專(zhuān)利名稱(chēng)：一種水稻根系硝化作用快速檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及植物營(yíng)養(yǎng)快速化檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及水稻根系硝化作 用快速檢測(cè)方法。
背景技術(shù)：
水稻等植物根系硝化作用強(qiáng)弱差異與水稻生長(zhǎng)及氮素吸收利用效率密 切相關(guān)，表現(xiàn)為根系硝化作用強(qiáng)的水稻生長(zhǎng)及氮素利用率均高于硝化作用弱的水稻品種。 以往檢測(cè)水稻根系硝化作用強(qiáng)弱均是通過(guò)采集水稻根表及根際土壤，測(cè)定土壤硝化強(qiáng)度的 方法進(jìn)行測(cè)定。此種方法由于將土壤取出后再進(jìn)行培養(yǎng)，從而屬于非原位測(cè)定，因此增加了 測(cè)定過(guò)程中人為因素的干擾，且耗時(shí)長(zhǎng)，測(cè)定方法復(fù)雜。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的就是提供一種水稻根系硝化作用快速檢測(cè)方法，該方法 能在水稻植株未被破壞的情況下，能快速檢測(cè)根系硝化作用強(qiáng)弱。 本發(fā)明的具體方法如下首先配制水稻營(yíng)養(yǎng)液，所述水稻營(yíng)養(yǎng)液由NH4C1 10mmoll—lPKH2P04 0. 5mmol l—1配制而成，其pH值為7，將重量為上述水稻營(yíng)養(yǎng)液重量 0. 8 %的瓊脂糖加入配制好的水稻營(yíng)養(yǎng)液中，并放在電爐上加熱至瓊脂糖全部熔化，待營(yíng)養(yǎng) 液稍冷卻后加入適量磺胺試劑，所述磺胺試劑的配制方法如下溶解10g磺胺和0. 5g萘基 乙烯胺于150ml去離子水中，加入100ml磷酸，冷卻后用去離子水定容至1000ml。所加入的 磺胺試劑為顯色劑，所述磺胺試劑的用量按體積比為水稻營(yíng)養(yǎng)液的l/200。用玻璃棒小心攪 拌營(yíng)養(yǎng)液，盡量避免產(chǎn)生氣泡。將攪拌均勻的營(yíng)養(yǎng)液緩慢倒入玻璃培養(yǎng)皿中(培養(yǎng)皿的直 徑大小視待測(cè)水稻根系大小而定，以能將水稻根系全部放入為宜)，倒入約lcm深。用去離 子水小心沖洗水稻根系，盡量避免根系損傷。將沖洗干凈的水稻根系放置于冷卻至4(TC左 右的營(yíng)養(yǎng)液中，此時(shí)迅速用鑷子將植株根系均勻擺放在裝有營(yíng)養(yǎng)液的培養(yǎng)皿中，待營(yíng)養(yǎng)液 冷卻至3『C左右時(shí)，由于營(yíng)養(yǎng)液中含有0. 8%的瓊脂糖，因此營(yíng)養(yǎng)液凝固呈半透明的無(wú)色 凝膠狀，水稻整個(gè)根系固定在凝膠中，清晰可見(jiàn)。 大約2h后，可見(jiàn)到水稻根系表面變?yōu)榧t色，且可以看出新生根表面紅色較深，而 老根表面紅色較淺，甚至不變紅。出現(xiàn)上述現(xiàn)象主要是由于凝膠中含有N4C1，植株根系一 方面吸收NH/，另一方面由于水稻根表生物膜上存在硝化細(xì)菌，且根系可以泌氧，因此硝化 作用在根表發(fā)生，NH/轉(zhuǎn)化為N(V。根表由于硝化作用產(chǎn)生的N(V在磺胺試劑作用下變?yōu)?紅色，且紅色越深，說(shuō)明硝化產(chǎn)生的N03—量越多。因此可以通過(guò)根表形成的紅色深淺判斷水 稻硝化作用的強(qiáng)弱。 本方法可視為半原位測(cè)定，植株在未被破壞的情況下，真實(shí)反映其根系硝化作用 強(qiáng)弱。在操作中，變色時(shí)間因測(cè)定植株不同而不同。本方法作為定性對(duì)比待測(cè)植株硝化強(qiáng) 弱，具有直觀、快速等優(yōu)點(diǎn)。
權(quán)利要求
一種水稻根系硝化作用快速檢測(cè)方法，其具體方法如下首先配制水稻營(yíng)養(yǎng)液，所述水稻營(yíng)養(yǎng)液由NH4Cl 10mmol 1-1和KH2PO40.5mmol1-1配制而成，其pH值為7，將重量為上述水稻營(yíng)養(yǎng)液重量0.8％的瓊脂糖加入配制好的水稻營(yíng)養(yǎng)液中，并放在電爐上加熱至瓊脂糖全部熔化，待營(yíng)養(yǎng)液稍冷卻后加入適量磺胺試劑，所述磺胺試劑的配制方法如下溶解10g磺胺和0.5g萘基乙烯胺于150ml去離子水中，加入100ml磷酸，冷卻后用去離子水定容至1000ml，所述磺胺試劑的用量按體積比為水稻營(yíng)養(yǎng)液的1/200，用玻璃棒小心攪拌營(yíng)養(yǎng)液，將攪拌均勻的營(yíng)養(yǎng)液緩慢倒入玻璃培養(yǎng)皿中，倒入約1cm深，用去離子水小心沖洗水稻根系，盡量避免根系損傷。將沖洗干凈的水稻根系放置于冷卻至40℃左右的營(yíng)養(yǎng)液中，此時(shí)迅速用鑷子將植株根系均勻擺放在裝有營(yíng)養(yǎng)液的培養(yǎng)皿中，通過(guò)觀測(cè)水稻根系表面顏色的變化，來(lái)測(cè)定水稻硝化作用的強(qiáng)弱。
全文摘要
本發(fā)明提供一種水稻根系硝化作用快速檢測(cè)方法，首先配制水稻營(yíng)養(yǎng)液，所述水稻營(yíng)養(yǎng)液由NH4Cl 10mmol 1-1和KH2PO40.5mmol 1-1配制而成，再將瓊脂糖加入營(yíng)養(yǎng)液中，并放在電爐上加熱至瓊脂糖全部熔化，待營(yíng)養(yǎng)液稍冷卻后加入適量磺胺試劑，將營(yíng)養(yǎng)液倒入玻璃培養(yǎng)皿中，將植株根系均勻擺放在裝有營(yíng)養(yǎng)液的培養(yǎng)皿中，通過(guò)觀測(cè)水稻根系表面顏色的變化來(lái)測(cè)定水稻硝化作用的強(qiáng)弱，本方法具有直觀、快速等優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號(hào)G01N33/483GK101750480SQ20081013636
公開(kāi)日2010年6月23日 申請(qǐng)日期2008年12月2日 優(yōu)先權(quán)日2008年12月2日
發(fā)明者李奕林, 李忠佩, 王興祥 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院南京土壤研究所