本發(fā)明涉及重金屬鉻污染的生物修復(fù)
技術(shù)領(lǐng)域:
,具體地,涉及一種花園伯克霍爾德氏菌、含有該菌的菌劑及其應(yīng)用和一種鈍化鉻的方法。
背景技術(shù):
:鉻(Cr)及其化臺(tái)物是冶金、金屬加工、電鍍、制革、油漆、顏料等行業(yè)常用的基本原料,在上述行業(yè)的生產(chǎn)過程中產(chǎn)生大量含鉻廢氣、廢水和廢渣,導(dǎo)致嚴(yán)重的環(huán)境污染問題。在環(huán)境中常見的鉻的形態(tài)有三價(jià)鉻和六價(jià)鉻。三價(jià)鉻在土壤中常以難溶氫氧化物的形式存在。溶液中的Cr3+濃度很小,所以毒性很??;六價(jià)鉻溶解度大,因而毒性很強(qiáng)。微量的鉻是人體必需的,但過量的攝入鉻將導(dǎo)致嚴(yán)重的后果。六價(jià)鉻和三價(jià)鉻都有致癌致畸作用。多年來,世界各國普遍將鉻污染列為重點(diǎn)防治對(duì)象。和其他重金屬污染一樣,鉻污染的治理途徑主要有兩種:一是改變鉻在土壤中的存在形態(tài),將六價(jià)鉻還原為三價(jià)鉻,降低其在環(huán)境中的遷移能力和生物可利用性;二是將鉻從被污染土壤中清除。根據(jù)這兩種思路,當(dāng)前的土壤修復(fù)技術(shù)主要為物理、化學(xué)方法,但均對(duì)土壤擾動(dòng)大,可能引發(fā)二次污染問題,投資成本大,這些局限性制約了技術(shù)的大規(guī)模使用。而生物修復(fù)法不破壞植物生長所需的土壤環(huán)境,不會(huì)產(chǎn)生二次污染,可原地處理,操作簡單。具體地,固定化和穩(wěn)定化是將被鉻污染的土壤與某種粘合劑混合(也可以輔以一定的還原劑,用于還原六價(jià)鉻),通過粘合劑固定其中的鉻,使鉻不再向周圍環(huán)境遷移。在眾多的粘合劑中,水泥和硅土被認(rèn)為是一種有效、易得和價(jià)廉的產(chǎn)品。采用該方法修復(fù)鉻污染土壤,需將土壤挖掘出來,成本 較高,處理效果也有待進(jìn)一步提高?;瘜W(xué)還原法是一種原位修復(fù)方法,利用鐵屑、硫酸亞鐵或其他一些容易得到的化學(xué)還原劑(也可以輔以一定的粘合劑)將六價(jià)鉻還原為三價(jià)鉻,形成難溶的化合物,從而降低鉻在環(huán)境中的遷移性和生物可利用性,進(jìn)而減輕鉻污染的危害。但在處理過程中,還原劑有可能被沖走,也可能被其他物質(zhì)氧化。另外,向土壤中投加的還原劑有可能造成二次污染。因此。土壤顆粒內(nèi)部的六價(jià)鉻的去除是化學(xué)還原法的難點(diǎn)。化學(xué)清洗法是利用水力壓頭推動(dòng)清洗液通過污染土壤而將鉻從土壤中清洗出去,然后再對(duì)含有鉻的清洗液進(jìn)行處理。清洗液可能含有某種絡(luò)合劑,或者就是清水。同樣化學(xué)清洗法引入的清洗劑也可能造成二次污染,且僅適宜滲透系數(shù)大的土壤。生物修復(fù)法泛指應(yīng)用植物和微生物來治理鉻污染?,F(xiàn)在鉻污染的治理主要集中于微生物方面,即利用原土壤中的土著微生物或向污染環(huán)境補(bǔ)充經(jīng)過馴化的高效微生物,在優(yōu)化的操作條件下,通過生物還原反應(yīng),將六價(jià)鉻還原為三價(jià)鉻,從而修復(fù)被污染土壤。該方法不會(huì)產(chǎn)生二次污染,因此篩選出一株高效鉻鈍化菌株應(yīng)用于實(shí)際土壤修復(fù)至關(guān)重要。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:本發(fā)明的目的是為了克服鉻污染生物修復(fù)中存在的上述缺陷,提供一種花園伯克霍爾德氏菌、含有該菌的菌劑及其應(yīng)用和一種鈍化鉻的方法。