本發(fā)明屬于微生物菌劑制備領(lǐng)域，更具體地說(shuō)，涉及一種耐低溫硝化菌劑及其制備方法和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
為了改善水環(huán)境質(zhì)量，我國(guó)在“十二五”期間大力開展水污染防治工作，提出將氨氮納為水污染物排放約束性控制指標(biāo)。氨氮是水體中的一種常見污染物，其對(duì)水生態(tài)環(huán)境的危害表現(xiàn)在多個(gè)方面，如消耗水中溶解氧，使水體發(fā)黑發(fā)臭；毒害水生生物，使水體生態(tài)遭到破壞等。廢水脫氮主要分為物化法和生物法，其中生物處理法由于條件溫和，處理成本低、二次污染少等優(yōu)勢(shì)，在國(guó)內(nèi)外得到廣泛的應(yīng)用。生物脫氮的基本原理是，氨氮通過(guò)硝化作用氧化為硝酸鹽，再通過(guò)反硝化作用將硝酸鹽還原成氣態(tài)氮從水中逸出，達(dá)到脫氮目的。
溫度是影響硝化作用的主要因素之一，當(dāng)溫度小于15℃時(shí)硝化速度明顯下降；低于5℃時(shí)硝化細(xì)菌的生命活動(dòng)幾乎停止。在冬季，我國(guó)污水處理廠生物處理系統(tǒng)存在硝化功能啟動(dòng)慢(需30天以上)、硝化能力不穩(wěn)定、氨氮處理能力明顯下降等問題，嚴(yán)重制約了生物脫氮的效果。此外，生物毒性和氨氮負(fù)荷也是影響硝化作用的重要因素，部分工業(yè)(制藥、化工、印染等)廢水中氨氮濃度較高，且具有較強(qiáng)的生物毒性，也會(huì)發(fā)生硝化能力不足這一現(xiàn)象。有研究表明向生物處理系統(tǒng)中投加硝化菌劑可有效減少啟動(dòng)時(shí)間、強(qiáng)化硝化功能(如中國(guó)專利申請(qǐng)?zhí)?00810012685.6，申請(qǐng)日為2008年8月2日，發(fā)明創(chuàng)造名稱為一種含氨廢水短程硝化的快速啟動(dòng)方法，其通過(guò)投加硝化細(xì)菌或硝化細(xì)菌與活性污泥的混合作為接種物，將啟動(dòng)時(shí)間縮短至25天左右，并可對(duì)氨氮濃度為800～1200mg/L的廢水進(jìn)行脫氮處理)，因此為解決上述問題，我國(guó)對(duì)耐低溫硝化菌劑的研發(fā)日益增多。
目前，耐低溫硝化菌劑主要分為兩類：一類是使用由一種或幾種硝化菌組成的純硝化菌劑(如中國(guó)專利申請(qǐng)?zhí)?2156977.0，申請(qǐng)日為2002年12月24日，發(fā)明創(chuàng)造名稱為一種低溫硝化菌劑及其用途，其提供了一種低溫硝化菌劑包含漢堡硝化桿菌AS 1.2729，維式硝化桿菌AS 1.2730和AS 1.2775，蠟狀芽孢桿菌AS 1.230，地衣芽孢桿菌AS 1.518，釀酒酵母AS 2.412等六種菌株，這些菌株經(jīng)培養(yǎng)后，按其培養(yǎng)物同等體積比例配比組成為耐低溫硝化菌劑，在較低溫度下具有去除超低濃度氨氮的作用。)，另一類是使用高度富集硝化細(xì)菌的活性污泥(如中國(guó)專利申請(qǐng)?zhí)?01310296780.4，申請(qǐng)日為2013年07月15日，發(fā)明創(chuàng)造名稱為一種耐低溫自養(yǎng)硝化菌劑的富集及其在廢水處理中的應(yīng)用，其提供的一種高度富集耐低溫自養(yǎng)硝化細(xì)菌的活性污泥，該菌劑在10℃的低溫環(huán)境下，能夠以氨氮為唯一氮源，在好氧環(huán)境中將氨氮高效去除；充分實(shí)現(xiàn)了硝化細(xì)菌在低溫條件下的活性維持和持續(xù)的硝化速率。)。第一類硝化菌劑雖然有富集培養(yǎng)速度快、菌種純度高等優(yōu)點(diǎn)，但其制備成本高，菌種易變異和退化，且菌種組成相對(duì)單一，實(shí)際應(yīng)用中適應(yīng)能力較差，不易發(fā)揮生物強(qiáng)化功能；第二類硝化菌劑可克服第一類菌劑的缺點(diǎn)，是目前較常使用的培養(yǎng)方法，但第二類硝化菌劑的研究主要集中于自養(yǎng)硝化菌劑，存在功能菌株類型單一的問題，導(dǎo)致其可市場(chǎng)應(yīng)用范圍較窄，且通常需要大量的時(shí)間進(jìn)行馴化和富集。硝化菌劑的制備成本、生產(chǎn)速度及應(yīng)用范圍直接影響了其市場(chǎng)推廣，因此提供一種低成本并可廣泛應(yīng)用于多種廢水處理系統(tǒng)的耐低溫硝化菌劑的制備方法顯得尤為重要。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
