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一個影響豬生長和PRRSV抗性的SLA?DRB1啟動子區(qū)分子標(biāo)記及其應(yīng)用的制作方法

文檔序號:12097839閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一個影響豬體重和PRRSV抗性的分子標(biāo)記,其特征在于所述分子標(biāo)記位于豬SLA-DRB1基因啟動子區(qū)-28位點,且具有C/T多態(tài)性,TT型體重高于CT型和CC型,仔豬感染PRRSV后TT型仔豬血液中病毒載量低于CT型仔豬和CC型仔豬。

2.權(quán)利要求1所述的分子標(biāo)記在豬分子育種中的應(yīng)用。

3.一種用于檢測權(quán)利要求1所述的分子標(biāo)記的引物對,其特征在于上游引物P1如序列表中SEQ ID NO:1所示,下游引物P2如序列表中SEQ ID NO:2所示。

4.權(quán)利要求3所述的引物對在豬分子育種中的應(yīng)用。

5.一種檢測權(quán)利要求1所述的分子標(biāo)記的方法,其特征在于包括利用權(quán)利要求3所述的引物對PCR擴增豬基因組中含有權(quán)利要求1所述的分子標(biāo)記的一段序列,對擴增產(chǎn)物進行測序,判讀豬SLA-DRB1基因啟動子區(qū)-28位點的C/T多態(tài)性。

6.一種篩選高生長性狀和具有PRRSV抗性的豬品系的方法,其特征在于包括檢測豬SLA-DRB1基因啟動子區(qū)-28位點的多態(tài)性,選擇TT型個體留種。

7.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法,其特征在于包含以下步驟:

1)提取豬基因組DNA;

2)利用本發(fā)明所述的引物對PCR擴增SLA-DRB1基因啟動子區(qū)序列,得到218bp擴增產(chǎn)物;

3)利用本發(fā)明所述的引物P2對218bp擴增產(chǎn)物進行測序分型,分為CC型、CT型、TT型;

4)選擇TT型個體留種。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法,其特征在于所述PCR擴增的反應(yīng)總體系為20μL,模板DNA 15-100ng,5U/μL Taq聚合酶0.2μL,10mM的dNTP0.5μL,引物P1和P2各5pmol,25mM的MgCl21.2-1.6μL,10×緩沖液2μL,加滅菌雙蒸水至20μL;所述PCR擴增的反應(yīng)程序為:94℃預(yù)變性5min;94℃變性30s,53-60℃退火30s,72℃延伸30s,35個循環(huán);72℃延伸7min。

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