本發(fā)明涉及化合物、含有所述化合物的組合物、組合和藥物及其制備方法。本發(fā)明還涉及所述化合物、組合、組合物和藥物在治療其中STING(干擾素基因刺激物)的調(diào)節(jié)是有益的疾病和病癥中的用途和作為疫苗佐劑的用途，所述疾病和病癥例如炎癥、過(guò)敏性和自身免疫性疾病、感染性疾病、癌癥。
發(fā)明背景
脊椎動(dòng)物不斷受到微生物入侵的威脅，并已進(jìn)化了免疫防御機(jī)制以消除感染性病原體。在哺乳動(dòng)物中，該免疫系統(tǒng)包含兩個(gè)分支；先天性免疫和適應(yīng)性免疫。先天性免疫系統(tǒng)是由模式識(shí)別受體(PRR)引發(fā)的第一道防線，其檢測(cè)來(lái)自病原體的配體以及損傷相關(guān)分子模式(Takeuchi O.等人，Cell，2010：140，805-820)。已經(jīng)鑒定了越來(lái)越多的這些受體，包括Toll樣受體(TLR)、C型凝集素受體、視黃酸誘導(dǎo)基因I(RIG-I)樣受體和NOD樣受體(NLR)以及雙鏈DNA傳感器。PRR的活化導(dǎo)致參與炎性應(yīng)答的基因上調(diào)，包括抑制病原體復(fù)制和促進(jìn)適應(yīng)性免疫的1型干擾素、促炎細(xì)胞因子和趨化因子。
適配子蛋白STING(干擾素基因刺激物)，也稱為TMEM 173、MPYS、MITA和ERIS，已被鑒定為對(duì)胞質(zhì)核酸的先天性免疫應(yīng)答中的中心信號(hào)傳導(dǎo)分子(Ishikawa H和Barber G N，Nature，2008：455，674-678；WO2013/1666000)。STING的活化導(dǎo)致IRF3和NFκB途徑的上調(diào)，從而導(dǎo)致干擾素-β和其它細(xì)胞因子的誘導(dǎo)。STING對(duì)病原體或宿主來(lái)源的胞質(zhì)DNA以及稱為環(huán)狀二核苷酸(CDN)的不尋常核酸的應(yīng)答是至關(guān)重要的。
CDN首先被鑒定為負(fù)責(zé)控制原核細(xì)胞中的許多應(yīng)答的細(xì)菌第二信使。細(xì)菌CDN，例如c-di-GMP是以兩個(gè)3’,5’磷酸二酯鍵為特征的對(duì)稱分子。
經(jīng)細(xì)菌CDN直接激活STING最近已通過(guò)X射線晶體學(xué)進(jìn)行了證實(shí)(Burdette D L和Vance R E，Nature Immunology，2013：14,19-26)。因此，細(xì)菌CDN及其類似物已作為潛在的疫苗佐劑吸引了興趣(Libanova R.等人，Microbial Biotechnology 2012：5，168-176；WO2007/054279，WO2005/087238)。
最近，已經(jīng)闡明了對(duì)胞質(zhì)DNA的應(yīng)答，并且顯示通過(guò)稱為環(huán)GMP-AMP合酶(cGAS，以前稱為C6orf150或MB21D1)的酶參與產(chǎn)生新穎哺乳動(dòng)物CDN信號(hào)傳導(dǎo)分子，其被稱為cGAMP，然后其激活STING。與細(xì)菌CDN不同，cGAMP是不對(duì)稱分子，其特征在于它的混合的2’,5’和3’,5’磷酸二酯鍵。(Gao P等人，Cell，2013：153，1-14)。cGAMP(II)與STING的相互作用也已通過(guò)X射線晶體學(xué)證明(Cai X等人，Molecular Cell，2014：54，289-296)。
干擾素首先被描述為可以保護(hù)細(xì)胞免受病毒感染的物質(zhì)(Isaacs & Lindemann，J. Virus Interference. Proc. R. Soc. Lon. Ser. B. Biol. Sci. 1957：147，258-267)。在人中，I型干擾素是由9號(hào)染色體上的基因編碼的相關(guān)蛋白家族，并且編碼干擾素α(IFNα)的至少13種同種型和干擾素β(IFNβ)的一種同種型。重組IFNα是第一個(gè)批準(zhǔn)的生物治療劑，并且已經(jīng)成為病毒感染和癌癥的重要療法。除了對(duì)細(xì)胞的直接抗病毒活性外，已知干擾素是作用于免疫系統(tǒng)細(xì)胞的免疫應(yīng)答的有效調(diào)節(jié)劑。
給予可刺激先天性免疫應(yīng)答包括活化I型干擾素和其它細(xì)胞因子的小分子化合物，可成為治療或預(yù)防包括病毒感染的人疾病的重要策略。這種類型的免疫調(diào)節(jié)策略具有鑒定化合物的潛能，所述化合物不僅可用于感染性疾病而且可用于癌癥(Krieg. Curr. Oncol. Rep.，2004：6(2)，88-95)、過(guò)敏性疾病(Moisan J.等人，Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol.，2006：290，L987-995)、其它炎性病癥例如腸易激綜合征(Rakoff-Nahoum S.，Cell.，2004，23，118(2)：229-41)，以及作為疫苗佐劑(Persing等人，Trends Microbiol. 2002：10(10 Suppl)，S32-7)。
過(guò)敏性疾病與對(duì)過(guò)敏原的Th2偏向的免疫應(yīng)答相關(guān)。Th2應(yīng)答與升高的IgE水平相關(guān)，其通過(guò)對(duì)肥大細(xì)胞的作用促進(jìn)對(duì)過(guò)敏原的超敏反應(yīng)，導(dǎo)致例如在過(guò)敏性鼻炎和哮喘中見(jiàn)到的癥狀。在健康個(gè)體中，對(duì)過(guò)敏原的免疫應(yīng)答與混合的Th2/Th1和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞應(yīng)答更加平衡。已顯示1型干擾素的誘導(dǎo)導(dǎo)致局部環(huán)境中Th2型細(xì)胞因子的減少并促進(jìn)Th1/Treg應(yīng)答。在本文中，通過(guò)例如STING的活化誘導(dǎo)1型干擾素可以在過(guò)敏性疾病例如哮喘和過(guò)敏性鼻炎的治療中提供益處(Huber J.P.等人，J Immunol 2010：185，813-817)。
已顯示本發(fā)明的某些化合物與STING結(jié)合并在與人PBMC孵育時(shí)誘導(dǎo)1型干擾素和其它細(xì)胞因子。誘導(dǎo)人干擾素的化合物可用于治療各種病狀，例如治療過(guò)敏性疾病和其它炎性病癥例如過(guò)敏性鼻炎和哮喘，治療感染性疾病和癌癥，并且還可用作疫苗佐劑。本發(fā)明的某些化合物可以結(jié)合STING，但作為拮抗劑起作用，并且這些可用于治療例如自身免疫性疾病。
本發(fā)明的某些化合物可以是有效的免疫調(diào)節(jié)劑，因此，應(yīng)當(dāng)小心處理。
設(shè)想用活化或抑制劑靶向STING可能是治療其中1型IFN途徑的調(diào)節(jié)是有益的疾病和病癥和作為疫苗佐劑的有希望的方法，所述疾病和病癥包括炎性、過(guò)敏性和自身免疫性疾病、感染性疾病、癌癥。
發(fā)明概述
在一個(gè)方面，提供了式(I)化合物
其中
Y1和Y2獨(dú)立地是CH2或O；
R1是OH且R2是NH2或R1是NH2且R2是H；
R3是OH且R4是NH2或R3是NH2且R4是H；
R5 = OH、F；
R6 = OH、F；
并且當(dāng)R5和R6都是OH時(shí)，Y1和Y2中至少一個(gè)是CH2
(包括其互變異構(gòu)體)或其藥學(xué)上可接受的鹽。
在本發(fā)明的另一方面，提供了包含式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和一種或多種藥學(xué)上可接受的賦形劑的藥物組合物。
在本發(fā)明的另一方面，提供了式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其用于治療。
在本發(fā)明的另一方面，提供了式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其用于治療其中調(diào)節(jié)STING是有益的疾病或病癥。
在本發(fā)明的另一方面，提供了式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其用于治療炎癥、過(guò)敏性和自身免疫性疾病、感染性疾病、癌癥和作為疫苗佐劑。
在本發(fā)明的另一方面，提供了治療個(gè)體的其中調(diào)節(jié)STING是有益的疾病或病癥的方法，包括給予治療有效量的式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽。
在本發(fā)明的另一方面，提供了治療個(gè)體的炎癥、過(guò)敏性和自身免疫性疾病、感染性疾病和癌癥的方法，包括給予治療有效量的式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽。
在本發(fā)明的另一方面，提供了式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽在制備用于治療其中調(diào)節(jié)STING是有利的疾病或病癥的藥物中的用途。
在本發(fā)明的另一方面，提供了式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽在制備用于治療炎癥、過(guò)敏性和自身免疫性疾病、感染性疾病和癌癥的藥物中的用途。
在另一方面，提供了包含式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和至少一種其它治療劑的組合。
在本發(fā)明的另一方面，提供了包含式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和至少一種其它治療劑和一種或多種藥學(xué)上可接受的賦形劑的藥物組合物。
在另一方面，提供了包含式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和至少一種其它治療劑的組合，其用于治療。
在另一方面，提供了包含式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和至少一種其它治療劑的組合，其用于治療其中STING的調(diào)節(jié)是有益的疾病或病癥。
在另一方面，提供了包含式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和至少一種其它治療劑的組合，其用于治療炎癥、過(guò)敏性和自身免疫性疾病、感染性疾病和癌癥。
在本發(fā)明的另一方面，提供了治療個(gè)體的其中STING的調(diào)節(jié)是有益的疾病或病癥的方法，包括給予治療有效量的包含式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和至少一種其它治療劑的組合。
在本發(fā)明的另一方面，提供了治療個(gè)體的炎癥、過(guò)敏性和自身免疫性疾病、感染性疾病和癌癥的方法，包括給予治療有效量的包含式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和至少一種其它治療劑的組合。
在另一方面，還提供了包含式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的疫苗佐劑。
在另一方面，還提供了包含抗原或抗原組合物和式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的免疫原性組合物。
在另一方面，還提供了包含抗原或抗原組合物和式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的免疫原性組合物，其用于治療或預(yù)防疾病。
在另一方面，還提供式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽在制備用于治療或預(yù)防疾病的包含抗原或抗原組合物的免疫原性組合物中的用途。
在另一方面，還提供了治療或預(yù)防疾病的方法，包括向患有或易患疾病的人個(gè)體給予包含抗原或抗原組合物和式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的免疫原性組合物。
在另一方面，還提供了包含抗原或抗原組合物和式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的疫苗組合物，其用于治療或預(yù)防疾病。
在另一方面，還提供了包含抗原或抗原組合物和式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的疫苗組合物，其用于治療或預(yù)防疾病。
在另一方面，還提供了式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽在制備用于治療或預(yù)防疾病的包含抗原或抗原組合物的疫苗組合物中的用途。
在另一方面，還提供了治療或預(yù)防疾病的方法，包括向患有或易患疾病的人個(gè)體給予包含抗原或抗原組合物和式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的疫苗組合物。
發(fā)明詳述
如本文所用，“本發(fā)明化合物”包括式(I)化合物及其鹽的所有溶劑合物、復(fù)合物、多晶型物、放射性標(biāo)記衍生物、互變異構(gòu)體、立體異構(gòu)體和光學(xué)異構(gòu)體。
如本文所用，術(shù)語(yǔ)“有效量”是指例如研究人員或臨床醫(yī)生所探求的引起組織、系統(tǒng)、動(dòng)物或人的生物或醫(yī)學(xué)應(yīng)答的藥物或藥劑的量。此外，術(shù)語(yǔ)“治療有效量”是指與未接受該量的相應(yīng)個(gè)體相比，導(dǎo)致疾病、病狀或副作用的改善的治療、治愈、預(yù)防或改善，或降低疾病或病狀的進(jìn)展速率的任何量。該術(shù)語(yǔ)在其范圍內(nèi)還包括有效增強(qiáng)正常生理功能的量。
術(shù)語(yǔ)“防止(prophylaxis)”包括預(yù)防(prevention)并且是指預(yù)防而不是治愈或治療疾病的措施或程序。預(yù)防是指減少獲得或發(fā)展疾病的風(fēng)險(xiǎn)，其導(dǎo)致疾病的至少一種臨床癥狀不在可能暴露于致病劑的個(gè)體或疾病發(fā)生之前易患疾病的個(gè)體中發(fā)展。
如本文所用，術(shù)語(yǔ)“藥學(xué)上可接受的”是指在合理的醫(yī)學(xué)判斷范圍內(nèi)適合用于與人類和動(dòng)物的組織接觸而沒(méi)有過(guò)度毒性、刺激性或其它問(wèn)題或并發(fā)癥、與合理的收益/風(fēng)險(xiǎn)比相稱的那些化合物、材料、組合物和劑型。
如本文所用，“藥學(xué)上可接受的賦形劑”包括所有稀釋劑、載體、粘合劑、助流劑和用于給予本發(fā)明化合物的藥物制劑的其它組分。
本發(fā)明化合物可以以固體或液體形式存在。在固體形式中，本發(fā)明化合物可以以從完全無(wú)定形至完全結(jié)晶的固態(tài)的連續(xù)體存在。術(shù)語(yǔ)“無(wú)定形”是指這種狀態(tài)，其中材料在分子水平上缺乏長(zhǎng)程有序，并且根據(jù)溫度，可以顯示固體或液體的物理性質(zhì)。通常，這種材料不給出特征性X射線衍射圖，并且盡管顯示固體的性質(zhì)，但更正式地描述為液體。在加熱時(shí)，發(fā)生從固體到液體性質(zhì)的變化，其特征在于狀態(tài)變化，通常為二級(jí)(“玻璃化轉(zhuǎn)變”)。術(shù)語(yǔ)“結(jié)晶”是指其中材料在分子水平具有規(guī)則有序內(nèi)部結(jié)構(gòu)并且給出具有限定峰的特征性X射線衍射圖的固相。這種材料當(dāng)充分加熱時(shí)也將顯示液體的性質(zhì)，但從固體到液體的變化的特征在于相變，通常為一級(jí)(‘熔點(diǎn)’)。
本發(fā)明化合物可以具有以多于一種形式結(jié)晶的能力，這是稱為多晶型的特征，并且應(yīng)當(dāng)理解，這種多晶型形式(“多晶型物”)在本發(fā)明的范圍內(nèi)。多晶型通?？梢宰鳛閷?duì)溫度或壓力或兩者的變化的應(yīng)答而發(fā)生，并且還可以由結(jié)晶過(guò)程的變化引起。多晶型物可通過(guò)本領(lǐng)域已知的各種物理特征例如x射線衍射圖、溶解度和熔點(diǎn)來(lái)區(qū)分。
