本發(fā)明屬于食品中抗生素殘留快速檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種基于電流型便攜式葡萄糖傳感器(PGM)及其配套電極結(jié)合S.thermophilus對(duì)葡萄糖發(fā)酵抑制率的測(cè)定和計(jì)算，實(shí)現(xiàn)以客觀判定為依據(jù)對(duì)牛乳或雞組織中抗生素殘留的快速檢測(cè)。

背景技術(shù)：

抗生素具有良好的抗感染效果，價(jià)格便宜，容易獲得等優(yōu)點(diǎn)，在畜牧業(yè)和水產(chǎn)業(yè)得到了廣泛應(yīng)用，但也因此造成了嚴(yán)重的抗生素殘留問(wèn)題。長(zhǎng)期使用抗生素或者食用抗生素殘留的食品都會(huì)造成人及其動(dòng)物體內(nèi)抗生素累積，危害人體健康，如發(fā)生過(guò)敏反應(yīng)、微生態(tài)平衡破壞致免疫系統(tǒng)受損以及體內(nèi)產(chǎn)生一定的耐藥性致病菌株；如長(zhǎng)期食用的食品中含有氨基糖苷類抗生素殘留則會(huì)引起中耳炎和腎毒性疾?。欢绻梭w內(nèi)的抗生素殘留量達(dá)到一定程度時(shí)還可能會(huì)導(dǎo)致人體癌癥和基因突變。

近年來(lái)，由于經(jīng)濟(jì)利益的驅(qū)使，現(xiàn)在抗生素在畜、禽和水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)生產(chǎn)中的濫用越來(lái)越多，已經(jīng)成為我國(guó)和全世界都面臨的嚴(yán)重問(wèn)題。長(zhǎng)期食用含有抗生素殘留的食品，可能會(huì)導(dǎo)致人體產(chǎn)生過(guò)敏反應(yīng)和耐藥性等，如氯霉素，會(huì)導(dǎo)致再生障礙性貧血和粒細(xì)胞缺乏癥，從而危害人類的健康。目前抗生素殘留的檢測(cè)方法主要有微生物抑制法、理化分析法和免疫檢測(cè)法，其中微生物抑制法的TTC法，我國(guó)食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的檢查牛乳中抗生素殘留的檢測(cè)方法(GB5409-85)。該法簡(jiǎn)單、快速，檢測(cè)成本低，3～4h可以出結(jié)果，適用于基層檢測(cè)單位采用，但是需要通過(guò)肉眼主觀來(lái)判斷顯色狀態(tài)，沒(méi)有客觀判定標(biāo)準(zhǔn)，易產(chǎn)生一定的誤差，并且對(duì)微紅色難以做出準(zhǔn)確的判斷；理化分析方法雖然具有較高的準(zhǔn)確性和靈敏性，但是樣品前處理和檢測(cè)過(guò)程都較復(fù)雜，儀器設(shè)備昂貴。因此，研制簡(jiǎn)便、快速、經(jīng)濟(jì)和準(zhǔn)確的抗生素殘留的檢測(cè)方法具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。

電流型便攜式葡萄糖傳感器(簡(jiǎn)稱便攜式血糖儀，Personal glucose meters，PGM)具有體積微小、便攜、經(jīng)濟(jì)、操作簡(jiǎn)便、快速準(zhǔn)確等突出優(yōu)點(diǎn)，己被廣泛應(yīng)用于糖尿病患者血糖的醫(yī)院隨時(shí)檢測(cè)和自我監(jiān)測(cè)。將具有如此突出優(yōu)點(diǎn)和成熟的檢測(cè)技術(shù)引入到繁瑣的食品致病菌和抗生素殘留的快速檢測(cè)領(lǐng)域，具有很好的創(chuàng)新性、研究?jī)r(jià)值和應(yīng)用前景。目前僅有的基于PGM構(gòu)建的對(duì)非糖類物質(zhì)檢測(cè)的方法所必須用到的蔗糖轉(zhuǎn)化酶標(biāo)記抗體或核酸類物質(zhì)等生物制劑的制備較繁瑣，活性等易受貯存時(shí)間和貯存環(huán)境等條件作用而降低，不但影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，同時(shí)，在簡(jiǎn)便、快捷和經(jīng)濟(jì)方面的優(yōu)勢(shì)也受到了很大影響。

