1.一種組合物,其包含:
滲透壓維持劑 0.5~1.0wt%,
保濕劑 5~40wt%(例如10~30wt%),
余量為pH緩沖劑,
該組合物的pH值為6.5~7.5,
其中:所述滲透壓維持劑選自:氯化鈉和氯化鉀,所述保濕劑選自:海藻糖、透明質(zhì)酸、甘油、聚乙二醇和葡萄糖,所述pH緩沖劑選自:PBS緩沖液和Tris-HCl緩沖液。
2.權(quán)利要求1所述的組合物,其包含:
氯化鈉或氯化鉀 0.5~1.0wt%,
甘油 3~8wt%,
海藻糖 15~22wt%,
余量為Tris-HCl緩沖液。
3.權(quán)利要求1所述的組合物,其包含:
氯化鈉或氯化鉀 0.5~1.0wt%,
透明質(zhì)酸 3~8wt%,
甘油 3~8wt%,
聚乙二醇 3~8wt%,
余量為Tris-HCl緩沖液。
4.權(quán)利要求1所述的組合物,其包含:
氯化鈉或氯化鉀 0.5~1.0wt%,
葡萄糖 8~12wt%,
透明質(zhì)酸 0.5~1.2wt%,
海藻糖 3~8wt%,
余量為PBS緩沖液。
5.一種誘變原生質(zhì)體的方法,其包括:使用權(quán)利要求1至4任一項(xiàng)所述的組合物作為原生質(zhì)體的滲透壓穩(wěn)定劑。
6.權(quán)利要求5所述的誘變原生質(zhì)體的方法,其包括:
(1)提供原生質(zhì)體懸浮液;
(2)將原生質(zhì)體懸浮液置于權(quán)利要求1至4任一項(xiàng)所述的組合物中,得到待誘變原生質(zhì)體樣品;
(3)對步驟(2)得到的待誘變原生質(zhì)體樣品進(jìn)行誘變。
7.權(quán)利要求6所述的誘變原生質(zhì)體的方法,該方法采用常壓室溫等離子體對原生質(zhì)體進(jìn)行誘變。
8.權(quán)利要求7所述的誘變原生質(zhì)體的方法,包括以下步驟:
a)用復(fù)合酶對細(xì)胞進(jìn)行破壁處理,得到原生質(zhì)體懸浮液;
b)將原生質(zhì)體懸浮液置于所述的組合物中,調(diào)整原生質(zhì)體濃度為3×106~3×108CFU/mL,得到待誘變原生質(zhì)體樣品;
c)采用常壓室溫等離子體育種儀對待誘變原生質(zhì)體樣品進(jìn)行誘變,載樣量為10~30μL,作用功率為100~200w,作用時(shí)間為15~50秒。
9.權(quán)利要求1至4任一項(xiàng)所述的組合物作為原生質(zhì)體的滲透壓穩(wěn)定劑的用途。
10.權(quán)利要求1至4任一項(xiàng)所述的組合物在原生質(zhì)體ARTP誘變中的應(yīng)用。