本發(fā)明的花園伯克霍爾德氏菌,具有較高的鉻鈍化能力,可耐受高濃度的鉻污染,操作簡便,可在鉻污染的土壤或含鉻廢水的生物修復(fù)過程中發(fā)揮重要作用。為了實(shí)現(xiàn)上述目的,本發(fā)明的發(fā)明人進(jìn)行了大量的篩選實(shí)驗(yàn),結(jié)果篩選到一種具有較高的鉻鈍化能力、可耐受高濃度的鉻污染的花園伯克霍爾德氏菌。因此,第一方面,本發(fā)明提供了一種花園伯克霍爾德氏菌(Burkholderia anthina),該花園伯克霍爾德氏菌的保藏號(hào)為CGMCCNO:10843。第二方面,本發(fā)明提供了一種含有上述花園伯克霍爾德氏菌(Burkholderiaanthina)的菌劑。第三方面,本發(fā)明提供了上述花園伯克霍爾德氏菌和/或菌劑在鈍化鉻中的應(yīng)用。第四方面,本發(fā)明提供了一種鈍化鉻的方法,所述方法包括:將上述花園伯克霍爾德氏菌和/或上述菌劑與鉻污染樣品接觸,以對(duì)鉻污染樣品中的鉻進(jìn)行鈍化。本發(fā)明的花園伯克霍爾德氏菌為重金屬鉻高效鈍化菌株,能夠降低鉻在水相或土壤相中的生物可利用度。與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明的花園伯克霍爾德氏菌能夠高效鈍化土壤相(對(duì)土壤擾動(dòng)小)或水相中的鉻,可耐受高濃度的鉻污染,操作簡便,可在鉻污染的土壤或含鉻廢水的生物修復(fù)過程中發(fā)揮重要作用,實(shí)現(xiàn)環(huán)保綠色修復(fù)的目的。本發(fā)明的其它特征和優(yōu)點(diǎn)將在隨后的具體實(shí)施方式部分予以詳細(xì)說明。生物保藏本發(fā)明的花園伯克霍爾德氏菌(Burkholderiaanthina),于2015年5月22日被保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(地址:北京市朝陽區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào),中國科學(xué)院微生物研究所,郵政編碼:100101)(保藏單位的縮寫為CGMCC),保藏編號(hào)為CGMCC:10843。具體實(shí)施方式以下對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)施方式進(jìn)行詳細(xì)說明。應(yīng)當(dāng)理解的是,此處所描述的具體實(shí)施方式僅用于說明和解釋本發(fā)明,并不用于限制本發(fā)明。第一方面,本發(fā)明提供了一種花園伯克霍爾德氏菌(Burkholderia anthina),該花園伯克霍爾德氏菌的保藏號(hào)為CGMCCNO:10843。本發(fā)明的保藏號(hào)為CGMCCNO:10843的花園伯克霍爾德氏菌,為革蘭氏陰性菌,屬于伯克氏菌科伯克霍爾德屬花園伯克霍爾德氏菌。該菌株來源于安徽宣城鉻污染土壤,采用土壤環(huán)流方式篩選并通過稀釋平板方法分離純化得到。生物學(xué)特性為:彎曲短桿狀、無芽孢、白色圓形凸起;革蘭氏染色實(shí)驗(yàn)、產(chǎn)H2S實(shí)驗(yàn)、淀粉酶實(shí)驗(yàn)陰性,明膠液化試驗(yàn)、氧化酶試驗(yàn)、接觸酶試驗(yàn)、硝酸鹽還原試驗(yàn)陽性,可利用甘露糖。其中,本發(fā)明的花園伯克霍爾德氏菌的分離過程可以包括:將100g土壤與適量粒徑約為3mm的砂?;旌暇鶆?,置于環(huán)流富集裝置的上層,200mlLB培養(yǎng)基作為環(huán)流液置于下層。啟動(dòng)蠕動(dòng)泵,富集過程中根據(jù)環(huán)流液的蒸發(fā)情況定期補(bǔ)加環(huán)流液。