本發(fā)明將微生物檢測(cè)法易于普及的特點(diǎn)與PGM簡(jiǎn)便靈敏的優(yōu)勢(shì)相結(jié)合，采用S.thermophilus作為指示菌，利用PGM測(cè)定S.thermophilus發(fā)酵體系中的葡萄糖濃度，若樣品中有抗生素殘留，S.thermophilus生長(zhǎng)繁殖受到抑制，消耗葡萄糖的能力也就受到抑制?；诖嗽恚耘Ｈ橹星嗝顾?、氯霉素、慶大霉素和卡那霉素殘留以及雞組織中青霉素和慶大霉素殘留為檢測(cè)對(duì)象，對(duì)一系列試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行綜合分析和對(duì)比，以提高此方法的靈敏度與穩(wěn)定性，為抗生素殘留的檢測(cè)提供了一種簡(jiǎn)便、快速、經(jīng)濟(jì)、準(zhǔn)確的新方法。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

為了克服現(xiàn)有技術(shù)中的上述缺陷，本發(fā)明提供了一種基于PGM快速檢測(cè)牛乳或雞組織中抗生素殘留的方法。

基于PGM快速檢測(cè)牛乳或雞組織中抗生素殘留的方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)菌種的培養(yǎng)和收集：將嗜熱鏈球菌(S.thermophilus)菌株劃斜面置于37℃培養(yǎng)12h后，挑取一環(huán)S.thermophilus菌種，接種到滅菌脫脂乳中，置于37±1℃下培養(yǎng)15h進(jìn)行活化；取活化后的菌液置于MRS培養(yǎng)基中進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)15h，用生理鹽水洗下菌體，最后用生理鹽水懸浮菌體計(jì)數(shù)1×10⁸cfu/mL后備用，得菌液；

(2)取牛乳或勻漿后的雞組織樣本5.0g，加入葡萄糖使葡萄糖濃度為10～15.0mmol/L，再加入步驟(1)的菌液1mL；對(duì)照組為無(wú)抗牛乳或勻漿后的無(wú)抗雞組織5.0g，加入葡萄糖使其濃度與樣本相同，再加入步驟(1)的菌液1mL；空白組為無(wú)抗牛乳或勻漿后的無(wú)抗雞組織5.0g，加入葡萄糖使其濃度與樣本相同，不加菌液；80℃滅菌20min，在對(duì)應(yīng)時(shí)間0min、180min取出，用電流型便攜式葡萄糖傳感器(PGM)測(cè)定樣本、對(duì)照組和空白組中葡萄糖含量，計(jì)算葡萄糖濃度的變化(ΔC)，ΔC＝C1－C2，C1為0h時(shí)的葡萄糖濃度，C2為180min時(shí)的葡萄糖濃度；

(3)計(jì)算葡萄糖發(fā)酵抑制率：葡萄糖發(fā)酵抑制率＝[(對(duì)照ΔC-樣品ΔC-空白ΔC)/對(duì)照ΔC]×100％；

(4)葡萄糖發(fā)酵抑制率等于或大于50％的，即可判定被測(cè)牛乳或雞組織中抗生素殘留為陽(yáng)性。

進(jìn)一步地，步驟(2)中，當(dāng)樣本為牛乳時(shí)，加入葡萄糖使葡萄糖濃度為10mmol/L。當(dāng)樣本為雞組織時(shí)，加入葡萄糖使葡萄糖濃度為15mmol/L。

抗生素殘留是食品中重要危害因素，特別是在我國(guó)，為構(gòu)建更敏感準(zhǔn)確的殘留抗生素快速檢測(cè)新方法，本發(fā)明根據(jù)抗生素能抑制嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophilus，S.thermophilus)發(fā)酵且PGM能快速檢測(cè)一定基質(zhì)中葡萄糖發(fā)酵抑制率的原理，創(chuàng)建了一種牛乳和雞組織中抗生素殘留的快速檢測(cè)方法。在無(wú)抗乳中添加適量葡萄糖，利用S.thermophilus在發(fā)酵過(guò)程中能分解葡萄糖和在抗生素存在的情況下生長(zhǎng)受到抑制的原理，用PGM測(cè)定發(fā)酵過(guò)程中的葡萄糖濃度。對(duì)牛乳中葡萄糖初始濃度、S.thermophilus添加量、檢測(cè)時(shí)間等因素的選擇和優(yōu)化，結(jié)果確定乳中抗生素檢測(cè)的最佳條件為葡萄糖初始濃度為15.0mmol/L，S.thermophilus的添加量為1×10⁸cfu/mL，檢測(cè)時(shí)間為3h，牛乳中青霉素、鏈霉素、慶大霉素和卡那霉素的檢測(cè)限分別為4μg/L、50μg/L、100μg/L、50μg/L，雞組織中青霉素和慶大霉素的檢測(cè)限分別為12.5μg/kg、50μg/kg。此方法具有簡(jiǎn)便快速、檢測(cè)成本低廉、容易實(shí)施等優(yōu)點(diǎn)，適用于基層檢測(cè)機(jī)構(gòu)的抗生素殘留檢測(cè)。

