技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及一種KAP13‐1基因在綿羊毛纖維細(xì)度鑒定中的應(yīng)用。根據(jù)牛KAP13‐1基因設(shè)計(jì)引物，以綿羊皮膚cDNA為模板，RT‐PCR綿羊KAP13‐1基因片段；根據(jù)綿羊KAP13‐1基因的氨基酸序列制備多克隆抗體，用免疫組化檢測(cè)KAP13‐1基因在綿羊毛囊中表達(dá)量；(3)利用2A肽序列構(gòu)建綿羊啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的共表達(dá)綿羊KAP13‐1和綠熒光蛋白的重組載體；以KAP13‐1基因和ZsGreen1‐1載體中綠熒光蛋白基因設(shè)計(jì)引物；融合PCR得到KAP13‐1‐2A‐ZSG，用連接酶將KAP13‐1‐2A‐ZSG連接到雙酶切載體中；以綿羊脾臟基因組為模板擴(kuò)增KAP11‐1基因啟動(dòng)子，酶切連接到中間載體中獲重組載體(4)用重組載體轉(zhuǎn)化昆明小鼠，鑒定轉(zhuǎn)基因陽(yáng)性小鼠毛纖維皮質(zhì)部中的表達(dá)量，并檢測(cè)距離毛囊底部130μm處毛纖維的直徑。

技術(shù)研發(fā)人員：余梅;楊萬(wàn)寶;肖玉凈;李新云;李小平;曹建華;趙書(shū)紅
受保護(hù)的技術(shù)使用者：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)
文檔號(hào)碼：201611018055
技術(shù)研發(fā)日：2016.11.18
技術(shù)公布日：2017.05.24