高于國外有證標準品的純度。
優(yōu)選地，步驟(1)所述吡唑醚菌酯原藥的純度為97％-99％，例如97％、97.3％、97.5％、97.8％、98％、98.3％、98.5％、98.8％或99％。
優(yōu)選地，步驟(1)所述吡唑醚菌酯原藥中高效液相面積歸一化百分含量大于等于0.1％的雜質(zhì)為具有如下式a-c所示結(jié)構(gòu)的化合物中的任意一種或至少兩種的組合：
優(yōu)選地，所述單個雜質(zhì)的高效液相面積歸一化百分含量小于1％，例如0.1％、0.13、0.15％、0.18％、0.2％、0.25％、0.3％、0.35％、0.38％、0.4％、0.45％、0.5％、0.55％、0.6％、0.65％、0.7％、0.75％、0.8％、0.85％、0.9％、0.95％或1％。
優(yōu)選地，步驟(1)所述醇類溶劑為甲醇、乙醇或異丙醇中的任意一種或至少兩種的組合。
優(yōu)選地，步驟(1)所述醇類溶劑的加入體積與吡唑醚菌酯的質(zhì)量之比為2:1-6:1，例如2:1、2.3:1、2.5:1、2.8:1、3:1、3.3:1、3.5:1、3.8:1、4:1、4.3:1、4.5:1、4.8:1、5:1、5.3:1、5.5:1、5.8:1或6:1，優(yōu)選3:1-4:1。由于每次重結(jié)晶精制后濾餅的量逐漸減少，醇類溶劑的量也按比例相應(yīng)減少。
優(yōu)選地，步驟(1)所述溶解在加熱回流下進行。
優(yōu)選地，步驟(2)所述加熱為加熱至60-80℃，例如60℃、63℃、65℃、68℃、70℃、73℃、75℃、78℃或80℃。
優(yōu)選地，步驟(2)所述去離子水與步驟(1)所述醇類溶劑的體積比為1:1-1:3，例如1:1、1:1.3、1:1.5、1:1.8、1:2、1:2.2、1:2.5、1:2.8或1:3，優(yōu)選1:2。
在本發(fā)明的步驟(2)中加入去離子水后，保持溶液澄清，緩慢降至室溫，所述緩慢可以采取自然降溫的方式。
優(yōu)選地，步驟(3)所述醇類溶劑為甲醇、乙醇或異丙醇中的任意一種或至少兩種的組合。
優(yōu)選地，步驟(3)所述醇類溶劑的加入體積與油與步驟(1)所述吡唑醚菌酯的質(zhì)量之比為2:1-6:1，例如2:1、2.3:1、2.5:1、2.8:1、3:1、3.3:1、3.5:1、3.8:1、4:1、4.3:1、4.5:1、4.8:1、5:1、5.3:1、5.5:1、5.8:1或6:1，優(yōu)選3:1-4:1。
優(yōu)選地，步驟(3)所述熱溶的溫度為50℃以上，例如50℃、55℃、58℃、60℃、65℃、68℃、70℃、73℃、75℃、78℃、80℃或85℃等。
優(yōu)選地，步驟(3)所述熱溶在回流下進行。
在本發(fā)明中，步驟(3)所述降溫要保持緩慢降溫，可以采取自然降溫的方式，以使得固體慢慢析出，盡量保證析出固體的純化度較高。
優(yōu)選地，步驟(3)所述析出固體時的溫度為0～30℃，例如0℃、3℃、5℃、8℃、10℃、13℃、15℃、18℃、20℃、22℃、25℃、28℃或30℃，優(yōu)選10～20℃。可通過冷卻或加熱的方式使體系控制在該溫度范圍。在該溫度范圍內(nèi)可以使得固體慢慢析出，盡量保證析出固體的純化度較高。
優(yōu)選地，步驟(4)所述醇類溶劑為甲醇、乙醇或異丙醇中的任意一種或至少兩種的組合。
優(yōu)選地，步驟(4)所述醇類溶劑加入體積與步驟(3)得到的固體的質(zhì)量之比為2:1-6:1，例如2:1、2.3:1、2.5:1、2.8:1、3:1、3.3:1、3.5:1、3.8:1、4:1、4.3:1、4.5:1、4.8:1、5:1、5.3:1、5.5:1、5.8:1或6:1，優(yōu)選3:1-4:1。