1.要解決的問題
針對(duì)現(xiàn)有的耐低溫硝化菌劑存在制備成本高，菌種易變異和退化，適應(yīng)能力較差，功能菌株類型單一的問題，本發(fā)明的目的之一是提供一種耐低溫硝化菌劑及其制備方法和應(yīng)用，該耐低溫硝化菌劑包含自養(yǎng)硝化細(xì)菌、異養(yǎng)硝化細(xì)菌和氨氧化古菌等三類硝化功能菌，其通過(guò)適溫富集、低溫馴化的方式進(jìn)行制備，富集過(guò)程通過(guò)外加碳源(培養(yǎng)異養(yǎng)硝化細(xì)菌)及金屬鹽(培養(yǎng)氨氧化古菌)的方式提高硝化功能菌多樣性，緩解低溫下的氨氮降解性能迅速下降的問題，加快馴化速度，提高培養(yǎng)效率。
2.技術(shù)方案
為了解決上述問題，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案如下：
一種耐低溫硝化菌劑，所述耐低溫硝化菌劑包括自養(yǎng)硝化細(xì)菌、異養(yǎng)硝化細(xì)菌和氨氧化古菌這三類硝化功能菌，通過(guò)適溫富集、低溫馴化的方式制備得到。
上述的一種耐低溫硝化菌劑的制備方法，其制備步驟為：
(1)接種某污水處理廠好氧段活性污泥至反應(yīng)器中；
(2)采用連續(xù)進(jìn)水方式向反應(yīng)器中添加自養(yǎng)硝化菌培養(yǎng)基，所添加的自養(yǎng)硝化菌培養(yǎng)基中氨氮的濃度根據(jù)反應(yīng)器對(duì)培養(yǎng)基的利用率逐步提高，培養(yǎng)過(guò)程保持反應(yīng)器溫度為20～30℃；
(3)待反應(yīng)器對(duì)自養(yǎng)硝化菌培養(yǎng)基的利用率達(dá)到90％時(shí)，向自養(yǎng)硝化菌培養(yǎng)基投加有機(jī)碳源及金屬鹽，此培養(yǎng)過(guò)程保持反應(yīng)器溫度為20～30℃；
(4)待反應(yīng)器對(duì)有機(jī)碳源及金屬鹽自養(yǎng)硝化培養(yǎng)基的利用率達(dá)到90％時(shí)，降低反應(yīng)器溫度至5～10℃；
(5)提高培養(yǎng)基在反應(yīng)器中的時(shí)間，使培養(yǎng)基的利用率不低于80％，待反應(yīng)器培養(yǎng)基利用率不低于90％時(shí)，逐步減少培養(yǎng)基在反應(yīng)器中的時(shí)間，直至培養(yǎng)基利用率保持在80％～90％之間；
(6)在保持培養(yǎng)基的利用率在80％～90％的基礎(chǔ)上，從反應(yīng)器中取出部分培養(yǎng)液，所得培養(yǎng)液中的菌劑即為制備得到的耐低溫硝化菌劑。
更進(jìn)一步地，步驟(1)中所述的反應(yīng)器為膜生物反應(yīng)器、升流式反應(yīng)器；步驟(1)中接種的污泥氨氧化速率不小于0.5×10-3mg NH4+-N/mgMLSS·h。
更進(jìn)一步地，步驟(2)中所述的自養(yǎng)硝化菌培養(yǎng)基由0.19～7.60‰氯化銨、0.04～1.60‰磷酸二氫鉀、0.63～27.00‰碳酸氫鈉、1～20‰生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)液組成，其制備方法為：將上述組分在25～40℃條件下超聲溶解，定容，最后加入1～20‰生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)液。