式(I)化合物可以以溶劑化和非溶劑化形式存在。如本文所用，術(shù)語(yǔ)“溶劑合物”是指由溶質(zhì)(在本發(fā)明中，式(I)化合物或鹽)和溶劑形成的可變化學(xué)計(jì)量的復(fù)合物。用于本發(fā)明目的的這些溶劑可以不干擾溶質(zhì)的生物活性。本領(lǐng)域技術(shù)人員將理解，可以形成用于結(jié)晶化合物的藥學(xué)上可接受的溶劑合物，其中溶劑分子在結(jié)晶期間摻入到晶格中。摻入的溶劑分子可以是水分子或非水性的，例如乙醇、異丙醇、DMSO、乙酸、乙醇胺和乙酸乙酯分子。摻有水分子的晶格通常稱為“水合物”。水合物包括化學(xué)計(jì)量的水合物以及含有可變量水的組合物。本發(fā)明包括所有這些溶劑合物。
還應(yīng)注意，式(I)化合物可以形成互變異構(gòu)體?！盎プ儺悩?gòu)體”是指作為特定化合物結(jié)構(gòu)的可互換形式并且在氫原子和電子的位移方面變化的化合物。因此，兩個(gè)結(jié)構(gòu)可以通過(guò)π電子和原子(通常為H)的移動(dòng)而處于平衡。例如，烯醇和酮是互變異構(gòu)體，因?yàn)樗鼈兺ㄟ^(guò)用酸或堿處理而迅速互變。應(yīng)當(dāng)理解，本發(fā)明化合物的所有互變異構(gòu)體和互變異構(gòu)體的混合物包括在本發(fā)明化合物的范圍內(nèi)。為了絕對(duì)清晰，在式(I)化合物中當(dāng)R1或R3表示OH時(shí)，化合物將形成酮互變異構(gòu)體(=O)。
在本發(fā)明的一個(gè)方面，Y1和Y2中至少一個(gè)是CH2。
在本發(fā)明的一個(gè)方面，Y1是CH且Y2是O。
在本發(fā)明的一個(gè)方面，Y1是O且Y2是CH
在本發(fā)明的一個(gè)方面，Y1和Y2都是CH。
在本發(fā)明的一個(gè)方面，Y1和Y2都是O且R5和R6中至少一個(gè)是F。
在本發(fā)明的一個(gè)方面，R3是NH2且R4是H。
在本發(fā)明的一個(gè)方面，R2是NH2且R1是OH。
在本發(fā)明的一個(gè)方面，R3是NH2，R4是H，R2是NH2且R1是OH。
在本發(fā)明的一個(gè)方面，R3是NH2，R4是H，R2是NH2，R1是OH，R5是OH且R6是OH。
盡管上面對(duì)于每個(gè)變量通常已經(jīng)單獨(dú)列出了每個(gè)變量的方面，但本發(fā)明包括其中式(I)的幾個(gè)或每個(gè)方面選自上面列出的每個(gè)方面的那些化合物。因此，本發(fā)明旨在包括每個(gè)變量的方面的所有組合。
本發(fā)明化合物的實(shí)例包括以下：
(1S,6R,8R,9S,10R,15R,17R,18R)-17-(2-氨基-6-氧代-6,9-二氫-1H-嘌呤-9-基)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-3,9,12,18-四羥基-2,4,11,13-四氧雜-3λ5,12λ5-二磷雜三環(huán)[13.2.1.06,10]十八烷-3,12-二酮
(1R,6R,8R,9S,10R,15R,17R,18R)-17-(2-氨基-6-氧代-6,9-二氫-1H-嘌呤-9-基)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-3,9,12,18-四羥基-2,4,11,13,16-五氧雜-3λ5,12λ5-二磷雜三環(huán)[13.2.1.06,10]十八烷-3,12-二酮
(1S,6R,8R,9R,10S,15R,17R,18R)-17-(2-氨基-6-氧代-6,9-二氫-1H-嘌呤-9-基)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-3,9,12,18-四羥基-2,4,7,11,13-五氧雜-3λ5,12λ5-二磷雜三環(huán)[13.2.1.06,10]十八烷-3,12-二酮
(1S,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-17-(2-氨基-6-氧代-6,9-二氫-1H-嘌呤-9-基)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-9-氟-3,12,18-三羥基-2,4,7,11,13-五氧雜-3λ5,12λ5-二磷雜三環(huán)[13.2.1.06,10]十八烷-3,12-二酮
式(I)化合物可以是鹽的形式。
通常，本發(fā)明的鹽是藥學(xué)上可接受的鹽。包括在術(shù)語(yǔ)“藥學(xué)上可接受的鹽”內(nèi)的鹽是指本發(fā)明化合物的無(wú)毒鹽。關(guān)于合適的鹽的綜述參見(jiàn)Berge等人，J. Pharm. Sci. 1977，66，1-19。
合適的藥學(xué)上可接受的鹽可以包括酸加成鹽。
藥學(xué)上可接受的酸加成鹽可通過(guò)式(I)化合物與合適的無(wú)機(jī)或有機(jī)酸(例如氫溴酸、鹽酸、硫酸、硝酸、磷酸、對(duì)甲苯磺酸、苯磺酸、甲磺酸、乙磺酸、萘磺酸例如2-萘磺酸)的反應(yīng)而形成，所述反應(yīng)任選在合適的溶劑例如有機(jī)溶劑中進(jìn)行，以得到鹽，其通常例如通過(guò)結(jié)晶和過(guò)濾分離。式(I)化合物的藥學(xué)上可接受的酸加成鹽可包括或可以是例如氫溴酸鹽、鹽酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽、磷酸鹽、對(duì)甲苯磺酸鹽、苯磺酸鹽、甲磺酸鹽、乙磺酸鹽、萘磺酸鹽(例如2-萘磺酸鹽)。
其它非藥學(xué)上可接受的鹽，例如三氟乙酸鹽，可用于例如分離本發(fā)明化合物，并且包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
本發(fā)明在其范圍內(nèi)包括式(I)化合物的所有可能的化學(xué)計(jì)量和非化學(xué)計(jì)量形式。
盡管可能的是，為了用于治療，本發(fā)明化合物可以作為原始化學(xué)品給予，但可以將作為活性成分的本發(fā)明化合物作為藥物組合物呈現(xiàn)。這種組合物可以以藥學(xué)領(lǐng)域熟知的方式制備，并且包含至少一種活性化合物。因此，本發(fā)明進(jìn)一步提供了包含本發(fā)明化合物和一種或多種藥學(xué)上可接受的賦形劑的藥物組合物。賦形劑在與組合物的其它成分相容并且對(duì)其接受者無(wú)害的意義上必須是可接受的。按照本發(fā)明的另一方面，還提供了制備藥物組合物的方法，所述藥物組合物包括藥劑或其藥學(xué)上可接受的鹽與一種或多種藥學(xué)上可接受的賦形劑。所述藥物組合物可用于治療和/或預(yù)防本文所述的任何病癥。
通常，本發(fā)明化合物以藥學(xué)有效量給予。實(shí)際給予的化合物的量通常由醫(yī)師根據(jù)相關(guān)情況確定，包括待治療的病癥、所選的給藥途徑、實(shí)際給予的化合物、單個(gè)患者的年齡、體重和反應(yīng)、患者癥狀的嚴(yán)重程度等。
藥物組合物可以以每單位劑量含有預(yù)定量的活性成分的單位劑型呈現(xiàn)。術(shù)語(yǔ)“單位劑型”是指適合作為人個(gè)體和其它哺乳動(dòng)物的單位劑量的物理上分離的單位，每個(gè)單位含有計(jì)算為產(chǎn)生所需治療效果的預(yù)定量的活性物質(zhì)，以及合適的藥物賦形劑、媒介物或載體。典型的單位劑型包括液體組合物的預(yù)填充的、預(yù)測(cè)量的安瓿或注射器，或在固體組合物的情況下為丸劑、片劑、膠囊等。
優(yōu)選的單位劑量組合物是含有活性成分的日劑量或亞劑量或其適當(dāng)部分的那些。因此，這種單位劑量可以每天給予一次或多于一次。這種藥物組合物可以通過(guò)藥學(xué)領(lǐng)域熟知的任何方法制備。
藥物組合物可適于通過(guò)任何適當(dāng)?shù)耐緩?，例如通過(guò)口服(包括口腔或舌下)、直腸、吸入、鼻內(nèi)、局部(包括口腔、舌下或經(jīng)皮)、陰道或腸胃外(包括皮下、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)或皮內(nèi))途徑給予。這種組合物可以通過(guò)藥學(xué)領(lǐng)域已知的任何方法，例如通過(guò)使活性成分與載體或賦形劑結(jié)合制備。
適合于口服給予的藥物組合物可以呈現(xiàn)為離散單位，例如膠囊或片劑；粉劑或顆粒劑；在水性或非水性液體中的溶液或懸浮液；可食用泡沫或攪打物(whip)；或水包油液體乳劑或油包水液體乳劑。
例如，對(duì)于片劑或膠囊形式的口服給予，活性藥物組分可以與口服的、無(wú)毒的藥學(xué)上可接受的惰性賦形劑如乙醇、甘油、水等組合。粉劑通過(guò)將化合物減小至合適的細(xì)小尺寸并與類似制備的藥物賦形劑如可食用碳水化合物(例如，淀粉或甘露醇)混合來(lái)制備。還可以存在調(diào)味劑、防腐劑、分散劑和著色劑。
膠囊通過(guò)如上所述制備粉末混合物并填充成形的明膠殼來(lái)制備。包括助流劑和潤(rùn)滑劑如膠體二氧化硅、滑石、硬脂酸鎂、硬脂酸鈣或固體聚乙二醇的賦形劑可在填充操作之前加入到粉末混合物中。還可以加入崩解劑或增溶劑如瓊脂、碳酸鈣或碳酸鈉以改善膠囊攝入時(shí)藥物的利用度。
此外，當(dāng)期望或需要時(shí)，也可以將包括合適的粘合劑、助流劑、潤(rùn)滑劑、甜味劑、矯味劑、崩解劑和著色劑的賦形劑摻入混合物中。合適的粘合劑包括淀粉、明膠、天然糖如葡萄糖或β-乳糖、玉米甜味劑、天然和合成樹(shù)膠如阿拉伯膠、黃蓍膠或海藻酸鈉、羧甲基纖維素、聚乙二醇、蠟等。這些劑型中使用的潤(rùn)滑劑包括油酸鈉、硬脂酸鈉、硬脂酸鎂、苯甲酸鈉、乙酸鈉、氯化鈉等。崩解劑包括但不限于淀粉、甲基纖維素、瓊脂、膨潤(rùn)土、黃原膠等。片劑例如通過(guò)制備粉末混合物，制粒或制塊(slug)，加入潤(rùn)滑劑和崩解劑并壓制成片劑來(lái)配制。粉末混合物通過(guò)將適當(dāng)粉碎的化合物與如上所述的稀釋劑或堿以及任選地與粘合劑如羧甲基纖維素、藻酸鹽、明膠或聚乙烯吡咯烷酮、溶液阻滯劑如石蠟、吸收促進(jìn)劑如季鹽和/或吸收劑如膨潤(rùn)土、高嶺土或磷酸二鈣混合來(lái)制備。粉末混合物可以通過(guò)用粘合劑如糖漿，淀粉糊，阿卡迪亞膠漿(acadia mucilage)或纖維素或聚合材料的溶液潤(rùn)濕并強(qiáng)制通過(guò)篩網(wǎng)來(lái)制粒。作為制粒的替代方法，粉末混合物可以通過(guò)壓片機(jī)，結(jié)果是不完全形成的片狀物(slug)破碎成顆粒?？梢酝ㄟ^(guò)加入硬脂酸、硬脂酸鹽、滑石或礦物油來(lái)潤(rùn)滑顆粒以防止粘附到片劑形成模具。然后將潤(rùn)滑的混合物壓制成片劑。本發(fā)明化合物也可以與自由流動(dòng)??的惰性載體混合，并直接壓制成片劑，而不經(jīng)過(guò)制?；蛑茐K步驟?？梢蕴峁┯上x(chóng)膠的密封包衣、糖或聚合物材料的包衣和蠟的拋光包衣組成的透明或不透明的保護(hù)包衣。可以向這些包衣中加入染料以區(qū)分不同的單位劑量。
口服液體如溶液、懸浮液、糖漿和酏劑可以以劑量單位形式制備，使得給定量含有預(yù)定量的化合物。糖漿可以通過(guò)將化合物溶于適當(dāng)調(diào)味的水溶液中來(lái)制備，而酏劑通過(guò)使用無(wú)毒的醇媒介物來(lái)制備。懸浮液可以通過(guò)將化合物分散在無(wú)毒媒介物中來(lái)配制。還可以加入增溶劑和乳化劑如乙氧基化異硬脂醇和聚氧乙烯山梨醇醚、防腐劑、矯味添加劑如薄荷油或天然甜味劑或糖精或其它人工甜味劑等。
在適當(dāng)?shù)那闆r下，用于口服給予的劑量單位組合物可以是微膠囊化的。還可以例如通過(guò)將顆粒材料包衣或包埋在聚合物、蠟等中，制備組合物以延長(zhǎng)或維持釋放。
本發(fā)明化合物還可以以脂質(zhì)體遞送系統(tǒng)，例如小單層囊泡、大單層囊泡和多層囊泡的形式給予。脂質(zhì)體可以由多種磷脂形成，例如膽固醇、硬脂胺或磷脂酰膽堿。
適于經(jīng)皮給予的藥物組合物可以呈現(xiàn)為離散貼劑，其意欲與接受者的表皮保持長(zhǎng)時(shí)間的緊密接觸。
適于局部給予的藥物組合物可以配制為軟膏、乳膏、懸浮液、洗劑、粉劑、溶液、糊劑、凝膠、噴霧劑、氣霧劑或油劑。
對(duì)于眼睛或其它外部組織，例如口腔和皮膚的治療，組合物優(yōu)選作為局部軟膏或乳膏施用。當(dāng)配制在軟膏中時(shí)，活性成分可以與石蠟或水溶性軟膏基質(zhì)一起使用?；蛘?，活性成分可以用水包油乳膏基質(zhì)或油包水基質(zhì)配制成乳膏。
適于局部給予至眼睛的藥物組合物包括滴眼劑，其中活性成分溶解或懸浮于合適的載體，特別是水性溶劑中。
適于在口中局部給予的藥物組合物包括錠劑(lozenge)、軟錠劑(pastille)和口腔洗劑。
適于直腸給予的藥物組合物可以呈現(xiàn)為栓劑或灌腸劑。
用于鼻或吸入給予的劑型可以方便地配制為氣霧劑、溶液、懸浮液、滴劑、凝膠或干粉。
用于鼻內(nèi)給予的組合物包括通過(guò)滴劑或通過(guò)加壓泵給予至鼻子的水性組合物。合適的組合物含有水作為用于該目的的稀釋劑或載體。用于給予至肺或鼻子的組合物可以含有一種或多種賦形劑，例如一種或多種懸浮劑、一種或多種防腐劑、一種或多種表面活性劑、一種或多種張力調(diào)節(jié)劑、一種或多種共溶劑，并且可以包括組分以控制組合物的pH，例如緩沖系統(tǒng)。此外，組合物可以含有其它賦形劑如抗氧化劑，例如焦亞硫酸鈉和掩味劑。還可以通過(guò)霧化將組合物給予至鼻子或呼吸道的其它區(qū)域。
鼻內(nèi)組合物可以允許式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽被遞送至鼻腔的所有區(qū)域(靶組織)，并且進(jìn)一步可以允許式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽保持與靶組織接觸更長(zhǎng)時(shí)間段。用于鼻內(nèi)組合物的合適的給藥方案將是用于患者通過(guò)鼻子緩慢吸入隨后在鼻腔被清除。在吸入期間，組合物將被給予至一個(gè)鼻孔，而另一個(gè)被手動(dòng)壓縮。然后對(duì)另一個(gè)鼻孔重復(fù)該程序。通常，每個(gè)鼻孔一次或兩次噴霧將通過(guò)上述程序每天給予一次、兩次或三次，理想地每天一次。特別感興趣的是適合每天一次給予的鼻內(nèi)組合物。
如果包括的話，懸浮劑通常以0.1至5%(w/w)，例如1.5%至2.4%(w/w)的量存在，基于組合物的總重量。藥學(xué)上可接受的懸浮劑的實(shí)例包括但不限于Avicel?(微晶纖維素和羧甲基纖維素鈉)、羧甲基纖維素鈉、硅酸鎂鋁(veegum)、黃蓍膠、膨潤(rùn)土、甲基纖維素、黃原膠、卡波普和聚乙二醇。
用于給予至肺或鼻子的組合物可以含有一種或多種賦形劑，其可以通過(guò)包含一種或多種防腐劑來(lái)保護(hù)免受微生物或真菌污染和生長(zhǎng)。藥學(xué)上可接受的抗微生物劑或防腐劑的實(shí)例包括但不限于季銨化合物(例如苯扎氯銨、芐索氯銨、西曲溴銨、氯化十六烷基吡啶鎓、勞拉氯銨和米吡氯銨)、汞試劑(例如硝酸苯汞、乙酸苯汞和硫柳汞)、醇試劑(例如氯丁醇、苯乙醇和芐醇)、抗菌酯(例如對(duì)羥基苯甲酸的酯)、螯合劑如乙二胺四乙酸二鈉(EDTA)和其它抗微生物劑例如氯己定、氯甲酚、山梨酸及其鹽(例如山梨酸鉀)和多粘菌素。藥學(xué)上可接受的抗真菌劑或防腐劑的實(shí)例包括但不限于苯甲酸鈉、山梨酸、丙酸鈉、對(duì)羥基苯甲酸甲酯、對(duì)羥基苯甲酸乙酯、對(duì)羥基苯甲酸丙酯和對(duì)羥基苯甲酸丁酯。如果包括的話，防腐劑可以以0.001至1%(w/w)，例如0.015%至0.5%(w/w)的量存在，基于組合物的總重量。
組合物(例如其中至少一種化合物為懸浮液形式)可以包括一種或多種表面活性劑，其用于促進(jìn)藥物顆粒在組合物的水相中的溶解。例如，所使用的表面活性劑的量是在混合期間不會(huì)引起發(fā)泡的量。藥學(xué)上可接受的表面活性劑的實(shí)例包括脂肪醇、酯和醚，例如聚氧乙烯(20)脫水山梨醇單油酸酯(聚山梨醇酯80)、聚乙二醇醚和泊洛沙姆。表面活性劑可以以約0.01至10%(w/w)，例如0.01至0.75%(w/w)，例如約0.5%(w/w)的量存在，基于組合物的總重量。
可以包括一種或多種張力調(diào)節(jié)劑以實(shí)現(xiàn)與體液，例如鼻腔的流體的滲透壓，導(dǎo)致刺激性水平降低。藥學(xué)上可接受的張力調(diào)節(jié)劑的實(shí)例包括但不限于氯化鈉、右旋糖、木糖醇、氯化鈣、葡萄糖、甘油和山梨醇。如果存在，可以0.1至10%(w/w)，例如4.5至5.5%(w/w)，例如約5.0%(w/w)的量包括張力調(diào)節(jié)劑，基于組合物的總重量。
本發(fā)明的組合物可以通過(guò)加入合適的緩沖劑如檸檬酸鈉、檸檬酸、氨丁三醇、磷酸鹽如磷酸二鈉(例如十二水合物、七水合物、二水合物和無(wú)水形式)或磷酸鈉及其混合物進(jìn)行緩沖。
