本發(fā)明屬于藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種雷替曲塞的溶劑化一水合物及其制備方法。

背景技術(shù)：

雷替曲塞，是由英國(guó)的royalmarsden醫(yī)院的癌癥研究署與zeneca共同合作發(fā)展的藥物。它是一種胸腺合成酶抑制劑，屬于葉酸的衍生物，用于治療晚期直腸結(jié)腸癌患者。1996年英國(guó)首次上市，商品名tomudex，其結(jié)構(gòu)式如下：

現(xiàn)階段，對(duì)于雷替曲塞晶型報(bào)道很少，更多的是集中在對(duì)于其制備以及精制方法的公開(kāi)報(bào)道。

原研專利us4992550中公開(kāi)了堿溶酸析的精制方法，最終制備得到了一種粉末狀固態(tài)物質(zhì)，為一水合物晶型，并提供了相關(guān)熔點(diǎn)數(shù)據(jù)180-184℃。目前工業(yè)上也大多采用這種堿溶酸析的精制方法，但是該制備方法容易在成品中導(dǎo)致氯化鈉的殘留。

專利cn201210260633.7、cn201110361869.5以及cn201410844732.9中均公開(kāi)一種將雷替曲塞溶于有機(jī)溶劑后再進(jìn)行洗滌的重結(jié)晶方法，其中，在cn201210260633.7中還提供了一種雷替曲塞的新晶型，但是上述精制方法所形成的中間體容易發(fā)粘或者形成凝膠，不利于進(jìn)行下一步過(guò)濾工藝。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種雷替曲塞的溶劑化物，其作為精制反應(yīng)的中間產(chǎn)物，為制備高純度的雷替曲塞提供了另一種路徑，由該精制方法制備的目標(biāo)產(chǎn)物，純度高、在長(zhǎng)期穩(wěn)定性方面得到了顯著的提升，提升了雷替曲塞的藥用標(biāo)準(zhǔn)，且該精制工藝簡(jiǎn)單，適合工業(yè)化大生產(chǎn)。

本發(fā)明提供一種雷替曲塞的溶劑化合物，其特征在于，結(jié)構(gòu)如下所示：

r＝c1-c10的烷基，其中優(yōu)選r為甲基、乙基中的一種；

優(yōu)選的雷替曲塞甲醇水合物ⅱ，其x射線粉末衍射圖在2θ值為7.9±0.2°、10.2±0.2°、12.9±0.2°、15.2±0.2°、17.0±0.2°°、20.4±0.2°、23.2±0.2°、24.00±0.2°、27.6±0.2°處具有特征峰。優(yōu)選地，2θ值在7.9±0.2°、10.2±0.2°、12.9±0.2°、15.2±0.2°、17.0±0.2°、18.9±0.2°、19.3±0.2°、20.4±0.2°、23.2±0.2°、24.00±0.2°、24.5±0.2°、25.3±0.2°、27.0±0.2°、27.6±0.2°、30.8±0.2°處具有特征峰。更優(yōu)選地，xrpd圖譜見(jiàn)圖1。

本發(fā)明提供的雷替曲塞甲醇水合物ⅱ其差示掃描量熱(dsc)曲線在48.2℃、98.2℃、178.5℃處有吸熱峰，其在48.2℃失去溶劑甲醇分子、98.2℃時(shí)失去溶劑水分子，178.5℃為溶化峰。dsc圖譜詳見(jiàn)圖2。

本發(fā)明經(jīng)卡爾費(fèi)休水分儀測(cè)得水分含量在3.46％，約含有一分子水。

本發(fā)明提供的雷替曲塞甲醇水合物ⅱ其熱重(tg)曲線在加熱至110℃時(shí)，具有9.5％的失重，由熱重?cái)?shù)據(jù)分析得一分子雷替曲塞中含有一個(gè)水分子和一個(gè)甲醇分子。熱重分析圖如圖3所示。