更進(jìn)一步地，生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)液的組成成分及各組分的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為：0.3～6‰氯化鐵、0.03～0.6‰硫酸銅、0.02～0.4‰氯化錳、2～40‰氯化鈣、0.03～0.6‰氯化鋅、0.03～0.6‰氯化鈷、2～40‰氯化鎂、0.04～0.8‰碘化鉀、0.03～0.6‰硼酸、0.1～2‰硫胺素，余量為水；其制備方法為：將上述組分在25～40℃條件下超聲溶解，定容。
更進(jìn)一步地，步驟(2)中在培養(yǎng)基利用率不低于90％時(shí)，逐步提高自養(yǎng)硝化菌培養(yǎng)基中氯化銨、磷酸二氫鉀和碳酸氫鈉的濃度，其中每次提高比例為50％～100％。
更進(jìn)一步地，步驟(3)中投加的有機(jī)碳源為甲醇、醋酸鈉、葡萄糖、可溶性淀粉、待處理廢水中的特征污染物中的一種或多種。
更進(jìn)一步地，步驟(3)中投加的有機(jī)碳源的COD濃度為100～5000mg/L。
更進(jìn)一步地，步驟(3)中投加的金屬鹽為氯化鈉、硫酸鈉中的一種或兩種。
更進(jìn)一步地，步驟(3)中投加的金屬鹽的鹽濃度為0.5％～5％。
更進(jìn)一步地，上述的一種耐低溫硝化菌劑在廢水處理領(lǐng)域中的應(yīng)用。
3.有益效果
相比于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明的有益效果為：
(1)本發(fā)明的耐低溫硝化菌劑包含自養(yǎng)硝化細(xì)菌、異養(yǎng)硝化細(xì)菌和氨氧化古菌等三類硝化功能菌，其通過(guò)適溫富集、低溫馴化的方式進(jìn)行制備，富集過(guò)程通過(guò)外加碳源(培養(yǎng)異養(yǎng)硝化細(xì)菌)及金屬鹽(培養(yǎng)氨氧化古菌)的方式提高硝化功能菌多樣性，緩解低溫下的氨氮降解性能迅速下降的問題，加快馴化速度，提高培養(yǎng)效率；
(2)本發(fā)明的方法制備的耐低溫硝化菌劑中硝化功能菌豐度及多樣性高，在投加本發(fā)明中的耐低溫硝化菌劑后，硝化微生物的比例可根據(jù)不同廢水水質(zhì)特征自動(dòng)調(diào)節(jié)，如廢水中COD很低，這時(shí)自養(yǎng)硝化細(xì)菌豐度就會(huì)上升，而異養(yǎng)硝化細(xì)菌豐度會(huì)下降，或廢水中鹽度較高，自養(yǎng)硝化細(xì)菌豐度會(huì)下降，氨氧化古菌豐度會(huì)上升；使各類污水處理廠均能穩(wěn)定保持良好的氨氮處理效果，具有較高的使用價(jià)值；
(3)本發(fā)明的方法制備的耐低溫硝化菌劑功能穩(wěn)定，應(yīng)用前景及范圍廣闊，可有效解決冬季污水處理廠的氨氮處理效果差的問題，具有良好的社會(huì)效益；
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)一步進(jìn)行描述。
實(shí)施例1
市政污水處理用耐低溫硝化菌劑的制備
(1)從某市政污水廠好氧曝氣池中取得活性污泥，測(cè)定其氨氧化速率為0.6～0.8×10-3mgNH4+-N/mgMLSS·h。
(2)將該活性污泥接種于升流式反應(yīng)器中，采用連續(xù)進(jìn)水方式向反應(yīng)器中添加自養(yǎng)硝化菌培養(yǎng)基(0.19‰氯化銨，0.04‰磷酸二氫鉀，0.63‰碳酸氫鈉，1‰生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)液)，反應(yīng)器溫度控制為25℃，培養(yǎng)基在反應(yīng)器中停留時(shí)間為12小時(shí)，直至反應(yīng)器培養(yǎng)基利用率為99％。
自養(yǎng)硝化菌培養(yǎng)基的制備方法為：將上述組分在25℃條件下超聲溶解，定容至1000mL；生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)液由：0.3‰氯化鐵、0.03‰硫酸銅、0.02‰氯化錳、2‰份氯化鈣、0.03‰份氯化鋅、0.03‰份氯化鈷、2‰氯化鎂、0.04‰碘化鉀、0.03‰硼酸、0.1‰硫胺素、水組成，其制備方法為：將上述組分在25℃條件下超聲溶解，定容至1000mL。
