本發(fā)明屬于葡萄籽中原花青素的提取分離技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種利用離子液體提取葡萄籽中原花青素的工藝方法。

背景技術(shù)：

原花青素是由兒茶素[(+)-catechin]和表兒茶素[(-)-epicatechin]類黃烷衍生物聚合而成的低聚體。原花青素類以二聚體、三聚體為多見，此外還有四聚體、五聚體、六聚體，其具有較多生理和藥理活性。原花青素是一種較好的氧自由基清除劑和脂質(zhì)過氧化抑制劑，其抗氧化性是vc的20倍，是ve的50倍，在藥品、保健品、食品和化妝品等眾多領(lǐng)域有較大應(yīng)用。原花青素更具有抗致突變活性，可以預(yù)防心血管疾病和有害細(xì)胞增殖。此外，原花青素還具有如抗致癌作用、抗病毒與抗真菌活性、抗腹瀉活性和抗?jié)兓钚缘人幚砘钚?。我國葡萄資源豐富，葡萄加工過程產(chǎn)生大量的廢棄物葡萄籽，其中富含原花青素，從葡萄籽中提取有效成分原花青素具有極大的社會效益和環(huán)境效益。

目前有關(guān)原花青素提取的報(bào)道很多，中國專利申請201110450058.2“一種原花青素的制備方法”，利用乙醇水溶液從葡萄籽、松樹皮、紫薯等原料中粗提原花青素，再利用雙水相萃取法從原花青素粗提物中制備原花青素，其工藝過程為預(yù)處理→提取→萃取→干燥，該方法的特點(diǎn)是所有過程都在液相中進(jìn)行，易于連續(xù)操作，但產(chǎn)品得率較低，僅為0.58％、0.53％。中國專利申請201310425454.9“一種從葡萄籽中提取原花青素的新方法”，采用乙醇水溶液+超聲輔助提取→壓榨法處理→酶解→大孔樹脂純化工藝，產(chǎn)品得率為6.43％～7.35％，但工藝復(fù)雜，且超聲輔助法可能會破壞葡萄籽中有效成分。離子液體因其具有揮發(fā)性小、熱穩(wěn)定性高、溶解性能好、憎水性可調(diào)、易循環(huán)使用、環(huán)境友好的優(yōu)點(diǎn)，被應(yīng)用于原花青素的提取工藝。中國專利申請201510448485.5“一種從興安落葉松樹皮中提取原花青素的方法”，采用溴化1-烯丙基-3-甲基咪唑離子液體溶液+超聲輔助提取，然后提取液用大孔樹脂吸附，再用乙醇溶液解析的工藝方法，但離子液體的濃度為0.5～3mol/l，且需采用超聲輔助。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

針對現(xiàn)有技術(shù)不足，本發(fā)明提供了一種利用離子液體提取葡萄籽中原花青素的工藝方法。

一種利用離子液體提取葡萄籽中原花青素的工藝方法，先將葡萄籽進(jìn)行脫脂預(yù)處理，加入提取溶劑回流提取原花青素，所述提取溶劑為，體積百分含量為40％～95％的乙醇水溶液中加入0.0001～0.15mol/l的離子液體。

所述離子液體選自[bmim]cl、[bmim]br、[bmim]bf4、[omim]pf6、[hoemmim]cl、谷氨酸四氟硼酸鹽、谷氨酸三氟乙酸鹽、谷氨酸六氟磷酸鹽、谷氨酸三氟甲基磺酸鹽、谷氨酸雙三氟甲磺酰亞胺鹽、三甲基羥乙基銨雙(三氟甲烷磺酰)亞胺鹽、三甲基羥乙基銨六氟磷酸鹽、三甲基羥乙基銨四氟硼酸鹽、三甲基羥乙基銨氯鹽、[prmim]cl、[c5mim]cl、[c7mim]cl、[bmim]no3、[bmim]pf6、[bmim]ntf2、[omim]pf6。

