本發(fā)明具體涉及一種鹵素取代v-型吡啶-2，6-雙苯并咪唑鋅配合物合成方法及抗腫瘤活性檢測，屬于化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

腫瘤是威脅人類健康和生命安全的主要疾病，每年奪取許多人的生命，抗腫瘤藥物的研究與開發(fā)一直是化學(xué)家和藥物學(xué)家關(guān)注的熱點(diǎn)，尋找更高效、更高選擇性而毒副作用小的抗腫瘤藥物是抗腫瘤藥物研究開發(fā)的主要方向。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題克服現(xiàn)有的缺陷，提供一種鹵素取代v-型吡啶-2，6-雙苯并咪唑鋅配合物合成方法及抗腫瘤活性檢測，具有良好的體外抗腫瘤活性，可以制備成抗腫瘤的藥物，可以有效解決背景技術(shù)中的問題。

為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了如下的技術(shù)方案：

本發(fā)明提供一種鹵素取代v-型吡啶-2，6-雙苯并咪唑鋅配合物合成方法及抗腫瘤活性檢測，包括配體合成方法和配合物合成方法，所述配體合成方法為：(1)cl-bbp配體的合成：在三頸瓶中稱取多聚磷酸(10g)，再稱取2，6-吡啶二甲酸(3mmol，0.5g)，4-氯鄰苯二胺(6mmol，0.8555g)混合均勻后倒入三頸瓶中，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下180℃，反應(yīng)5h；反應(yīng)結(jié)束后趁熱倒入1l冰水中強(qiáng)力攪拌，完全溶解后加氨水調(diào)ph為9-11后抽濾，將濾渣洗至中性，晾干后得粗產(chǎn)品，用甲醇重結(jié)晶，產(chǎn)率：73％；(2)br-bbp配體的合成：在三頸瓶中稱取多聚磷酸(10g)，再稱取2，6-吡啶二甲酸(3mmol，0.5g)，4-溴鄰苯二胺(6mmol，1.1222g)混合均勻后倒入三頸瓶中，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下180℃，反應(yīng)5h；反應(yīng)結(jié)束后趁熱倒入1l冰水中強(qiáng)力攪拌，完全溶解后加氨水調(diào)ph為9-11后抽濾，將濾渣洗至中性，晾干后得粗產(chǎn)品，用乙醇重結(jié)晶，產(chǎn)率：78％。

優(yōu)選的，所述配合物合成方法為：(1)配合物zn(cl-bbp)cl2(1)的合成：稱取zncl2金屬鹽(0.0054g，0.04mmol)溶于4ml乙醇，加入有機(jī)配體cl-bbp(0.0038g，0.01mmol)的乙醇溶液，混合后放入玻璃樣品瓶中，在室溫條件下靜置，使溶劑緩慢揮發(fā)，溶液揮發(fā)法一周后得到配合物1的黃色晶體，用乙醇洗滌，空氣中干燥；產(chǎn)率：62％(以zn計(jì))，紅外光譜：(kbr/pellet，cm^-1)：3401m，3069m，1606m，1579s，1447s，1419s，1311s，1237s，1058m，1016w，930m，861m，815s，667m；(2)配合物zn(br-bbp)cl2(2)的合成：用br-bbp(0.0042g，0.01mmol)替代cl-bbp配體，室溫靜置4天后，過濾，得到黃色晶體，用乙醇洗滌后，干燥；產(chǎn)率：56％(以zn計(jì))，紅外光譜(kbr/pellet，cm^-1)：3435m，1627s，1605s，1578s，1478s，1447s，1385m，1312s，1237w，1157w，922m，866w；

優(yōu)選的，所述配體合成方法的步驟(1)中的紅外光譜為：(kbr/pellet，cm^-1)：3193s，1625m，1601m，1574m，1460s，1434s，1383m，1312m，1155w，1060s，928s，736s，692m。

優(yōu)選的，所述配體合成方法的步驟(2)中的紅外光譜為：(kbr/pellet，cm^-1)：3190s，1619m，1599s，1578s，1458s，1307s，1228m，1158w，916s，805s，682s，654m，590m。