(3)提高自養(yǎng)硝化菌培養(yǎng)基濃度，使培養(yǎng)基中氯化銨濃度為0.38‰，磷酸二氫鉀濃度為0.08‰，碳酸氫鈉濃度為1.26‰，生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)液濃度為1‰，保持溫度為25℃，停留時(shí)間為12小時(shí)，直至反應(yīng)器培養(yǎng)基利用率為99％。
(4)在自養(yǎng)硝化菌培養(yǎng)基添加0.1‰的葡萄糖(指添加葡萄糖后自養(yǎng)硝化菌培養(yǎng)基中葡萄糖的濃度為0.1‰)，5‰的氯化鈉(同葡萄糖)，保持溫度為25℃，停留時(shí)間為12小時(shí)，直至反應(yīng)器培養(yǎng)基利用率為99％。
(5)降低反應(yīng)器溫度至10℃，并將停留時(shí)間提高為24小時(shí)，直至反應(yīng)器培養(yǎng)基利用率為95％。
(6)逐步降低停留時(shí)間直至6小時(shí)，在保持反應(yīng)器培養(yǎng)基利用率為85％下，從反應(yīng)器中取出五分之一體積的培養(yǎng)液，在6000rpm下離心10分鐘即可制備得到市政污水處理用耐低溫硝化菌劑。
(7)對(duì)市政污水處理用耐低溫硝化菌劑的氨氧化速率進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果為3.6～5.2×10-3mgNH4+-N/mgMLSS·h，氨氧化速率明顯提高。
實(shí)施例2
四環(huán)素廢水處理用耐低溫硝化菌劑的制備
(1)從某四環(huán)素廢水處理廠好氧曝氣池中取得活性污泥，測(cè)定其氨氧化速率為1.6～2.2×10-3mgNH4+-N/mgMLSS·h。
(2)將該活性污泥接種于膜生物反應(yīng)器中，采用連續(xù)進(jìn)水方式向反應(yīng)器中添加自養(yǎng)硝化菌培養(yǎng)基(0.38‰氯化銨，0.08‰磷酸二氫鉀，1.26‰碳酸氫鈉，5‰生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)液)，反應(yīng)器溫度控制為28℃，培養(yǎng)基在反應(yīng)器中停留時(shí)間為24小時(shí)，直至反應(yīng)器培養(yǎng)基利用率為99％。
自養(yǎng)硝化菌培養(yǎng)基的制備方法為：將上述組分在25～40℃條件下超聲溶解，定容至1000mL；生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)液由：6‰份氯化鐵、0.6‰份硫酸銅、0.4‰份氯化錳、40‰份氯化鈣、0.6‰份氯化鋅、0.6‰份氯化鈷、40‰份氯化鎂、0.8‰份碘化鉀、0.6‰份硼酸、2‰份硫胺素、水組成，其制備方法為：將上述組分在40℃條件下超聲溶解，定容至1000mL。
(3)逐步提高自養(yǎng)硝化菌培養(yǎng)基濃度，使培養(yǎng)基中氯化銨濃度為1.91‰，磷酸二氫鉀濃度為0.40‰，碳酸氫鈉濃度為6.30‰，生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)液濃度為5‰，保持溫度為28℃，停留時(shí)間為24小時(shí)，直至反應(yīng)器培養(yǎng)基利用率為99％。
(4)在自養(yǎng)硝化菌培養(yǎng)基添加1‰的葡萄糖，0.2‰的四環(huán)素、10‰的氯化鈉，保持溫度為28℃，停留時(shí)間為24小時(shí)，直至反應(yīng)器培養(yǎng)基利用率為90％。
(5)降低反應(yīng)器溫度至10℃，并將停留時(shí)間提高為48小時(shí)，直至反應(yīng)器培養(yǎng)基利用率為90％。
(6)逐步降低停留時(shí)間直至12小時(shí)，在保持反應(yīng)器培養(yǎng)基利用率為80％下，從反應(yīng)器中取出六分之一體積的培養(yǎng)液，在6000rpm下離心10分鐘即可制備得到四環(huán)素廢水處理用耐低溫硝化菌劑。
(7)對(duì)四環(huán)素廢水處理用耐低溫硝化菌劑的氨氧化速率進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果為8.5～11.2×10-3mgNH4+-N/mgMLSS·h，氨氧化速率明顯提高。