優(yōu)選地，步驟(4)所述重復(fù)步驟(3)為重復(fù)2次以上，例如2次、3次、4次、5次、6次、7次、8次、9次、10次，優(yōu)選重復(fù)2-5次。
優(yōu)選地，在步驟(3)所述攪拌下降溫的過程中加入晶種，以促進析晶過程。
本發(fā)明彌補了吡唑醚菌酯標準品的國內(nèi)市場空白，在上海市科委項目資助下，本發(fā)明進行了吡唑醚菌酯標準品的純化工藝研究，產(chǎn)品含量測試結(jié)果也得到了國內(nèi)八家權(quán)威檢驗檢測機構(gòu)聯(lián)合驗證，產(chǎn)品純度高，數(shù)據(jù)可靠有效。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果為：
(1)本發(fā)明的重結(jié)晶工藝能有效提純吡唑醚菌酯，同時通過選擇特定的吡唑醚菌酯原藥，確定了制備高純度吡唑醚菌酯標準品的最佳原料選擇，更進一步提高了產(chǎn)品的純度。
(2)本發(fā)明通過所述方法可以得到純度在99.5％以上的吡唑醚菌酯標準品，高于國外有證標準品的純度，采用的工藝簡便、成本低廉、能夠大批量制備吡唑醚菌酯標準品，填補了國內(nèi)空白，為精確定量吡唑醚菌酯原藥含量和監(jiān)控該品種生產(chǎn)過程提供了堅實的基礎(chǔ)。
具體實施方式
下面通過具體實施方式來進一步說明本發(fā)明的技術(shù)方案。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該明了，所述實施例僅僅是幫助理解本發(fā)明，不應(yīng)視為對本發(fā)明的具體限制。
以下實施例中所述外標定值純度結(jié)果(本發(fā)明中純度均指質(zhì)量百分含量)，均為以國外純度99.0％的有證吡唑醚菌酯標準品為標準，列出了外標法測試的結(jié)果，這些結(jié)果主要反映了與國外該品種的純度差異，其結(jié)果準確可靠。
實施例1
在配有機械攪拌器、溫度計、回流冷凝裝置的反應(yīng)釜中，加入400g吡唑醚菌酯原藥(品牌a，純度98.5％，高效液相面積歸一化百分含量98.9％，其中雜質(zhì)a含量0.32％，雜質(zhì)b含量0.15％，雜質(zhì)c含量0.25％，其他雜質(zhì)總計0.29％)和1200ml無水乙醇，加熱回流使溶解，趁熱過濾除去不溶物；濾液再重新加熱至70℃，攪拌下緩慢加入600ml去離子水，并保持溶液始終處于澄清狀態(tài)，攪拌0.5h后緩慢降溫至室溫，再用冰水浴降溫至5℃，析出油狀物，停止攪拌，靜置6h，分出下層油狀物；
該油狀物加入800ml無水乙醇，加熱至60℃，攪拌均勻使溶清，緩慢降溫至10℃，加入少量吡唑醚菌酯晶種，保溫攪拌析晶4h，過濾，得濾餅360g(濕重)，該濾餅加入1000ml無水乙醇，加熱至50℃，攪拌均勻使溶解，緩慢降溫至20℃，保溫攪拌析晶4h，過濾，得濾餅228g(濕重)；該濾餅加入500ml無水乙醇，加熱至60℃，攪拌均勻使溶解，緩慢降溫至20℃，保溫攪拌析晶4h，過濾，烘干后得吡唑醚菌酯標準品155g，國外標準品外標定值純度99.9％，本實施例得到的產(chǎn)品的高效液相面積歸一化百分含量99.99％，扣除水分和金屬離子后的純度為99.89％。
實施例2