如果存在，可以以0.1至5%(w/w)，例如1至3%(w/w)的量包括緩沖劑，基于組合物的總重量。
掩味劑的實(shí)例包括三氯蔗糖、蔗糖、糖精或其鹽、果糖、右旋糖、甘油、玉米糖漿、阿斯巴甜、安賽蜜、木糖醇、山梨醇、赤蘚糖醇、甘草酸銨、索馬甜、紐甜、甘露醇、薄荷醇、桉樹(shù)油、樟腦、天然調(diào)味劑、人造調(diào)味劑及其組合。
可以包括一種或多種共溶劑以有助于藥物化合物和/或其它賦形劑的溶解性。藥學(xué)上可接受的共溶劑的實(shí)例包括但不限于丙二醇、二丙二醇、乙二醇、甘油、乙醇、聚乙二醇(例如PEG300或PEG400)和甲醇。在一個(gè)實(shí)施方案中，共溶劑是丙二醇。
如果存在，可以以0.05至30%(w/w)，例如1至25%(w/w)，例如1至10%(w/w)的量包括共溶劑，基于組合物的總重量。
用于吸入給予的組合物包括通過(guò)加壓泵或吸入器，例如，貯庫(kù)干粉吸入器、單位劑量干粉吸入器、預(yù)計(jì)量多劑量干粉吸入器、鼻吸入器或加壓氣霧劑吸入器、噴霧器或吹入器給予至呼吸道的水性、有機(jī)或水性/有機(jī)混合物、干粉或結(jié)晶組合物。合適的組合物含有水作為用于該目的的稀釋劑或載體，并且可以提供有常規(guī)賦形劑，例如緩沖劑、張力調(diào)節(jié)劑等。水性組合物也可以通過(guò)霧化給予至鼻子和呼吸道的其它區(qū)域。這種組合物可以是使用合適的液化推進(jìn)劑從加壓包裝例如定量吸入器遞送的水溶液或懸浮液或氣霧劑。
用于局部給予至鼻子(例如，用于治療鼻炎)或給予至肺的組合物包括通過(guò)加壓泵遞送至鼻腔的加壓氣霧劑組合物和水性組合物。非加壓的并且適于局部給予至鼻腔的組合物是特別令人感興趣的。合適的組合物含有水作為用于該目的的稀釋劑或載體。用于給予至肺或鼻子的水性組合物可以提供有常規(guī)賦形劑，例如緩沖劑、張力調(diào)節(jié)劑等。水性組合物也可以通過(guò)霧化給予至鼻子。
流體分配器通?？捎糜趯⒘黧w組合物遞送到鼻腔。流體組合物可以是水性或非水性的，但通常是水性的。這種流體分配器可以具有分配噴嘴或分配孔口，在將用戶施加的力施加到流體分配器的泵裝置時(shí)，通過(guò)該分配噴嘴或分配孔口分配計(jì)量劑量的流體組合物。這種流體分配器通常提供有多個(gè)計(jì)量劑量的流體組合物的貯庫(kù)，該劑量在順序泵致動(dòng)時(shí)是可分配的。分配噴嘴或孔口可構(gòu)造成插入使用者的鼻孔中，用于將流體組合物噴霧分配到鼻腔中。在國(guó)際專利申請(qǐng)公開(kāi)號(hào)WO 2005/044354(Glaxo Group Limited)中描述和示出了前述類型的流體分配器。分配器具有容納流體排出裝置的殼體，流體排出裝置具有安裝在用于容納流體組合物的容器上的壓縮泵。殼體具有至少一個(gè)可用手指操作的側(cè)桿，其可相對(duì)于殼體向內(nèi)移動(dòng)，以通過(guò)凸輪在容器中向上移動(dòng)容器，以使泵壓縮并將計(jì)量劑量的組合物通過(guò)殼體的鼻噴嘴從泵桿泵出。在一個(gè)實(shí)施方案中，流體分配器是WO 2005/044354的圖30-40中所示的一般類型。
含有式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的水性組合物也可以通過(guò)如國(guó)際專利申請(qǐng)公開(kāi)號(hào)WO2007/138084(Glaxo Group Limited)中公開(kāi)的，例如參考其圖22-46公開(kāi)的，或如英國(guó)專利申請(qǐng)?zhí)朑B0723418.0(Glaxo Group Limited)中公開(kāi)的，例如參考其圖7-32公開(kāi)的泵遞送。泵可以由如GB0723418.0的圖1-6中公開(kāi)的致動(dòng)器致動(dòng)。
用于通過(guò)吸入局部遞送至肺的干粉組合物可以例如呈現(xiàn)于例如明膠的膠囊和藥筒中，或者例如層壓鋁箔的泡罩中，用于吸入器或吹入器中。粉末共混組合物通常含有用于吸入式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的粉末混合物和合適的粉末基質(zhì)(載體/稀釋劑/賦形劑物質(zhì))，例如單糖、二糖或多糖(例如乳糖或淀粉)。除了藥物和載體外，干粉組合物還可以包括其它賦形劑(例如三元合劑，例如糖酯，例如纖維二糖八乙酸酯，硬脂酸鈣或硬脂酸鎂)。
在一個(gè)實(shí)施方案中，適于吸入給予的組合物可以并入到安裝在合適的吸入裝置內(nèi)部的藥物包裝上提供的多個(gè)密封劑量容器中。容器可以是可破裂的、可剝離的或另外可以一次一個(gè)打開(kāi)的，并且通過(guò)吸入給予的干粉組合物的劑量在吸入裝置的口上給予，如本領(lǐng)域已知的。藥物包可以采取多種不同的形式，例如盤形或細(xì)長(zhǎng)條。代表性的吸入裝置是由GlaxoSmithKline銷售的DISKHALERTM和DISKUSTTM裝置。
干粉可吸入組合物還可以作為吸入裝置中的大容量貯庫(kù)(bulk reservoir)提供，然后裝置提供有計(jì)量裝置，用于計(jì)量組合物從貯庫(kù)到吸入通道的劑量，其中計(jì)量劑量能夠通過(guò)患者在裝置口處吸氣來(lái)吸入。這種類型的示例性市售裝置是TURBUHALER?(AstraZeneca)、TWISTHALER?(Schering)和CLICKHALER?(Innovata)。
用于干粉可吸入組合物的另一種遞送方法是用于使計(jì)量劑量的組合物以膠囊(每個(gè)膠囊一個(gè)劑量)提供，然后將其裝載到吸入裝置中，通常由患者按需要裝載。該裝置具有破裂、刺穿或以其它方式打開(kāi)膠囊的裝置，使得當(dāng)患者在裝置口處吸氣時(shí)劑量能夠被帶入患者的肺中。作為這種裝置的市售實(shí)例，可以提及ROTAHALER?(GlaxoSmithKline)和HANDIHALER?(Boehringer Ingelheim)。
適于吸入的加壓氣霧劑組合物可以是懸浮液或溶液，并且可以含有式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和合適的推進(jìn)劑，例如碳氟化合物或含氫氯氟烴或其混合物，特別是氫氟烷烴，特別是1,1,1,2-四氟乙烷、1,1,1,2,3,3,3-七氟-正丙烷或其混合物。氣霧劑組合物可任選含有本領(lǐng)域熟知的其它組合物賦形劑，如表面活性劑例如油酸，卵磷脂或寡聚乳酸或其衍生物，例如如WO 94/21229和WO 98/34596(Minnesotamining and Manufacturing Company)中所述，和共溶劑例如乙醇。加壓組合物通常保留在用閥(例如計(jì)量閥)封閉的罐(例如鋁罐)中并裝配到提供有口的致動(dòng)器中。
適于陰道給予的藥物組合物可以作為陰道栓劑、棉塞、乳膏、凝膠、糊劑、泡沫或噴霧制劑呈現(xiàn)。
適于腸胃外給予的藥物組合物包括水性和非水性無(wú)菌注射液，其可含有抗氧化劑、緩沖劑、抑菌劑和溶質(zhì)，其使組合物與預(yù)期接受者的血液等滲；以及水性和非水性無(wú)菌懸浮液，其可以包括懸浮劑和增稠劑。組合物可以呈現(xiàn)于單位劑量或多劑量容器，例如密封的安瓿和小瓶中，并且可以儲(chǔ)存在冷凍干燥(凍干)條件下，僅需要在臨使用前加入無(wú)菌液體載體，例如注射用水。臨時(shí)注射液和懸浮液可以由無(wú)菌粉末、顆粒和片劑制備。
應(yīng)當(dāng)理解，除了上述特別提及的成分之外，組合物還可以包括本領(lǐng)域中關(guān)于所討論的制劑類型的常規(guī)的其它試劑，例如適于口服給予的那些可以包括調(diào)味劑。
可以向需要其的哺乳動(dòng)物給予反義或RNA干擾分子?；蛘撸梢越o予包含其的構(gòu)建體。這種分子和構(gòu)建體可以用于干擾目的蛋白質(zhì)，例如組蛋白去甲基化酶的表達(dá)，并且因此改變組蛋白去甲基化。通常，遞送是通過(guò)本領(lǐng)域已知的方法。
反義或RNA干擾分子可以在體外遞送至細(xì)胞或體內(nèi)，例如遞送至哺乳動(dòng)物的腫瘤?？梢允褂眠f送節(jié)點(diǎn)而沒(méi)有限制，包括：靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、腹膜內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、手術(shù)期間的局部遞送、內(nèi)窺鏡、皮下和口服?？梢赃x擇載體用于任何特定應(yīng)用的期望性質(zhì)。載體可以是病毒或質(zhì)粒。腺病毒載體在這方面是有用的。組織特異性、細(xì)胞類型特異性或其它可調(diào)節(jié)的啟動(dòng)子可用于控制抑制性多核苷酸分子的轉(zhuǎn)錄。也可以使用非病毒載體如脂質(zhì)體或納米球。
式(I)化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽也可以與疫苗一起配制作為佐劑以調(diào)節(jié)其活性。這種組合物可以含有抗體或抗體片段或抗原組分，包括但不限于蛋白質(zhì)、DNA、活或死細(xì)菌和/或病毒或病毒樣顆粒，以及一種或多種具有佐劑活性的組分，包括但不限于鋁鹽、油和水乳劑、熱休克蛋白、脂質(zhì)A制劑和衍生物、糖脂、其它TLR激動(dòng)劑如CpG DNA或類似藥劑、細(xì)胞因子如GM-CSF或IL-12或類似藥劑。
藥劑的治療有效量將取決于多種因素，包括例如個(gè)體的年齡和體重、需要治療的精確病癥及其嚴(yán)重程度、制劑的性質(zhì)和給藥途徑，并且最終由主治醫(yī)生或獸醫(yī)決定。特別地，待治療的個(gè)體是哺乳動(dòng)物，特別是人。
所述藥劑可以以日劑量給予。該量可以以每天單次劑量或更通常以每天多次(例如兩次、三次、四次、五次或六次)亞劑量給予，使得總?cè)談┝肯嗤?/p>
適當(dāng)?shù)?，根?jù)本發(fā)明給予的本發(fā)明化合物的量將是選自每天0.01mg至1g的量(以游離或未成鹽化合物計(jì))。
式(I)化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽可以單獨(dú)使用或與其它治療劑組合使用。式(I)化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽和其它藥學(xué)活性劑可以一起或分開(kāi)給予，并且當(dāng)分別給予時(shí)，可以在單獨(dú)或組合的藥物組合物中通過(guò)任何方便的途徑同時(shí)或以任何順序相繼進(jìn)行給予。
將選擇式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和其它藥學(xué)活性劑的量和相對(duì)給予時(shí)間以實(shí)現(xiàn)期望的組合治療效果。本發(fā)明化合物和其它治療劑可以通過(guò)在包括兩種化合物的單一藥物組合物中同時(shí)給予來(lái)組合使用?；蛘?，所述組合可以在分開(kāi)的藥物組合物中以相繼方式分開(kāi)給予，每個(gè)所述藥物組合物包括一種化合物，其中例如首先給予本發(fā)明化合物，其次給予另一種化合物，反之亦然。這種相繼給予可以在時(shí)間上接近(例如同時(shí))或在時(shí)間上遙遠(yuǎn)。此外，即使以相同劑型給予化合物也不要緊，例如，一種化合物可以局部給予，而另一種化合物可以口服給予。合適地，兩種化合物都口服給予。
組合可以作為組合試劑盒呈現(xiàn)。本文使用的術(shù)語(yǔ)“組合試劑盒”或“試劑盒”是指用于給予根據(jù)本發(fā)明的組合的一種或多種藥物組合物。當(dāng)同時(shí)給予兩種化合物時(shí)，組合試劑盒可以在單一藥物組合物例如片劑中或在分開(kāi)的藥物組合物中含有兩種化合物。當(dāng)不同時(shí)給予化合物時(shí)，組合試劑盒將在單一包裝中的分開(kāi)的藥物組合物中或在分開(kāi)的包裝中的分開(kāi)的藥物組合物中含有每種化合物。
組合試劑盒也可以通過(guò)說(shuō)明，例如劑量和給藥說(shuō)明提供。這種劑量和給藥說(shuō)明可以是提供給醫(yī)生的類型，例如通過(guò)藥物產(chǎn)品標(biāo)簽，或者它們可以是由醫(yī)生提供給患者的類型，例如說(shuō)明書(shū)。
當(dāng)以相繼方式分開(kāi)給予組合時(shí)，其中首先給予一種，其次給予另一種，反之亦然，這種相繼給予可以在時(shí)間上接近或在時(shí)間上遙遠(yuǎn)。例如，包括在給予第一藥劑之后數(shù)分鐘至數(shù)十分鐘給予另一種藥劑，和在給予第一藥劑后數(shù)小時(shí)至數(shù)天給予另一種藥劑，其中時(shí)間的間隔沒(méi)有限制，例如，一種藥劑可以每天給予一次，而另一種藥劑可以每天給予2或3次，或者一種藥劑可以每周給予一次，而另一種藥劑可以每天給予一次等。
本領(lǐng)域技術(shù)人員將清楚，在適當(dāng)?shù)那闆r下，其它治療成分可以以下列形式使用：鹽，例如作為堿金屬或胺鹽或作為酸加成鹽，或前藥，或作為酯，例如低級(jí)烷基酯，或作為溶劑合物，例如水合物，以優(yōu)化治療成分的活性和/或穩(wěn)定性和/或物理特性，例如溶解度。還將清楚的是，在適當(dāng)?shù)那闆r下，治療成分可以以光學(xué)純的形式使用。
當(dāng)組合在相同的組合物中時(shí)，應(yīng)當(dāng)理解，兩種化合物必須是穩(wěn)定的，并且彼此和組合物的其它組分相容，并且可以配制用于給藥。當(dāng)單獨(dú)配制時(shí)，它們可以以任何方便的組合物提供，方便地，以本領(lǐng)域中對(duì)這種化合物已知的方式。
當(dāng)式(I)化合物與對(duì)相同疾病、病癥或病狀有活性的第二治療劑組合使用時(shí)，每種化合物的劑量可以不同于單獨(dú)使用該化合物時(shí)的劑量。適當(dāng)?shù)膭┝繉⑹潜绢I(lǐng)域技術(shù)人員容易理解的。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的方法和用途中的哺乳動(dòng)物是人。
本發(fā)明化合物可用于治療其中STING的調(diào)節(jié)是有益的疾病和病癥。這包括炎癥、過(guò)敏性和自身免疫性疾病、感染性疾病和癌癥。
作為免疫應(yīng)答的調(diào)節(jié)劑，式(I)化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽也可以作為單獨(dú)或組合作為佐劑用于治療其中STING的調(diào)節(jié)是有益的疾病和病癥。
在一個(gè)方面，所述疾病或病癥是炎癥、過(guò)敏性和自身免疫性病狀。
相關(guān)的自身免疫性疾病包括但不限于系統(tǒng)性紅斑狼瘡、牛皮癬、胰島素依賴性糖尿病(IDDM)、皮肌炎和干燥綜合征(SS)。
炎癥代表一組對(duì)創(chuàng)傷的血管、細(xì)胞和神經(jīng)響應(yīng)。炎癥可以表征為炎癥細(xì)胞如單核細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞和粒細(xì)胞進(jìn)入組織的運(yùn)動(dòng)。這通常涉及減少的內(nèi)皮屏障功能和水腫進(jìn)入組織。炎癥可以分為急性或慢性。急性炎癥是身體對(duì)有害刺激的初始響應(yīng)，并且通過(guò)血漿和白細(xì)胞從血液到損傷組織的運(yùn)動(dòng)增加來(lái)實(shí)現(xiàn)。生化事件的級(jí)聯(lián)擴(kuò)散和成熟炎性響應(yīng)，其涉及損傷組織內(nèi)的局部血管系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)和各種細(xì)胞。稱為慢性炎癥的長(zhǎng)期炎癥導(dǎo)致存在于炎癥部位的細(xì)胞類型的進(jìn)行性變化，并且其特征在于來(lái)自炎性過(guò)程的組織的同時(shí)破壞和愈合。
當(dāng)作為對(duì)感染的免疫應(yīng)答的一部分或作為對(duì)創(chuàng)傷的急性應(yīng)答發(fā)生時(shí)，炎癥可能是有益的并且通常是自限制性的。然而，炎癥在多種條件下可能是有害的。這包括響應(yīng)感染劑產(chǎn)生過(guò)度炎癥，這可導(dǎo)致顯著的器官損傷和死亡(例如，在敗血癥的環(huán)境中)。此外，慢性炎癥通常是有害的，并且是許多慢性疾病的根源，其對(duì)組織造成嚴(yán)重和不可逆的損傷。在這種情況下，免疫應(yīng)答通常針對(duì)自身組織(自身免疫)，盡管對(duì)外來(lái)實(shí)體的慢性應(yīng)答也可能導(dǎo)致對(duì)自身組織的旁觀者損傷(bystander damage)。