實(shí)施例3
苯酚廢水處理用耐低溫硝化菌劑的制備
(1)從某苯酚廢水處理廠好氧曝氣池中取得活性污泥，測(cè)定其氨氧化速率為1.2～1.7×10-3mgNH4+-N/mgMLSS·h。
(2)將該活性污泥接種于膜生物反應(yīng)器中，采用連續(xù)進(jìn)水方式向反應(yīng)器中添加自養(yǎng)硝化菌培養(yǎng)基(0.38‰氯化銨，0.08‰磷酸二氫鉀，1.26‰碳酸氫鈉，20‰生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)液)，反應(yīng)器溫度控制為23℃，培養(yǎng)基在反應(yīng)器中停留時(shí)間為24小時(shí)，直至反應(yīng)器培養(yǎng)基利用率為99％。
自養(yǎng)硝化菌培養(yǎng)基的制備方法為：將上述組分在30℃條件下超聲溶解，定容至1000mL；生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)液由：3‰氯化鐵、0.3‰硫酸銅、0.2‰氯化錳、20‰氯化鈣、0.3‰氯化鋅、0.3‰氯化鈷、20‰氯化鎂、0.4‰碘化鉀、0.3‰硼酸、1‰硫胺素、水組成，其制備方法為：將上述組分在30℃條件下超聲溶解，定容至1000mL。
(3)逐步提高自養(yǎng)硝化菌培養(yǎng)基濃度，使培養(yǎng)基中氯化銨濃度為7.60‰，磷酸二氫鉀濃度為1.60‰，碳酸氫鈉濃度為27.00‰，生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)液濃度為20‰，保持溫度為28℃，停留時(shí)間為24小時(shí)，直至反應(yīng)器培養(yǎng)基利用率為99％。
(4)在自養(yǎng)硝化菌培養(yǎng)基添加7.00‰的葡萄糖，0.50‰的苯酚、30.00‰的氯化鈉，保持溫度為28℃，停留時(shí)間為24小時(shí)，直至反應(yīng)器培養(yǎng)基利用率為90％。
(5)降低反應(yīng)器溫度至10℃，并將停留時(shí)間提高為48小時(shí)，直至反應(yīng)器培養(yǎng)基利用率為90％。
(6)逐步降低停留時(shí)間直至12小時(shí)，在保持反應(yīng)器培養(yǎng)基利用率為80％下，從反應(yīng)器中取出六分之一體積的培養(yǎng)液，在6000rpm下離心10分鐘即可制備得到苯酚廢水處理用耐低溫硝化菌劑。
(7)對(duì)苯酚廢水處理用耐低溫硝化菌劑的氨氧化速率進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果為13.2～15.9×10-3mgNH4+-N/mgMLSS·h，氨氧化速率明顯提高。
實(shí)施例4
煉油廠廢水處理用耐低溫硝化菌劑的制備
(1)從某煉油廢水處理廠好氧曝氣池中取得活性污泥，測(cè)定其氨氧化速率為0.6～1.3×10-3mgNH4+-N/mgMLSS·h。
(2)將該活性污泥接種于膜生物反應(yīng)器中，采用連續(xù)進(jìn)水方式向反應(yīng)器中添加自養(yǎng)硝化菌培養(yǎng)基(0.53‰氯化銨，0.12‰磷酸二氫鉀，1.89‰碳酸氫鈉，10‰生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)液)，反應(yīng)器溫度控制為25℃，培養(yǎng)基在反應(yīng)器中停留時(shí)間為24小時(shí)，直至反應(yīng)器培養(yǎng)基利用率為95％。
自養(yǎng)硝化菌培養(yǎng)基的制備方法為：將上述組分在35℃條件下超聲溶解，定容至1000mL；生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)液由：2‰氯化鐵、0.2‰硫酸銅、0.15‰氯化錳、5‰氯化鈣、0.1‰氯化鋅、0.1‰氯化鈷、5‰氯化鎂、0.15‰碘化鉀、0.1‰硼酸、0.5‰硫胺素、水組成，其制備方法為：將上述組分在35℃條件下超聲溶解，定容至1000mL。
