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一種基于大腸桿菌表達系統(tǒng)的重組pBpp蛋白制備方法與流程

文檔序號:12712578閱讀:來源:國知局
技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供了一種基于大腸桿菌表達系統(tǒng)的重組pBpp蛋白制備方法,該技術(shù)方案以斑馬魚糞便菌群DNA為模板,擴增得到pBpp表達基因,再利用pET28c質(zhì)粒為載體,先于大腸桿菌TOP10中擴增質(zhì)粒,而后轉(zhuǎn)化入大腸桿菌BL21中進行蛋白表達。在此基礎(chǔ)上,本發(fā)明針對重組菌株的特性設(shè)計了適宜的蛋白表達及誘導(dǎo)條件,對于胞內(nèi)表達的pBpp蛋白,本發(fā)明對菌體進行超聲破碎后,先利用鎳珠結(jié)合游離的蛋白,再進行蛋白洗脫,最后分別利用PBS和甘油進行透析,從而實現(xiàn)了pBpp蛋白的有效純化。實驗發(fā)現(xiàn),本發(fā)明所制備的pBpp蛋白可確切誘導(dǎo)胰腺中β細胞的增殖,從而對因胰島β細胞損傷所導(dǎo)致的糖尿病起到治療效果。

技術(shù)研發(fā)人員:陳廷濤;辛洪波;王鑫
受保護的技術(shù)使用者:南昌大學
文檔號碼:201710138073
技術(shù)研發(fā)日:2017.03.09
技術(shù)公布日:2017.06.27

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