1.一種基于同源重組的基因編輯方法，包括采用核酸酶對(duì)目標(biāo)基因進(jìn)行切割，其特征在于：所述方法中還包括ssgRNA和靶向性轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，所述ssgRNA能夠引導(dǎo)核酸酶靶向基因編輯相關(guān)蛋白的編碼核酸但不會(huì)發(fā)生切割，所述靶向性轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子能夠調(diào)控基因編輯相關(guān)蛋白的轉(zhuǎn)錄。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，所述的核酸酶對(duì)目標(biāo)基因進(jìn)行同源重組包括采用sgRNA，所述sgRNA能夠引導(dǎo)核酸酶靶向目標(biāo)基因進(jìn)行切割；優(yōu)選所述sgRNA包括3'端的保守間隔相鄰基序，優(yōu)選所述的基序?yàn)镹GG；優(yōu)選所述sgRNA為18-23bp，優(yōu)選20bp。
3.如權(quán)利要求1或2所述的方法，所述的核酸酶選自Cas9和CPF1，所述Cas9優(yōu)選選自SaCas9、SpCas9。
4.如權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的方法，所述方法中還包括同源互補(bǔ)修復(fù)模板，優(yōu)選在同源重組的整合位點(diǎn)刪除終止密碼子。
5.如權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的方法，所述的ssgRNA包括3'端的保守間隔相鄰基序，優(yōu)選所述的基序?yàn)镹GG；優(yōu)選所述的ssgRNA為14-16bp，更優(yōu)選為14bp、15bp或16bp。
6.如權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的方法，所述的靶向性轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子選自靶向性轉(zhuǎn)錄激活因子或靶向性轉(zhuǎn)錄抑制因子的至少一種，優(yōu)選所述靶向性轉(zhuǎn)錄激活因子選自VP64，優(yōu)選所述靶向性轉(zhuǎn)錄抑制因子選自KRAB。
7.如權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)所述的方法，所述的基因編輯相關(guān)蛋白選自非同源區(qū)末端連接相關(guān)蛋白和同源重組相關(guān)蛋白的至少一種，優(yōu)選所述非同源區(qū)末端連接相關(guān)蛋白選自LIG4，優(yōu)選所述同源重組相關(guān)蛋白選自Rad51、Rad52和Brca1或其組合。
8.如權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)所述的方法，所述方法中的核酸酶與靶向性轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子形成融合蛋白，優(yōu)選所述融合蛋白包含柔性連接子。
9.如權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)所述的方法，所述的ssgRNA還偶聯(lián)了RNA適配體序列，所述RNA適配體序列能夠特異性的與關(guān)聯(lián)蛋白結(jié)合，所述靶向性轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子與所述的關(guān)聯(lián)蛋白形成融合蛋白。
10.如權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)所述的方法，所述方法中的核酸酶與第一靶向性轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子形成融合蛋白，優(yōu)選所述融合蛋白包含柔性連接子，所述的ssgRNA還偶聯(lián)了RNA適配體序列，所述RNA適配體序列能夠特異性的與關(guān)聯(lián)蛋白結(jié)合，第二靶向性轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子與所述的關(guān)聯(lián)蛋白形成融合蛋白。
11.如權(quán)利要求9或10任一項(xiàng)所述的方法，所述RNA適配體為發(fā)夾結(jié)構(gòu)；優(yōu)選所述發(fā)夾結(jié)構(gòu)選自MS2或PP7，所述關(guān)聯(lián)蛋白選自MS2結(jié)合蛋白或PCP結(jié)合蛋白。