富集結(jié)束后,取上層土壤與下層環(huán)流液,并將上清液分別稀釋10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6、10-7、10-8,吸取適量涂布于含有50、100、200、300mg/LCr6+的LB固體培養(yǎng)基上,25-30℃培養(yǎng)3天后取菌株進(jìn)行平板劃線,分離單菌落。本發(fā)明從篩選出的菌株中獲得了一株對(duì)重金屬鉻耐抗性最強(qiáng)的菌株W-10,對(duì)該菌株進(jìn)行生理生化鑒定分析,其生物學(xué)特性為:彎曲短桿狀、無芽孢、白色圓形凸起;革蘭氏染色實(shí)驗(yàn)、產(chǎn)H2S實(shí)驗(yàn)、淀粉酶實(shí)驗(yàn)陰性,明膠液化試驗(yàn)、氧化酶試驗(yàn)、接觸酶試驗(yàn)、硝酸鹽還原試驗(yàn)陽性,可利用甘露糖。同時(shí),根據(jù)天根細(xì)菌基因組DNA提取試劑盒(TIANampbacteriaDNAkit)步驟提取該菌株的DNA,進(jìn)行16SrDNA基因序列分析,其16srDNA基因序列如SEQIDNO.1所示,結(jié)果表明該菌為花園伯克霍爾德氏菌(Burkholderiaanthina)。將該花園伯克霍爾德氏菌保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心,保藏號(hào)為CGMCCNO:10843。本發(fā)明提供的花園伯克霍爾德氏菌經(jīng)過培養(yǎng)能夠產(chǎn)生大量花園伯克霍爾德氏菌的活菌體,所述培養(yǎng)的方法沒有特別的要求,只要是能使所述花園 伯克霍爾德氏菌增殖即可,例如,可以按照107CFU/mL的接種量將花園伯克霍爾德氏菌的活菌體接種于LB培養(yǎng)基中,在25-38℃的溫度下培養(yǎng)12-36小時(shí)后,得到培養(yǎng)液。本發(fā)明中,對(duì)于花園伯克霍爾德氏菌的培養(yǎng)條件沒有特別的限定,可以為本領(lǐng)域常用的各種培養(yǎng)條件,例如,培養(yǎng)時(shí)所用的LB液體培養(yǎng)基的組成可以為:0.8-1重量%蛋白胨,0.5-0.8重量%酵母粉,1-1.5重量%氯化鈉,pH=6.8-7.0。固體LB培養(yǎng)基中還含有2.5-3.0重量%的瓊脂。培養(yǎng)時(shí)所用的無機(jī)鹽培養(yǎng)基的組成可以為:0.8-1.2重量%KH2PO4,0.8-1.2重量%K2HPO4,1-1.5重量%NH4NO3,0.03-0.08重量%MgSO4,0.001-0.003重量%CaCl2,0.01-0.03重量%FeSO4·7H2O,pH=6.0-7.5。本發(fā)明可以進(jìn)一步分離上述培養(yǎng)液中的花園伯克霍爾德氏菌的活菌體,所述分離的方法沒有特別的限制,只要是能從培養(yǎng)液中富集菌體即可,例如可以通過離心和/或過濾的方法實(shí)現(xiàn),所述離心和所述過濾的條件可以為公知的條件,本發(fā)明在此不再贅述。本發(fā)明還可以進(jìn)一步從花園伯克霍爾德氏菌的活菌體中得到細(xì)胞內(nèi)提取物,對(duì)于得到細(xì)胞內(nèi)提取物的方法沒有特別的限定,可以為本領(lǐng)域常用的各種方法,例如可以為在冰浴條件下對(duì)菌體進(jìn)行超聲破碎,離心取上清。第二方面,本發(fā)明提供了含有保藏號(hào)為CGMCCNO:10843的花園伯克霍爾德氏菌(Burkholderiaanthina)的菌劑。本發(fā)明的發(fā)明人在研究的過程中意外的發(fā)現(xiàn),本發(fā)明的花園伯克霍爾德氏菌的活菌體和死菌體均能夠有效對(duì)重金屬鉻進(jìn)行鈍化。因此,如上所述的花園伯克霍爾德氏菌的菌體可以為活菌體,也可以為死菌體,還可以為活菌體和死菌體的混合菌體,即菌劑含有所述花園伯克霍爾德氏菌的死菌體和/或活菌體。