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撒丁島梭菌7α?羥基類固醇脫氫酶突變體R194A的制作方法

文檔序號(hào):12248791閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種撒丁島梭菌7α-羥基類固醇脫氫酶突變體,其特征在于,其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示,是氨基酸序列為SEQ ID NO:1的7α-羥基類固醇脫氫酶的第194位氨基酸由Arg變?yōu)锳la所得。

2.編碼權(quán)利要求1所述的撒丁島梭菌7α-羥基類固醇脫氫酶突變體的基因。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的基因,其特征在于,其核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。

4.一種表達(dá)盒,其特征在于,包含權(quán)利要求2所述的基因。

5.一種載體,其特征在于,包含權(quán)利要求2所述的基因或權(quán)利要求4所述的表達(dá)盒。

6.一種重組細(xì)胞,其特征在于,包含權(quán)利要求2所述的基因或權(quán)利要求4所述的表達(dá)盒或權(quán)利要求5所述的載體。

7.一種制備權(quán)利要求1所述的撒丁島梭菌7α-羥基類固醇脫氫酶突變體的方法,其特征在于,在能夠成功誘導(dǎo)蛋白表達(dá)的條件下培養(yǎng)權(quán)利要求6所述的重組細(xì)胞并分離得到撒丁島梭菌7α-羥基類固醇脫氫酶突變體。

8.一種催化劑,其特征在于,其有效成分包含權(quán)利要求1所述的撒丁島梭菌7α-羥基類固醇脫氫酶突變體。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的催化劑,其特征在于,還包括與權(quán)利要求1所述的撒丁島梭菌7α-羥基類固醇脫氫酶突變體同時(shí)使用時(shí)能夠提高酶催化效率或增加酶穩(wěn)定性的其它試劑。

10.一種實(shí)現(xiàn)化學(xué)物質(zhì)的羰基不對(duì)稱還原的方法,其特征在于,使用權(quán)利要求1所述的撒丁島梭菌7α-羥基類固醇脫氫酶突變體或權(quán)利要求8或9所述的催化劑與反應(yīng)底物在15-37℃、pH 6.0-11.0條件下進(jìn)行催化反應(yīng)。

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