本發(fā)明涉及沙棘多肽的制備,具體涉及一種抗氧化沙棘多肽的制備方法。
背景技術(shù):
沙棘是一種珍貴的藥食兩用的作物,研究表明沙棘中含有維C、胡蘿卜素、維E、維B1、維B2、葉酸等多種維生素,還有豐富的黃酮類、原花青素和異鼠李素等生物活性物質(zhì)。過去人們對沙棘資源的開發(fā)主要集中在提取果汁、沙棘油和提取總黃酮等方面,加工后的殘渣一般被棄置或作為粗飼料來處理。雖然沙棘籽中含有25%~28%的蛋白質(zhì),但是這些蛋白質(zhì)大多被木質(zhì)纖維包裹,蛋白消化利用率很低。如果能夠?qū)⑦@些蛋白質(zhì)有效地水解加工成小分子的多肽,不但可以大大提高消化吸收效率,而且還有許多保健作用。目前關(guān)于大豆多肽的抗氧化方面有過不少的報道,抗氧化多肽作為一種具有特殊功能的肽類物質(zhì),能夠清除體內(nèi)的自由基,保護一些易被氧化的物質(zhì)。對比大豆與沙棘籽中的蛋白質(zhì)組成與氨基酸配比能夠發(fā)現(xiàn)沙棘與大豆一樣具有良好的氨基酸配比,具有人體人體必須的八種氨基酸。目前國內(nèi)關(guān)于沙棘籽多肽的研究較少,對其功能性研究更少,基本沒有關(guān)于沙棘籽多肽抗氧化實驗方面的報道。國外對于沙棘的研究主要在沙棘的藥用價值方面,主要為沙棘油、沙棘黃酮等方面,關(guān)于沙棘蛋白及沙棘多肽的研究較少。
本發(fā)明對沙棘籽多肽在抗氧化和清除自由基等方面進行了研究,為開發(fā)抗氧化食品和化妝品奠定基礎(chǔ)。
技術(shù)實現(xiàn)要素:
本發(fā)明的目的在于提供的一種抗氧化沙棘多肽的制備方法,為開發(fā)沙棘籽多肽抗氧化食品和化妝品奠定基礎(chǔ)。
為實現(xiàn)上述發(fā)明目的,本發(fā)明采取的技術(shù)方案是:該一種抗氧化沙棘多肽的制備方法,是沙棘籽為原料,低溫提取多肽,其制備方法包括:處理勻漿,細胞破碎、酶解,提取過濾,濃縮后噴霧干燥,得沙棘多肽。
一種抗氧化沙棘多肽的制備方法按如下工藝步驟:
(1). 將沙棘籽清洗、淋水、浸泡5-6 小時;
(2). 將軟化的沙棘籽加入其重量的5-10 倍40-60℃的蒸餾水,于高壓均質(zhì)機中,破碎植物細胞5-10 分鐘,用8.0mol/L HCl 溶液,控制pH 值2-4,底物質(zhì)量濃度為0.5-1%,酶液用量占沙棘籽重量10-20%,高壓均質(zhì)5-10 分鐘,冷卻至室溫,3000r/min 離心5 分鐘,上清液70-90℃滅酶30-50 分鐘,減壓濃縮,得到多肽濃縮液;
(3). 將離心剩余殘渣加入3-5 倍的40-60℃蒸餾水,進行2 次高壓均質(zhì),方法與以上步驟相同;
(4). 將多肽濃縮液噴霧干燥,得沙棘籽多肽。
所述酶優(yōu)選為胃蛋白酶。
沙棘籽多肽溶液在20mg/mL濃度條件下,總抗氧化能力(AOV)的測定表明,羥自由基清除率 91.35%, 超氧陰離子自由基清除率64.33%,具有很強抗氧化性,在抗氧化食品和化妝品方面具有廣闊的應(yīng)用前景。
具體實施方式
下面的實施例用來進一步說明本發(fā)明,而不應(yīng)該是對本發(fā)明范圍的限制:
實施例1
取20g沙棘籽(蛋白含量為25%)清洗、淋水、浸泡5小時,加入40℃100ml蒸餾水,于高壓均質(zhì)機中,破碎植物細胞10 分鐘,用8.0mol/L HCl 溶液,控制pH 值2,加入胃蛋白酶2g,高壓均質(zhì)10 分鐘,冷卻至室溫,3000r/min 離心5 分鐘,上清液70℃滅酶50 分鐘,減壓濃縮,得到多肽濃縮液;將離心剩余殘渣加入40℃60ml蒸餾水,進行2 次高壓均質(zhì),方法與以上步驟相同;將合并的多肽濃縮液噴霧干燥,得沙棘籽多肽。
將以上沙棘籽多肽配制成20mg/ml溶液,總抗氧化能力(AOV)的測定表明,該多肽溶液在20mg/mL時,羥自由基清除率 91.35%, 超氧陰離子自由基清除率64.33%。
實施例2
取100g沙棘籽(蛋白含量為25%)清洗、淋水、浸泡5小時,加入60℃1000ml蒸餾水,于高壓均質(zhì)機中,破碎植物細胞5 分鐘,用8.0mol/L HCl 溶液,控制pH 值4,加入胃蛋白酶20g,高壓均質(zhì)5分鐘,冷卻至室溫,3000r/min 離心5分鐘,上清液90℃滅酶30 分鐘,減壓濃縮,得到多肽濃縮液;將離心剩余殘渣加入60℃500ml蒸餾水,進行2 次高壓均質(zhì),方法與以上步驟相同;將合并的多肽濃縮液噴霧干燥,得沙棘籽多肽。
將以上沙棘籽多肽配制成20mg/ml溶液,總抗氧化能力(AOV)的測定表明,該多肽溶液在20mg/mL時,羥自由基清除率 90.04%, 超氧陰離子自由基清除率64.10%。
實施例3
取500g沙棘籽(蛋白含量為25%)清洗、淋水、浸泡6小時,加入50℃4000ml蒸餾水,于高壓均質(zhì)機中,破碎植物細胞8 分鐘,用8.0mol/L HCl 溶液,控制pH 值3,加入胃蛋白酶75g,高壓均質(zhì)8分鐘,冷卻至室溫,3000r/min 離心5 分鐘,上清液80℃滅酶40 分鐘,減壓濃縮,得到多肽濃縮液;將離心剩余殘渣加入50℃2000ml蒸餾水,進行2 次高壓均質(zhì),方法與以上步驟相同;將合并的多肽濃縮液噴霧干燥,得沙棘籽多肽。
將以上沙棘籽多肽配制成20mg/ml溶液,總抗氧化能力(AOV)的測定表明,該多肽溶液在20mg/mL時,羥自由基清除率 91.12%, 超氧陰離子自由基清除率64.16%。