但更令人驚奇的是,本發(fā)明的發(fā)明人進(jìn)一步發(fā)現(xiàn),本發(fā)明提供的花園伯克霍爾德氏菌的細(xì)胞內(nèi)提取物,對(duì)重金屬鉻的鈍化效果更佳,因此, 優(yōu)選情況下,菌劑含有所述花園伯克霍爾德氏菌的細(xì)胞內(nèi)提取物。根據(jù)本發(fā)明,對(duì)于以上死菌體的制備方法沒有特別的限制,例如但不限于,可以通過自然裂解制備,也可以通過熱致死制備,還可以通過冰浴條件下超聲破碎制備,其中以冰浴條件下超聲破碎制備效果最優(yōu)。對(duì)于得到細(xì)胞內(nèi)提取物的方法沒有特別的限定,可以為本領(lǐng)域常用的各種方法,例如可以為在冰浴條件下對(duì)菌體進(jìn)行超聲破碎,離心取上清。本發(fā)明中,對(duì)菌劑中所述花園伯克霍爾德氏菌的濃度或細(xì)胞內(nèi)提取物的量沒有特別的限定,可以根據(jù)具體的情況進(jìn)行具體的選擇,在此不再詳細(xì)贅述。另外,根據(jù)預(yù)定的用途不同,本發(fā)明提供的菌劑可以制備為不同的劑型,并添加相應(yīng)的賦形劑等成分。其中,在何種劑型的菌劑中添加何種賦形劑為本領(lǐng)域技術(shù)人員所公知,在此不再詳細(xì)贅述。第三方面,本發(fā)明提供了上述花園伯克霍爾德氏菌和/或菌劑在鈍化鉻中的應(yīng)用。優(yōu)選情況下,鉻源為鉻污染的土壤或含鉻廢水。本發(fā)明中,“鈍化鉻”是指降低鉻污染樣品中重金屬六價(jià)鉻的含量及其生物有效性,從而達(dá)到修復(fù)重金屬鉻污染的環(huán)境的目的。第四方面,本發(fā)明提供了一種鈍化鉻的方法,該方法包括:將保藏號(hào)為CGMCCNO:10843的花園伯克霍爾德氏菌和/或含有保藏號(hào)為CGMCCNO:10843的花園伯克霍爾德氏菌的菌劑與鉻污染樣品接觸,以對(duì)鉻污染樣品中的鉻進(jìn)行鈍化。本發(fā)明方法中,對(duì)于接觸的方法沒有特別的限定,可以為本領(lǐng)域常用的各種的方法,例如可以在鉻污染樣品中加入保藏號(hào)為CGMCCNO:10843的花園伯克霍爾德氏菌和/或含有保藏號(hào)為CGMCCNO:10843的花園伯克霍爾德氏菌的菌劑,混合均勻。本發(fā)明的方法中,本發(fā)明的發(fā)明人在研究中發(fā)現(xiàn),在鉻污染樣品中加入 一定量的花園伯克霍爾德氏菌的營養(yǎng)源能夠有效加速鉻的鈍化。因此,優(yōu)選情況下,該方法還包括:在鉻污染樣品中加入營養(yǎng)源,進(jìn)一步優(yōu)選地,所述營養(yǎng)源為營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)液、玉米粉蛋白胨培養(yǎng)液、酵母膏蛋白胨培養(yǎng)液、LB培養(yǎng)液和無機(jī)鹽培養(yǎng)液中的至少一種。本發(fā)明方法中,優(yōu)選情況下,所述樣品為土壤或含鉻廢水。本發(fā)明方法中,對(duì)于加入至鉻污染樣品中的花園伯克霍爾德氏菌的形式并沒有特別的限定,只要保證加入后所述花園伯克霍爾德氏菌能夠在所述鉻污染樣品中起作用并且對(duì)重金屬鉻有效鈍化即可,加入的所述花園伯克霍爾德氏菌的形式,例如,可以為培養(yǎng)至對(duì)數(shù)期的菌體或菌液,也可以為冷凍干燥后的菌體干粉,還可以為其細(xì)胞內(nèi)提取物。本發(fā)明對(duì)加入的花園伯克霍爾德氏菌的數(shù)量和菌劑的量也沒有特別的限制,這可以根據(jù)所述鉻污染樣品中的鉻的含量以及鈍化難易程度來決定,例如,當(dāng)所述樣品中的鉻含量較高或較難鈍化或?qū)τ谒龌▓@伯克霍爾德氏菌的生存較不利時(shí),可以提高所述花園伯克霍爾德氏菌的接種量和菌劑的加入量;當(dāng)所述樣品中的鉻含量較低或較易鈍化或?qū)λ龌▓@伯克霍爾德氏菌的生存的影響較小時(shí),可以減少所述花園伯克霍爾德氏菌的接種量和菌劑的加入量。