因此，抗炎治療的目的是減少這種炎癥，以當(dāng)存在時(shí)抑制自身免疫，并允許生理過(guò)程或愈合和組織修復(fù)進(jìn)展。
所述藥劑可用于治療身體的任何組織和器官的炎癥，包括肌肉骨骼炎癥、血管炎癥、神經(jīng)炎癥、消化系統(tǒng)炎癥、眼部炎癥、生殖系統(tǒng)炎癥和其它炎癥，如下所示。
肌肉骨骼炎癥是指肌肉骨骼系統(tǒng)的任何炎性病癥，特別是影響骨骼關(guān)節(jié)，包括手、腕、肘、肩、顎、脊柱、頸、髖部、膝蓋、踝和腳的關(guān)節(jié)的那些病癥，以及影響連接肌肉到骨骼的組織例如腱的病癥。可以用本發(fā)明化合物治療的肌肉骨骼炎癥的實(shí)例包括關(guān)節(jié)炎(包括，例如，骨關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、牛皮癬性關(guān)節(jié)炎、強(qiáng)直性脊柱炎、急性和慢性感染性關(guān)節(jié)炎、與痛風(fēng)和假性通風(fēng)有關(guān)的關(guān)節(jié)炎和幼年特發(fā)性關(guān)節(jié)炎)、腱炎、滑膜炎、腱鞘炎、滑囊炎、纖維組織炎(纖維肌痛)、上髁炎、肌炎和骨炎(包括，例如，佩吉特氏病、恥骨炎和囊性纖維性骨炎)。
眼部炎癥是指眼睛的任何結(jié)構(gòu)，包括眼瞼的炎癥?？梢杂帽景l(fā)明化合物治療的眼部炎癥的實(shí)例包括瞼炎、瞼皮松垂癥、結(jié)膜炎、淚腺炎、角膜炎、干性角結(jié)膜炎(干眼病)、鞏膜炎、倒睫癥和葡萄膜炎。
可以用本發(fā)明化合物治療的神經(jīng)系統(tǒng)的炎癥的實(shí)例包括腦炎、吉蘭巴雷綜合征、腦膜炎、神經(jīng)性肌強(qiáng)直、發(fā)作性睡眠、多發(fā)性硬化、脊髓炎和精神分裂癥。
可以用本發(fā)明化合物治療的脈管系統(tǒng)或淋巴系統(tǒng)的炎癥的實(shí)例包括關(guān)節(jié)硬化、關(guān)節(jié)炎、靜脈炎、血管炎和淋巴管炎。
可以用本發(fā)明化合物治療的消化系統(tǒng)的炎性病癥的實(shí)例包括膽管炎、膽囊炎、腸炎、小腸結(jié)腸炎、胃炎、胃腸炎、炎性腸病(例如克羅恩病和潰瘍性結(jié)腸炎)、回腸炎和直腸炎。
可用本發(fā)明化合物治療的生殖系統(tǒng)的炎性病癥的實(shí)例包括子宮頸炎、絨毛膜羊膜炎、子宮內(nèi)膜炎、附睪炎、臍炎、卵巢炎、睪丸炎、輸卵管炎、輸卵管卵巢膿腫、尿道炎、陰道炎、外陰炎和外陰痛。
所述藥劑可用于治療具有炎性組分的自身免疫病癥。這種病癥包括普遍性急性播散性脫發(fā)、Behcet氏病、查加斯病、慢性疲勞綜合征、家族性自主神經(jīng)異常、腦脊髓炎、強(qiáng)直性脊柱炎、再生障礙性貧血、化膿性汗腺炎、自身免疫性肝炎、自身免疫性卵巢炎、乳糜瀉、克羅恩病、1型糖尿病、巨細(xì)胞動(dòng)脈炎、古德帕斯徹綜合征、格雷夫斯病、吉蘭巴雷綜合征、橋本氏病、過(guò)敏性紫癜、川崎病、紅斑狼瘡、顯微鏡下結(jié)腸炎、顯微鏡下多動(dòng)脈炎、混合性結(jié)締組織病、多發(fā)性硬化、重癥肌無(wú)力、僵直性肌陣癵、視神經(jīng)炎、ord’s甲狀腺炎、天皰瘡、結(jié)節(jié)性多動(dòng)脈炎、多肌痛、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、萊特爾氏綜合征、干燥綜合征、顳動(dòng)脈炎、韋格納肉芽腫病、溫抗體型自身免疫性溶血性貧血、間質(zhì)性膀胱炎、萊姆病、硬斑病、牛皮癬、結(jié)節(jié)病、硬皮病、潰瘍性結(jié)腸炎和白癜風(fēng)。
所述藥劑可用于治療具有炎性組分的T細(xì)胞介導(dǎo)的超敏性疾病。這種病癥包括接觸性超敏反應(yīng)、接觸性皮炎(包括由毒葛所致)、蕁麻疹、皮膚過(guò)敏、呼吸道過(guò)敏(枯草熱、過(guò)敏性鼻炎)和谷蛋白敏感性腸病(乳糜瀉)。
可用藥劑治療的其它炎性病癥包括例如闌尾炎、皮炎、皮肌炎、心內(nèi)膜炎、纖維組織炎、牙齦炎、舌炎、肝炎、化膿性汗腺炎、虹膜炎、喉炎、乳腺炎、心肌炎、腎炎、耳炎、胰腺炎、腮腺炎、心外膜炎、腹膜炎、咽炎、胸膜炎、肺炎、前列腺炎、腎盂腎炎和口腔炎、移植排斥(涉及器官如腎、肝、心、肺、胰腺(例如，胰島細(xì)胞)、骨髓、角膜、小腸、皮膚同種異體移植物、皮膚同種移植物和心臟瓣膜異種移植物、血清病和移植物抗宿主病)、急性胰腺炎、慢性胰腺炎、急性呼吸窘迫綜合征、Sexary綜合征、先天性腎上腺增生、非化膿性甲狀腺炎、與癌癥相關(guān)的高鈣血癥、天皰瘡、大皰皰疹性皮炎、重癥多形性紅斑、剝脫性皮炎、脂溢性皮炎、季節(jié)性或常年性過(guò)敏性鼻炎、支氣管哮喘、接觸性皮炎、異位性皮炎、藥物超敏反應(yīng)、過(guò)敏性結(jié)膜炎、角膜炎、眼帶狀皰疹、虹膜炎和虹膜睫狀體炎(oiridocyclitis)、脈絡(luò)膜視網(wǎng)膜炎、視神經(jīng)炎、癥狀性結(jié)節(jié)病、爆發(fā)性或播撒性肺結(jié)核化療、成人的特發(fā)性血小板減少性紫癜、成人的繼發(fā)性血小板減少癥、成人的獲得性(自身免疫性)溶血性貧血、成人白血病和淋巴瘤、兒童急性白血病、局限性腸炎、自身免疫性血管炎、多發(fā)性硬化、慢性阻塞性肺病、實(shí)體器官移植排斥、敗血癥。優(yōu)選的治療包括移植排斥、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、牛皮癬性關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化、1型糖尿病、哮喘、炎性腸病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、牛皮癬、慢性肺部疾病和炎癥伴感染病癥(例如敗血癥)的治療。
在本發(fā)明的另一方面，提供了式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其用于治療炎癥、過(guò)敏性和自身免疫性疾病。
在另一方面，提供了治療炎癥、過(guò)敏性和自身免疫性疾病的方法，包括向需要其的人給予治療有效量的式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽。
在另一方面，提供了式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽在制備用于治療炎癥、過(guò)敏性和自身免疫性疾病的藥物中的用途。
在一個(gè)方面，待治療的疾病是哮喘。
式(I)化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽可以與一種或多種可用于預(yù)防或治療過(guò)敏性疾病、炎性疾病、自身免疫性疾病的其它藥劑組合使用，例如：抗原免疫療法、抗組胺劑、類固醇、NSAID、支氣管擴(kuò)張劑(例如β2激動(dòng)劑、腎上腺素激動(dòng)劑、抗膽堿能劑、茶堿)、甲氨蝶呤、白細(xì)胞三烯調(diào)節(jié)劑和類似藥劑；單克隆抗體療法例如抗IgE、抗TNF、抗IL-5、抗IL-6、抗IL-12、抗IL-1和類似藥劑；受體療法例如依那西普和類似藥劑；抗原非特異性免疫療法(例如干擾素或其它細(xì)胞因子/趨化因子、細(xì)胞因子/趨化因子受體調(diào)節(jié)劑、細(xì)胞因子激動(dòng)劑或拮抗劑、TLR激動(dòng)劑和類似藥劑)。
在另一方面，提供了包含式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和至少一種可用于治療過(guò)敏性疾病、炎癥或自身免疫性疾病的其它治療劑的組合。
在另一方面，提供了包含式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和至少一種可用于治療過(guò)敏性疾病、炎癥或自身免疫性疾病的其它治療劑的組合，其用于治療。
在另一方面，提供了包含式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和至少一種可用于治療過(guò)敏性疾病、炎癥或自身免疫性疾病的其它治療劑的組合，其用于治療過(guò)敏性疾病、炎癥或自身免疫性疾病。
在另一方面，提供了包含式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和至少一種可用于治療過(guò)敏性疾病、炎癥或自身免疫性疾病的其它治療劑的組合在制備用于治療過(guò)敏性疾病、炎癥或自身免疫性疾病的藥物中的用途。
在另一方面，提供了治療過(guò)敏性疾病、炎癥或自身免疫性疾病的方法，包括向需要其的人給予治療有效量的包含式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和至少一種可用于治療過(guò)敏性疾病、炎癥或自身免疫性疾病的其它治療劑的組合。
在另一方面，提供了藥物組合物，其包括包含式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和至少一種可用于治療過(guò)敏性疾病、炎癥或自身免疫性疾病的其它治療劑的組合和一種或多種的藥學(xué)上可接受的賦形劑。
在一個(gè)方面，待用這種組合治療的疾病是哮喘。
在一個(gè)方面，待治療的疾病或病癥是癌癥。
其中式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物可具有潛在有益的抗腫瘤作用的癌癥疾病和病癥的實(shí)例包括但不限于肺、骨、胰腺、皮膚、頭、頸、子宮、卵巢、胃、結(jié)腸、乳腺、食道、小腸、腸、內(nèi)分泌系統(tǒng)、甲狀腺、甲狀旁腺、腎上腺、尿道、前列腺、陰莖、睪丸、輸尿管、膀胱、腎或肝的癌癥；直腸癌；肛門區(qū)癌；輸卵管、子宮內(nèi)膜、宮頸、陰道、外陰、腎盂、腎細(xì)胞的癌；軟組織肉瘤；粘液瘤；橫紋肌瘤；纖維瘤；脂肪瘤；畸胎瘤；膽管癌；肝母細(xì)胞瘤；血管肉瘤；血管瘤；肝癌；纖維肉瘤；軟骨肉瘤；骨髓瘤；慢性或急性白血??；淋巴細(xì)胞性淋巴瘤；原發(fā)性CNS淋巴瘤；CNS的腫瘤；脊椎(spinal axis)腫瘤；鱗狀細(xì)胞癌；滑膜肉瘤；惡性胸膜間皮瘤；腦干膠質(zhì)瘤；垂體腺瘤；支氣管腺瘤；軟骨瘤樣錯(cuò)構(gòu)瘤；間皮瘤；霍奇金病或一種或多種前述癌癥的組合。
本發(fā)明化合物還可用于治療一種或多種困擾哺乳動(dòng)物的疾病，所述疾病的特征在于與新血管形成和/或血管通透性相關(guān)的病狀領(lǐng)域中的細(xì)胞增殖，包括血管增殖性病狀，包括關(guān)節(jié)炎(類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)和再狹窄；纖維化病狀，包括肝硬化和動(dòng)脈粥樣硬化；系膜細(xì)胞增殖性病狀，包括腎小球腎炎、糖尿病性腎病、惡性腎硬化、血栓性微血管病綜合征、增殖性視網(wǎng)膜病、器官移植排斥和腎小球病；和代謝病狀，包括牛皮癬、糖尿病、慢性傷口愈合、炎性和神經(jīng)變性疾病。
在本發(fā)明的另一方面，提供了式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其用于治療癌癥。
在另一方面，提供了治療癌癥的方法，包括向需要其的人給予治療有效量的式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽。
在另一方面，提供式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽在制備用于治療癌癥的藥物中的用途。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明化合物可以與癌癥治療的其它治療方法一起使用。特別地，在抗腫瘤治療中，設(shè)想與其它化療劑、激素、抗體劑以及除了上述那些之外的外科手術(shù)和/或放射治療的組合療法。
在一個(gè)實(shí)施方案中，所述其它抗癌療法是外科手術(shù)和/或放射療法。
在一個(gè)實(shí)施方案中，所述其它抗癌療法是至少一種另外的抗腫瘤劑。
在另一方面，提供了包含式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和至少一種抗腫瘤劑的組合。
在另一方面，提供了包含式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和至少一種抗腫瘤劑的組合，其用于治療。
在另一方面，提供了包含式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和至少一種抗腫瘤劑的組合，其用于治療癌癥。
在另一方面，提供了包含式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和至少一種抗腫瘤劑的組合在制備用于治療癌癥的藥物中的用途。
在另一方面，提供了治療癌癥的方法，包括向需要其的人給予治療有效量的包含式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和至少一種抗腫瘤劑的組合。
在另一方面，提供了藥物組合物，其包括包含式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和至少一種其它治療劑特別是至少一種抗腫瘤劑的組合和一種或多種藥學(xué)上可接受的載體、稀釋劑和賦形劑。
任何對(duì)于所治療的易受影響腫瘤具有活性的抗腫瘤劑可以用于組合中?？捎玫牡湫涂鼓[瘤劑包括但不限于抗微管劑，例如二萜類化合物和長(zhǎng)春花生物堿；鉑配位絡(luò)合物；烷化劑，例如氮芥、氧氮磷雜環(huán)己烯(oxazaphosphorines)、烷基磺酸酯、亞硝基脲和三氮烯類；抗生素，例如蒽環(huán)類、放線菌素和博來(lái)霉素；拓?fù)洚悩?gòu)酶II抑制劑，例如表鬼臼毒素；抗代謝物，例如嘌呤和嘧啶類似物和抗葉酸化合物；拓?fù)洚悩?gòu)酶I抑制劑，例如喜樹(shù)堿；激素和激素類似物；信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路抑制劑；非受體酪氨酸血管生成抑制劑；免疫治療劑；促凋亡劑；和細(xì)胞周期信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制劑。
抗微管或抗有絲分裂劑：
抗微管或抗有絲分裂劑是在細(xì)胞周期的M期或有絲分裂期對(duì)腫瘤細(xì)胞的微管具有活性的階段特異性藥劑?？刮⒐軇┑膶?shí)例包括但不限于二萜類化合物和長(zhǎng)春花生物堿。
源自天然來(lái)源的二萜類化合物是在細(xì)胞周期的G2/M期起作用的階段特異性抗癌劑。據(jù)信，二萜類化合物通過(guò)與該蛋白質(zhì)結(jié)合來(lái)穩(wěn)定微管的β-微管蛋白亞單位。然后蛋白質(zhì)的分解似乎受到抑制，同時(shí)阻止有絲分裂，隨后細(xì)胞死亡。二萜類化合物的實(shí)例包括但不限于紫杉醇及其類似物多西他賽。
紫杉醇，5β,20-環(huán)氧-1,2α,4,7β,10β,13α-六羥基紫杉烷-11-烯-9-酮4,10-二乙酸酯2-苯甲酸酯，13[(2R,3S)-N-苯甲酰基-3-苯基異絲氨酸酯]，是從太平洋紫衫樹(shù)短葉紅豆杉(Taxus brevifolia)中分離的天然二萜產(chǎn)物，并且可作為注射液TAXOL?商購(gòu)得到。它是萜烯的紫杉烷家族的成員。紫杉醇已被批準(zhǔn)臨床用于治療難治性卵巢癌(在美國(guó))(Markman等人，Yale Journal of Biology and Medicine，64:583，1991；McGuire等人，Ann. lntem，Med.，111:273，1989)和用于治療乳腺癌(Holmes等人，J. Nat. Cancer Inst.，83：1797,1991)。其是治療皮膚腫瘤(Einzig等人，Proc. Am. Soc. Clin. Oncol.，20:46)和頭頸癌(Forastire等人，Sem. Oncol.，20：56，1990)的潛在候選物。該化合物還顯示了治療多囊性腎病(Woo等人，Nature，368：750. 1994)、肺癌和瘧疾的潛力。用紫杉醇治療患者導(dǎo)致骨髓抑制(multiple cell lineages，Ignoff，R.J.等人，Cancer Chemotherapy Pocket Guide，1998)，這與閾濃度(50nM) 以上的給予持續(xù)時(shí)間有關(guān)(Kearns，C.M.等人，Seminars in Oncology，3(6) p.16-23，1995)。
