本發(fā)明涉及醫(yī)藥領(lǐng)域，特別是涉及一種老鸛草多糖及低聚糖的制備方法及應(yīng)用。
背景技術(shù)：
老鸛草為牻牛兒苗科植物牻牛兒苗Erodium stephanianum Willd.、老鶴草Geranium wilfordii Maxim.或野老鸛草Geranium carolinianum L.的干燥地上部分。具有祛風(fēng)濕、通經(jīng)絡(luò)、止瀉痢、抗菌、抗病毒、抗氧化、抗腫瘤、抗炎鎮(zhèn)痛、降糖、保肝等作用。臨床主要用于風(fēng)濕痹痛，麻木拘攣，筋骨酸痛，泄瀉痢疾?，F(xiàn)對(duì)其有效成分的研究主要涉及鞣質(zhì)、黃酮、有機(jī)酸、揮發(fā)油、三萜類(lèi)、甾醇類(lèi)、木質(zhì)素類(lèi)等成分，對(duì)其中的多糖和低聚糖的研究尚未見(jiàn)報(bào)道，特別是如何解決一體化制備老鸛草多糖及低聚糖也未見(jiàn)報(bào)道。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
針對(duì)上述情況，為了克服現(xiàn)有技術(shù)之缺陷，本發(fā)明之目的就是提供一種老鸛草多糖及低聚糖的制備方法，可有效解決老鸛草多糖及低聚糖的制備及老鸛草多糖在制備增強(qiáng)免疫力的藥物和保健品中的應(yīng)用和老鸛草低聚糖在制備抗疲勞的藥物和保健品中的應(yīng)用。
本發(fā)明解決的技術(shù)方案是，一種老鸛草多糖及低聚糖的制備方法，包括以下步驟：取老鸛草干燥，粉碎成粗粉；取老鸛草粗粉，向老鸛草粗粉中加入蒸餾水，老鸛草粗粉與蒸餾水的重量比為1：11-22，浸泡23-46min，84℃-98℃超聲提取41-97min，過(guò)濾，濾液濃縮至比重為1.11-1.20的浸膏，加入乙醇使乙醇含量達(dá)到體積濃度為66％-79％，4℃靜置8-15h，6000r/min離心45min，得上清液A和離心沉淀B，上清液A備用，離心沉淀B冷凍干燥，得老鸛草粗多糖粉末C，取老鸛草粗多糖粉末C加入10倍重量的蒸餾水使溶解得老鸛草粗多糖溶液D，向老鸛草粗多糖溶液D中加入其1％重量的酵母，于室溫下轉(zhuǎn)速150-195r/min搖床培養(yǎng)發(fā)酵，發(fā)酵時(shí)間26-74h，過(guò)濾，于濾液中加入Ca(OH)2至濾液pH值為8.1，88℃水浴加熱66min同時(shí)通入CO2氣體，放至室溫，過(guò)濾，濾液濃縮至比重為1.11-1.20的浸膏，加入乙醇使乙醇含量達(dá)到體積濃度為80％，4℃靜置12h，6000r/min離心35min，取下層沉淀冷凍干燥即得老鸛草多糖E；取上清液A減壓回收乙醇濃縮至比重為1.11-1.21的浸膏，乙醚萃取，收集下層萃取液，50℃揮去乙醚，依次通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂柱、凝膠樹(shù)脂柱，得洗脫液，洗脫液減壓濃縮，冷凍干燥得老鸛草低聚糖F；實(shí)現(xiàn)以老鸛草為原料制備老鸛草多糖及低聚糖，并將老鸛草多糖有效用于制備增強(qiáng)免疫力的藥物和保健品及將老鸛草低聚糖用于制備抗疲勞的藥物和保健品中的應(yīng)用。
所述的大孔吸附樹(shù)脂為AB-8型大孔吸附樹(shù)脂,凝膠樹(shù)脂為Sephadex LH-20。
本發(fā)明制備方法簡(jiǎn)單，易于操作，應(yīng)用范圍廣泛，可有效用于制備老鸛草多糖及低聚糖，老鸛草多糖可用于制備增強(qiáng)免疫力的藥物和保健品；老鸛草低聚糖可用于制備抗疲勞的藥物和保健品，開(kāi)拓了老鸛草藥材及老鸛草多糖、低聚糖的應(yīng)用價(jià)值，具有良好的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益，是中藥上的巨大創(chuàng)新。
具體實(shí)施方式
