1.一種從米糠中提取活性蛋白的方法,其特征在于:所述方法包括以下步驟:
1)預(yù)處理:在米糠中加入異丙醇,攪拌,加入正己烷浸提,調(diào)漿,倒入膠體磨,離心,取米糠粕真空脫溶,得脫脂米糠粕;
2)酶解和提?。涸诿卓菲芍屑诱麴s水,微波提取,調(diào)pH,加入米糠粨1~2%重量份的復(fù)合酶,攪拌,滅酶,離心取上清液;
3)分離純化:超濾,凝膠層析,冷凍干燥,得活性蛋白。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從米糠中提取活性蛋白的方法,其特征在于:所述步驟1中的米糠與異丙醇的體積比為1:2.5~6.3,米糠與正己烷的體積比為1:2.7~6.2;
所述步驟2)中蒸餾水中含有0.1~0.1%的苯氧基乙醇和0.01~0.1%的對(duì)氨基苯甲酸鹽。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從米糠中提取活性蛋白的方法,其特征在于:所述步驟1中調(diào)漿后倒入膠體磨8~22min,于3200~4800r/min離心8~25min,得米糠粕和混合油,取米糠粕,真空脫溶的真空度為0.05~0.2MPa,溫度為40~60℃。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從米糠中提取活性蛋白的方法,其特征在于:所述步驟2中加入米糠重量30~45倍的蒸餾水,微波提取的微波功率為350~450w,在45~55℃下微波提取2~3次,每次30~50min。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從米糠中提取活性蛋白的方法,其特征在于:所述步驟2中調(diào)pH至5.8~6.3,所述復(fù)合酶由纖維素酶2~5份、糖化酶2~5份、木瓜蛋白酶2~5份、乙醛脫氫酶0.2~0.7份、單寧酶0.6~1份、單甘脂 0.1~0.3份,攪拌酶解時(shí)間為50~80min。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從米糠中提取活性蛋白的方法,其特征在于:所述步驟3超濾的濾膜截留分子量為8000~14000Da,超濾壓力為4×104Pa。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從米糠中提取活性蛋白的方法,其特征在于:所述步驟3中凝膠層析的凝膠懸液由凝膠、磷酸氫二鈉和減鹽緩沖液組成,凝膠與減鹽緩沖液的質(zhì)量比為1:0.3:1~3,所述堿鹽緩沖液為體積比例為1:0.8~3.6混合的0.02~0.4mol/L NaOH溶液和含有0.05~0.8mol/L NaCl的PBS磷酸鹽緩沖溶液。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從米糠中提取活性蛋白的方法,其特征在于:所述步驟3中凝膠層析后在洗脫液中加入碘顏色反應(yīng)和茚三酮反應(yīng),收集有顯色反應(yīng)的洗脫液。