多西他賽，(2R,3S)-N-羧基-3-苯基異絲氨酸，N-叔丁基酯，13酯鏈上5β-20-環(huán)氧-1,2α,4,7β,10β,13α-六羥基紫杉烷-11-烯-9-酮4-乙酸酯2-苯甲酸酯，三水合物；可作為注射液以TAXOTERE?商購(gòu)得到。多西他賽指示用于治療乳腺癌。多西他賽是使用從歐洲紫杉樹(shù)的針葉提取的天然前體10-去乙?；?漿果赤霉素III制備的適量(q.v.)紫杉醇的半合成衍生物。
長(zhǎng)春花生物堿是源自長(zhǎng)春花植物的階段特異性抗腫瘤劑。長(zhǎng)春花生物堿通過(guò)與微管蛋白特異性結(jié)合而作用于細(xì)胞周期的M期(有絲分裂)。因此，結(jié)合的微管蛋白分子不能聚合成微管。有絲分裂被認(rèn)為在中期停止，隨后細(xì)胞死亡。長(zhǎng)春花生物堿的實(shí)例包括但不限于長(zhǎng)春堿、長(zhǎng)春新堿和長(zhǎng)春瑞濱。
長(zhǎng)春堿，長(zhǎng)春花堿硫酸鹽，可作為注射液以VELBAN?商購(gòu)得到。盡管其可能指示作為各種實(shí)體瘤的二線治療，但其主要指示用于治療睪丸癌和各種淋巴瘤，包括霍奇金?。灰约傲馨图?xì)胞性和組織細(xì)胞性淋巴瘤。骨髓抑制是長(zhǎng)春堿的劑量限制性副作用。
長(zhǎng)春新堿，22-氧代-長(zhǎng)春花堿硫酸鹽，可以作為注射液以O(shè)NCOVIN?商購(gòu)得到。長(zhǎng)春新堿指示用于治療急性白血病，并且還發(fā)現(xiàn)可用于霍奇金和非霍奇金惡性淋巴瘤的治療方案。脫發(fā)和神經(jīng)學(xué)效應(yīng)是長(zhǎng)春新堿的最常見(jiàn)的副作用，并且在較小程度上發(fā)生骨髓抑制和胃腸道粘膜炎效應(yīng)。
長(zhǎng)春瑞濱，3’,4’-二去氫-4’-去氧-C’-去甲長(zhǎng)春堿[R-(R*,R*)-2,3-二羥基丁二酸(1:2)(鹽)]，可作為酒石酸長(zhǎng)春瑞濱注射液(NAVELBINE?)商購(gòu)得到，其是一種半合成長(zhǎng)春花生物堿。長(zhǎng)春瑞濱指示為單一藥劑或與其它化療劑如順鉑組合用于治療各種實(shí)體瘤，特別是非小細(xì)胞肺癌、晚期乳腺癌和激素難治性前列腺癌。骨髓抑制是長(zhǎng)春瑞濱的最常見(jiàn)的劑量限制性副作用。
鉑配位絡(luò)合物：
鉑配位絡(luò)合物是非階段特異性抗癌劑，其與DNA相互作用。鉑絡(luò)合物進(jìn)入腫瘤細(xì)胞，經(jīng)歷水合作用并與DNA形成鏈內(nèi)和鏈間交聯(lián)，導(dǎo)致對(duì)腫瘤不利的生物效應(yīng)。鉑配位絡(luò)合物的實(shí)例包括但不限于奧沙利鉑、順鉑和卡鉑。
順鉑，順式-二氨二氯鉑，可作為注射液以PLATINOL?商購(gòu)得到。順鉑主要指示用于治療轉(zhuǎn)移性睪丸癌和卵巢癌以及晚期膀胱癌。
卡鉑，二氨[1,1-環(huán)丁烷-二羧酸根(2-)-O,O’]合鉑，可以作為注射液以PARAPLATIN?商購(gòu)得到?？ㄣK主要指示用于晚期卵巢癌的一線和二線治療。
烷化劑：
烷化劑是非階段特異性抗癌劑和強(qiáng)親電子藥劑。通常，烷化劑通過(guò)烷基化經(jīng)DNA分子的親核部分如磷酸基(phosphate)、氨基、巰基、羥基、羧基和咪唑基與DNA形成共價(jià)鍵。這種烷基化破壞了核酸功能，導(dǎo)致細(xì)胞死亡。烷化劑的實(shí)例包括但不限于氮芥，例如環(huán)磷酰胺，美法侖和苯丁酸氮芥；烷基磺酸酯，例如白消安；亞硝基脲，例如卡莫司??；和三氮烯類，例如達(dá)卡巴嗪。
環(huán)磷酰胺，2-[雙(2-氯乙基)氨基]四氫-2H-1,3,2-氧氮磷雜環(huán)己烯2-氧化物一水合物，可作為注射液或片劑以CYTOXAN?商購(gòu)得到。環(huán)磷酰胺指示為單一藥劑或與其它化療劑組合用于治療惡性淋巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤和白血病。
美法侖，4-[雙(2-氯乙基)氨基]-L-苯丙氨酸，可作為注射液或片劑以ALKERAN?商購(gòu)得到。美法侖指示用于姑息性治療多發(fā)性骨髓瘤和不可切除的卵巢上皮癌。骨髓抑制是美法侖的最常見(jiàn)的劑量限制性副作用。
苯丁酸氮芥，4-[雙(2-氯乙基)氨基]苯丁酸，可作為L(zhǎng)EUKERAN?片劑商購(gòu)得到。苯丁酸氮芥指示用于姑息性治療慢性淋巴性白血病和惡性淋巴瘤如淋巴肉瘤、巨濾泡型淋巴瘤和霍奇金病。
白消安，二甲磺酸-1,4-丁二醇酯，可作為MYLERAN?片劑商購(gòu)得到。白消安指示用于姑息性治療慢性骨髓性白血病。
卡莫司汀，1,3-[雙(2-氯乙基)-1-亞硝基脲，可作為單瓶的凍干材料以BiCNU?商購(gòu)獲得?？就∽鳛閱我凰巹┗蚺c其它藥劑組合指示用于姑息性治療腦腫瘤、多發(fā)性骨髓瘤、霍奇金病和非霍奇金淋巴瘤。
達(dá)卡巴嗪，5-(3,3-二甲基-1-三氮烯基)-咪唑-4-甲酰胺，可作為單瓶的物質(zhì)以DTIC-Dome?商購(gòu)獲得。達(dá)卡巴嗪指示用于治療轉(zhuǎn)移性惡性黑素瘤并且與其它藥劑組合用于霍奇金病的二線治療。
抗生素抗腫瘤劑：
抗生素抗腫瘤劑是非階段特異性藥劑，其結(jié)合或插入DNA。通常，這種作用導(dǎo)致穩(wěn)定的DNA絡(luò)合物或鏈斷裂，其破壞核酸的正常功能，導(dǎo)致細(xì)胞死亡?？股乜鼓[瘤劑的實(shí)例包括但不限于放線菌素如更生霉素、蒽環(huán)類如柔紅霉素和多柔比星；和博來(lái)霉素。
更生霉素，也稱為放線菌素D，可以注射形式以COSMEGEN?商購(gòu)得到。更生霉素指示用于治療威爾曼瘤和橫紋肌肉瘤。
柔紅霉素，(8S-順式)-8-乙酰基-10-[(3-氨基-2,3,6-三去氧-α-L-來(lái)蘇-己吡喃糖基)氧基]-7,8,9,10-四氫-6,8,11-三羥基-1-甲氧基-5,12并四苯二酮鹽酸鹽，可以脂質(zhì)體注射形式以DAUNOXOME?或作為注射劑以CERUBIDINE?商購(gòu)得到。柔紅霉素指示用于在急性非淋巴細(xì)胞性白血病和晚期HIV相關(guān)的卡波西肉瘤的治療中誘導(dǎo)緩解。
多柔比星，(8S,10S)-10-[(3-氨基-2,3,6-三去氧-α-L-來(lái)蘇-己吡喃糖基)氧基]-8-乙醇?；?，7,8,9,10-四氫-6,8,11-三羥基-1-甲氧基-5,12并四苯二酮鹽酸鹽，可作為注射形式以RUBEX?或ADRIAMYCIN RDF?商購(gòu)得到。多柔比星主要指示用于治療急性成淋巴細(xì)胞性白血病和急性髓系白血病，但也是治療一些實(shí)體瘤和淋巴瘤的有用成分。
博來(lái)霉素是從輪枝鏈霉菌(Streptomyces verticillus)菌株中分離的細(xì)胞毒性糖肽類抗生素的混合物，可以BLENOXANE?商購(gòu)得到。博來(lái)霉素作為單一藥劑或與其它藥劑組合指示用于姑息性治療鱗狀細(xì)胞癌、淋巴瘤和睪丸癌。
拓?fù)洚悩?gòu)酶II抑制劑：
拓?fù)洚悩?gòu)酶II抑制劑包括但不限于表鬼臼毒素。
表鬼臼毒素是源自曼德拉草(mandrake)植物的階段特異性抗腫瘤劑。表鬼臼毒素通常通過(guò)與拓?fù)洚悩?gòu)酶II和DNA形成三元復(fù)合物導(dǎo)致DNA鏈斷裂而影響細(xì)胞周期的S和G2期中的細(xì)胞。鏈斷裂積累，接著細(xì)胞死亡。表鬼臼毒素的實(shí)例包括但不限于依托泊苷和替尼泊苷。
依托泊苷，4’-去甲基-表鬼臼毒素9[4,6-0-(R)-亞乙基-β-D-吡喃葡萄糖苷]，可作為注射液或膠囊以VePESID?商購(gòu)獲得，并且通常稱為VP-16。依托泊苷作為單一藥劑或與其它化療劑組合指示用于治療睪丸癌和非小細(xì)胞肺癌。
替尼泊苷，4’-去甲基-表鬼臼毒素9[4,6-0-(R)-噻吩亞甲基-β-D-吡喃葡萄糖苷]，可作為注射液以VUMON?商購(gòu)獲得，并且通常稱為VM-26。替尼泊苷作為單一藥劑或與其它化療劑組合指示用于治療兒童的急性白血病。
抗代謝物腫瘤劑：
抗代謝物腫瘤劑是通過(guò)抑制DNA合成或通過(guò)抑制嘌呤或嘧啶堿基合成從而限制DNA合成而作用于細(xì)胞周期的S期(DNA合成)的階段特異性抗腫瘤劑。因此，S期不繼續(xù)進(jìn)行，接著細(xì)胞死亡?？勾x物抗腫瘤劑的實(shí)例包括但不限于氟尿嘧啶、甲氨蝶呤、阿糖胞苷、巰基嘌呤、硫鳥(niǎo)嘌呤和吉西他濱。
5-氟尿嘧啶，5-氟-2,4-(1H,3H)嘧啶二酮，可作為氟尿嘧啶商購(gòu)獲得。給予5-氟尿嘧啶導(dǎo)致抑制胸苷酸合成，并且也摻入到RNA和DNA二者中。結(jié)果通常是細(xì)胞死亡。5-氟尿嘧啶作為單一藥劑或與其它化療劑組合指示用于治療乳腺癌、結(jié)腸癌、直腸癌、胃癌和胰腺癌。其它氟嘧啶類似物包括5-氟脫氧尿苷(氟尿苷)和5-氟脫氧尿苷一磷酸。
阿糖胞苷，4-氨基-1-β-D-阿拉伯呋喃糖基-2(1H)-嘧啶酮，可作為CYTOSAR-U?商購(gòu)獲得，并且通常稱為Ara-C。認(rèn)為阿糖胞苷通過(guò)將阿糖胞苷末端摻入到生長(zhǎng)的DNA鏈中來(lái)抑制DNA鏈延長(zhǎng)，而在S期顯示細(xì)胞階段特異性。阿糖胞苷作為單一藥劑或與其它化療劑組合指示用于治療急性白血病。其它胞苷類似物包括5-氮雜胞苷和2’,2’-二氟脫氧胞苷(吉西他濱)。
巰基嘌呤，1,7-二氫-6H-嘌呤-6-硫酮一水合物，可作為PURINETHOL?商購(gòu)得到。巰基嘌呤通過(guò)至今尚未確定的機(jī)制抑制DNA合成，而在S期顯示細(xì)胞階段特異性。巰基嘌呤作為單一藥劑或與其它化療劑組合指示用于治療急性白血病。有用的巰基嘌呤類似物是硫唑嘌呤。
硫鳥(niǎo)嘌呤，2-氨基-1,7-二氫-6H-嘌呤-6-硫酮，可作為TABLOID?商購(gòu)得到。硫鳥(niǎo)嘌呤通過(guò)至今尚未確定的機(jī)制抑制DNA合成，而在S期顯示細(xì)胞階段特異性。硫鳥(niǎo)嘌呤作為單一藥劑或與其它化療劑組合指示用于治療急性白血病。其它嘌呤類似物包括噴司他丁、赤羥基壬基腺嘌呤、磷酸氟達(dá)拉濱和克拉屈濱。
吉西他濱，2’-脫氧-2’,2’-二氟胞苷一鹽酸鹽(β-異構(gòu)體)，可作為GEMZAR?商購(gòu)得到。吉西他濱通過(guò)阻斷細(xì)胞通過(guò)G1/S邊界的進(jìn)展而在S期顯示細(xì)胞階段特異性。吉西他濱與順鉑組合指示用于治療局部晚期非小細(xì)胞肺癌和單獨(dú)用于治療局部晚期胰腺癌。
甲氨蝶呤，N-[4[[(2,4-二氨基-6-蝶啶基)甲基]甲基氨基]苯甲?；鵠-L-谷氨酸，可作為甲氨蝶呤鈉商購(gòu)得到。甲氨蝶呤通過(guò)抑制合成嘌呤核苷酸和胸苷酸所需的二氫葉酸還原酶抑制DNA合成、修復(fù)和/或復(fù)制，而在S期顯示細(xì)胞階段特異性效應(yīng)。甲氨蝶呤作為單一藥劑或與其它化療劑組合指示用于治療絨毛膜癌、腦膜白血病、非霍奇金淋巴瘤，以及乳腺癌、頭癌、頸癌、卵巢癌和膀胱癌。
拓?fù)洚悩?gòu)酶I抑制劑：
喜樹(shù)堿，包括喜樹(shù)堿和喜樹(shù)堿衍生物，可作為拓?fù)洚悩?gòu)酶I抑制劑得到或在開(kāi)發(fā)中。喜樹(shù)堿的細(xì)胞毒活性被認(rèn)為與其拓?fù)洚悩?gòu)酶I抑制活性有關(guān)。喜樹(shù)堿的實(shí)例包括但不限于伊立替康、托泊替康和下文所述的7-(4-甲基哌嗪子基-亞甲基)-10,11-亞乙基二氧基-20-喜樹(shù)堿的各種光學(xué)形式。
鹽酸伊立替康，(4S)-4,11-二乙基-4-羥基-9-[(4-哌啶子基哌啶子基)羰基氧基]-1H-吡喃并[3’,4’,6,7]氮茚并[1,2-b]喹啉-3,14(4H,12H)-二酮鹽酸鹽，可作為注射液CAMPTOSAR?商購(gòu)得到。伊立替康是喜樹(shù)堿的衍生物，其與其活性代謝物SN-38一起結(jié)合到拓?fù)洚悩?gòu)酶I-DNA復(fù)合物。細(xì)胞毒性被認(rèn)為作為由拓?fù)洚悩?gòu)酶I:DNA:伊立替康或SN-38三元復(fù)合物與復(fù)制酶的相互作用引起的不可修復(fù)的雙鏈斷裂的結(jié)果而發(fā)生。伊立替康指示用于治療結(jié)腸或直腸的轉(zhuǎn)移性癌癥。
鹽酸托泊替康，(S)-10-[(二甲基氨基)甲基]-4-乙基-4,9-二羥基-1H-吡喃并[3’,4’,6,7]氮茚并[1,2-b]喹啉-3,14-(4H,12H)-二酮單鹽酸鹽，可作為注射液HYCAMTIN?商購(gòu)獲得。托泊替康是喜樹(shù)堿的衍生物，其結(jié)合拓?fù)洚悩?gòu)酶I-DNA復(fù)合物并防止由拓?fù)洚悩?gòu)酶I響應(yīng)于DNA分子的扭轉(zhuǎn)張力而引起的單鏈斷裂的再連接。托泊替康指示用于轉(zhuǎn)移性卵巢癌和小細(xì)胞肺癌的二線治療。
激素和激素類似物：
激素和激素類似物是用于治療癌癥的有用化合物，其中在激素和癌癥的生長(zhǎng)和/或生長(zhǎng)缺乏之間存在關(guān)系。可用于癌癥治療的激素和激素類似物的實(shí)例包括但不限于腎上腺皮質(zhì)類固醇，例如潑尼松和潑尼松龍，其可用于治療兒童的惡性淋巴瘤和急性白血??；氨魯米特和其它芳香酶抑制劑，例如阿那曲唑、來(lái)曲唑、伏氯唑和依西美坦，其可用于治療腎上腺皮質(zhì)癌和激素依賴性乳腺癌，其含有雌激素受體；孕激素，例如醋酸甲地孕酮，其可用于治療激素依賴性乳腺癌和子宮內(nèi)膜癌；雌激素、雌激素和抗雌激素，例如氟維司群、氟他胺、尼魯米特、比卡魯胺、乙酸環(huán)丙孕酮和5α-還原酶例如非那雄胺和度他雄胺，其用于治療前列腺癌和良性前列腺增生；抗雌激素，例如他莫昔芬、托瑞米芬、雷洛昔芬、屈洛昔芬、吲哚昔芬(iodoxyfene)，以及選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑(SERMS)，如美國(guó)專利號(hào)5,681,835、5,877,219和6,207,716中描述的那些，其可用于治療激素依賴性乳腺癌和其它易受影響的癌癥；和促性腺激素釋放激素(GnRH)及其類似物，其刺激促黃體生成素(LH)和/或促卵泡激素(FSH)的釋放，可用于治療前列腺癌，例如LHRH激動(dòng)劑和拮抗劑如醋酸戈舍瑞林和亮丙瑞林。
信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路抑制劑：
信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路抑制劑是阻斷或抑制引起細(xì)胞內(nèi)變化的化學(xué)過(guò)程的那些抑制劑。如本文所用，這種變化是細(xì)胞增殖或分化?？捎糜诒景l(fā)明的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制劑包括下列的抑制劑：受體酪氨酸激酶、非受體酪氨酸激酶、SH2/SH3結(jié)構(gòu)域阻斷劑、絲氨酸/蘇氨酸激酶、磷脂酰肌醇-3激酶、肌醇信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和Ras致癌基因。
幾種蛋白酪氨酸激酶催化參與調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)的各種蛋白質(zhì)中特定酪氨酰殘基的磷酸化。這種蛋白酪氨酸激酶可以廣義地分類為受體或非受體激酶。
受體酪氨酸激酶是具有胞外配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域、跨膜結(jié)構(gòu)域和酪氨酸激酶結(jié)構(gòu)域的跨膜蛋白。受體酪氨酸激酶參與細(xì)胞生長(zhǎng)的調(diào)節(jié)，并通常稱為生長(zhǎng)因子受體。許多這些激酶的不適當(dāng)或不受控制的活化，即異常激酶生長(zhǎng)因子受體活性，例如通過(guò)過(guò)表達(dá)或突變導(dǎo)致，已顯示導(dǎo)致不受控制的細(xì)胞生長(zhǎng)。因此，這種激酶的異?；钚砸呀?jīng)與惡性組織生長(zhǎng)相聯(lián)系。因此，這種激酶的抑制劑可以提供癌癥治療方法。生長(zhǎng)因子受體包括例如表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFr)、血小板衍生生長(zhǎng)因子受體(PDGFr)、erbB2、erbB4、ret、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體(VEGFr)、具有免疫球蛋白樣和表皮生長(zhǎng)因子同源結(jié)構(gòu)域的酪氨酸激酶(TIE-2)、胰島素樣生長(zhǎng)因子-I(IGFI)受體、巨噬細(xì)胞集落刺激因子(cfms)、BTK、ckit、cmet、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF)受體、Trk受體(TrkA、TrkB和TrkC)、肝配蛋白(eph)受體和RET原癌基因。幾種生長(zhǎng)受體抑制劑正在開(kāi)發(fā)中，包括配體拮抗劑、抗體、酪氨酸激酶抑制劑和反義寡核苷酸。生長(zhǎng)因子受體和抑制生長(zhǎng)因子受體功能的藥劑描述于例如Kath，John C.，Exp. Opin. Ther. Patents (2000) 10(6):803-818；Shawver等人，DDT Vol 2，No. 2 February 1997；和Lofts，F(xiàn). J.等人，“Growth factor receptors as targets”，New Molecular Targets for Cancer Chemotherapy，ed. Workman，Paul和Kerr，David，CRC press 1994，London中。
