1.一種qPCR鑒定羊肉的方法,其特征在于包括以下步驟:
1) 設(shè)計(jì)特異性識別羊線粒體基因片段的引物一組;
2) 將樣品總DNA的濃度調(diào)至20 ng/μL作為樣品qPCR的模板;
3) 使用步驟1) 的引物和步驟2) 的模板,通過qPCR擴(kuò)增目的基因片段;
4) 根據(jù)qPCR的Ct值判斷樣品是否為羊肉或是否含有羊肉或羊的其他組織成份。
2.如權(quán)利要求1所述一對引物,其特征在于:上游引物堿基序列:5′-tctctcctaggcatttgctta-3′,下游引物堿基序列:5′-cccgtcctacatgcatgaat-3′,引物濃度均為2 pmol/μL。
3.如權(quán)利要求1所述qPCR,其特征在于qPCR反應(yīng)體系為10μL (2×qPCR Master mix:5μL;的上、下游引物P1和P2各0.5μL;模板DNA:0.5μL;滅菌純水3.5μL)。
4.如權(quán)利要求1所述qPCR,其特征在于qPCR的程序?yàn)椋?5℃變性/3 s,62℃退火/30 s,72℃延伸反應(yīng)/25 s,40次循環(huán)。
5.如權(quán)利要求1所述根據(jù)qPCR的Ct值判斷樣品是否是或含有羊肉或羊的其他組織成份,其特征在于Ct值在15~31時(shí)出現(xiàn)特異性SYBR熒光信號,則表明檢測樣品是羊肉或含有羊肉的成分或羊的其他組織成份;反之不是或不含有羊肉成份或羊的其他組織成份。