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用于鑒定倉儲(chǔ)粉盜的引物對(duì)、試劑盒及方法與流程

文檔序號(hào):12056618閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.用于鑒定倉儲(chǔ)粉盜的引物對(duì),其特征在于,為下列引物對(duì)中的任一種:

由SEQ ID No:1和SEQ ID No:2所示的序列組成的引物對(duì);

由SEQ ID No:3和SEQ ID No:4所示的序列組成的引物對(duì);

由SEQ ID No:5和SEQ ID No:6所示的序列組成的引物對(duì)。

2.一種鑒定倉儲(chǔ)粉盜的試劑盒,其特征在于,包括權(quán)利要求1所述的引物對(duì)中的至少一種。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的鑒定倉儲(chǔ)粉盜的試劑盒,其特征在于,組成每個(gè)引物對(duì)的兩條單鏈DNA的摩爾數(shù)相等。

4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的鑒定倉儲(chǔ)粉盜的試劑盒,其特征在于,包括:分別單獨(dú)包裝的SEQ ID No:1和SEQ ID No:2所示的序列的單鏈DNA或分別單獨(dú)包裝的SEQ ID No:3和SEQ ID No:4所示的序列的單鏈DNA或分別單獨(dú)包裝的SEQ ID No:5和SEQ ID No:6所示的序列的單鏈DNA;

還包括下述物質(zhì)中的至少一種:PCR反應(yīng)緩沖液、DNA聚合酶、4種dNTP。

5.一種鑒定倉儲(chǔ)粉盜的方法,其特征在于,包括采用權(quán)利要求1或權(quán)利要求2中的引物對(duì)進(jìn)行PCR擴(kuò)增步驟。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的鑒定倉儲(chǔ)粉盜的方法,其特征在于,包括步驟:

S1:以待測(cè)倉儲(chǔ)粉盜的基因組DNA為模板,用權(quán)利要求1或權(quán)利要求2中的任一對(duì)引物對(duì)進(jìn)行PCR擴(kuò)增;

S2:檢測(cè)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物,根據(jù)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的大小確定待測(cè)倉儲(chǔ)粉盜類型。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的鑒定倉儲(chǔ)粉盜的方法,其特征在于,所述待測(cè)倉儲(chǔ)粉盜為下列中的至少一種:小粉盜、姬粉盜、亞扁粉盜。

8.根據(jù)權(quán)利要求6或7所述的鑒定倉儲(chǔ)粉盜的方法,其特征在于,步驟S2中,根據(jù)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的大小確定待測(cè)倉儲(chǔ)粉盜類型時(shí),

若PCR擴(kuò)增產(chǎn)物中含有272bp的片段,則待測(cè)倉儲(chǔ)粉盜為或候選為小粉盜;反之,則待測(cè)倉儲(chǔ)粉盜不為或候選不為小粉盜;

若PCR擴(kuò)增產(chǎn)物中含有285bp的片段,則待測(cè)倉儲(chǔ)粉盜為或候選為姬粉盜;反之,則待測(cè)倉儲(chǔ)粉盜不為或候選不為姬粉盜;

若PCR擴(kuò)增產(chǎn)物中含有427bp的片段,則待測(cè)倉儲(chǔ)粉盜為或候選為亞扁粉盜;反之,則待測(cè)倉儲(chǔ)粉盜不為或候選不為亞扁粉盜。

9.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的鑒定倉儲(chǔ)粉盜的方法,其特征在于,所述PCR擴(kuò)增的退火溫度為58℃。

10.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的鑒定倉儲(chǔ)粉盜的方法,其特征在于,組成每個(gè)引物對(duì)的兩條單鏈DNA在PCR反應(yīng)體系中的摩爾比均為1:1。

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