(3)逐步提高自養(yǎng)硝化菌培養(yǎng)基濃度，使培養(yǎng)基中氯化銨濃度為2.12‰，磷酸二氫鉀濃度為0.48‰，碳酸氫鈉濃度為7.56‰，生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)液濃度為10‰，保持溫度為28℃，停留時(shí)間為24小時(shí)，直至反應(yīng)器培養(yǎng)基利用率為95％。
(4)在自養(yǎng)硝化菌培養(yǎng)基添加7.00‰的甲醇、20.00‰的氯化鈉，保持溫度為28℃，停留時(shí)間為24小時(shí)，直至反應(yīng)器培養(yǎng)基利用率為90％。
(5)降低反應(yīng)器溫度至10℃，并將停留時(shí)間提高為48小時(shí)，直至反應(yīng)器培養(yǎng)基利用率為90％。
(6)逐步降低停留時(shí)間直至12小時(shí)，在保持反應(yīng)器培養(yǎng)基利用率為80％下，從反應(yīng)器中取出六分之一體積的培養(yǎng)液，在6000rpm下離心10分鐘即可制備得到煉油廠廢水處理用耐低溫硝化菌劑。
(7)對(duì)煉油廠廢水處理用耐低溫硝化菌劑的氨氧化速率進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果為9.2～13.6×10-3mgNH4+-N/mgMLSS·h，氨氧化速率明顯提高。
實(shí)施例5
畜禽養(yǎng)殖廢水處理用耐低溫硝化菌劑的制備
(1)從某市政污水廠好氧曝氣池中取得活性污泥，測(cè)定其氨氧化速率為0.75～1.1×10-3mgNH4+-N/mgMLSS·h。
(2)將該活性污泥接種于膜生物反應(yīng)器中，采用連續(xù)進(jìn)水方式向反應(yīng)器中添加自養(yǎng)硝化菌培養(yǎng)基(0.45‰氯化銨，0.10‰磷酸二氫鉀，1.51‰碳酸氫鈉，8‰生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)液)，反應(yīng)器溫度控制為25℃，培養(yǎng)基在反應(yīng)器中停留時(shí)間為24小時(shí)，直至反應(yīng)器培養(yǎng)基利用率為95％。
自養(yǎng)硝化菌培養(yǎng)基的制備方法為：將上述組分在35℃條件下超聲溶解，定容至1000mL；生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)液由：1.5‰氯化鐵、0.15‰硫酸銅、0.08‰氯化錳、8‰氯化鈣、0.1‰氯化鋅、0.1‰氯化鈷、8‰氯化鎂、0.08‰碘化鉀、0.1‰硼酸、0.5‰硫胺素、水組成，其制備方法為：將上述組分在35℃條件下超聲溶解，定容至1000mL。
(3)逐步提高自養(yǎng)硝化菌培養(yǎng)基濃度，使培養(yǎng)基中氯化銨濃度為1.13‰，磷酸二氫鉀濃度為0.25‰，碳酸氫鈉濃度為3.78‰，生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)液濃度為8‰，保持溫度為28℃，停留時(shí)間為24小時(shí)，直至反應(yīng)器培養(yǎng)基利用率為95％。
(4)在自養(yǎng)硝化菌培養(yǎng)基添加1.00‰的可溶性淀粉、5.00‰的氯化鈉，保持溫度為28℃，停留時(shí)間為24小時(shí)，直至反應(yīng)器培養(yǎng)基利用率為90％。
(5)降低反應(yīng)器溫度至10℃，并將停留時(shí)間提高為48小時(shí)，直至反應(yīng)器培養(yǎng)基利用率為90％。
(6)逐步降低停留時(shí)間直至12小時(shí)，在保持反應(yīng)器培養(yǎng)基利用率為80％下，從反應(yīng)器中取出六分之一體積的培養(yǎng)液，在6000rpm下離心10分鐘即可制備得到煉油廠廢水處理用耐低溫硝化菌劑。
(7)對(duì)畜禽養(yǎng)殖廢水處理用耐低溫硝化菌劑的氨氧化速率進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果為5.6～8.2×10-3mgNH4+-N/mgMLSS·h，氨氧化速率明顯提高。