技術(shù)特征：

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供了一種大鼠腦垂體細(xì)胞的分離及培養(yǎng)方法，包括以下步驟：(1)選取8d的雄性SD大鼠，麻醉處死；(2)將大鼠麻醉后腹面向上固定于板上，無菌條件下取出大鼠腦垂體，將腦垂體放入預(yù)冷PBS液中洗滌數(shù)次除去血漬，去除垂體包膜；(3)無菌條件下，在預(yù)冷的PBS中用眼科剪將腦垂體剪成1mm×1mm碎塊；(4)用預(yù)熱的III型膠原酶結(jié)合中性酶混合消化；(5)終止消化，過濾，收集濾液離心，棄上清，加培養(yǎng)基重懸，重復(fù)操作三次；(6)接種到24孔培養(yǎng)板培養(yǎng)；(7)將培養(yǎng)7d的細(xì)胞經(jīng)胰酶消化后再次篩網(wǎng)純化，離心棄上清，重懸接種于處理后的培養(yǎng)板中；(8)細(xì)胞免疫熒光鑒定。本發(fā)明提供的一種大鼠腦垂體細(xì)胞的分離及培養(yǎng)方法，操作簡單，所得腦垂體細(xì)胞存活率高、活性好，可用于建立體外實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ图?xì)胞，滿足腦垂體細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的要求。

技術(shù)研發(fā)人員：何剛;張亞洲;蔣敏;齊來俊
受保護(hù)的技術(shù)使用者：江蘇齊氏生物科技有限公司
技術(shù)研發(fā)日：2016.04.08
技術(shù)公布日：2017.10.20