進(jìn)一步，本發(fā)明還提供雷替曲塞甲醇水合物ⅱ的單晶，證明其晶型ⅱ中一分子雷替曲塞含有一分子水與一分子甲醇，將其單個(gè)晶體接受單晶x射線衍射分析，x單晶衍射圖譜如圖4，其為單斜晶系，軸長(zhǎng)晶面夾角α＝90°，β＝91.12°，γ＝90°。

本發(fā)明還提供雷替曲塞乙醇水合物ⅲ，其x射線粉末衍射圖在2θ值為7.7±0.2°、10.1±0.2°、12.7±0.2°、14.9±0.2°、16.7±0.2°、19.0±0.2°、20.3±0.2°、22.9±0.2°、23.8±0.2°、24.0±0.2°、27.2±0.2°處具有特征峰。優(yōu)選地，2θ值在7.7±0.2°、8.1±0.2°、10.1±0.2°、10.4±0.2°、10.8±0.2°、12.7±0.2°、13.2±0.2°、14.9±0.2°、16.7±0.2°、17.5±0.2°、19.0±0.2°、19.8±0.2°、20.3±0.2°、22.9±0.2°、23.8±0.2°、24.0±0.2°、27.2±0.2°、30.6±0.2°、32.5±0.2°處具有特征峰。更優(yōu)選地，xrpd圖譜見(jiàn)圖5。

本發(fā)明提供雷替曲塞乙醇水合物ⅲ其差示掃描量熱法(dsc)曲線在50.0℃、98.2℃、173.5℃處有吸熱峰，在50.0℃失去溶劑乙醇分子、98.2℃時(shí)失去溶劑水分子，173.5℃為溶化峰。dsc圖譜見(jiàn)圖6。

本發(fā)明經(jīng)卡爾費(fèi)休水分儀測(cè)得水分含量在3.50％，約含有一分子水。

本發(fā)明提供的雷替曲塞乙醇水合物ⅲ其熱重(tg)曲線在加熱至140℃時(shí)，具有12.33％的失重，由熱重?cái)?shù)據(jù)分析得一分子雷替曲塞中含有一個(gè)水分子和一個(gè)乙醇分子。熱重分析圖如圖7所示。

另一方面，本發(fā)明還提供了雷替曲塞甲醇水合物ⅱ的制備方法，包括以下步驟：將雷替曲塞溶解于水和甲醇溶劑的混合體系中，加熱溶解，熱抽，緩慢降溫，加水析出，分離，干燥即得。其中，水和甲醇溶劑的體積比為1：1～1：6。

另一方面，本發(fā)明還提供了雷替曲塞乙醇水合物ⅲ的制備方法，包括以下步驟：將雷替曲塞溶解于水和乙醇溶劑的混合體系中，加熱溶解，熱抽，緩慢降溫，加水析出，分離，干燥即得。其中，水和乙醇溶劑的體積比為1：3～1：7。

由于雷替曲塞粉末難溶于水，一般情況下，在有機(jī)溶劑中加入水，會(huì)使粗品的溶解度降低，這也是對(duì)比文件cn201210260633.7、cn201110361869.5中均采用無(wú)水的醇類或醚類溶劑對(duì)雷替曲塞粗品進(jìn)行溶解的原因，但是發(fā)明人驚奇的發(fā)現(xiàn)在醇類溶劑中加入一定比例的水后反而會(huì)顯著提升雷替曲塞的溶解度，水與醇類溶劑的比例對(duì)是否能夠得到固態(tài)的中間體也至關(guān)重要。

以下通過(guò)試驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證水與醇的比例對(duì)雷替曲塞晶型的影響、以及對(duì)其溶解度的影響，該試驗(yàn)在除水與醇的比例有差異外，其它試驗(yàn)條件均相同的情況下開(kāi)展，具體試驗(yàn)結(jié)果詳見(jiàn)下表。