附圖說(shuō)明

圖1是PGM的校正曲線圖。

圖2是不同培養(yǎng)液中葡萄糖濃度隨時(shí)間的變化曲線圖。

圖3a、圖3b是牛乳中葡萄糖消耗量隨菌濃度的變化曲線圖。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1：牛乳中4種抗生素殘留的檢測(cè)

菌種的培養(yǎng)和收集：將嗜熱鏈球菌(S.thermophilus)菌株劃斜面置于37℃培養(yǎng)12h后置于4℃冰箱中保藏以用于抗生素的檢測(cè)。挑取一環(huán)S.thermophilus菌種，接種到滅菌脫脂乳中，置于37±1℃下培養(yǎng)15h進(jìn)行活化。取活化后的菌液置于MRS培養(yǎng)基中進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)15h，用生理鹽水洗下菌體，最后用生理鹽水懸浮菌體計(jì)數(shù)后備用。

血糖儀校正及適用性確定：含有細(xì)菌的牛奶與測(cè)定血糖時(shí)用的血液在整體組成成分方面差別很大，為確定PGM可否適用于牛奶體系，精確配制含不同濃度葡萄糖的牛奶作為標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行對(duì)照，分別用PGM測(cè)定牛奶中葡萄糖濃度來(lái)確定血糖儀的準(zhǔn)確性和精確度，以保證試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

PGM是專門設(shè)計(jì)制作用來(lái)測(cè)定人體血液中葡萄糖含量的，測(cè)試用電極反應(yīng)區(qū)域內(nèi)發(fā)生反應(yīng)往往是有嚴(yán)格條件限制的，在其工作范圍1.1mmol·L^-1～33.3mmol·L^-1內(nèi)，為保證該研究中測(cè)試結(jié)果的準(zhǔn)確性，以葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液作為對(duì)照，檢測(cè)結(jié)果如圖1所示，其中C1是葡萄糖-牛乳中的葡萄糖濃度，C2是PGM所測(cè)得的葡萄糖濃度，當(dāng)葡萄糖濃度在1.1mmol·L^-1～33.3mmol·L^-1之間變化時(shí)，PGM檢測(cè)到的葡萄糖濃度與標(biāo)準(zhǔn)液中葡萄糖濃度呈良好的線性關(guān)系，線性方程為C1(mmol/L)＝1.59C2(mmol/L)+1.57，相關(guān)系數(shù)為0.996。試驗(yàn)結(jié)果表明，PGM能夠準(zhǔn)確檢測(cè)出葡萄糖-牛乳中葡萄糖濃度，可適用于該體系中。

檢測(cè)用菌種的選擇及菌液工作濃度的優(yōu)化確定：基于對(duì)葡萄糖發(fā)酵受抑制性及對(duì)多種抗生素敏感的特性，選擇嗜熱鏈球菌(S.thermophilus)為檢測(cè)用菌；菌株經(jīng)活化、擴(kuò)大培養(yǎng)并制成生理鹽水菌懸液。在多支試管中分別加入4.5mL含適量葡萄糖的滅菌牛乳，用生理鹽水對(duì)菌種液進(jìn)行10¹～10⁴倍稀釋，稀釋后的菌液濃度分別為10⁶～10¹⁰cfu/mL，將不同梯度的菌種液取0.5mL分別加至上述試管中混勻，于37±1℃下振蕩培養(yǎng)，分別按對(duì)應(yīng)時(shí)間(0min，90min，120min，150min，180min)將試管取出，用PGM測(cè)定牛乳中葡萄糖含量。為進(jìn)一步確定菌液的最佳工作濃度，選擇合適的幾個(gè)菌液濃度的菌種液0.5mL分別加至4.5mL含適量葡萄糖的有抗滅菌牛乳中，混勻，于37±1℃下振蕩培養(yǎng)，分別按對(duì)應(yīng)時(shí)間(0min，90min，120min，150min，180min)將試管取出，用PGM測(cè)定牛乳中葡萄糖含量。