根據(jù)本發(fā)明,當(dāng)鉻污染樣品為土壤時(shí),為了進(jìn)一步促進(jìn)本發(fā)明提供的花園伯克霍爾德氏菌對(duì)鉻的鈍化效率,優(yōu)選的,將土壤中的水含量控制在至少15重量%,更優(yōu)選為18-30重量%。實(shí)施例以下將通過實(shí)施例和對(duì)比例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)描述,但并不因此限制本發(fā)明。以下實(shí)施例和對(duì)比例中的實(shí)驗(yàn)方法中,如無特殊說明,均為本領(lǐng)域常規(guī) 方法。下述實(shí)施例和對(duì)比例中所用的實(shí)驗(yàn)材料,如無特殊說明,均為自常規(guī)生化試劑商店購買得到。六價(jià)鉻去除率=(處理前六價(jià)鉻含量-處理后六價(jià)鉻含量)/處理前六價(jià)鉻含量×100%。制備例將本發(fā)明的保藏號(hào)為CGMCCNO:10843的花園伯克霍爾德氏菌在LB液體培養(yǎng)基中活化2次,每次活化均在170rpm、30±1℃下進(jìn)行12小時(shí),得到菌液,將得到的菌液以3體積%的接種量接種于300mlLB液體培養(yǎng)基中,在170rpm、30±1℃的培養(yǎng)條件下進(jìn)行培養(yǎng),3h后進(jìn)入對(duì)數(shù)期,9h后到達(dá)穩(wěn)定期,菌濃度OD600約為7。實(shí)施例1本實(shí)施例用于說明本發(fā)明的保藏號(hào)為CGMCCNO:10843的花園伯克霍爾德氏菌在水相中對(duì)鉻的耐受性及鈍化能力向300mlLB液體培養(yǎng)基中加入重鉻酸鉀,使Cr6+濃度分別為50mg/L、100mg/L和200mg/L,121℃下滅菌15min。向滅菌后的前述LB培養(yǎng)基中以3體積%的接種量接入制備例得到的菌液。170rpm,30±1℃下培養(yǎng),取樣測菌液OD600值及六價(jià)鉻的濃度并計(jì)算六價(jià)鉻去除率。其中,六價(jià)鉻的濃度用ICP-AES法進(jìn)行測定,測定方法包括:取適量菌液,8000rpm離心5min,取上清液,采用ICP-AES檢測上清液中Cr6+濃度,ICP-AES的條件包括:測定波長為267.7nm。結(jié)果顯示:12h時(shí),在Cr6+濃度為50mg/L、100mg/L和200mg/L下,該菌株能達(dá)到的最高OD600值分別為4.33、6.23和7.37,對(duì)Cr6+的去除率分別為45.33%、55.60%和83.9%。表明本發(fā)明的保藏號(hào)為CGMCCNO:10843 的花園伯克霍爾德氏菌不僅能夠耐受高濃度的鉻污染,而且還有較高的鉻鈍化能力。實(shí)施例2本實(shí)施例用于說明本發(fā)明的保藏號(hào)為CGMCCNO:10843的花園伯克霍爾德氏菌在寡營養(yǎng)條件下對(duì)土壤中鉻的鈍化效果將100mlLB液體培養(yǎng)基在121℃下滅菌15min,然后接入1體積%的制備例得到的菌液,170rpm、30±1℃下培養(yǎng)12h。將菌液在8000rpm下離心5min,將得到的菌體用無菌去離子水進(jìn)行水洗并重懸制成100ml菌的水溶液,然后將該菌的水溶液加入到1kg重金屬鉻的污染土壤(六價(jià)鉻含量為52.36mg/kg)中,再加入適量無菌去離子水,攪拌均勻,培養(yǎng)20d,保證每天土壤的含水量為20%。20天后,將土壤在70℃下烘干,準(zhǔn)確稱取0.5g,加入10ml65重量%的HNO3后在195℃下微波消解20min,取上清液過濾,用ICP-AES測定Cr6+含量。土壤中Cr6+由52.36mg/kg降到23.88mg/kg。表明經(jīng)此菌株處理過的鉻污染土壤中鉻的含量明顯下降,說明在寡營養(yǎng)條件下,該菌株對(duì)土壤中重金屬鉻的鈍化具有良好的效果,能夠有效降低鉻在土壤中的生物可利用度。