酪氨酸激酶，其不是生長(zhǎng)因子受體激酶，被稱為非受體酪氨酸激酶?？捎糜诒景l(fā)明的作為抗癌藥物靶標(biāo)或潛在靶標(biāo)的非受體酪氨酸激酶包括cSrc、Lck、Fyn、Yes、Jak、cAb1、FAK(粘著斑激酶)、Brutons酪氨酸激酶和Bcr-Abl。這種非受體激酶和抑制非受體酪氨酸激酶功能的藥劑描述于Sinh，S.和Corey，S.J.，(1999) Journal of Hematotherapy and Stem Cell Research 8 (5)：465 – 80；和Bolen，J.B.，Brugge，J.S.，(1997) Annual review of Immunology. 15：371-404中。
SH2/SH3結(jié)構(gòu)域阻斷劑是破壞各種酶或銜接蛋白中的SH2或SH3結(jié)構(gòu)域結(jié)合的藥劑，所述酶或銜接蛋白包括PI3-K p85亞單元、Src家族激酶、銜接分子(Shc、Crk、Nck、Grb2)和Ras-GAP。作為抗癌藥物靶標(biāo)的SH2/SH3結(jié)構(gòu)域論述于Smithgall，T.E. (1995)，Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 34(3) 125-32中。
絲氨酸/蘇氨酸激酶抑制劑，包括MAP激酶級(jí)聯(lián)阻斷劑，其包括Raf激酶(rafk)、絲裂原或細(xì)胞外調(diào)節(jié)激酶(MEK)和細(xì)胞外調(diào)節(jié)激酶(ERK)的阻斷劑；和蛋白激酶C家族成員阻斷劑，包括PKC(α、β、γ、ε、μ、λ、ι、ζ)、IkB激酶家族(IKKa、IKKb)、PKB家族激酶、akt激酶家族成員和TGFβ受體激酶的阻斷劑。這種絲氨酸/蘇氨酸激酶及其抑制劑描述于Yamamoto，T.，Taya，S.，Kaibuchi，K.，(1999)，Journal of Biochemistry. 126 (5) 799-803；Brodt，P，Samani，A.，和Navab，R. (2000)，Biochemical Pharmacology，60. 1101-1107；Massague，J.，Weis-Garcia，F(xiàn). (1996) Cancer Surveys. 27:41-64；Philip，P.A.，和Harris，A.L. (1995)，Cancer Treatment and Research. 78：3-27，Lackey，K.等人，Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters，(10)，2000，223-226；U.S. Patent No. 6,268,391；和Martinez-Iacaci，L.等人，Int. J. Cancer (2000)，88(1)，44-52中。
磷脂酰肌醇-3激酶家族成員的抑制劑，包括PI3激酶、ATM、DNA-PK和Ku的阻斷劑也可用于本發(fā)明。這種激酶論述于Abraham，R.T. (1996)，Current Opinion in Immunology.8 (3) 412-8；Canman，C.E.，Lim，D.S. (1998)，Oncogene 17 (25) 3301-3308；Jackson，S.P. (1997)，International Journal of Biochemistry and Cell Biology. 29 (7):935-8；和Zhong，H.等人，Cancer res，(2000) 60(6)，1541-1545中。
還可用于本發(fā)明的是肌醇信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制劑，例如磷脂酶C阻斷劑和肌醇類似物。這種信號(hào)抑制劑描述于Powis，G.，和Kozikowski A.，(1994) New Molecular Targets for Cancer Chemotherapy ed.，Paul Workman和David Kerr，CRC press 1994，London中。
另一組信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路抑制劑是Ras致癌基因的抑制劑。這種抑制劑包括法尼基轉(zhuǎn)移酶、香葉烯基轉(zhuǎn)移酶和CAAX蛋白酶的抑制劑以及反義寡核苷酸、核酶和免疫療法。這種抑制劑已經(jīng)顯示阻斷含有野生型突變r(jià)as的細(xì)胞中的ras活化，從而起到抗增殖劑的作用。Ras致癌基因抑制論述于Scharovsky，O.G.，Rozados，V.R.，Gervasoni，S.I. Matar，P. (2000)，Journal of Biomedical Science. 7(4) 292-8；Ashby，M.N. (1998)，Current Opinion in Lipidology. 9 (2) 99 – 102；和BioChim. Biophys. Acta，(19899) 1423(3):19-30中。
如上所述，受體激酶配體結(jié)合的抗體拮抗劑也可以用作信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制劑。這組信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路抑制劑包括將人源化抗體用于受體酪氨酸激酶的細(xì)胞外配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域。例如Imclone C225 EGFR特異性抗體(參見(jiàn)Green，M.C.等人，Monoclonal Antibody Therapy for Solid Tumors，Cancer Treat. Rev.，(2000)，26(4)，269-286)；Herceptin? erbB2抗體(參見(jiàn)Tyrosine Kinase Signalling in Breast cancer:erbB Family Receptor Tyrosine Kinases，Breast cancer Res.，2000，2(3)，176-183)；和2CB VEGFR2特異性抗體(參見(jiàn)Brekken，R.A.等人，Selective Inhibition of VEGFR2 Activity by a monoclonal Anti-VEGF antibody blocks tumor growth in mice，Cancer Res. (2000) 60，5117-5124)。
抗血管生成劑：
(i)包括非受體MEK血管生成抑制劑的抗血管生成劑也可能是有用的?？寡苌蓜├缫种蒲軆?nèi)皮生長(zhǎng)因子的作用的那些(例如抗血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子抗體貝伐單抗[Avastin?]，以及通過(guò)其它機(jī)制起作用的化合物(例如利諾胺、整聯(lián)蛋白αvβ3功能抑制劑、內(nèi)皮他丁和血管他丁)。
免疫治療劑：
用于免疫治療方案的藥劑也可以與式(I)化合物組合使用。免疫治療方法，包括例如增加患者腫瘤細(xì)胞的免疫原性的離體和體內(nèi)方法，例如用細(xì)胞因子如白細(xì)胞介素2、白細(xì)胞介素4或粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子轉(zhuǎn)染，降低T細(xì)胞無(wú)能的方法，使用轉(zhuǎn)染的免疫細(xì)胞例如細(xì)胞因子轉(zhuǎn)染的樹(shù)突細(xì)胞的方法，使用細(xì)胞因子轉(zhuǎn)染的腫瘤細(xì)胞系的方法和使用抗獨(dú)特型抗體的方法。
促凋亡劑：
用于促凋亡方案的藥劑(例如，bcl-2反義寡核苷酸)也可用于本發(fā)明的組合中。
細(xì)胞周期信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制劑
細(xì)胞周期信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制劑抑制參與細(xì)胞周期控制的分子。稱為細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶(CDK)的蛋白激酶家族及其與稱為細(xì)胞周期蛋白的蛋白質(zhì)家族的相互作用控制通過(guò)真核細(xì)胞周期的進(jìn)展。不同細(xì)胞周期蛋白/CDK復(fù)合物的配位活化和失活對(duì)于通過(guò)細(xì)胞周期的正常進(jìn)展是必需的。幾種細(xì)胞周期信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的抑制劑正在開(kāi)發(fā)中。例如，細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶包括CDK2、CDK4和CDK6及其抑制劑的實(shí)例描述于例如Rosania等人，Exp. Opin. Ther. Patents (2000) 10(2):215-230中。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的組合包含式I的化合物或其鹽或溶劑合物和至少一種抗腫瘤劑，所述抗腫瘤劑選自抗微管劑、鉑配位絡(luò)合物、烷化劑、抗生素、拓?fù)洚悩?gòu)酶II抑制劑、抗代謝物、拓?fù)洚悩?gòu)酶I抑制劑、激素和激素類似物、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路抑制劑、非受體酪氨酸MEK血管生成抑制劑、免疫治療劑、促凋亡劑和細(xì)胞周期信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制劑。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的組合包含式I的化合物或其鹽或溶劑合物和至少一種抗腫瘤劑，所述抗腫瘤劑是選自二萜類化合物和長(zhǎng)春花生物堿的抗微管劑。
在另一實(shí)施方案中，至少一種抗腫瘤劑是二萜類化合物。
在另一實(shí)施方案中，至少一種抗腫瘤劑是長(zhǎng)春花生物堿。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的組合包含式I的化合物或其鹽或溶劑合物和至少一種抗腫瘤劑，所述抗腫瘤劑是鉑配位絡(luò)合物。
在另一實(shí)施方案中，至少一種抗腫瘤劑是紫杉醇、卡鉑或長(zhǎng)春瑞濱。
在另一實(shí)施方案中，至少一種抗腫瘤劑是卡鉑。
在另一實(shí)施方案中，至少一種抗腫瘤劑是長(zhǎng)春瑞濱。
在另一實(shí)施方案中，至少一種抗腫瘤劑是紫杉醇。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的組合包含式I的化合物及其鹽或溶劑合物和至少一種抗腫瘤劑，所述抗腫瘤劑是信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路抑制劑。
在另一實(shí)施方案中，信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路抑制劑是生長(zhǎng)因子受體激酶VEGFR2、TIE2、PDGFR、BTK、erbB2、EGFr、IGFR-1、TrkA、TrkB、TrkC或c-fms的抑制劑。
在另一實(shí)施方案中，所述信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路抑制劑是絲氨酸/蘇氨酸激酶rafk、akt或PKC-ζ的抑制劑。
在另一實(shí)施方案中，所述信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路抑制劑是選自src家族激酶的非受體酪氨酸激酶的抑制劑。
在另一實(shí)施方案中，所述信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路抑制劑是c-src的抑制劑。
在另一實(shí)施方案中，所述信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路抑制劑是Ras致癌基因的抑制劑，其選自法尼基轉(zhuǎn)移酶和香葉烯基轉(zhuǎn)移酶的抑制劑。
在另一實(shí)施方案中，所述信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路抑制劑是選自PI3K的絲氨酸/蘇氨酸激酶的抑制劑。
在另一實(shí)施方案中，所述信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路抑制劑是雙重EGFr/erbB2抑制劑，例如N-{3-氯-4-[(3-氟芐基)氧基]苯基}-6-[5-({[2-甲磺?；?乙基]氨基}甲基)-2-呋喃基]-4-喹唑啉胺(以下結(jié)構(gòu))：
。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的組合包含式I的化合物或其鹽或溶劑合物和至少一種抗腫瘤劑，所述抗腫瘤劑是細(xì)胞周期信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制劑。
在其它實(shí)施方案中，細(xì)胞周期信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制劑是CDK2、CDK4或CDK6的抑制劑。
在一個(gè)方面，待治療的疾病是感染性疾病，例如由細(xì)菌或病毒引起的。在本發(fā)明的另一方面，提供了用于治療感染性疾病的式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽。
在另一方面，提供了治療感染性疾病的方法，包括向需要其的人給予治療有效量的式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽。
在另一方面，提供式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽在制備用于治療感染性疾病的藥物中的用途。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明化合物可以與治療感染性疾病的其它治療方法一起使用。特別地，設(shè)想抗病毒劑和抗菌劑。