對(duì)于抗生素殘留檢測(cè)追求快速，當(dāng)指示菌濃度大、活性高時(shí)，如圖3a中，在90min時(shí)，PGM檢測(cè)到牛乳中葡萄糖濃度相對(duì)于初始值就有明顯的變化，但是菌液濃度太高，對(duì)低濃度抗生素的敏感度低，抗生素檢出限就會(huì)變高，檢測(cè)方法的靈敏度就會(huì)變低；但也不能為追求靈敏度，而過(guò)度減小菌液濃度，延長(zhǎng)檢測(cè)時(shí)間，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)不符合目前對(duì)乳制品中抗生素殘留檢測(cè)的需求。以國(guó)標(biāo)TTC法為基準(zhǔn)，最適的檢測(cè)時(shí)間確定為2.5h～3.0h。

從圖3a中可看出，菌液濃度為1×10¹⁰cfu/mL時(shí)，葡萄糖消耗太快，容易造成假陰性；菌液濃度為1×10⁶cfu/mL至1×10⁷cfu/mL時(shí)，在3.0h時(shí)葡萄糖還沒(méi)有明顯的消耗，要適當(dāng)?shù)难娱L(zhǎng)時(shí)間，但導(dǎo)致檢測(cè)時(shí)間太長(zhǎng)。所以選擇菌液濃度為1×10⁹cfu/mL和1×10⁸cfu/mL的菌種液做進(jìn)一步試驗(yàn)確定最佳工作濃度，將菌液濃度為1×10⁹cfu/mL和1×10⁸cfu/mL的菌種液分別置于無(wú)抗牛乳和有抗牛乳中做對(duì)比，通過(guò)抑制率情況來(lái)選擇最佳的菌液工作濃度，從圖3b中可看出，a和b分別是菌液濃度為1×10⁸cfu/mL菌種液在有抗牛乳和無(wú)抗牛乳中的所測(cè)數(shù)據(jù)，c和d分別是菌液濃度為1×10⁹cfu/mL菌種液在有抗牛乳和無(wú)抗牛乳中的所測(cè)數(shù)據(jù)，可以判斷出菌液濃度為1×10⁸cfu/mL時(shí)，在有抗牛奶中所受到的抑制比在菌液濃度為1×10⁹cfu/mL中受到的大，即菌液濃度為1×10⁸cfu/mL對(duì)抗生素更敏感，因此選擇菌液濃度為1×10⁸cfu/mL為最佳工作濃度。

葡萄糖濃度對(duì)嗜熱鏈球菌消耗葡萄糖的影響：分別配制葡萄糖濃度為0mmol/L，5.00mmol/L，15.00mmol/L，10.00mmol/L，20.00mmol/L的水溶液各50mL于錐形瓶中，加熱至80℃，加入適量乳粉混合均勻，經(jīng)高壓滅菌后，分別從每個(gè)錐形瓶移取450μL培養(yǎng)液于試管中，加入500μL菌液，于37±1℃下振蕩培養(yǎng)，分別按對(duì)應(yīng)時(shí)間(0min，30min，60min，90min，120min，150min，180min)將試管取出，用PGM測(cè)定脫脂乳中葡萄糖含量。

由圖2可知，在不加葡萄糖的滅菌牛乳中仍可測(cè)出葡萄糖說(shuō)明乳粉中含有少量葡萄糖，而在加入菌液(1×10¹⁰cfu/mL)之后，PGM讀數(shù)幾乎沒(méi)變化，推測(cè)嗜熱鏈球菌在過(guò)低的葡萄糖濃度下消耗乳糖，不消耗葡萄糖。在加入葡萄糖5.0mmol/L時(shí)，在0-120min內(nèi)S.thermophilus葡萄糖消耗量明顯，但是PGM讀數(shù)過(guò)低，不宜采??；15.0mmol/L，20.0mmol/L時(shí)，在0-60min內(nèi)高濃度的葡萄糖影響了S.thermophilus對(duì)葡萄糖的消耗，其消耗量變化幅度不大，會(huì)對(duì)抗生素檢測(cè)造成額外的誤差，因此在之后的測(cè)定中均選用10mmol/L。