優(yōu)選的，所述的一種鹵素取代v-型吡啶-2，6-雙苯并咪唑鋅配合物抗腫瘤活性檢測，包括腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)方法和mtt法測細(xì)胞抗腫瘤活性檢測方法，(1)所述腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)方法為：將hct116，bgc823細(xì)胞分別接種于盛有dmem培養(yǎng)液(含體積比為10％的血清和1％雙抗)的培養(yǎng)皿中，放置于37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱(含5％co2和95％的空氣)中孵育，每次實(shí)驗(yàn)取處于對數(shù)期的細(xì)胞；(2)所述mtt法測細(xì)胞抗腫瘤活性檢測方法為：使用mtt(3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴鹽)法分別對配合物1和2的抗腫瘤活性檢測進(jìn)行測試，實(shí)驗(yàn)前，配合物1-2分別用dmso助溶，然后用培養(yǎng)液稀釋，終溶液中的dmso含量不超過3‰；將細(xì)胞hct116，bgc823分別接種到96孔板上，每孔200μl，細(xì)胞數(shù)目控制在(5×10³-6.5×10³個/孔)；生長24h后，移除舊的培養(yǎng)液并將含有不同濃度配合物1或2的培養(yǎng)液分別加入到相應(yīng)的96孔板中，配合物的濃度梯度為5-50μm，每個濃度設(shè)置5個復(fù)孔。孵育相應(yīng)的時間段后，每孔中加入mtt溶液(5mg/ml)20μl，并于培養(yǎng)箱中繼續(xù)孵育4小時；取出96孔板并輕輕吸去孔內(nèi)的液體，然后每孔分別加入150μldmso溶液，室溫下在搖床上震蕩5-10min，待結(jié)晶物完全溶解后，用酶標(biāo)儀在492nm處檢測每個孔的od值；計(jì)算抑制率：抑制率(％)＝(a對照-a實(shí)驗(yàn))/a對照×100，抗腫瘤活性結(jié)果用ic50值表示，ic50值為對細(xì)胞增殖達(dá)到50％抑制效果時的藥物濃度，根據(jù)抑制率計(jì)算得到。

本發(fā)明所達(dá)到的有益效果是：具有良好的抗腫瘤活性，可以制備成抗腫瘤的藥物。

附圖說明

附圖用來提供對本發(fā)明的進(jìn)一步理解，并且構(gòu)成說明書的一部分，與本發(fā)明的實(shí)施例一起用于解釋本發(fā)明，并不構(gòu)成對本發(fā)明的限制。

在附圖中：

圖1是本發(fā)明實(shí)施例所述的一種鹵素取代v-型吡啶-2，6-雙苯并咪唑鋅配合物合成方法配合物1的晶體結(jié)構(gòu)，氫原子省略結(jié)構(gòu)圖；

圖2是本發(fā)明實(shí)施例所述的一種鹵素取代v-型吡啶-2，6-雙苯并咪唑鋅配合物合成方法配合物2的晶體結(jié)構(gòu)，氫原子及未配位游離溶劑分子省略結(jié)構(gòu)圖；

具體實(shí)施方式

以下結(jié)合附圖對本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例進(jìn)行說明，應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的優(yōu)選實(shí)施例僅用于說明和解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。

實(shí)施例：請參閱圖1-2，本發(fā)明一種鹵素取代v-型吡啶-2，6-雙苯并咪唑鋅配合物合成方法，包括配體合成方法和配合物合成方法，所述配體合成方法為：

(1)cl-bbp配體的合成：在三頸瓶中稱取多聚磷酸(10g)，再稱取2，6-吡啶二甲酸(3mmol，0.5g)，4-氯鄰苯二胺(6mmol，0.8555g)混合均勻后倒入三頸瓶中，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下180℃，反應(yīng)5h；反應(yīng)結(jié)束后趁熱倒入1l冰水中強(qiáng)力攪拌，完全溶解后加氨水調(diào)ph為9-11后抽濾，將濾渣洗至中性，晾干后得粗產(chǎn)品，用甲醇重結(jié)晶，產(chǎn)率：73％，紅外光譜為：(kbr/pellet，cm^-1)：3193s，1625m，1601m，1574m，1460s，1434s，1383m，1312m，1155w，1060s，928s，736s，692m；

(2)br-bbp配體的合成：在三頸瓶中稱取多聚磷酸(10g)，再稱取2，6-吡啶二甲酸(3mmol，0.5g)，4-溴鄰苯二胺(6mmol，1.1222g)混合均勻后倒入三頸瓶中，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下180℃，反應(yīng)5h；反應(yīng)結(jié)束后趁熱倒入1l冰水中強(qiáng)力攪拌，完全溶解后加氨水調(diào)ph為9-11后抽濾，將濾渣洗至中性，晾干后得粗產(chǎn)品，用乙醇重結(jié)晶，產(chǎn)率：78％，紅外光譜為：(kbr/pellet，cm^-1)：3190s，1619m，1599s，1578s，1458s，1307s，1228m，1158w，916s，805s，682s，654m，590m；