表1來(lái)自初步小規(guī)模結(jié)晶結(jié)果的概要

本發(fā)明還發(fā)現(xiàn)以雷替曲塞溶劑化物ⅱ、ⅲ作為中間體，制備雷替曲塞一水合物的方法，通過(guò)該方法基本可以制備純的雷替曲塞一水合物，且通過(guò)該方法制備的一水合物在長(zhǎng)期穩(wěn)定試驗(yàn)中，表現(xiàn)出了更穩(wěn)定的特性。

以下是小規(guī)模穩(wěn)定性試驗(yàn)的結(jié)果，雷替曲塞粗品可采用以n-[5-(n-甲胺基)-2-噻吩甲?；鵠-l-谷氨酸二乙酯和2-甲基-6-溴甲基-3-氫-喹唑啉-4-酮為原料，經(jīng)縮合、水解制備得雷替曲塞粗品或市場(chǎng)處購(gòu)買雷替曲塞粗品，純度約95％，水分3％。

批次1：按照us4992550(簡(jiǎn)稱‘550)中公開(kāi)的方法進(jìn)行制備雷替曲塞一水合物；

批次2：將雷替曲塞粗品，重結(jié)晶生成雷替曲塞甲醇水合物ⅱ，在40-60℃下真空干燥6-8h，得雷替曲塞一水合物。

批次3：將雷替曲塞粗品，重結(jié)晶生成雷替曲塞乙醇水合物ⅲ，在50-65℃下真空干燥6-8h，得雷替曲塞一水合物。

以下對(duì)‘550方法和本申請(qǐng)的方法進(jìn)行了比較分析，其具體區(qū)別詳見(jiàn)下表

表2精制方法比較分析

從上述表中可以看出，本精制方法與‘550中公開(kāi)的方法相比直接避免了nacl產(chǎn)生，而氯離子超標(biāo)是該品種生產(chǎn)質(zhì)量控制的難點(diǎn)。因此本發(fā)明操作簡(jiǎn)單，更加適合工業(yè)化操作。

與此同時(shí)，按照本申請(qǐng)制備的方法與‘550中公開(kāi)制備方法相比，得到的成品的穩(wěn)定性更高,以下通過(guò)穩(wěn)定性試驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證上述結(jié)論。

將上述3個(gè)批次的產(chǎn)品，在恒溫恒濕的箱中進(jìn)行30天的穩(wěn)定性考察，試驗(yàn)條件：60℃/92.5％相對(duì)濕度(rh)，在光照4000lx的條件下，放置10天，分別于0天，5天，10天，取樣，進(jìn)行產(chǎn)品純度以及雜質(zhì)檢驗(yàn)。

表3批次1-3的穩(wěn)定性試驗(yàn)的結(jié)果

由以上數(shù)據(jù)可知，以溶劑化物為中間體，直接干燥得精制品制備的雷替曲塞一水合物，在長(zhǎng)期穩(wěn)定性中更勝一籌。

附圖說(shuō)明

圖1雷替曲塞甲醇水合物ⅱ的xrpd圖譜；

圖2雷替曲塞甲醇水合物ⅱ的dsc圖譜；

圖3雷替曲塞甲醇水合物ⅱ的tga圖譜；

圖4雷替曲塞甲醇水合物ⅱ的單晶空間結(jié)構(gòu)圖；

圖5雷替曲塞乙醇水合物ⅲ的xrpd圖譜；

圖6雷替曲塞乙醇水合物ⅲ的dsc圖譜；

圖7雷替曲塞乙醇水合物ⅲ的tga圖譜；

圖8雷替曲塞無(wú)定型的xrpd圖譜；

圖9實(shí)施例9制備的雷替曲塞一水合物的hplc圖譜；

圖10實(shí)施例10制備的雷替曲塞一水合物的hplc圖譜。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合具體實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的技術(shù)方案，但并不限定本發(fā)明。

雷替曲塞粗品可采用以n-[5-(n-甲胺基)-2-噻吩甲酰基]-l-谷氨酸二乙酯和2-甲基-6-溴甲基-3-氫-喹唑啉-4-酮為原料，經(jīng)縮合、水解制備得雷替曲塞粗品或市場(chǎng)處購(gòu)買雷替曲塞粗品，純度約95.0％，水分3％。