以下結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)施方式作詳細(xì)說(shuō)明。
本發(fā)明在具體實(shí)施中，可由以下實(shí)施例給出。
實(shí)施例1
本發(fā)明在具體實(shí)施中，取老鸛草干燥，粉碎成粗粉；取老鸛草粗粉，向老鸛草粗粉中加入蒸餾水，老鸛草粗粉與蒸餾水的重量比為1：22，浸泡46min，98℃超聲提取97min，過(guò)濾，濾液濃縮至比重為1.20的浸膏，加入乙醇使乙醇含量達(dá)到體積濃度為79％，4℃靜置15h，6000r/min離心45min，得上清液A和離心沉淀B，上清液A備用，離心沉淀B冷凍干燥，得老鸛草粗多糖粉末C，取老鸛草粗多糖粉末C加入10倍重量的蒸餾水使溶解得老鸛草粗多糖溶液D，向老鸛草粗多糖溶液D中加入其1％重量的酵母，于室溫下轉(zhuǎn)速195r/min搖床培養(yǎng)發(fā)酵，發(fā)酵時(shí)間74h，過(guò)濾，于濾液中加入Ca(OH)2至濾液pH值為8.1，88℃水浴加熱66min同時(shí)通入CO2氣體，放至室溫，過(guò)濾，濾液濃縮至比重為1.20的浸膏，加入乙醇使乙醇含量達(dá)到體積濃度為80％，4℃靜置12h，6000r/min離心35min，取下層沉淀冷凍干燥即得老鸛草多糖E；取上清液A減壓回收乙醇濃縮至比重為1.21的浸膏，乙醚萃取，收集下層萃取液，50℃揮去乙醚，依次通過(guò)AB-8型大孔吸附樹(shù)脂柱、Sephadex LH-20凝膠樹(shù)脂柱，得洗脫液，洗脫液減壓濃縮，冷凍干燥得老鸛草低聚糖F。
實(shí)施例2
本發(fā)明還可是取老鸛草干燥，粉碎成粗粉；取老鸛草粗粉，向老鸛草粗粉中加入蒸餾水，老鸛草粗粉與蒸餾水的重量比為1：11，浸泡23min，84℃超聲提取41min，過(guò)濾，濾液濃縮至比重為1.11的浸膏，加入乙醇使乙醇含量達(dá)到體積濃度為66％，4℃靜置8h，6000r/min離心45min，得上清液A和離心沉淀B，上清液A備用，離心沉淀B冷凍干燥，得老鸛草粗多糖粉末C，取老鸛草粗多糖粉末C加入10倍重量的蒸餾水使溶解得老鸛草粗多糖溶液D，向老鸛草粗多糖溶液D中加入其1％重量的酵母，于室溫下轉(zhuǎn)速150r/min搖床培養(yǎng)發(fā)酵，發(fā)酵時(shí)間26h，過(guò)濾，于濾液中加入Ca(OH)2至濾液pH值為8.1，88℃水浴加熱66min同時(shí)通入CO2氣體，放至室溫，過(guò)濾，濾液濃縮至比重為1.11的浸膏，加入乙醇使乙醇含量達(dá)到體積濃度為80％，4℃靜置12h，6000r/min離心35min，取下層沉淀冷凍干燥即得老鸛草多糖E；取上清液A減壓回收乙醇濃縮至比重為1.11的浸膏，乙醚萃取，收集下層萃取液，50℃揮去乙醚，依次通過(guò)為AB-8型大孔吸附樹(shù)脂柱、Sephadex LH-20凝膠樹(shù)脂柱，得洗脫液，洗脫液減壓濃縮，冷凍干燥得老鸛草低聚糖F。
實(shí)施例3
取老鸛草干燥，粉碎成粗粉；取老鸛草粗粉，向老鸛草粗粉中加入蒸餾水，老鸛草粗粉與蒸餾水的重量比為1：16，浸泡35min，91℃超聲提取69min，過(guò)濾，濾液濃縮至比重為1.15的浸膏，加入乙醇使乙醇含量達(dá)到體積濃度為72.5％，4℃靜置11h，6000r/min離心45min，得上清液A和離心沉淀B，上清液A備用，離心沉淀B冷凍干燥，得老鸛草粗多糖粉末C，取老鸛草粗多糖粉末C加入10倍重量的蒸餾水使溶解得老鸛草粗多糖溶液D，向老鸛草粗多糖溶液D中加入其1％重量的酵母，于室溫下轉(zhuǎn)速173r/min搖床培養(yǎng)發(fā)酵，發(fā)酵時(shí)間50h，過(guò)濾，于濾液中加入Ca(OH)2至濾液pH值為8.1，88℃水浴加熱66min同時(shí)通入CO2氣體，放至室溫，過(guò)濾，濾液濃縮至比重為1.15的浸膏，加入乙醇使乙醇含量達(dá)到體積濃度為80％，4℃靜置12h，6000r/min離心35min，取下層沉淀冷凍干燥即得老鸛草多糖E；取上清液A減壓回收乙醇濃縮至比重為1.16的浸膏，乙醚萃取，收集下層萃取液，50℃揮去乙醚，依次通過(guò)AB-8型大孔吸附樹(shù)脂柱、Sephadex LH-20凝膠樹(shù)脂柱，得洗脫液，洗脫液減壓濃縮，冷凍干燥得老鸛草低聚糖F。