工藝方法主要包括如下步驟：

1)預(yù)處理：先將葡萄籽進(jìn)行淘洗，挑出殘次品，經(jīng)粉碎后篩選出20～40目的葡萄籽粉末，脂溶性溶劑浸泡后干燥待用；

2)提?。翰襟E1)預(yù)處理的葡萄籽粉末中加入提取溶劑，在提取溫度為40～80℃，提取時(shí)間為15～120min，料液比為1:5～1:15(g/ml)的條件下回流提取，離心分離取上層清液，渣液采用同樣的方式再提取一次，離心分離取上層清液，合并兩次上層清液，得到提取液；

3)濃縮：步驟2)所得提取液減壓濃縮至1/5～1/3體積，靜置8～12h，離心分離取上層液體，得到濃縮液；

4)干燥：步驟3)所得濃縮液進(jìn)行噴霧干燥，得到富含原花青素的粉末。

4、根據(jù)權(quán)利要求3所述的工藝方法，其特征在于，步驟1)中所述脂溶性溶劑選自正己烷、環(huán)己烷、石油醚、氯仿、四氯化碳。

步驟1)中所述浸泡的時(shí)間為24h。

所述離心的轉(zhuǎn)速為2000r/min，時(shí)間均為5～20min。

步驟4)中所述的噴霧干燥，噴霧干燥機(jī)的風(fēng)機(jī)頻率為40～60hz，蠕動泵轉(zhuǎn)速為4～8r/min，進(jìn)風(fēng)溫度為150～200℃。

本發(fā)明的有益效果為：

本發(fā)明的工藝方法，在原有的乙醇水溶液提取溶劑中，加入極少量(少于0.05mol/l)的離子液體，充分利用離子液體與原花青素之間的強(qiáng)相互作用，以及極少量離子液體的溶解性，大大提高了從葡萄籽中提取原花青素的提取效率，且無需超聲/微波輔助，工藝簡單，成本低。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合具體實(shí)施方式對本發(fā)明做進(jìn)一步說明。應(yīng)該強(qiáng)調(diào)的是，下述說明僅僅是示例性的，而不是為了限制本發(fā)明的范圍及其應(yīng)用。

實(shí)施例i1-實(shí)施例i3和對比例i1采用1#葡萄籽品種。

實(shí)施例ii1-實(shí)施例ii3和對比例ii1采用2#葡萄籽品種。

提取效率＝提取的原花青素的質(zhì)量(mg)/葡萄籽粉末質(zhì)量(g)

實(shí)施例i1

先將1#葡萄籽進(jìn)行簡單淘洗，挑出殘次品，粉碎后篩選出20～40目粉末，經(jīng)石油醚浸泡24小時(shí)后自然風(fēng)干待用；稱取葡萄籽粉末100g置于三口燒瓶中，稱量0.005mol(0.87g)1-丁基-3-甲基咪唑氯鹽([bmim]cl)溶于1000ml體積百分含量為95％的乙醇水溶液中，在80℃，以此提取溶劑回流提取60min，然后離心5min，取上層清液，渣液用上述提取溶劑以相同方法再次提取一次，離心5min后取上層清液，合并兩次清液，經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀旋蒸濃縮至300ml左右，濃縮液靜置12h后離心20min，取上層液體于1000ml容量瓶中，用去離子水定容，檢測原花青素的濃度。經(jīng)計(jì)算，原花青素的提取效率為12.81mg/g。

對比例i1

對比例1作為實(shí)施例1的對比，提取溶劑為1000ml體積百分含量為95％的乙醇水溶液，不使用1-丁基-3-甲基咪唑氯鹽([bmim]cl)，其他條件與實(shí)施例1相同。經(jīng)計(jì)算，原花青素的提取效率為8.60mg/g。

實(shí)施例i2

先將1#葡萄籽進(jìn)行簡單淘洗，挑出殘次品，粉碎后篩選出20～40目粉末經(jīng)石油醚浸泡24小時(shí)后自然風(fēng)干待用；稱取葡萄籽粉末100g置于三口燒瓶中，稱量0.0005mol(0.14g)1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸鹽([bmim]pf6)溶于1000ml體積百分含量為95％的乙醇水溶液中，在80℃，以此提取溶劑回流提取120min，然后離心5min，取上層清液，渣液用上述提取溶劑以相同方法再次提取一次，離心5min后取上層清液，合并兩次清液，經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀旋蒸濃縮至300ml左右，濃縮液靜置12h后離心20min，取上層液體于1000ml容量瓶中，用去離子水定容，檢測原花青素的濃度。經(jīng)計(jì)算，原花青素的提取效率為17.78mg/g。