式(I)化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽可以與一種或多種可用于預(yù)防或治療細(xì)菌和病毒感染的藥劑組合使用。這種藥劑的實(shí)例包括但不限于：聚合酶抑制劑，例如WO 2004/037818-A1中公開(kāi)的那些，以及WO 2004/037818和WO 2006/045613中公開(kāi)的那些；JTK-003、JTK-019、NM-283、HCV-796、R-803、R1728、R1626以及WO 2006/018725、WO 2004/074270、WO 2003/095441、US2005/0176701、WO 2006/020082、WO 2005/080388、WO 2004/064925、WO 2004/065367、WO 2003/007945、WO 02/04425、WO 2005/014543、WO 2003/000254、EP 1065213、WO 01/47883、WO 2002/057287、WO 2002/057245中公開(kāi)的那些和類似藥劑；復(fù)制抑制劑，例如阿昔洛韋、泛昔洛韋、更昔洛韋、西多福韋、拉米夫定和類似藥劑；蛋白酶抑制劑，例如HIV蛋白酶抑制劑沙奎那韋、利托那韋、茚地那韋、奈非那韋、安普那韋、福沙那韋、貝卡那韋、阿扎那韋、替拉那韋、帕利那韋、拉西那韋和HCV蛋白酶抑制劑BILN2061、VX-950、SCH503034；和類似藥劑；核苷和核苷酸逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑，例如齊多夫定、地達(dá)諾新、拉米夫定、扎西他濱、阿巴卡韋、司他夫定、阿德福韋、阿德福韋酯、福齊夫定、todoxil、恩曲他濱、阿洛夫定、amdoxovir、艾夫他濱和類似藥劑；非核苷逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(包括具有抗氧化活性的藥劑，例如怡妙康、奧替普拉等)，例如奈韋拉平、地拉韋啶、依法韋侖、洛韋胺、怡妙康、奧替普拉、卡普韋林、TMC-278、TMC-125、依曲韋林和類似藥劑；進(jìn)入抑制劑，例如恩夫韋地(T-20)、T-1249、PRO-542、PRO-140、TNX-355、BMS-806、5-Helix和類似藥劑；整合酶抑制劑，例如L-870,180和類似藥劑；芽殖抑制劑，例如PA-344和PA-457，以及類似的藥劑；趨化因子受體抑制劑，例如vicriviroc(Sch-C)、Sch-D、TAK779、maraviroc(UK-427,857)、TAK449，以及WO 02/74769、WO 2004/054974、WO 2004/055012、WO 2004/055010、WO 2004/055016、WO 2004/055011和WO 2004/054581中公開(kāi)的那些，以及類似藥劑；神經(jīng)氨酸酶抑制劑，例如CS-8958、扎那米韋、奧司他韋、帕拉米韋和類似藥劑；離子通道阻斷劑，例如金剛烷胺或金剛乙胺和類似藥劑；和干擾RNA和反義寡核苷酸和例如ISIS-14803和類似藥劑；未確定作用機(jī)制的抗病毒劑，例如WO 2005/105761、WO 2003/085375、WO 2006/122011中公開(kāi)的那些、利巴韋林和類似藥劑。式(I)化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽還可以與一種或多種其它藥劑組合使用，所述藥劑可用于預(yù)防或治療病毒感染，例如免疫治療(例如干擾素或其它細(xì)胞因子/趨化因子、細(xì)胞因子/趨化因子受體調(diào)節(jié)劑、細(xì)胞因子激動(dòng)劑或拮抗劑和類似藥劑)；和治療疫苗、抗纖維化劑、抗炎劑例如皮質(zhì)類固醇或NSAID(非甾體抗炎劑)和類似藥劑。
在另一方面，提供了包含式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和至少一種可用于治療感染性疾病的其它治療劑的組合。
在另一方面，提供了包含式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和至少一種可用于治療感染性疾病的其它治療劑的組合，其用于治療。
在另一方面，提供了包含式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和至少一種可用于治療感染性疾病的其它治療劑的組合，其用于治療感染性疾病。
在另一方面，提供了包含式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和至少一種可用于治療感染性疾病的其它治療劑的組合在制備用于治療感染性疾病的藥物中的用途。
在另一方面，提供了治療感染性疾病的方法，包括向需要其的人給予治療有效量的包含式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和至少一種可用于治療感染性疾病的其它治療劑的組合。
在另一方面，提供了藥物組合物，其包括包含式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和至少一種可用于治療感染性疾病的其它治療劑的組合和一種或多種藥學(xué)上可接受的賦形劑。
因此，還提供了包含式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的疫苗佐劑。
還提供了包含抗原或抗原組合物和式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的免疫原性組合物。
還提供了包含抗原或抗原組合物和式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的疫苗組合物。
還提供了治療或預(yù)防疾病的方法，包括向患有或易患疾病的人個(gè)體給予包含抗原或抗原組合物和式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的免疫原性組合物。
還提供了治療或預(yù)防疾病的方法，包括向患有或易患疾病的人個(gè)體給予包含抗原或抗原組合物和式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的疫苗組合物。
還提供了式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽在制備用于治療或預(yù)防疾病的包含抗原或抗原組合物的免疫原性組合物中的用途。
還提供了式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽在制備用于治療或預(yù)防疾病的包含抗原或抗原組合物的疫苗組合物中的用途。
式(I)化合物可以通過(guò)如下面方案和/或下述具體實(shí)施例中所述的有機(jī)合成領(lǐng)域已知的方法制備。在所有方法中，應(yīng)充分理解的是，按照化學(xué)的一般原理，在必要時(shí)可以使用敏感或反應(yīng)性基團(tuán)的保護(hù)基。根據(jù)有機(jī)合成的標(biāo)準(zhǔn)方法處理保護(hù)基(T. W. Green和P. G. M. Wuts (1999) Protective Groups in Organic Synthesis，第三版，John Wiley & Sons)。這些基團(tuán)在化合物合成的方便階段使用本領(lǐng)域技術(shù)人員容易明白的方法除去。選擇方法以及反應(yīng)條件和它們的執(zhí)行順序應(yīng)與式(I)化合物的制備一致。
化合物制備
式(I)化合物及其鹽可通過(guò)下文所述的方法制備，其構(gòu)成本發(fā)明的其它方面。
因此，提供了制備式(I)化合物的方法，其中R5和R6都是OH，該方法包括式(II)化合物的脫保護(hù)：
其中R1、R2、R3、R4、Y1和Y2如上文對(duì)式(I)化合物所定義，R11和R12是合適的保護(hù)基，例如叔丁基二甲基甲硅烷氧基(OTBDMS)，然后如果需要，制備如此形成的化合物鹽。類似的方法將用于制備其中R5和R6之一是氟的式(I)化合物，在這種情況下，只有R11或R12之一將是適當(dāng)保護(hù)的羥基，例如叔丁基二甲基甲硅烷氧基(OTBDMS)
例如，將式(II)化合物溶于合適的溶劑，例如吡啶中，并在合適的溫度，例如50-55℃下加熱，然后用三乙胺三氫氟酸鹽和三乙胺的混合物處理合適的時(shí)間段，例如2-3小時(shí)。通過(guò)加入溶劑例如丙酮沉淀并且如果需要，進(jìn)行純化來(lái)分離產(chǎn)物(II)。
式(II)化合物可以通過(guò)式(III)化合物的脫保護(hù)來(lái)制備：
其中，Y1、Y2、R11和R12如上文對(duì)式(II)化合物所定義，且R7、R8、R9和R10定義為
當(dāng)R7 = OH且R8 = NHCOiPr或R7 = NHBz且R8 = H時(shí)
R9 = OH且R10 = NHCOiPr或R9 = NHBz且R10 = H
例如，將式(III)化合物溶于合適的混合物，例如甲胺的甲醇溶液或氨水的甲醇溶液中，并在合適的溫度，例如50-55℃下加熱合適的時(shí)間段，例如2-24小時(shí)。通過(guò)除去溶劑并且如果需要，進(jìn)行純化來(lái)分離產(chǎn)物(II)。
式(III)化合物可通過(guò)式(IV)化合物的反應(yīng)制備：
..應(yīng)為:-
其中，Y1、Y2、R7、R8、R9、R10、R11和R12如上文對(duì)式(III)化合物所定義。
例如，將式(IV)化合物溶于合適的溶劑，例如吡啶中，并用合適的偶聯(lián)劑，例如2-氯-5,5-二甲基-1,3,2-二氧雜磷雜環(huán)己烷2-氧化物處理，并在合適的溫度，例如20℃下加熱合適的時(shí)間段，例如1-2小時(shí)。通過(guò)加入合適的溶劑，例如水淬滅反應(yīng)，然后在加入氧化劑，例如碘后，在合適的溫度，例如20℃下攪拌合適的時(shí)間段，例如15分鐘。通過(guò)除去溶劑并且如果需要，進(jìn)行純化來(lái)分離產(chǎn)物(III)。
式(IV)化合物可以通過(guò)式(V)化合物與式(VI)化合物的反應(yīng)制備：
其中，Y1、Y2、R7、R8、R9、R10、R11和R12如上文對(duì)式(III)化合物所定義，并且DMTr是4,4'-二甲氧基三苯甲基保護(hù)基。
例如，在分子篩存在下，將式(VI)化合物溶于合適的溶劑，例如乙腈中，并用溶于合適溶劑，例如乙腈中的式(V)化合物的溶液處理，并在合適的溫度，例如20℃下攪拌合適的時(shí)間段，例如1-2小時(shí)。加入合適的氧化劑溶液，例如叔丁基過(guò)氧化氫的癸烷溶液，并將混合物在合適的溫度，例如20℃下攪拌合適的時(shí)間段，例如0.5小時(shí)。在淬滅過(guò)量氧化劑，例如通過(guò)加入亞硫酸氫鈉水溶液，并蒸發(fā)溶劑后，將殘余物溶于合適的溶劑，例如二氯甲烷和水的混合物中，并用合適的試劑，例如二氯乙酸處理，并在合適的溫度，例如20℃下攪拌合適的時(shí)間段，例如15-30分鐘。通過(guò)加入合適的溶劑，例如吡啶，并通過(guò)蒸發(fā)濃縮，得到含有產(chǎn)物(IV)的溶液。
式(V)化合物可以通過(guò)式(VII)化合物的反應(yīng)制備。
其中，Y1、R9和R10如上文對(duì)式(III)化合物所定義，并且DMTr是4,4'-二甲氧基三苯甲基保護(hù)基。
例如，將式(VII)化合物溶于合適的混合物，例如含有水的乙腈中，用三氟乙酸吡啶鎓處理，并在合適的溫度，例如20℃下攪拌合適的時(shí)間段，例如1分鐘，然后加入叔丁胺并將混合物在合適的溫度，例如20℃下攪拌合適的時(shí)間段，例如10分鐘。通過(guò)蒸發(fā)溶劑，然后溶于合適的溶劑，例如含有水的二氯甲烷中分離產(chǎn)物，用二氯乙酸處理并在合適的溫度，例如20℃下攪拌合適的時(shí)間段，例如10分鐘。通過(guò)加入吡啶，然后與乙腈共沸混合物，得到產(chǎn)物(V)的乙腈濃溶液。
式(VI)化合物可以通過(guò)式(VIII)化合物的反應(yīng)制備
其中，Y2、R7、R8和R12如上文對(duì)式(III)化合物所定義。并且DMTr是4,4'-二甲氧基三苯甲基保護(hù)基。
例如，在與合適的溶劑，例如乙腈共沸后，將式(VIII)化合物溶于合適的溶劑，例如二氯甲烷中，并與亞磷酸酯化試劑，例如3-((雙(二異丙基氨基)膦基)氧基)丙腈在堿，例如1H-四唑存在下反應(yīng)，并在合適的溫度，例如20℃下攪拌合適的時(shí)間段，例如20小時(shí)。在水處理和純化后分離產(chǎn)物(VI)。
式(VII)化合物可以通過(guò)式(IX)化合物的反應(yīng)制備
其中，Y1、R9、R10和R11如上文對(duì)式(III)化合物所定義，并且DMTr是4,4'-二甲氧基三苯甲基保護(hù)基。
例如，在與合適的溶劑，例如乙腈共沸后，將式(IX)化合物溶于合適的溶劑，例如二氯甲烷中，并與亞磷酸酯化試劑，例如3-((雙(二異丙基氨基)膦基)氧基)丙腈在堿，例如1H-四唑存在下反應(yīng)，并在合適的溫度，例如20℃下攪拌合適的時(shí)間段，例如20小時(shí)。在水處理和純化后分離產(chǎn)物(VII)。
式(VIII)化合物和式(IX)化合物可通過(guò)式(X)化合物的反應(yīng)制備
其中，Y是Y1或Y2且Z1是R7或R9且Z2是R8或R10，如上文對(duì)式(III)化合物所定義，并且DMTr是4,4'-二甲氧基三苯甲基保護(hù)基。
例如，將式(X)化合物溶于合適的溶劑，例如吡啶中，并在堿，例如咪唑的存在下與甲硅烷基化試劑，例如叔丁基二甲基甲硅烷基氯反應(yīng)，并在合適的溫度，例如20℃下攪拌合適的時(shí)間段，例如4-20小時(shí)。在水處理和色譜分離后分離產(chǎn)物(VIII)和(IX)。
式(X)化合物可通過(guò)式(XI)化合物的反應(yīng)制備
其中Y、Z1和Z2如上文對(duì)式(X)化合物所定義。
例如，將式(XI)化合物溶于合適的溶劑，例如吡啶中，并與4,4'-二甲氧基三苯甲基氯反應(yīng)，并在合適的溫度，例如20℃下攪拌合適的時(shí)間段，例如4-20小時(shí)。在水處理并且如果需要，進(jìn)行純化后分離產(chǎn)物(X)。
式(XI)化合物可以通過(guò)式(XII)或式(XIII)化合物的反應(yīng)制備
其中Y如上文對(duì)式(XI)化合物所定義。
例如，將式(XII)化合物溶于合適的溶劑，例如吡啶中，并與三甲基甲硅烷基氯反應(yīng)，并在合適的溫度，例如20℃下攪拌合適的時(shí)間段，例如2小時(shí)。冷卻至0℃后，加入苯甲酰氯。將混合物在合適的溫度，例如0-20℃下攪拌合適的時(shí)間段，例如18-20小時(shí)，然后用水處理，接著用堿水溶液，例如0.88氨溶液處理。通過(guò)蒸發(fā)溶劑并用水洗滌來(lái)分離Z1 = NHBz 和Z2 = H的產(chǎn)物(XI)。
例如，將式(XIII)化合物溶于合適的溶劑，例如吡啶中，并與三甲基甲硅烷基氯反應(yīng)，并在合適的溫度，例如20℃下攪拌合適的時(shí)間段，例如2-4小時(shí)。冷卻至0℃后，加入異丁酰氯。將混合物在合適的溫度，例如0-20℃下攪拌合適的時(shí)間段，例如1-20小時(shí)，然后冷卻至合適的溫度例如0℃，用水處理，接著用堿水溶液，例如0.88氨溶液處理。通過(guò)蒸發(fā)溶劑，隨后水處理并且如果需要，進(jìn)行純化來(lái)分離Z1 = OH和Z2 = NHCOiPr的產(chǎn)物(XI)。
本發(fā)明的方面通過(guò)參考以下實(shí)施例來(lái)說(shuō)明但不以任何方式限于以下實(shí)施例。
分析方法
1H NMR
1H NMR光譜在CDCl3、DMSO-d6、CD3CN或D2O中在Bruker DPX 400或Bruker Avance DRX，Varian Unity 400光譜儀或JEOL Delta上記錄，均在400MHz下工作。所用內(nèi)標(biāo)為四甲基甲硅烷或殘留的質(zhì)子化溶劑，對(duì)于CDCl3為7.25ppm，或?qū)τ贒MSO-d6為2.50ppm。
LCMS
系統(tǒng)A
柱：50mm x 2.1mm ID，1.7μm Acquity UPLC BEH C18
流速：1mL/min.
溫度：40℃
UV檢測(cè)范圍：210至350nm
質(zhì)譜：使用交替掃描正和負(fù)模式電噴霧電離在質(zhì)譜儀上記錄
溶劑： A：0.1% v/v甲酸水溶液
B：0.1% v/v甲酸乙腈
梯度： 時(shí)間(min.)A%B%
0 97 3
1.5 0 100
1.9 0 100
2.0 97 3。
系統(tǒng)B
柱：50mm x 2.1mm ID，1.7μm Acquity UPLC BEH C18
流速：1mL/min.
溫度：40℃
UV檢測(cè)范圍：210至350nm
質(zhì)譜：使用交替掃描正和負(fù)模式電噴霧電離在質(zhì)譜儀上記錄
溶劑： A：10mM碳酸氫銨水溶液，用氨溶液調(diào)節(jié)至pH10
B:乙腈
梯度： 時(shí)間(min.)A%B%
0 99 1
1.5 3 97
1.9 3 97
2.0 0 100。
系統(tǒng)C
柱：50mm x 2.1mm ID，1.7μm Acquity UPLC CSH C18
流速：1mL/min.
溫度：40℃
注入體積0.5μL
UV檢測(cè)范圍：210至350nm
質(zhì)譜：使用交替掃描正和負(fù)模式電噴霧電離在質(zhì)譜儀上記錄
溶劑： A：0.1% v/v甲酸水溶液
B：0.1% v/v甲酸乙腈
梯度： 時(shí)間(min.)A%B%
0 97 3
1.5 5 95
1.9 5 95
2.0 97 3。
系統(tǒng)D
柱：50mm x 2.1mm ID，1.7μm Acquity UPLC CSH C18
流速：1mL/min.
溫度：40℃
注入體積0.3μL
UV檢測(cè)范圍：210至350nm
質(zhì)譜：使用交替掃描正和負(fù)模式電噴霧電離在質(zhì)譜儀上記錄
溶劑： A：10mM碳酸氫銨水溶液，用氨溶液調(diào)節(jié)至pH10
B：乙腈
梯度： 時(shí)間(min.)A%B%
0 97 3
0.05 97 3
1.5 5 95
1.9 5 95
2.0 97 3。
系統(tǒng)E
柱：50mm x 2.1mm ID，1.7μm Acquity UPLC BEH C18
流速：1mL/min.