牛乳中4種抗生素檢測(cè)限的確定：

抗生素在牛乳中對(duì)S.thermophilus葡萄糖發(fā)酵抑制率測(cè)定：用含適量葡萄糖的滅菌牛奶配制這4種抗生素的標(biāo)準(zhǔn)品，濃度梯度按照牛奶中的這4種抗生素的最大允許殘留限量(MRL)的n倍來(lái)配制(MRL×n)，n＝0.25、0.5、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0。取各梯度抗生素的牛乳4.5mL，加入適量濃度的菌液500μL，對(duì)照組加入4.5mL無(wú)抗牛乳，500μL菌液，空白組為4.5mL無(wú)抗牛乳，不加菌液，各試管在80℃加熱5min。在對(duì)應(yīng)時(shí)間(0min，120min，150min，180min)將試管取出，用PGM測(cè)定牛乳中葡萄糖含量，計(jì)算各試管中葡萄糖濃度的變化(ΔC)，ΔC＝C1－C2,C1為0h牛乳中葡萄糖濃度，C2為180min牛乳中葡萄糖濃度。

抑制率計(jì)算：抑制率＝(對(duì)照ΔC-樣品ΔC-空白ΔC)/對(duì)照ΔC。

確定本方法對(duì)這4種抗生素的檢測(cè)限(最低抑菌濃度)。

選定青霉素濃度梯度1μg/L、2μg/L、4μg/L、8μg/L、16μg/L、32μg/L，鏈霉素、慶大霉素和卡那霉素濃度梯度50μg/L、100μg/L、200μg/L、400μg/L、800μg/L、1600μg/L，在對(duì)應(yīng)時(shí)間(0min，120min，150min，180min)測(cè)定一次，對(duì)照樣品為無(wú)抗牛乳4.5mL加500μL菌液，，空白樣品為無(wú)抗牛乳4.5mL。測(cè)定結(jié)果如下。

表1不同濃度青霉素對(duì)牛乳中葡萄糖濃度變化的影響

表2不同濃度鏈霉素對(duì)牛乳中葡萄糖濃度變化的影響

表3不同濃度慶大霉素對(duì)牛乳中葡萄糖濃度變化的影響

表4不同濃度卡那霉素對(duì)牛乳中葡萄糖濃度變化的影響

從以上表中可看出，與對(duì)照組相比，對(duì)添加有抗生素的牛乳對(duì)S.thermophilus發(fā)酵葡萄糖都有抑制作用，而對(duì)于在180min時(shí)抑制率大于等于50％作為對(duì)牛乳中S.thermophilus有明顯抑制作用的判斷依據(jù)。由此可說(shuō)明當(dāng)青霉素濃度大于4μg/L、鏈霉素濃度大于50μg/L、慶大霉素濃度大于100μg/L、卡那霉素濃度大于50μg/L時(shí)，對(duì)牛乳中的S.thermophilus有明顯的抑制作用，而我國(guó)對(duì)牛奶中這四種抗生素的最高殘留量(MRL)分別為青霉素4μg/L，鏈霉素、慶大霉素和卡那霉素均為200μg/L，因此，該方法的檢測(cè)限能達(dá)到我國(guó)對(duì)牛乳中這四種抗生素的最高殘留限量(MRL)的要求。

實(shí)施例2：雞組織中2種抗生素檢測(cè)

抗生素在雞組織中對(duì)S.thermophilus葡萄糖發(fā)酵抑制率測(cè)定：農(nóng)業(yè)部235號(hào)公告規(guī)定了部分藥物在動(dòng)物可食組織中的最高殘留限量(MRL)，其中青霉素、慶大霉素在雞組織中的MRL為50μg/kg、100μg/kg。采用空白肌肉添加抗生素標(biāo)準(zhǔn)品的方法，以雞組織中的抗生素最大允許殘留限量(MRL)的n倍制成一系列濃度梯度(MRL×n)，n＝0.25、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0。取勻漿后的各梯度抗生素的雞組織5.0g，加入10mL含適量葡萄糖的滅菌無(wú)抗牛乳，再加入適量濃度的菌液1mL，對(duì)照組加入勻漿后的無(wú)抗雞組織5.0g，10mL含適量葡萄糖的滅菌無(wú)抗牛乳，菌液1mL，空白組為勻漿后的無(wú)抗雞組織5.0g，10mL含適量葡萄糖的滅菌無(wú)抗牛乳，不加菌液，各試管在80℃滅菌20min。在對(duì)應(yīng)時(shí)間(0min，120min，150min，180min)將試管取出，用PGM測(cè)定牛乳中葡萄糖含量，計(jì)算各試管中葡萄糖濃度的變化(ΔC)，ΔC＝C1－C2,C1為0h時(shí)的葡萄糖濃度，C2為180min時(shí)的葡萄糖濃度。

