技術(shù)特征：

1.一種靶向大鼠磷脂酶Cγ2干擾重組腺病毒，其特征在于，靶向大鼠磷脂酶Cγ2干擾重組腺病毒是將靶向大鼠磷脂酶Cγ2的寡核苷酸shRNA插入含有腺病毒基因組的骨架質(zhì)粒pHBAd-BHG中得到的，所述寡核苷酸shRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的靶向大鼠磷脂酶Cγ2干擾重組腺病毒構(gòu)建方法，其特征在于，具體包括以下步驟：

步驟1，單鏈shRNA寡核苷酸的合成

步驟1.1，分別合成單鏈shRNA寡核苷酸的F序列和R序列；

其中，F(xiàn)序列為：

AATTCGCCAGCTTCGTGAGAAGATCATTCAAGAGATGATCTTCTCACGAAGCTGGCTTTTTTG；

R序列為：

GATCCAAAAAAGCCAGCTTCGTGAGAAGATCATCTCTTGAATGATCTTCTCACGAAGCTGGCG；

步驟2，重組穿梭質(zhì)粒的構(gòu)建和鑒定

步驟2.1，用EcoR I和BamH I雙酶切穿梭載體pHBAd-U6-GFP，凝膠回收線性化的、長(zhǎng)序列片段的空載體；

步驟2.2，將合成的F序列、R序列分別用1×TE稀釋成濃度為1μg/1μL，得到F溶液和R溶液，然后將F溶液和R溶液退火，形成退火產(chǎn)物雙鏈F/R；

步驟2.3，將步驟2.2中的雙鏈F/R與步驟2.1中長(zhǎng)序列片段的空載體連接，得到重組質(zhì)粒pHBAd-PLCγ2shRNA；

步驟3，靶向大鼠磷脂酶Cγ2干擾重組腺病毒的構(gòu)建

步驟3.1，將HEK293細(xì)胞接種于含10％FBS的DMEM完全培養(yǎng)液中，于5％CO₂、37℃環(huán)境中培養(yǎng)，當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到70-80％時(shí)，重組質(zhì)粒pHBAd-PLCγ2shRNA和骨架質(zhì)粒pHBAd-BHG經(jīng)轉(zhuǎn)染試劑LipofiterTM介導(dǎo)，共轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞，得到細(xì)胞混合物；

步驟2.2，將所述細(xì)胞混合物接種于含10％FBS的DMEM完全培養(yǎng)液中，按“8”字形晃動(dòng)，5％CO₂、37℃條件下培養(yǎng)，6h后更換新鮮的DMEM完全培養(yǎng)液，觀察細(xì)胞出毒情況，當(dāng)細(xì)胞漸成葡萄狀并出現(xiàn)噬斑時(shí)，將從培養(yǎng)皿底部脫落的細(xì)胞收集至離心管中，離心管交替置于液氮和37℃水浴條件下凍融，然后離心，收集上清毒液，即得到Ad-PLCγ2shRNA第1代毒種P1；

步驟2.3，用第一代毒種P1感染密度為90％的HEK293細(xì)胞，收集第二代毒種P2；

步驟2.4，用第二代毒種P2感染密度為90％的HEK293細(xì)胞，收集第三代毒種P3，所述第三代毒種P3即為靶向大鼠磷脂酶Cγ2干擾重組腺病毒。

3.一種如權(quán)利要求1所述的靶向大鼠磷脂酶Cγ2干擾重組腺病毒在抑制肝細(xì)胞增殖中的應(yīng)用。