技術總結
一種新型慢病毒包裝方法,由下述步驟組成:(1)接種2×106個293T細胞;(2)轉染的混合物培養(yǎng)12?15小時;(3)混合每個轉染離心管,病毒載體為10ug小片段RNA質(zhì)粒,40ug包裝質(zhì)粒,20ug包膜蛋白質(zhì)粒,用100mM氯化鈉補足體積100μL;(4)配置Biomiga?Genetran?Ⅲ和氯化鈉的混合液;(5)加80μL的Biomiga?Genetran?Ⅲ和氯化鈉混合物到轉染離心管中,總體積180μL;(6)室溫放置20?30分鐘;(7)從細胞中吸出培養(yǎng)基,然后加8ml的新鮮培養(yǎng)基,半個小時內(nèi)加50μL仲丁巴比安,混勻;(8)培養(yǎng)48?60小時;(9)72小時后,收集病毒。
技術研發(fā)人員:史鏡宇;章宏遠;劉艷紅;言國英;王敬紅;趙林軍;劉師岐
受保護的技術使用者:嘉興宇遠生物科技有限公司
文檔號碼:201610977672
技術研發(fā)日:2016.11.08
技術公布日:2017.03.15