本發(fā)明檢測(cè)藥物晶型結(jié)構(gòu)及其性能的儀器如下：

1.單晶結(jié)構(gòu)由x射線單晶衍射儀測(cè)定，制造商荷蘭enrafnoius&enrafnoius公司，儀器型號(hào)：cad4/pc。

2.粉末衍射儀是由制造廠商瑞士arl公司生產(chǎn)的，儀器型號(hào)：x'tra，cu-kα管電壓40kv，管電流30ma，掃描速度8°/min。

3.差示掃描量熱曲線和熱重曲線由美國(guó)perkinelmer公司生產(chǎn)，儀器型號(hào)：pyris1dsc，采用氮?dú)鈿夥眨郎厮俾?0℃/min。

4.卡爾費(fèi)休水分測(cè)試儀型號(hào)：mettlertoledov30volumetrickftitrator

實(shí)施例1制備雷替曲塞甲醇一水合物ⅱ的粉末

將1g雷替曲塞溶解于40ml甲醇與10ml的水的混合溶劑中，加熱至50℃溶清，熱抽，自然緩慢降溫至35℃，有晶體析出，緩慢滴加水110ml，低溫5℃析晶2h，過(guò)濾干燥即得晶型ⅱ的白綠色晶體粉末。用xrpd、dsc、tg對(duì)其進(jìn)行表征，結(jié)果如圖1～3。

實(shí)施例2制備雷替曲塞甲醇一水合物ⅱ的單晶

將1g雷替曲塞粉末溶于水：甲醇(體積比＝1：3)的混合溶劑中，通過(guò)0.45μm的濾紙將未溶解的固體過(guò)濾掉，將得到的飽和濾液用扎孔的薄膜封住，緩慢揮發(fā)至固體析出，過(guò)濾，真空干燥，收集固體即得晶型ⅱ。對(duì)單個(gè)晶體進(jìn)行x射線單晶衍射，結(jié)果如圖4。

實(shí)施例3制備雷替曲塞乙醇一水合物ⅲ的粉末

將1g雷替曲塞溶解于60ml乙醇與10ml的水的混合溶劑中，加熱至50℃溶清，熱抽，自然緩慢降溫至40℃，加入雷替曲塞乙醇一水合物ⅲ晶種，有晶體析出，自然降溫至35℃，緩慢滴加水170ml，低溫5℃析晶2h，過(guò)濾干燥即得晶型ⅲ的晶體粉末。

實(shí)施例4純有機(jī)溶劑中制備無(wú)定形

將1g雷替曲塞溶解于40ml甲醇中，加熱至50℃溶清，熱抽，自然緩慢降溫至35℃，有晶體析出，緩慢滴加水110ml，低溫5℃析晶2h，過(guò)濾干燥即得黃綠粉末，其xrd粉末衍射如圖8所示，為無(wú)定形。

實(shí)施例5按照cn201110001785.0中公開(kāi)的方法進(jìn)行制備

將0.20g(0.38mmol)n-[5-[n-[(3，4-二氫-2-甲基-4-氧代-6-喹唑啉基)甲基]-n-甲基氨基]-2-噻吩甲酰]-l-谷氨酸二乙酯溶于10ml乙醇和10ml丙酮中，加入3mol·l-1氫氧化鈉水溶液14ml，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)3h。減壓蒸餾蒸除乙醇和丙酮，用2mol·l-1鹽酸調(diào)ph＝4，過(guò)濾，得棕黃色固體，用甲醇-無(wú)水乙醚重結(jié)晶，得淺黃色固體雷替曲塞0.14g，收率80.1％。經(jīng)檢測(cè)其為無(wú)定形粉末。