實(shí)施例4
取老鸛草干燥，粉碎成粗粉；取老鸛草粗粉11kg，向老鸛草粗粉中加入蒸餾水121kg，浸泡46min，91℃超聲提取97min，過(guò)濾，濾液濃縮至比重為1.11的浸膏，加入乙醇使乙醇含量達(dá)到體積濃度為66％，4℃靜置11h，6000r/min離心45min，得上清液A和離心沉淀B，上清液A備用，離心沉淀B冷凍干燥，得老鸛草粗多糖粉末C，取老鸛草粗多糖粉末C加入10倍重量的蒸餾水使溶解得老鸛草粗多糖溶液D，向老鸛草粗多糖溶液D中加入其1％重量的酵母，于室溫下轉(zhuǎn)速173r/min搖床培養(yǎng)發(fā)酵，發(fā)酵時(shí)間26h，過(guò)濾，于濾液中加入Ca(OH)2至濾液pH值為8.1，88℃水浴加熱66min同時(shí)通入CO2氣體，放至室溫，過(guò)濾，濾液濃縮至比重為1.16的浸膏，加入乙醇使乙醇含量達(dá)到體積濃度為80％，4℃靜置12h，6000r/min離心35min，取下層沉淀冷凍干燥即得老鸛草多糖E；取上清液A減壓回收乙醇濃縮至比重為1.21的浸膏，乙醚萃取，收集下層萃取液，50℃揮去乙醚，依次通過(guò)AB-8型大孔吸附樹(shù)脂柱、Sephadex LH-20凝膠樹(shù)脂柱，得洗脫液，洗脫液減壓濃縮，冷凍干燥得老鸛草低聚糖F。
上述制備的老鸛草多糖及老鸛草低聚糖經(jīng)蒽酮-硫酸法(常規(guī)測(cè)定方法，是公知技術(shù))測(cè)定，其糖含量均不低于82％。經(jīng)HPGPC法測(cè)定，老鸛草低聚糖的分子量在300-2000之間。
上述僅是給出的幾個(gè)實(shí)施例，在研制中，發(fā)明人經(jīng)反復(fù)多次實(shí)驗(yàn)均取得了相同或相近似的結(jié)果，制備方法科學(xué)合理有效，原料豐富，價(jià)格低廉，產(chǎn)品應(yīng)用廣泛，具有應(yīng)用價(jià)值，對(duì)老鸛草多糖及低聚糖進(jìn)行反復(fù)試驗(yàn)，均取得了滿(mǎn)意的技術(shù)效果，有關(guān)試驗(yàn)資料如下：
老鸛草多糖的免疫活性實(shí)驗(yàn)
一.試驗(yàn)材料
1.試驗(yàn)動(dòng)物：18.5-23g昆明種清潔劑小鼠，雌雄各半。由鄭州大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。
2.實(shí)驗(yàn)試藥：本發(fā)明方法制備的老鸛草多糖含量為86.71％，瑞士染液，香菇多糖(湖北廣仁藥業(yè)有限公司)，環(huán)磷酰胺(江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司)，枸櫞酸鈉，氯化鈉，酒石酸鉀鈉，葡萄糖，磷酸氫二鉀，磷酸二氫鉀，酚紅等。
二.試驗(yàn)方法
1.老鸛草多糖對(duì)正常小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響
