亚洲成年人黄色一级片,日本香港三级亚洲三级,黄色成人小视频,国产青草视频,国产一区二区久久精品,91在线免费公开视频,成年轻人网站色直接看

一套高效分泌表達異源蛋白的工程菌及其應用的制作方法

文檔序號:12346237閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種重組菌,為如下(1)或(2):

(1)所示的重組菌為降低和/或抑制枯草芽孢桿菌中YrrN蛋白活性得到的菌;

(2)所示的重組菌為降低和/或抑制枯草芽孢桿菌中YwpE蛋白活性得到的菌。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的重組菌,其特征在于:

所述降低和/或抑制枯草芽孢桿菌中YrrN蛋白活性為抑制或沉默枯草芽孢桿菌中YrrN蛋白編碼基因的表達;所述抑制或沉默枯草芽孢桿菌中YrrN蛋白編碼基因的表達具體為敲除枯草芽孢桿菌中YrrN蛋白編碼基因或其部分片段;

所述降低和/或抑制枯草芽孢桿菌中YwpE蛋白活性為抑制或沉默枯草芽孢桿菌中YwpE蛋白編碼基因的表達;所述抑制或沉默枯草芽孢桿菌中YwpE蛋白編碼基因的表達具體為敲除枯草芽孢桿菌中YwpE蛋白編碼基因或其部分片段。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的重組菌,其特征在于:

所述敲除枯草芽孢桿菌中YrrN蛋白編碼基因或其部分片段為將枯草芽孢桿菌中YrrN蛋白編碼基因替換為抗性基因;

所述敲除枯草芽孢桿菌中YwpE蛋白編碼基因或其部分片段為將枯草芽孢桿菌中YwpE蛋白編碼基因替換為抗性基因;

所述將枯草芽孢桿菌中YrrN蛋白編碼基因替換為抗性基因和所述將枯草芽孢桿菌中YwpE蛋白編碼基因替換為抗性基因采用基因組定點編輯或同源重組的方式進行;

所述基因組定點編輯具體為ZFN編輯、TALEN編輯或CRISPR/Cas9編輯;

所述同源重組具體為λ-red同源重組或sacB基因介導篩選的同源重組或自殺質(zhì)粒介導的同源重組。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的重組菌,其特征在于:

所述將枯草芽孢桿菌中YrrN蛋白編碼基因替換為抗性基因和所述將枯草芽孢桿菌中YwpE蛋白編碼基因替換為抗性基因均采用同源重組的方式進行;

所述將枯草芽孢桿菌中YrrN蛋白編碼基因替換為抗性基因為將包括所述YrrN蛋白編碼基因上游同源臂、抗性基因表達盒和所述YrrN蛋白編碼基因下游同源臂的同源重組片段A導入枯草芽孢桿菌中;

所述將枯草芽孢桿菌中YwpE蛋白編碼基因替換為抗性基因為將包括所述YwpE蛋白編碼基因上游同源臂、抗性基因表達盒和所述YwpE蛋白編碼基因下游同源臂的同源重組片段B導入枯草芽孢桿菌中。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的重組菌,其特征在于:

所述抗性基因為zeocin;

所述同源重組片段A的核苷酸序列為序列2;

所述同源重組片段B的核苷酸序列為序列4;

所述枯草芽孢桿菌為枯草芽孢桿菌BS168。

6.一種重組菌,使權(quán)利要求1-5中任一所述的重組菌表達幾丁質(zhì)結(jié)合蛋白CBP21或淬滅酶AIO6BS。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的重組菌,其特征在于:

所述表達的方法為將幾丁質(zhì)結(jié)合蛋白CBP21的編碼基因或淬滅酶AIO6BS的編碼基因?qū)霗?quán)利要求1-5中任一所述的重組菌。

8.權(quán)利要求1-5中任一所述的重組菌或權(quán)利要求6或7所述的重組菌在生產(chǎn)幾丁質(zhì)結(jié)合蛋白CBP21和/或提高幾丁質(zhì)結(jié)合蛋白CBP21的分泌表達水平中的應用;

或,權(quán)利要求1-5中任一所述的重組菌或權(quán)利要求6或7所述的重組菌在生產(chǎn)淬滅酶AIO6BS和/或提高淬滅酶AIO6BS的分泌表達水平中的應用。

9.一種生產(chǎn)外源蛋白的方法,為利用權(quán)利要求1-5中任一所述重組菌,進行外源蛋白表達。

10.一種生產(chǎn)幾丁質(zhì)結(jié)合蛋白CBP21或淬滅酶AIO6BS的方法,包括如下步驟:發(fā)酵培養(yǎng)權(quán)利要求6或7所述的重組菌,得到所述幾丁質(zhì)結(jié)合蛋白CBP21或淬滅酶AIO6BS。

當前第2頁1 2 3 
網(wǎng)友詢問留言 已有0條留言
  • 還沒有人留言評論。精彩留言會獲得點贊!
1