抑制率計(jì)算：抑制率＝(對(duì)照ΔC-樣品ΔC-空白ΔC)/對(duì)照ΔC。

確定本方法對(duì)這2種抗生素的檢測(cè)(最低抑菌濃度)。

選定青霉素濃度梯度12.5μg/kg、25μg/kg、50μg/kg、100μg/kg、200μg/kg、400μg/kg的雞組織，慶大霉素濃度梯度25μg/kg、50μg/kg、100μg/kg、400μg/kg、400μg/kg、800μg/kg，在對(duì)應(yīng)時(shí)間(0min，120min，150min，180min)測(cè)定一次，對(duì)照組為勻漿后的無(wú)抗雞組織5.0g加10mL葡萄糖濃度為15.0mmol/L的滅菌無(wú)抗牛乳，菌液1mL，空白組為勻漿后的無(wú)抗雞組織5.0g，加10mL含葡萄糖濃度為15.0mmol/L的滅菌無(wú)抗牛乳，不加菌液。測(cè)定結(jié)果如下。

表5不同濃度青霉素對(duì)雞組織中葡萄糖濃度變化的影響

表6不同濃度慶大霉素對(duì)雞組織中葡萄糖濃度變化的影響

從以上表中可看出，與對(duì)照組相比，對(duì)添加有抗生素的牛乳對(duì)S.thermophilus都有抑制作用，而對(duì)于在180min時(shí)抑制率大于等于50％作為對(duì)S.thermophilus有明顯抑制作用判斷依據(jù)。由此可說(shuō)明當(dāng)青霉素濃度大于12.5μg/kg、慶大霉素濃度大于50μg/kg時(shí)，對(duì)牛乳中的S.thermophilus有明顯的抑制作用，而我國(guó)對(duì)雞組織中這兩種抗生素的最高殘留量(MRL)分別為青霉素50μg/kg，慶大霉素為100μg/kg，因此，該方法的檢測(cè)限能達(dá)到我國(guó)對(duì)雞組織中這兩種抗生素的最高殘留限量(MRL)的要求。

實(shí)施例3：準(zhǔn)確性試驗(yàn)

將市售的牛乳和雞肝樣品各自隨機(jī)分成30份，樣品總數(shù)為60份，分別隨機(jī)加入抗生素制備人工模擬試驗(yàn)樣品，采用PGM進(jìn)行檢測(cè)，并將檢測(cè)結(jié)果與國(guó)標(biāo)法進(jìn)行對(duì)比。

為驗(yàn)證該方法的準(zhǔn)確性，將2個(gè)人工制備的模擬樣品分別隨機(jī)分成30份，在最佳條件下，分別用該方法與國(guó)標(biāo)法對(duì)各樣品進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果如表7所示。由表7可知，與國(guó)標(biāo)法相比，該方法具有較高的準(zhǔn)確率，結(jié)果表明PGM可用于實(shí)際樣品中抗生素殘留的檢測(cè)。

表7國(guó)標(biāo)法與PGM方法檢測(cè)結(jié)果對(duì)照

本發(fā)明以葡萄糖為信號(hào)轉(zhuǎn)換分子，利用S.thermophilus發(fā)酵葡萄糖原理，用PGM對(duì)抗生素殘留進(jìn)行了檢測(cè)，研制了一種新穎的、簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)的方法用于抗生素殘留的檢測(cè)。其檢測(cè)限能達(dá)到我國(guó)對(duì)牛乳和雞肉組織中對(duì)應(yīng)抗生素的最高殘留限量(MRL)的要求，與理化分析法相比，該方法簡(jiǎn)便經(jīng)濟(jì)，易于推廣；與TTC法相比，更加靈敏準(zhǔn)確，并且還可以用于動(dòng)物性食品中抗生素殘留的檢測(cè)。雖然不能定性檢測(cè)某一抗生素，但用來(lái)初步篩選檢測(cè)牛乳和雞組織中的抗生素殘留，仍然是一種簡(jiǎn)便、快速、效果明顯的方法。該方法檢測(cè)成本低廉，不需要昂貴的儀器，更適合基層檢測(cè)單位的常規(guī)檢測(cè)。