取小鼠50只，體重18.5-23g，雌雄各半，隨機(jī)均勻分成5組。分別灌服小、中、大劑量的老鸛草多糖水溶液(10mg/ml，20mg/ml，40mg/ml；0.2ml/10g)，香菇多糖混懸液(5mg/ml；0.2ml/10g)及同體積的生理鹽水(0.2ml/10g)。每天給藥1次，連續(xù)給藥7天。于給藥第7天早上各組小鼠均腹腔注射5％雞紅細(xì)胞生理鹽水混懸液0.5ml。于第7天灌胃給藥2h后注射5％雞紅細(xì)胞，4h后脫頸椎處死，腹腔注入漢氏液2.5ml，輕揉小鼠腹部，然后剪開(kāi)腹部皮膚，在腹膜上剪一小孔，用吸管吸取腹腔液2ml置于試管中，混勻；吸取少許腹腔液滴于載玻片上，液點(diǎn)大小約為1.5cm×2cm。將載玻片放在鋪有濕紗布的糖瓷盤(pán)中，37℃孵育30min，生理鹽水沖去附著的細(xì)胞，瑞氏染液染色，自來(lái)水沖洗晾干；顯微鏡下觀(guān)察小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬情況，并計(jì)算吞噬百分率和吞噬指數(shù)。
表1腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能結(jié)果
**表示與空白組比P＜0.01，*表示與空白組比P＜0.05
從表1可以看出，與空白對(duì)照組比，小劑量組可顯著提高小鼠腹腔巨噬細(xì)胞對(duì)雞紅細(xì)胞的吞噬百分率，可提高腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)(P＜0.05)；大、中劑量組及香菇多糖組均能極顯著提高吞噬百分率及吞噬指數(shù)(P＜0.01)，其中尤以中劑量老鸛草多糖組作用為最強(qiáng)。
2.老鸛草多糖對(duì)正常小鼠溶血素形成的影響
取小鼠50只，體重18.5-23g，雌雄各半，隨機(jī)分為5組。分別灌服小、中、大劑量的老鸛草多糖水溶液(10mg/ml，20mg/ml，40mg/ml；0.2ml/10g)，香菇多糖混懸液(5mg/ml；0.2ml/10g)及同體積的生理鹽水(0.2ml/10g)。每天給藥1次，連續(xù)給藥7天。同時(shí)，給藥第1天各組小鼠均腹腔注射5％雞紅細(xì)胞生理鹽水混懸液0.2ml/只，進(jìn)行免疫，于第7天給藥后2h，小鼠眼眶取血，離心，分離血清。用生理鹽水1∶100稀釋后，取1ml稀釋液與5％雞紅細(xì)胞混懸液0.5ml、10％補(bǔ)體0.5ml(豚鼠血清，用雞紅細(xì)胞預(yù)先飽和6h)混勻，37℃孵育30min，冰水中終止反應(yīng)。另設(shè)不加補(bǔ)體的空白管作對(duì)照，吸取各管上清液于UV-T1810型分光光度計(jì)540nm處比色，測(cè)定各組溶血素形成情況。
3.老鸛草多糖對(duì)正常小鼠溶血空斑形成的影響
取小鼠50只，體重18.5-23g，雌雄各半，隨機(jī)均勻分為5組。分別灌服小、中、大劑量的老鸛草多糖水溶液(10mg/ml，20mg/ml，40mg/ml；0.2ml/10g)，香菇多糖混懸液(5mg/ml；0.2ml/10g)及同體積的生理鹽水(0.2ml/10g)。每天給藥1次，連續(xù)給藥7天。同時(shí)，給藥第1天各組小鼠均腹腔注射5％雞紅細(xì)胞生理鹽水混懸液0.2ml/只，進(jìn)行免疫，于第7天給藥后2h，脫頸椎處死并解剖小鼠，取出脾臟，同組兩個(gè)小鼠脾臟為一例；勻漿，并調(diào)整脾細(xì)胞混懸液中脾細(xì)胞數(shù)為5×106個(gè)/ml。取脾細(xì)胞混懸液1.0ml，與0.2％雞紅細(xì)胞混懸液0.5ml和1∶10的豚鼠血清0.5ml混勻。另設(shè)不加補(bǔ)體的空白管，37℃孵育1h，離心，取上清液于UV-T1810型分光光度計(jì)413nm處比色，測(cè)各組溶血空斑形成情況。
表2溶血素、溶血空斑形成結(jié)果
**表示與空白組比P＜0.01，*表示與空白組比P＜0.05
從表2可以看出，與空白對(duì)照組比，小劑量組溶血空斑有顯著升高(P＜0.05)，大、中劑量組和香菇多糖組溶血素和溶血空斑均極顯著提高(P＜0.01)。其中尤以中劑量老鸛草多糖組作用為最優(yōu)。
4.老鸛草多糖對(duì)環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)的免疫抑制小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響
