技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供一種用于高效分離干細(xì)胞活性線粒體的方法,包括如下步驟:1)將間充質(zhì)干細(xì)胞檢測(cè)表面標(biāo)記鑒定,向骨、軟骨和脂肪分化能力鑒定;2)胰酶消化,離心收集細(xì)胞;重懸清洗離心;3)配制線粒體提取液:A液是裂解液,C是終止反應(yīng)液。4)A液重懸清洗過(guò)后的細(xì)胞沉淀進(jìn)行渦旋、靜置,重復(fù)數(shù)次;加入C液中止裂解,離心得白色沉淀留待第5步操作;上清液再離心得白色沉淀;5)第4步中首次離心的沉淀,重復(fù)第4步的操作;6)將第4步和第5步的白色沉淀放在一起,離心得白色沉淀,立即使用或者?80度保存。本發(fā)明方法分離獲得的線粒體活性好、純度高,適用于間充質(zhì)干細(xì)胞分離獲得線粒體,且操作簡(jiǎn)便、不需要研磨。
技術(shù)研發(fā)人員:王琳琳;張曉明;王超;陳瑩瑩;沈岳良
受保護(hù)的技術(shù)使用者:浙江大學(xué)
文檔號(hào)碼:201610549535
技術(shù)研發(fā)日:2016.07.13
技術(shù)公布日:2016.11.23