本發(fā)明屬于食品生物技術(shù)領(lǐng)域，并涉及一株高產(chǎn)棕色素的葡糖醋桿菌（Gluconacetobactersp.）FBFS 97-2及其棕色素的制備方法。

背景技術(shù)：

色素又名著色劑，是指能使被染物著色的物質(zhì)，可用于改善物品色澤，被廣泛應(yīng)用于食品、制藥、化妝品、紡織等工業(yè)領(lǐng)域。

色素按其生產(chǎn)方式通常被分為合成色素和天然色素，合成色素因其具有色澤鮮艷、著色力強(qiáng)、性質(zhì)穩(wěn)定和價(jià)格低廉等眾多優(yōu)點(diǎn)而被廣泛應(yīng)用。但隨著社會(huì)的發(fā)展和生活水平的提高，人們對(duì)食品、藥品和日用品安全性的要求也越來(lái)越高，眾多合成色素也因其安全性而被禁用或限量使用，因而安全性高的天然色素的開發(fā)一直是研究熱點(diǎn)。微生物色素作為一種天然色素，具有不受資源限制，容易工廠化生產(chǎn)等優(yōu)點(diǎn)，是尋找天然色素的重要方向之一。

以食品著色劑為例，目前已廣泛應(yīng)用于食品工業(yè)的棕色素主要包括焦糖色素、金櫻子棕、菊花黃浸膏和可可殼色等4種。其中應(yīng)用最為廣泛的是焦糖色素，常用于醬油、食醋、料酒、烘制食品、糖果、飲料等食品的增色，但焦糖色素是一種合成色素，在生產(chǎn)過(guò)程中可能會(huì)產(chǎn)生4-甲基咪唑和丙烯酰胺等有害物質(zhì)；而另外3種棕色素都是植物提取物，存在成本較高、理化性質(zhì)不穩(wěn)定等缺點(diǎn)。

本發(fā)明從土壤中分離篩選得到一株高產(chǎn)棕色素的醋酸菌——葡糖醋桿菌FBFS 97-2，并提供了其棕色素的制備方法。相關(guān)研究未見報(bào)道。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明提供一株葡糖醋桿菌（Gluconacetobactersp.）菌株FBFS 97-2，其保藏編號(hào)為：CCTCC M 2016481。

上述菌株由本實(shí)驗(yàn)室從土壤中分離得到。

本發(fā)明的第二個(gè)目的是提供一種通過(guò)葡糖醋桿菌FBFS 97-2發(fā)酵制備棕色素的方法。

本發(fā)明提供的方法，包括如下步驟：采用上述葡糖醋桿菌FBFS 97-2進(jìn)行液態(tài)發(fā)酵，獲得富含棕色素的發(fā)酵液，再通過(guò)離心和干燥得到棕色素。

上述方法中，所述發(fā)酵的條件為30 °C，160 r/min培養(yǎng)17 d。

上述方法中，液態(tài)培養(yǎng)基配方如下：葡萄糖100 mg/mL，酵母浸膏10 mg/mL，以雙蒸水配制。

上述方法中，將2%（v/v）的葡糖醋桿菌FBFS 97-2種子液接入培養(yǎng)基中。

上述方法中，葡糖醋桿菌FBFS 97-2種子液是取一環(huán)葡糖醋桿菌FBFS 97-2斜面菌體接入種子液培養(yǎng)基中，在30 °C，160 r/min培養(yǎng)24 h。

上述方法中，葡糖醋桿菌FBFS 97-2的種子液培養(yǎng)基如下：葡萄糖100 mg/mL，酵母浸膏10 mg/mL，以雙蒸水配制。葡糖醋桿菌FBFS 97-2的斜面培養(yǎng)基如下：葡萄糖100 mg/mL，酵母浸膏10 mg/mL，瓊脂15 mg/mL，碳酸鈣30 mg/mL以雙蒸水配制。

上述方法中，發(fā)酵液中棕色素的制備包括如下步驟：先通過(guò)高速離心（10000 r/min, 10min）去除發(fā)酵液中的菌體，再通過(guò)真空干燥獲得棕色素。

上述菌株葡糖醋桿菌FBFS 97-2已于2016年9月14日保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心（簡(jiǎn)稱為CCTCC，地址為：湖北省武漢市洪山區(qū)八一路），保藏編號(hào)為：CCTCC M 2016481，分類命名為葡糖醋桿菌（Gluconacetobactersp.）。

本發(fā)明的實(shí)驗(yàn)證明，葡糖醋桿菌FBFS 97-2能產(chǎn)棕色素，30 °C，160 r/min液態(tài)發(fā)酵17 d，培養(yǎng)液中的棕色素在其最大吸收波長(zhǎng)440nm下的吸光度可達(dá)20.08。

附圖說(shuō)明

圖1葡糖醋桿菌FBFS 97-2的菌落形態(tài)(菌落直徑1.8mm)。

圖2 葡萄醋桿菌FBFS 97-2發(fā)酵液在440nm下吸光度隨發(fā)酵時(shí)間的變化。

圖3 葡萄醋桿菌FBFS 97-2發(fā)酵液顏色隨發(fā)酵時(shí)間的變化。

具體實(shí)施方式

以下的實(shí)施例便于更好地理解本發(fā)明，但并不限定本發(fā)明。下述實(shí)施例中的實(shí)驗(yàn)方法，如無(wú)特殊說(shuō)明，均為常規(guī)方法。下述實(shí)施例中所用的試驗(yàn)材料，如無(wú)特殊說(shuō)明，均來(lái)自常規(guī)生化試劑商店。以下實(shí)施例中的定量試驗(yàn)，均設(shè)置三次重復(fù)實(shí)驗(yàn)，結(jié)果取平均值。下面結(jié)合附圖進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明。

實(shí)施例1 發(fā)酵時(shí)間對(duì)發(fā)酵液中棕色素含量的影響：按說(shuō)明書所述方法，通過(guò)分光光度計(jì)（440nm）檢測(cè)葡萄醋桿菌FBFS 97-2發(fā)酵液在不同發(fā)酵時(shí)間下棕色素的含量，發(fā)現(xiàn)發(fā)酵液的顏色深度隨發(fā)酵時(shí)間的進(jìn)行先上升后下降，第17d的顏色最深，在440nm下的吸光度為20.08（圖2-圖3）。

上述實(shí)例中檢測(cè)發(fā)酵液中棕色素含量的方法包括如下步驟：發(fā)酵液先通過(guò)高速離心（10000 r/min, 10min）去除菌體，再經(jīng)適當(dāng)稀釋后用分光光度計(jì)于440nm處進(jìn)行檢測(cè)。