實(shí)施例i3

先將1#葡萄籽進(jìn)行淘洗，挑出殘次品，粉碎后篩選出20～40目粉末經(jīng)石油醚浸泡24小時(shí)后自然風(fēng)干待用；稱取葡萄籽粉末100g置于三口燒瓶中，稱量0.0025mol(0.43g)1-丁基-3-甲基咪唑氯鹽([bmim]cl)溶于500ml體積百分含量為95％的乙醇水溶液中，在60℃，以此提取溶劑回流提取90min，然后離心5min，取上層清液，渣液用上述提取溶劑以相同方法再次提取一次，離心5min后取上層清液，合并兩次清液，經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀旋蒸濃縮至300ml左右，濃縮液靜置12h后離心20min，取上層液體于1000ml容量瓶中，用去離子水定容，檢測原花青素的濃度。經(jīng)計(jì)算，原花青素的提取效率為12.55mg/g。

實(shí)施例ii1

先將2#葡萄籽進(jìn)行淘洗，挑出殘次品，粉碎后篩選出20～40目粉末，經(jīng)石油醚浸泡24小時(shí)后自然風(fēng)干待用；稱取葡萄籽粉末100g置于三口燒瓶中，稱量0.02mol(3.53g)1-羥乙基-2,3-二甲基咪唑氯鹽([hoemmim]cl)溶于614ml體積百分含量為44.47％的乙醇水溶液中，在65℃，以此提取溶劑回流提取70min，然后離心5min，取上層清液，渣液用上述提取溶劑以相同方法再次提取一次，離心5min后取上層清液，合并兩次清液，經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀旋蒸濃縮至300ml左右，濃縮液靜置12h后離心20min，取上層液體于1000ml容量瓶中，用去離子水定容，檢測原花青素的濃度。經(jīng)計(jì)算，原花青素的提取效率為4.43mg/g。

對比例ii1

對比例1作為實(shí)施例1的對比，提取溶劑為614ml體積百分含量為44.47％的乙醇水溶液，不使用1-羥乙基-2,3-二甲基咪唑氯鹽([hoemmim]cl)，其他條件與實(shí)施例1相同。經(jīng)計(jì)算，原花青素的提取效率為2.12mg/g。

實(shí)施例ii2

先將2#葡萄籽進(jìn)行淘洗，挑出殘次品，粉碎后篩選出20～40目粉末，經(jīng)石油醚浸泡24小時(shí)后自然風(fēng)干待用；稱取葡萄籽粉末100g置于三口燒瓶中，稱量0.02mol(6.81g)1-辛基-3-甲基咪唑六氟磷酸鹽([omim]pf6)溶于614ml體積百分含量為44.47％的乙醇水溶液中，在65℃，以此提取溶劑回流提取70min，然后離心5min，取上層清液，渣液用上述提取溶劑以相同方法再次提取一次，離心5min后取上層清液，合并兩次清液，經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀旋蒸濃縮至300ml左右，濃縮液靜置12h后離心20min，取上層液體于1000ml容量瓶中，用去離子水定容，檢測原花青素的濃度。經(jīng)計(jì)算，原花青素的提取效率為4.0mg/g。

實(shí)施例ii3

先將2#葡萄籽進(jìn)行淘洗，挑出殘次品，粉碎后篩選出20～40目粉末經(jīng)石油醚浸泡24小時(shí)后自然風(fēng)干待用；稱取葡萄籽粉末100g置于三口燒瓶中，稱量0.02mol(3.49g)1-丁基-3-甲基咪唑氯鹽([bmim]cl)溶于614ml體積百分含量為44.47％的乙醇水溶液中，在65℃，以此提取溶劑回流提取70min，然后離心5min，取上層清液，渣液用上述提取溶劑以相同方法再次提取一次，離心5min后取上層清液，合并兩次清液，經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀旋蒸濃縮至300ml左右，濃縮液靜置12h后離心20min，取上層液體于1000ml容量瓶中，用去離子水定容，檢測原花青素的濃度。經(jīng)計(jì)算，原花青素的提取效率為2.74mg/g。