12.一種用于基因編輯的組合物，包括ssgRNA和靶向性轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，所述ssgRNA能夠引導(dǎo)核酸酶靶向基因編輯相關(guān)蛋白的編碼核酸但不會(huì)發(fā)生切割，所述靶向性轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子能夠調(diào)控基因編輯相關(guān)蛋白的轉(zhuǎn)錄。
13.如權(quán)利要求12所述的組合物，所述組合物還包括核酸酶、sgRNA、同源互補(bǔ)修復(fù)模板或其組合。
14.一種用于基因編輯的組合物，包括核酸酶、核酸酶與靶向性轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子形成的融合蛋白、sgRNA、ssgRNA和同源互補(bǔ)修復(fù)模板，所述ssgRNA能夠引導(dǎo)核酸酶靶向基因編輯相關(guān)蛋白的編碼核酸但不會(huì)發(fā)生切割，所述靶向性轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子能夠調(diào)控基因編輯相關(guān)蛋白的轉(zhuǎn)錄。
15.一種用于基因編輯的組合物，包括提供核酸酶、sgRNA、RNA適配體序列與ssgRNA的偶聯(lián)分子、同源互補(bǔ)修復(fù)模板、靶向性轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子與RNA適配體關(guān)聯(lián)蛋白的融合蛋白，所述ssgRNA能夠引導(dǎo)核酸酶靶向基因編輯相關(guān)蛋白的編碼核酸但不會(huì)發(fā)生切割，所述靶向性轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子能夠調(diào)控基因編輯相關(guān)蛋白的轉(zhuǎn)錄。
16.一種用于基因編輯的組合物，包括提供核酸酶與第一靶向性轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子形成的融合蛋白、sgRNA、RNA適配體序列與ssgRNA的偶聯(lián)分子、同源互補(bǔ)修復(fù)模板和第二靶向性轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子與RNA適配體關(guān)聯(lián)蛋白的融合蛋白，所述ssgRNA能夠引導(dǎo)核酸酶靶向基因編輯相關(guān)蛋白的編碼核酸但不會(huì)發(fā)生切割，所述靶向性轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子能夠調(diào)控基因編輯相關(guān)蛋白的轉(zhuǎn)錄。
17.如權(quán)利要求12-16任一項(xiàng)所述的組合物，所述的靶向性轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子選自靶向性轉(zhuǎn)錄激活因子或靶向性轉(zhuǎn)錄抑制因子的至少一種，優(yōu)選所述靶向性轉(zhuǎn)錄激活因子選自VP64，優(yōu)選所述靶向性轉(zhuǎn)錄抑制因子選自。
18.如權(quán)利要求12-16任一項(xiàng)所述的組合物，所述的基因編輯相關(guān)蛋白選自非同源區(qū)末端連接相關(guān)蛋白和同源重組相關(guān)蛋白的至少一種，優(yōu)選所述非同源區(qū)末端連接相關(guān)蛋白選自LIG4，優(yōu)選所述同源重組相關(guān)蛋白選自Rad51、Rad52和Brca1或其組合。
19.一種RNA適配體序列與ssgRNA的偶聯(lián)分子，所述的ssgRNA部分能夠引導(dǎo)核酸酶靶向基因編輯相關(guān)蛋白的編碼核酸但不會(huì)發(fā)生切割，所述RNA適配體序列部分能夠特異性的與關(guān)聯(lián)蛋白結(jié)合；優(yōu)選所述的ssgRNA部分包括3'端的保守間隔相鄰基序，優(yōu)選所述的基序?yàn)镹GG；優(yōu)選所述的ssgRNA部分為14-16bp，優(yōu)選為14bp、15bp或16bp。
20.如權(quán)利要求19所述的偶聯(lián)分子，所述RNA適配體為發(fā)夾結(jié)構(gòu)；優(yōu)選所述發(fā)夾結(jié)構(gòu)選自MS2或PP7，所述關(guān)聯(lián)蛋白選自MS2結(jié)合蛋白或PCP結(jié)合蛋白。
21.一種試劑盒，包括權(quán)利要求12-18任一項(xiàng)所述的組合物或權(quán)利要求19-20任一項(xiàng)所述的偶聯(lián)分子。
22.權(quán)利要求1-11任一項(xiàng)所述的方法或權(quán)利要求12-18任一項(xiàng)所述的組合物或權(quán)利要求19-20任一項(xiàng)所述的偶聯(lián)分子用于基因編輯的用途。
23.權(quán)利要求1-11任一項(xiàng)所述的方法或權(quán)利要求22所述的用途，所述的基因來自于微生物、植物、動(dòng)物、細(xì)胞、哺乳動(dòng)物或人。