技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供一種鑒別豬流行性腹瀉病毒疫苗弱毒株和/或流行毒株一步法RT?PCR診斷試劑盒,包括20μL?RT?PCR一步法酶、250μL酶緩沖液、300μL?RNase?Free?dH2O、40μL混合引物、20μL陽性對照、20μL陰性對照、80μL?DL2000及25μL?6×Loading?Buffer;該試劑盒,與現(xiàn)有技術(shù)相比,具有操作簡單,反轉(zhuǎn)錄與PCR擴(kuò)增一步完成,減少了反應(yīng)時間,避免了模板RNA的降解,提高了檢測的敏感性等優(yōu)點(diǎn)。該引物對豬傳染性胃腸炎病毒、豬A群輪狀病毒、豬瘟病毒、豬繁殖與呼吸綜合癥病毒和豬捷申病毒的擴(kuò)增結(jié)果均為陰性,該方法最低能檢出1pg的豬流行性腹瀉病毒疫苗弱毒株和1pg的流行毒株模板,本試劑盒能廣泛應(yīng)用于基層檢測機(jī)構(gòu),對豬場流行性腹瀉病毒病的早期鑒別診斷、防控及凈化有重要意義。
技術(shù)研發(fā)人員:于新友;李峰;李天芝;沈志強(qiáng);吳家強(qiáng);孫文博
受保護(hù)的技術(shù)使用者:山東省濱州畜牧獸醫(yī)研究院
文檔號碼:201710018128
技術(shù)研發(fā)日:2017.01.11
技術(shù)公布日:2017.06.13