取小鼠60只，體重18.5-23g，雌雄各半，隨機(jī)均勻分為6組。除空白對(duì)照組外，其余各組均建立環(huán)磷酰胺致免疫抑制模型共5組(劑量為8mg/ml；第1、2、3天連續(xù)腹腔注射)，模型組建立完成后，分別灌服老鸛草多糖水溶液(5mg/ml，10mg/ml，20mg/ml；0.2ml/10g)，香菇多糖混懸液(5mg/ml，0.2ml/10g)及同體積的生理鹽水(0.2ml/10g)。每天給藥1次，連續(xù)給藥7天。于給藥最后一天早上各組小鼠均腹腔注射5％雞紅細(xì)胞生理鹽水混懸液0.5ml，灌胃給藥后2h，給雞紅細(xì)胞后4h，脫頸椎處死小鼠。腹腔注入漢氏液2.5ml，輕揉小鼠腹部，然后剪開(kāi)小鼠腹部皮膚，在腹膜上剪一小孔，用移液槍吸取腹腔液2ml置于試管中，混勻；吸取少許腹腔液滴于載玻片上，液點(diǎn)大小約為1.5cm×2cm。將載玻片放在鋪有濕紗布的糖瓷盤(pán)中，37℃孵育30min，生理鹽水沖去附著的細(xì)胞，瑞氏染液染色，自來(lái)水沖洗晾干，顯微鏡下觀(guān)察小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬情況，并計(jì)算吞噬百分率和吞噬指數(shù)。
表3腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能結(jié)果
**表示與模型組比P＜0.01
從表3可以看出，與空白組相比，模型組小鼠腹腔巨噬細(xì)胞對(duì)雞紅細(xì)胞的吞噬指數(shù)和吞噬百分率顯著降低(P＜0.01)，說(shuō)明造模成功。與模型組相比，大、中、小劑量多糖組和香菇多糖組可顯著提高小鼠腹腔巨噬細(xì)胞對(duì)雞紅細(xì)胞的吞噬指數(shù)和吞噬百分率(P＜0.01)，尤以中劑量組效果最好。
5.老鸛草多糖對(duì)環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)的免疫抑制小鼠溶血素形成的影響
取小鼠60只，體重18.5-23g，雌雄各半，隨機(jī)均勻分為6組。除空白對(duì)照組外，其余各組均建立環(huán)磷酰胺致免疫抑制模型共5組(劑量為8mg/ml；第1、2、3天連續(xù)腹腔注射)；模型組建立完成后，各組小鼠(含空白組)均腹腔注射5％雞紅細(xì)胞生理鹽水混懸液0.2ml/只，進(jìn)行免疫；并開(kāi)始分別灌服老鸛草多糖水溶液(5mg/ml，10mg/ml，20mg/ml；0.2ml/10g)、香菇多糖混懸液(5mg/ml，0.2ml/10g)及同體積的生理鹽水(0.2ml/10g)，每天給藥1次，連續(xù)給藥7天。最后1次給藥后2h，小鼠眼眶取血，離心，分離血清；以生理鹽水1∶100稀釋后，取1ml稀釋液與5％雞紅細(xì)胞混懸液0.5ml、10％補(bǔ)體0.5ml(豚鼠血清，用雞紅細(xì)胞預(yù)先飽和6h)混勻；37℃孵育30min，冰水中終止反應(yīng)，另設(shè)不加補(bǔ)體的空白管作對(duì)照；吸取各管上清液于UV-T1810型分光光度計(jì)540nm處比色，測(cè)定各組溶血素形成情況，結(jié)果見(jiàn)表4。
6.老鸛草多糖對(duì)環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)的免疫抑制小鼠溶血空斑形成的影響