在配有機械攪拌器、溫度計、回流冷凝裝置的反應(yīng)釜中，加入400g吡唑醚菌酯原藥(品牌a，定量純度98.5％，高效液相面積歸一化純度98.9％，其中雜質(zhì)a含量0.32％，雜質(zhì)b含量0.15％，雜質(zhì)c含量0.25％，其他雜質(zhì)總計0.29％)和800ml無水甲醇，加熱回流使溶解，趁熱過濾除去不溶物；濾液再重新加熱至60℃，攪拌下緩慢加入800ml去離子水，并保持溶液始終處于澄清狀態(tài)，攪拌0.5h后緩慢降溫至室溫，再用冰水浴降溫至5℃，析出油狀物，停止攪拌，靜置4h，分出下層油狀物；
該油狀物加入1200ml無水甲醇，加熱至50℃，攪拌均勻使澄清，緩慢降溫至0℃，加入少量吡唑醚菌酯晶種，保溫攪拌析晶4h，過濾，得濾餅345g(濕重)，該濾餅加入1200ml無水甲醇，加熱至60℃，攪拌均勻使溶解，緩慢降溫至10℃，保溫攪拌析晶4h，過濾，得濾餅203g(濕重)；該濾餅加入450ml無水甲醇，加熱至回流，攪拌均勻使溶解，緩慢降溫至10℃，保溫攪拌析晶4h，過濾，烘干后得吡唑醚菌酯標準品134g，國外標準品外標定值純度99.8％，本實施例得到的產(chǎn)品的高效液相面積歸一化百分含量99.95％，扣除水分和金屬離子后的純度為99.84％。
實施例3
在配有機械攪拌器、溫度計、回流冷凝裝置的反應(yīng)釜中，加入400g吡唑醚菌酯原藥(品牌a，定量純度98.5％，高效液相面積歸一化純度98.9％，其中雜質(zhì)a含量0.32％，雜質(zhì)b含量0.15％，雜質(zhì)c含量0.25％，其他雜質(zhì)總計0.29％)和1600ml無水異丙醇，加熱回流使溶解，趁熱過濾除去不溶物；濾液再重新加熱至80℃，攪拌下緩慢加入800ml去離子水，并保持溶液始終處于澄清狀態(tài)，攪拌0.5h后緩慢降溫至室溫，再用冰水浴降溫至0℃，析出油狀物，停止攪拌，靜置4h，分出下層油狀物；
該油狀物加入1200ml無水異丙醇，加熱至80℃，攪拌均勻使澄清，緩慢降溫至30℃，加入少量吡唑醚菌酯晶種，保溫攪拌析晶4h，過濾，得濾餅350g(濕重)，該濾餅加入1000ml無水異丙醇，加熱至70℃，攪拌均勻使溶解，緩慢降溫至10℃，保溫攪拌析晶4h，過濾，得濾餅212g(濕重)；該濾餅加入500ml無水異丙醇，加熱至60℃，攪拌均勻使溶解，緩慢降溫至20℃，保溫攪拌析晶4h，過濾，烘干后得吡唑醚菌酯標準品142g，國外標準品外標定值純度99.8％，本實施例得到的產(chǎn)品的高效液相面積歸一化百分含量99.93％，扣除水分和金屬離子后的純度為99.81％。
實施例4
在配有機械攪拌器、溫度計、回流冷凝裝置的反應(yīng)釜中，加入400g吡唑醚菌酯原藥(品牌a，定量純度98.5％，高效液相面積歸一化純度98.9％，其中雜質(zhì)a含量0.32％，雜質(zhì)b含量0.15％，雜質(zhì)c含量0.25％，其他雜質(zhì)總計0.29％)和2400ml無水異丙醇，加熱回流使溶解，趁熱過濾除去不溶物；濾液再重新加熱至80℃，攪拌下緩慢加入800ml去離子水，并保持溶液始終處于澄清狀態(tài)，攪拌0.5h后緩慢降溫至室溫，再用冰水浴降溫至5℃，析出油狀物，停止攪拌，靜置4h，分出下層油狀物；
該油狀物加入1200ml無水異丙醇，加熱至70℃，攪拌均勻使澄清，緩慢降溫至30℃，加入少量吡唑醚菌酯晶種，保溫攪拌析晶4h，過濾，得濾餅341g(濕重)，該濾餅加入1000ml無水異丙醇，加熱至60℃，攪拌均勻使溶解，緩慢降溫至10℃，保溫攪拌析晶4h，過濾，得濾餅201g(濕重)；該濾餅加入500ml無水異丙醇，加熱至60℃，攪拌均勻使溶解，緩慢降溫至10℃，保溫攪拌析晶4h，過濾，烘干后得吡唑醚菌酯標準品128g，國外標準品外標定值純度99.8％，本實施例得到的產(chǎn)品的高效液相面積歸一化百分含量99.96％，扣除水分和金屬離子后的純度為99.85％。
