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稻瘟菌效應(yīng)蛋白基因過表達(dá)菌株降低對(duì)pH敏感性的方法與流程

文檔序號(hào):12411258閱讀:來源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種稻瘟菌效應(yīng)蛋白基因過表達(dá)菌株降低對(duì)pH敏感性的方法,其特征在于,包括以下步驟:

(1)分別將稻瘟病菌效應(yīng)蛋白過表達(dá)菌株接種于pH5和pH8的蕃茄燕麥培養(yǎng)基中培養(yǎng)10天;

(2)用滅菌棉簽將培養(yǎng)基表面長(zhǎng)滿的菌絲刮掉,再將刮掉菌絲的培養(yǎng)基放置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行12小時(shí)黑暗12小時(shí)光照處理3天;

(3)用滅菌水清洗培養(yǎng)基表面的孢子,取10μl孢子懸浮液于載玻片上于顯微鏡下進(jìn)行孢子計(jì)數(shù),統(tǒng)計(jì)產(chǎn)孢量;

(4)分別用pH5和pH8的緩沖液清洗孢子,將孢子懸浮液置于洋蔥表皮于28℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),于6h時(shí)于顯微鏡下觀察孢子萌發(fā)率及附著胞形成率。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的稻瘟菌效應(yīng)蛋白基因過表達(dá)菌株降低對(duì)pH敏感性的方法,其特征在于:所述步驟(4)中用pH5和pH8的緩沖液清洗孢子處的孢子是在未經(jīng)調(diào)整pH的蕃茄燕麥培養(yǎng)基上培養(yǎng)的孢子。

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