實(shí)施例3本實(shí)施例用于說明本發(fā)明的保藏號(hào)為CGMCCNO:10843的花園伯克霍爾德氏菌在富營養(yǎng)條件下對(duì)土壤中鉻的鈍化效果將100mlLB液體培養(yǎng)基在121℃下滅菌15min,然后接入1體積%的制備例得到的菌液,170rpm、30±1℃下培養(yǎng)12h。將前述菌液加入到1kg重金屬鉻的污染土壤(六價(jià)鉻含量為52.36mg/kg)中,加入適量無菌去離子水,攪拌均勻,培養(yǎng)20d,保證每天土壤的含水量為20%。20天后,將土壤在 70℃下烘干,準(zhǔn)確稱取0.5g,加入10ml65重量%的HNO3后在195℃下微波消解20min,取上清液過濾,用ICP-AES測定Cr6+含量。土壤中Cr6+由52.36mg/kg降到8.38mg/kg。表明經(jīng)此菌株處理過的鉻污染土壤中鉻的含量明顯下降,說明在富營養(yǎng)條件下,該菌株對(duì)土壤中重金屬鉻的鈍化具有良好的效果,且明顯優(yōu)于寡營養(yǎng)條件,能夠更有效降低鉻在土壤中的生物可利用度。實(shí)施例4本實(shí)施例用于說明本發(fā)明的保藏號(hào)為CGMCCNO:10843的花園伯克霍爾德氏菌在水相中不同形態(tài)對(duì)六價(jià)鉻的鈍化能力將100mlLB液體培養(yǎng)基在121℃下滅菌15min,然后接入1體積%的制備例得到的菌液,170rpm、30±1℃下培養(yǎng)12h。將菌液4℃離心取上清,即為上清樣品。用10mmol/LTris-HCI緩沖液(pH7.0)洗滌前述得到的菌體2次后重懸,平均分成3份。一份不作處理,即為靜息細(xì)胞樣品;一份加入1體積%甲苯和0.2體積%TritonX-100振蕩,即為滲透性細(xì)胞樣品;一份在冰浴條件下超聲破碎,超聲頻率為25KHz,超聲時(shí)間為20min,4℃離心取上清,即為細(xì)胞內(nèi)提取物樣品。四份樣品分別加入一定量的重鉻酸鉀,使Cr6+濃度為50mg/L。12h后離心并測定上清液中的Cr6+濃度,六價(jià)鉻去除率結(jié)果如表1所示。表1項(xiàng)目六價(jià)鉻去除率上清樣品25.8%靜息細(xì)胞樣品57.6%滲透性細(xì)胞樣品73.6%細(xì)胞內(nèi)提取物樣品88.5%由表1可以看出,細(xì)胞內(nèi)提取物樣品對(duì)六價(jià)鉻去除率高達(dá)88.5%,遠(yuǎn)高于上清樣品、靜息細(xì)胞樣品和滲透性細(xì)胞樣品,表明本發(fā)明的CGMCCNO:10843的花園伯克霍爾德氏菌的細(xì)胞內(nèi)提取物樣品能夠更有效的鈍化鉻。以上詳細(xì)描述了本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式,但是,本發(fā)明并不限于上述實(shí)施方式中的具體細(xì)節(jié),在本發(fā)明的技術(shù)構(gòu)思范圍內(nèi),可以對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行多種簡單變型,這些簡單變型均屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。另外需要說明的是,在上述具體實(shí)施方式中所描述的各個(gè)具體技術(shù)特征,在不矛盾的情況下,可以通過任何合適的方式進(jìn)行組合,為了避免不必要的重復(fù),本發(fā)明對(duì)各種可能的組合方式不再另行說明。此外,本發(fā)明的各種不同的實(shí)施方式之間也可以進(jìn)行任意組合,只要其不違背本發(fā)明的思想,其同樣應(yīng)當(dāng)視為本發(fā)明所公開的內(nèi)容。當(dāng)前第1頁1 2 3