所述配合物合成方法為：

(1)配合物zn(cl-bbp)cl2(1)的合成：稱取zncl2金屬鹽(0.0054g，0.04mmol)溶于4ml乙醇，加入有機(jī)配體cl-bbp(0.0038g，0.01mmol)的乙醇溶液，混合后放入玻璃樣品瓶中，在室溫條件下靜置，使溶劑緩慢揮發(fā)，溶液揮發(fā)法一周后得到配合物1的黃色晶體，用乙醇洗滌，空氣中干燥；產(chǎn)率：62％(以zn計(jì))，紅外光譜：(kbr/pellet，cm^-1)：3401m，3069m，1606m，1579s，1447s，1419s，1311s，1237s，1058m，1016w，930m，861m，815s，667m；

(2)配合物zn(br-bbp)cl2(2)的合成：用br-bbp(0.0042g，0.01mmol)替代cl-bbp配體，室溫靜置4天后，過濾，得到黃色晶體，用乙醇洗滌后，干燥；產(chǎn)率：56％(以zn計(jì))，紅外光譜(kbr/pellet，cm^-1)：3435m，1627s，1605s，1578s，1478s，1447s，1385m，1312s，1237w，1157w，922m，866w；

一種鹵素取代v-型吡啶-2，6-雙苯并咪唑鋅配合物抗腫瘤活性檢測，包括腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)方法和mtt法測細(xì)胞抗腫瘤活性檢測方法，

(1)所述腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)方法為：將hct116，bgc823細(xì)胞分別接種于盛有dmem培養(yǎng)液(含體積比為10％的血清和1％雙抗)的培養(yǎng)皿中，放置于37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱(含5％co2和95％的空氣)中孵育，每次實(shí)驗(yàn)取處于對數(shù)期的細(xì)胞；

(2)所述mtt法測細(xì)胞抗腫瘤活性檢測方法為：使用mtt(3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴鹽)法分別對配合物1和2的抗腫瘤活性檢測進(jìn)行測試，實(shí)驗(yàn)前，配合物1-2分別用dmso助溶，然后用培養(yǎng)液稀釋，終溶液中的dmso含量不超過3‰；將細(xì)胞hct116，bgc823分別接種到96孔板上，每孔200μl，細(xì)胞數(shù)目控制在(5×10³-6.5×10³個/孔)；生長24h后，移除舊的培養(yǎng)液并將含有不同濃度配合物1或2的培養(yǎng)液分別加入到相應(yīng)的96孔板中，配合物的濃度梯度為5-50μm，每個濃度設(shè)置5個復(fù)孔。孵育相應(yīng)的時間段后，每孔中加入mtt溶液(5mg/ml)20μl，并于培養(yǎng)箱中繼續(xù)孵育4小時；取出96孔板并輕輕吸去孔內(nèi)的液體，然后每孔分別加入150μldmso溶液，室溫下在搖床上震蕩5-10min，待結(jié)晶物完全溶解后，用酶標(biāo)儀在492nm處檢測每個孔的od值；計(jì)算抑制率：抑制率(％)＝(a對照-a實(shí)驗(yàn))/a對照×100，抗腫瘤活性結(jié)果用ic50值表示。

配合物對結(jié)腸癌hct116細(xì)胞的抑制活性：利用mtt法，測試人結(jié)腸癌hct116細(xì)胞經(jīng)配合物1-2處理24，48，72h后的ic50值。hct116細(xì)胞經(jīng)配合物1處理24，48，72h后，ic50值分別為30.0±2.4，13.0±2.1，7.5±1.2μm；hct116細(xì)胞經(jīng)配合物2處理24，48，72h后，ic50值分別為42.9±2.4，18.1±2.9，9.5±1.1μm，均體現(xiàn)出明顯的時間依賴性，為了與配合物進(jìn)行對比，測試了配體cl-bbp及br-bbp在48h對hct116細(xì)胞的抑制活性。配體cl-bbp及br-bbp分別處理hct116細(xì)胞48h后的ic50值分別為33.0±2.3，29.2±2.6μm。

配合物對人胃癌bgc823細(xì)胞的抑制活性：測試人胃癌bgc823細(xì)胞，經(jīng)配合物1處理24，48，72h后，ic50值分別為39.1±2.0，28.8±3.1，15.7±1.1μm。經(jīng)配合物2處理24，48，72h后，ic50值分別為68.4±5.0，43.9±4.7，22.7±2.5μm，配體cl-bbp及br-bbp處理人胃癌bgc823細(xì)胞48h后的ic50值分別為48.8±2.8，49.1±2.0μm。

最后應(yīng)說明的是：以上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例而已，并不用于限制本發(fā)明，盡管參照前述實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)的說明，對于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來說，其依然可以對前述各實(shí)施例所記載的技術(shù)方案進(jìn)行修改，或者對其中部分技術(shù)特征進(jìn)行等同替換。凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。