實(shí)施例6按照cn201210260633.7中公開(kāi)的方法進(jìn)行制備

溫度為0℃，往480ml1nnaoh溶液中加入分次加入52.8gn-[5-[n-甲基-n-(2-甲基-4-氧代-3，4-二氫喹唑啉基-6-甲基)氨基]噻吩-2-甲酰基]-l-谷氨酸二乙酯(約0.1mol)純度在97％，繼續(xù)攪拌2小時(shí)，過(guò)濾。濾液用二氯甲烷(500ml×2)萃取掉有機(jī)相雜質(zhì)，再用乙酸乙酯(500ml×2)再萃取掉剩余的有機(jī)相雜質(zhì)，在攪拌下(0--5℃)水層用1n鹽酸調(diào)ph值至3.0左右，有大量固體析出。0℃下攪拌1小時(shí)，過(guò)濾，產(chǎn)物用純化水洗滌，洗至濾液無(wú)cl^-離子殘留用0.1nagno3測(cè)定)，盡量抽干，得雷替曲塞粗濕品138克，取該雷替曲塞粗產(chǎn)物13.8g加入到600ml無(wú)水甲醇中，室溫?cái)嚢?.5小時(shí)，試制品有少量不溶物，室溫下過(guò)濾，濾液28-35℃下濃縮析晶，置4℃冰箱中冷藏3小時(shí)，過(guò)濾，產(chǎn)物用少量純化水洗滌，室溫真空干燥10小時(shí)，得幾近白色的結(jié)晶固體3.2g，經(jīng)檢測(cè)其為無(wú)定型粉末。

實(shí)施例7按照cn201410844732.9中公開(kāi)的方法進(jìn)行制備

往反應(yīng)瓶中加入5g雷替曲塞粗品，再加入15ml甲醇，水浴加熱，回流攪拌，使其全部溶解，回流0.5h，將溶液降溫至40℃，于40℃保溫靜置1h，過(guò)濾去掉雜質(zhì)，再將溶液在4小時(shí)內(nèi)緩慢降溫至15℃，保溫7h，固體析出。經(jīng)檢測(cè)其為無(wú)定形粉末。

實(shí)施例8按照cn20110361869.5中公開(kāi)的方法進(jìn)行制備

粗品置于1000ml反應(yīng)瓶中，加入600ml甲醇加熱回流至澄清，過(guò)濾，濾液冷卻至5-10℃，慢慢加入約4200ml純化水?dāng)嚢栉鼍?，過(guò)濾，固體用純化水洗滌，得淡黃色固體。40℃真空干燥24小時(shí)，得淺黃色精品30.3g，摩爾收率85％。hplc純度99.8％。經(jīng)檢測(cè)其為無(wú)定形粉末。

實(shí)施例9對(duì)無(wú)定型、一水合物、溶劑化合物進(jìn)行長(zhǎng)期穩(wěn)定試驗(yàn)考察。

將雷替曲塞無(wú)定型、一水合物、溶劑化物ⅱ、ⅲ在恒溫恒濕箱中進(jìn)行6個(gè)月的穩(wěn)定性試驗(yàn)。試驗(yàn)條件為：25℃/75％相對(duì)濕度(rh)，分別于0、1、2、3、6個(gè)月取樣，進(jìn)行純度和雜質(zhì)檢驗(yàn)。

表4不同晶型穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果

從上表數(shù)據(jù)可知，雷替曲塞的甲醇水合物以及乙醇水合物在長(zhǎng)期穩(wěn)定性試驗(yàn)中，表現(xiàn)出了比無(wú)定型更高的穩(wěn)定性，并且其穩(wěn)定性并不劣于一水合物的穩(wěn)定性。

實(shí)施例10

取實(shí)施例1所得雷替曲塞甲醇水合物2g，在40-60℃下真空干燥6-8小時(shí)后即得雷替曲塞一水合物，收率為86％，其純度為99.94％，最大單雜0.04％，其hplc圖譜詳見(jiàn)圖9。

實(shí)施例11

取實(shí)施例3所得雷替曲塞乙醇水合物3g，在50-65℃下真空干燥6-8h后，即得雷替曲塞一水合物，收率為83％，純度為99.84％，最大單雜為0.06％，其hplc圖譜詳見(jiàn)圖10。