取小鼠60只，體重18.5-23g，雌雄各半，隨機(jī)均勻分為6組。除空白對(duì)照組外，其余各組均建立環(huán)磷酰胺致免疫抑制模型共5組(劑量為8mg/ml；第1、2、3天連續(xù)腹腔注射)；模型組建立完成后，各組小鼠(含空白組)均腹腔注射5％雞紅細(xì)胞生理鹽水混懸液0.2ml/只，進(jìn)行免疫；并開(kāi)始分別灌服老鸛草多糖水溶液(5mg/ml，10mg/ml，20mg/ml；0.2ml/10g)、香菇多糖混懸液(5mg/ml，0.2ml/10g)及同體積的生理鹽水(0.2ml/10g)，每天給藥1次，連續(xù)給藥7天。于最后1次給藥后2h，脫頸椎處死并解剖小鼠，取出脾臟，同組中兩個(gè)小鼠脾臟為一例，勻漿，并調(diào)整脾細(xì)胞混懸液中脾細(xì)胞數(shù)為5×106個(gè)/ml。取脾細(xì)胞混懸液1.0ml，與0.2％雞紅細(xì)胞混懸液0.5ml和1∶10的豚鼠血清0.5ml混勻。另設(shè)不加補(bǔ)體的空白管，37℃孵育1h，離心，取上清液于UV-T1810型分光光度計(jì)413nm處比色，測(cè)各組溶血空斑形成情況，結(jié)果見(jiàn)表4。
表4溶血素、溶血空斑形成結(jié)果
**表示與模型組比P＜0.01
從上表可看出，與空白對(duì)照組比，模型組溶血素和溶血空斑均顯著降低(P＜0.01)，說(shuō)明造免疫抑制模型成功。與模型組比，各個(gè)劑量老鸛草多糖組及香菇多糖組均可顯著促進(jìn)小鼠溶血素和溶血空斑的形成(P＜0.01)。其中，尤以0.2g/kg劑量老鸛草多糖組為最佳。
老鸛草低聚糖抗疲勞作用的實(shí)驗(yàn)：
一.試驗(yàn)材料
1.試驗(yàn)動(dòng)物：18.5-23g昆明種清潔劑小鼠，雌雄各半。由鄭州大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。
2.實(shí)驗(yàn)試藥：本發(fā)明方法制備的老鸛草低聚糖含量為89.35％，超氧化物歧化酶(SOD)測(cè)定試劑盒、丙二醛(MDA)測(cè)定試劑盒等。
二.試驗(yàn)方法
取體重18.5-23g的昆明種小鼠40只，按體重隨機(jī)分為4組：正常對(duì)照組、低(200mg/kg)、中(500mg/kg)、高劑量(800mg/kg)給藥組；每天灌胃給藥一次，正常對(duì)照組以等量的生理鹽水灌胃，連續(xù)給藥30天，于末次給藥后30min，將小鼠放于游泳箱中，水溫為25±5℃，鼠尾根部負(fù)重5％體重的鉛皮，記錄小鼠自游泳開(kāi)始到頭部沒(méi)入水中8s不出水面的時(shí)間，即小鼠的負(fù)重游泳時(shí)間。小鼠在游泳結(jié)束恢復(fù)24h后，每組小鼠分別眼眶取血，分離血清，用超氧化物歧化酶(SOD)測(cè)定試劑盒、丙二醛(MDA)測(cè)定試劑盒分別測(cè)定小鼠血清中SOD，MDA值，見(jiàn)表5。
表5老鸛草低聚糖對(duì)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間，血清中SOD及MDA的影響
*表示與空白組相比P<0.05；**表示與空白組相比P<0.01
從表5可以看出，老鸛草低聚糖高、低劑量均可顯著提高機(jī)體SOD活力，降低MDA含量(P<0.05)，中劑量組可極顯著提高機(jī)體SOD活力，降低MDA含量(P<0.01)，從而表現(xiàn)出老鸛草低聚糖有較好的抗疲勞作用。
以上所述的實(shí)施例，僅是本發(fā)明的較佳實(shí)施例，并非對(duì)本發(fā)明做任何形式上的限制，雖然本發(fā)明已以較佳實(shí)施例揭露如上，但并不是對(duì)本發(fā)明進(jìn)行限定，任何熟悉本專(zhuān)業(yè)的技術(shù)人員，在不脫離本發(fā)明技術(shù)方案范圍內(nèi)，當(dāng)可利用上述揭示的技術(shù)內(nèi)容做出些許改動(dòng)或修飾為等同變化的等效實(shí)施例，但凡是未脫離本發(fā)明技術(shù)方案的內(nèi)容，依據(jù)本發(fā)明的技術(shù)實(shí)質(zhì)對(duì)以上實(shí)施例所做的任何簡(jiǎn)單修改，等同變化與修飾，均屬本發(fā)明技術(shù)方案的范圍內(nèi)。