實施例5
對實施例1-4中使用的吡唑醚菌酯原藥中的雜質(zhì)結(jié)構(gòu)進行確定
取400g吡唑醚菌酯原藥(品牌a)，加入1200ml乙醇，升溫至回流溶解，降溫析晶，過濾得濾液，雜質(zhì)富集到母液中，母液濃縮一半，再降溫析晶，過濾得到的母液再重復(fù)以上重結(jié)晶過程5次，最后的母液旋干，得雜質(zhì)富集粗品9.2g，柱層析純化分離各雜質(zhì)，得到各約100～200mg的三種主要雜質(zhì)，純度均大于98％，結(jié)構(gòu)確定結(jié)果如下：
雜質(zhì)a:白色固體，uplc-ms(m/e,+pesi):358.0941(m+h)+
1hnmr(cdcl3)δ3.76(s,3h),5.32(s,2h),5.90(d,1h),7.12(d,1h),7.36-7.43(m,4h),7.55(m,1h),7.57(d,1h),7.67(m,1h),7.85(d,1h),8.39(br,1h)。
其結(jié)構(gòu)確定為：
雜質(zhì)b：白色固體，uplc-ms(m/e,+pesi):374.0890(m+h)+
1hnmr(cdcl3)δ3.80(s,3h),5.39(s,2h),5.92(d,1h),7.38(d,1h),7.38-7.43(m,4h),7.46(m,1h),7.49(d,1h),7.60(m,1h),7.64(d,1h),8.49(br,1h)。
其結(jié)構(gòu)確定為：
雜質(zhì)c：白色固體，uplc-ms(m/e,+pesi):436.0812(m+h)+
1hnmr(cdcl3)δ3.67(t,2h),3.80(s,3h),4.18(t,2h),5.34(s,2h),5.93(d,1h),7.36-7.41(m,5h),7.52-7.54(m,2h),7.64(m,1h),7.70(d,1h)。
其結(jié)構(gòu)確定為：
對比例1
以400g吡唑醚菌酯原藥(品牌b，定量純度98.7％，高效液相面積歸一化純度99.0％)為原料，采用實施例1相同的純化工藝提純本品，得吡唑醚菌酯標準品129g，國外標準品外標定值純度99.4％，本對比例的產(chǎn)品的高效液相面積歸一化百分含量99.52％。
對比例2
以400g吡唑醚菌酯原藥(品牌c，定量純度98.2％，高效液相面積歸一化純度98.8％)為原料，采用實施例1相同的純化工藝提純本品，得吡唑醚菌酯標準品116g，國外標準品外標定值純度99.3％，本對比例的產(chǎn)品的高效液相面積歸一化百分含量99.48％。
由本發(fā)明實施例1-4與對比例2的對比可以看出，在本發(fā)明中，含有如上所述雜質(zhì)a、b、c的品牌a的吡唑醚菌酯原藥經(jīng)過本發(fā)明所述的方法制備得到的吡唑醚菌酯標準品的純度更高，更能夠符合其高純度標準品制備的要求，而品牌b和c的吡唑醚菌酯原藥雖然也經(jīng)過本發(fā)明所述的方法處理，但是卻得不到更高純度的標準品。
申請人聲明，本發(fā)明通過上述實施例來說明本發(fā)明的詳細方法，但本發(fā)明并不局限于上述詳細方法，即不意味著本發(fā)明必須依賴上述詳細方法才能實施。所屬技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員應(yīng)該明了，對本發(fā)明的任何改進，對本發(fā)明產(chǎn)品各原料的等效替換及輔助成分的添加、具體方式的選擇等，均落在本發(fā)明的保護范圍和公開范圍之內(nèi)。