1.一種從樣品中純化目標蛋白質的方法,其包括以下步驟:
i.將含有蛋白質的樣品加載至固定相上,以使目標蛋白質結合至所述固定相;
ii.使具有結合的目標蛋白質的固相接觸辛酸溶液;其中該辛酸溶液處于允許形成游離辛酸的pH下,并且其中如針對游離辛酸所測量的,該辛酸溶液是濃度為1至50mM的辛酸緩沖液;以及
iii.洗脫所述目標蛋白質。
2.根據權利要求1所述的方法,其中目標蛋白質的純化包括所述樣品中病毒的滅活。
3.根據權利要求1或2中任一項所述的方法,其用于無病毒蛋白質溶液的制備。
4.根據權利要求1至3所述的方法,其中所述辛酸溶液包含一定比例的i)辛酸鹽和ii)無機或有機酸的組合,從而提供這樣一種溶液:其pH低于7.0,如6.5或更低,并且如針對游離辛酸所測量的,其辛酸濃度為至少1mM,如至少2mM,如2至10mM的濃度。
5.根據權利要求1至4所述的方法,其中所述蛋白質選自抗體或其片段,凝血因子如FV、FVII、FVIII、FIX、FX、FXI和FVIII,以及生長激素。
6.根據前述權利要求中任一項所述的方法,其中所述樣品選自發(fā)酵液、細胞培養(yǎng)物、細胞系培養(yǎng)基、腹水、組織培養(yǎng)基、轉基因細胞培養(yǎng)基、包含血漿成分的人類或動物血漿。
7.根據前述權利要求中任一項所述的方法,其中所述固定相是層析柱。
8.根據權利要求7所述的方法,其中將所述樣品加載至選自離子交換層析柱、親和層析柱、混合模式層析柱、快速蛋白質液相層析柱和膨脹床吸附(EBA)層析柱的固定相上。
9.根據前述權利要求中任一項所述的方法,其中所述辛酸溶液具有將所述病毒滅活而不使所述目標蛋白質變性的pH。
10.根據前述權利要求中任一項所述的方法,其中辛酸溶液的pH為6.1或更低,如2-6,如pH為2<pH≤6,優(yōu)選3<pH≤6,更優(yōu)選4<pH≤6,如4.5<pH≤6,如4.6≤pH<6,如約4.6、約4.7、約4.8、約4.9、約5.0、約5.1、約5.2、約5.3、約5.4、約5.5、約5.6、約5.7、約5.8和約5.9,如4.9<pH<6。
11.根據前述權利要求中任一項所述的方法,其中辛酸溶液是一種辛酸緩沖液,如針對游離辛酸所測量的,其濃度為1至20mM,如2至20mM或1至10mM,更優(yōu)選2至10mM如2至8mM,如2至6mM。
12.根據前述權利要求中任一項所述的方法,其中所述樣品包含有包膜病毒、無包膜病毒、或無包膜病毒和有包膜病毒兩者。
13.根據前述權利要求中任一項所述的方法,其為自動化的,或是自動化蛋白質純化過程的一部分。
14.根據前述權利要求中任一項所述的方法,其進一步將支原體滅活。
15.一種用于純化選自凝血因子、抗體或其Fab的蛋白質的方法,其包括以下步驟:
i.將包含一種或多種所述蛋白質的樣品加載至用于親和層析的固定相上;
ii.使固相接觸pH為4.9<pH<6.2的、如針對游離辛酸所測量的2至10mM如2至8mM,如2至6mM的辛酸溶液,以便滅活并洗掉病毒;
iii.洗脫所述目標蛋白質。