溫度：40℃
UV檢測(cè)范圍：210至350nm
質(zhì)譜：使用交替掃描正和負(fù)模式電噴霧電離在質(zhì)譜儀上記錄
溶劑： A：10mM碳酸氫銨水溶液，用氨溶液調(diào)節(jié)至pH10
B：乙腈
梯度： 時(shí)間(min.)A%B%
0 99 1
1.5 3 97
1.9 3 97
2.0 99 1。
質(zhì)量定向自動(dòng)化制備HPLC(MDAP)
在下面給出的條件下進(jìn)行質(zhì)量定向自動(dòng)化制備HPLC。UV檢測(cè)是來(lái)自210nm至350nm波長(zhǎng)的平均信號(hào)，并且在質(zhì)譜儀上使用交替掃描正和負(fù)模式電噴霧電離記錄質(zhì)譜。
方法A
方法A在Sunfire C18柱(通常為150mm×30mm i.d.5μm裝填直徑)上在環(huán)境溫度下進(jìn)行。使用的溶劑是：
A = 0.1% v/v甲酸水溶液
B = 0.1% v/v甲酸的乙腈溶液。
方法B
方法B在XBridge C18柱(通常為100mm×30mm i.d.5μm裝填直徑)上在環(huán)境溫度下進(jìn)行。使用的溶劑是：
A = 10mM碳酸氫銨水溶液，用氨溶液調(diào)節(jié)至pH10
B =乙腈。
方法C
方法C在Sunfire C18柱(通常為150mm×30mm i.d.5μm裝填直徑)上在環(huán)境溫度下進(jìn)行。使用的溶劑是：
A = 0.1% v/v三氟乙酸水溶液
B = 0.1% v/v三氟乙酸的乙腈溶液。
縮寫(xiě)
以下列表提供了本文所用的某些縮寫(xiě)的定義。應(yīng)當(dāng)理解，該列表不是窮盡的，但本文下面未定義的那些縮寫(xiě)的含義對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員將是容易明白的。
DCM 二氯甲烷
DMF N,N-二甲基甲酰胺
DMSO 二甲亞砜
DMTr 二甲氧基三苯甲基
THF 四氫呋喃
EtOAc 乙酸乙酯
MeOH 甲醇
EtOH 乙醇
MeCN 乙腈
HCl 鹽酸
HPLC 高效液相色譜
MDAP 質(zhì)量定向自動(dòng)化制備HPLC
SPE 固相萃取
MeOH 甲醇
TBDMS 叔丁基二甲基甲硅烷基
TBME 叔丁基甲基醚
TFA 三氟乙酸
DIPEA N,N-二異丙基乙胺。
命名
使用Chem Draw(CambridgeSoft)或Marvin Sketch(ChemAxon)中的命名工具從結(jié)構(gòu)命名化合物。
反應(yīng)中間體
中間體1：N-(9-((1R,2S,3R,4R)-2,3-二羥基-4-(羥甲基)環(huán)戊基)-9H-嘌呤-6-基)苯甲酰胺
在氮?dú)夥障聦⑷谆裙柰?17.94mL，141mmol)加入到(1R,2S,3R,5R)-3-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-(羥甲基)環(huán)戊烷-1,2-二醇(5.00g，18.85mmol)(Yang Y.等人，J. Org. Chem.，2004：69，3993-3996)的無(wú)水吡啶(80mL)懸浮液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。將反應(yīng)混合物在冰/水浴中冷卻至0℃，并經(jīng)3分鐘滴加苯甲酰氯(3.72mL，32.0mmol)。將混合物溫?zé)嶂潦覝?，并在氮?dú)夥障聰嚢?9.5小時(shí)。將反應(yīng)混合物在冰/水浴中冷卻至0℃，用水(15mL)淬滅并在0℃下攪拌5分鐘。將混合物溫?zé)嶂潦覝睾?，加?.88氨溶液(39.5mL，714mmol)，并將混合物在室溫下攪拌20分鐘。將反應(yīng)混合物真空蒸發(fā)，得到白色固體。將冷水(100mL)加入到固體中，并將??懸浮液過(guò)濾。固體用冷水(3 x 25mL)和乙醚(3 x 25mL)洗滌。將固體的小樣品在干燥槍中干燥1小時(shí)，并通過(guò)1H NMR分析。將剩余的固體在干燥槍中干燥16小時(shí)，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(5.977g)。
LCMS(系統(tǒng)E)：tRET = 0.52min；MH+ 370。
中間體2：N-(9-((1R,2S,3R,4R)-4-((雙(4-甲氧基苯基)(苯基)甲氧基)甲基)-2,3-二羥基環(huán)戊基)-9H-嘌呤-6-基)苯甲酰胺
將N-(9-((1R,2S,3R,4R)-2,3-二羥基-4-(羥甲基)環(huán)戊基)-9H-嘌呤-6-基)苯甲酰胺與無(wú)水吡啶(3×20mL)共沸三次。將4,4'-二甲氧基三苯甲基氯(1.11g，3.28mmol)的無(wú)水吡啶(6mL)溶液滴加到N-(9-((1R,2S,3R,4R)-2,3-二羥基-4-(羥甲基)環(huán)戊基)-9H-嘌呤-6-基)苯甲酰胺(1.164g，3.15mmol)的無(wú)水吡啶(19mL)懸浮液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3.5小時(shí)。
將反應(yīng)混合物真空蒸發(fā)，并將所得油狀物在乙酸乙酯(100mL)與飽和碳酸氫鈉水溶液(100mL)之間分配。分離有機(jī)層，并將水層用另外的乙酸乙酯(100mL)萃取。合并的有機(jī)萃取物用鹽水(50mL)洗滌，使用疏水玻璃料干燥，并真空蒸發(fā)，得到白色固體(2.058g)。將固體溶于最小體積的二氯甲烷中，加載至100g二氯甲烷預(yù)處理的二氧化硅柱筒上，并使用0-5%甲醇/二氯甲烷梯度，歷時(shí)60分鐘(檢測(cè)波長(zhǎng)=240nm)純化。合并適當(dāng)?shù)募?jí)分，并真空蒸發(fā)，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(1.475g)。
LCMS(系統(tǒng)E)：tRET = 1.18min；MH+ 672。
中間體3a和3b：N-(9-((1R,2S,3R,4R)-4-((雙(4-甲氧基苯基)(苯基)甲氧基)甲基)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-3-羥基環(huán)戊基)-9H-嘌呤-6-基)苯甲酰胺(3a)和N-(9-((1R,2S,3R,4R)-4-((雙(4-甲氧基苯基)(苯基)甲氧基)甲基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-羥基環(huán)戊基)-9H-嘌呤-6-基)苯甲酰胺(3b)
在室溫下將咪唑(0.436g，6.40mmol)和叔丁基二甲基氯硅烷(0.405g，2.69mmol)加入到N-(9-((1R,2S,3R,4R)-4-((雙(4-甲氧基苯基)(苯基)甲氧基)甲基)-2,3-二羥基環(huán)戊基)-9H-嘌呤-6-基)苯甲酰胺(1.433g，2.133mmol)的無(wú)水吡啶(5mL)攪拌溶液中。將反應(yīng)混合物在氮?dú)夥障聰嚢?小時(shí)。將反應(yīng)混合物在二氯甲烷(50mL)與水(50mL)之間分配。分離有機(jī)層，并將水層用二氯甲烷(50mL)萃取。合并的有機(jī)萃取物用鹽水(50mL)洗滌，使用疏水玻璃料干燥，并真空蒸發(fā)，得到無(wú)色油狀物。將該油狀物與甲苯(2×30ml)共沸，得到白色固體(1.54g)。將固體溶于DMSO(5mL)中，施加到預(yù)處理的反相Biotage 120g KP-C18-HS柱筒上，并使用1柱體積的50%乙腈水溶液洗脫，然后使用50-80%乙腈水溶液梯度洗脫20柱體積(檢測(cè)波長(zhǎng)230nm)。
合并適當(dāng)?shù)募?jí)分，并真空蒸發(fā)，得到標(biāo)題化合物3a，為白色固體(477mg)和標(biāo)題化合物3b，為白色固體(674mg)。
中間體3a
LCMS(系統(tǒng)A)：tRET = 1.47min；MH+ 786
中間體3b
LCMS(系統(tǒng)A)：tRET = 1.56min；MH+ 786。
中間體4：(1R,2S,3R,5R)-3-(6-苯甲酰胺基-9H-嘌呤-9-基)-5-((雙(4-甲氧基苯基)(苯基)甲氧基)甲基)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)環(huán)戊基 (2-氰基乙基) 二異丙基亞磷酰胺
將N-(9-((1R,2S,3R,4R)-4-((雙(4-甲氧基苯基)(苯基)甲氧基)甲基)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-3-羥基環(huán)戊基)-9H-嘌呤-6-基)苯甲酰胺(379mg，0.482mmol)在無(wú)水乙腈(2×10mL)中共沸。在室溫下將3-((雙(二異丙基氨基)膦基)氧基)丙腈(0.191ml，0.603mmol)和1H-四唑(43mg，0.614mmol)加入到共沸的N-(9-((1R,2S,3R,4R)-4-((雙(4-甲氧基苯基)(苯基)甲氧基)甲基)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-3-羥基環(huán)戊基)-9H-嘌呤-6-基)苯甲酰胺(378mg，0.482mmol)的無(wú)水二氯甲烷(5.5mL)攪拌溶液中。將反應(yīng)混合物在氮?dú)夥障聰嚢?0小時(shí)。
加入3-((雙(二異丙基氨基)膦基)氧基)丙腈(0.031mL，0.096mmol)和1H-四唑(7mg，0.100mmol)，并將反應(yīng)混合物在氮?dú)庀略贁嚢?小時(shí)。反應(yīng)混合物用二氯甲烷(50mL)稀釋，并用飽和碳酸氫鈉水溶液(50mL)洗滌。分離有機(jī)層，并將水層用另外的二氯甲烷(50mL)萃取。使用疏水玻璃料干燥合并的有機(jī)萃取物，并真空蒸發(fā)，得到無(wú)色玻璃狀物(577mg)。使用1%三乙胺的二氯甲烷(140mL)溶液、二氯甲烷(140mL)、乙酸乙酯(140mL)和環(huán)己烷(140mL)預(yù)處理20g二氧化硅柱筒。將無(wú)色玻璃狀物裝載至最小體積的二氯甲烷中，并使用0-100%乙酸乙酯的環(huán)己烷梯度洗脫60分鐘(檢測(cè)波長(zhǎng)=254nm)。合并適當(dāng)?shù)募?jí)分，并真空蒸發(fā)，得到標(biāo)題化合物，為白色泡沫(292mg)。
LCMS(系統(tǒng)E)：tRET = 1.70min；MH+ 986。
中間體5：(1R,2S,3R,5R)-3-(6-苯甲酰胺基-9H-嘌呤-9-基)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(羥甲基)環(huán)戊基氫膦酸酯
在室溫下向(1R,2S,3R,5R)-3-(6-苯甲酰胺基-9H-嘌呤-9-基)-5-((雙(4-甲氧基苯基)(苯基)甲氧基)甲基)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)環(huán)戊基 (2-氰基乙基) 二異丙基亞磷酰胺(285mg，0.289mmol)的乙腈(1.5mL)和水(0.011mL，0.611mmol)溶液中加入三氟乙酸吡啶鎓(67mg，0.347mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1分鐘。加入叔丁胺(1.442mL，13.73mmol)，并將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌10分鐘。將反應(yīng)混合物真空蒸發(fā)(35℃水浴)，得到白色泡沫，將其溶于乙腈(3mL)中，并真空蒸發(fā)，得到白色泡沫。將泡沫再次溶于乙腈(3mL)中，并真空蒸發(fā)，得到白色泡沫。將泡沫溶于二氯甲烷(6.85mL)和水(0.052mL，2.89mmol)中。加入二氯乙酸(0.21mL，2.54mmol)，并將紅色溶液在室溫下攪拌10分鐘。通過(guò)LCMS分析反應(yīng)混合物證實(shí)存在標(biāo)題化合物。
LCMS(系統(tǒng)E)：tRET = 0.73min；MH+ 548。
反應(yīng)混合物用吡啶(0.411mL，5.09mmol)淬滅并真空濃縮至約2mL體積(35-40℃水浴)。將所得白色懸浮液與無(wú)水乙腈(3×3mL)(35-40℃水浴)共沸，在第一和第二共沸物上濃縮至約2mL體積，并在最終共沸物上濃縮至約1mL體積。用suba封條塞住燒瓶，用氮?dú)獬榭?沖洗，并將白色懸浮液立即用于下一反應(yīng)序列。
中間體6：N-(9-((1R,2S,3R,4R)-2,3-二羥基-4-(羥甲基)環(huán)戊基)-6-氧代-6,9-二氫-1H-嘌呤-2-基)異丁酰胺
在氮?dú)夥障陆?jīng)2小時(shí)將三甲基氯硅烷(2.71mL，21.33mmol)分批(5批)加入到2-氨基-9-((1R,2S,3R,4R)-2,3-二羥基-4-(羥甲基)環(huán)戊基)-1H-嘌呤-6(9H)-酮(1.00g，3.56mmol)(Exall A.M.等人，Journal of the Chemical Society，Perkin Transactions 1：Organic and Bio-Organic Chemistry，1991：2467-77)的無(wú)水吡啶(25mL)懸浮液中。將反應(yīng)在室溫下再攪拌1.5小時(shí)。將反應(yīng)在冰/水浴中冷卻至0℃，并經(jīng)3分鐘滴加異丁酰氯(1.117mL，10.67mmol)。將混合物溫?zé)嶂潦覝?，并攪?小時(shí)。將反應(yīng)混合物在冰/水浴中冷卻至0℃，并用水(15mL)淬滅。在0℃下攪拌5分鐘后，將反應(yīng)溫?zé)嶂潦覝?。將?0.880，7.40mL，134mmol)加入到混合物中，并攪拌60分鐘。真空蒸發(fā)反應(yīng)混合物，得到棕色固體。將棕色固體在水(100mL)與二氯甲烷(100mL)之間分配。有機(jī)層用水(50mL)反萃取。合并水層，并真空蒸發(fā)，得到棕色固體。棕色固體用甲醇(3×50mL)研磨，并將液體部分傾析，然后真空蒸發(fā)，得到深棕色固體(3.919g)。將深棕色固體溶于DMSO(16mL)中，并通過(guò)色譜使用400g反相C-18二氧化硅柱筒，用1個(gè)柱體積的5%乙腈(+0.1% 0.88氨溶液)/10mM碳酸氫銨水溶液(用氨調(diào)節(jié)至pH 10)洗脫，隨后用5-30%乙腈(+0.1% 0.88氨溶液)/10mM碳酸氫銨水溶液(用氨調(diào)節(jié)至pH 10)梯度洗脫20個(gè)柱體積純化。合并適當(dāng)?shù)募?jí)分，并真空蒸發(fā)，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(1.022g)。
LCMS(系統(tǒng)E)：tRET = 0.46min；MH+ 352。
中間體7：N-(9-((1R,2S,3R,4R)-4-((雙(4-甲氧基苯基)(苯基)甲氧基)甲基)-2,3-二羥基環(huán)戊基)-6-氧代-6,9-二氫-1H-嘌呤-2-基)異丁酰胺
將N-(9-((1R,2S,3R,4R)-2,3-二羥基-4-(羥甲基)環(huán)戊基)-6-氧代-6,9-二氫-1H-嘌呤-2-基)異丁酰胺(1.025g，2.92mmol)與無(wú)水吡啶(2×20mL)共沸兩次。在室溫下經(jīng)5分鐘將4,4'-二甲氧基三苯甲基氯(1.028g，3.03mmol)的無(wú)水吡啶(5.5mL)溶液滴加到共沸的N-(9-((1R,2S,3R,4R)-2,3-二羥基-4-(羥甲基)環(huán)戊基)-6-氧代-6,9-二氫-1H-嘌呤-2-基)異丁酰胺(1.025g，2.92mmol)的無(wú)水吡啶(17mL)溶液中。將反應(yīng)在室溫下攪拌90分鐘。將另外部分的4,4'-二甲氧基三苯甲基氯(0.356g，1.051mmol)的無(wú)水吡啶(2mL)溶液加入到反應(yīng)混合物中，并繼續(xù)攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)混合物真空蒸發(fā)，并將所得油狀物在乙酸乙酯(100mL)與飽和碳酸氫鈉水溶液(100mL)之間分配。分離有機(jī)層，并用鹽水(30mL)洗滌，使用疏水玻璃料干燥，并真空蒸發(fā)，得到黃色固體(2.4g)。將固體物質(zhì)溶于最小體積的二氯甲烷中，裝載至100g二氯甲烷預(yù)處理的二氧化硅柱筒上，并通過(guò)色譜使用0-8%甲醇的二氯甲烷梯度經(jīng)25柱體積(檢測(cè)波長(zhǎng)=240nm)純化。合并適當(dāng)?shù)募?jí)分，并真空蒸發(fā)，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(1.3g)。
LCMS(系統(tǒng)E)：tRET = 1.13min；MH+ 654。
中間體8a和8b：N-(9-((1R,2S,3R,4R)-4-((雙(4-甲氧基苯基)(苯基)甲氧基)甲基)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-3-羥基環(huán)戊基)-6-氧代-6,9-二氫-1H-嘌呤-2-基)異丁酰胺(8a)和N-(9-((1R,2S,3R,4R)-4-((雙(4-甲氧基苯基)(苯基)甲氧基)甲基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-羥基環(huán)戊基)-6-氧代-6,9-二氫-1H-嘌呤-2-基)異丁酰胺(8b)
在室溫下將咪唑(2.298g，33.8mmol)和叔丁基二甲基氯硅烷(2.204g，14.63mmol)加入到N-(9-((1R,2S,3R,4R)-4-((雙(4-甲氧基苯基)(苯基)甲氧基)甲基)-2,3-二羥基環(huán)戊基)-6-氧代-6,9-二氫-1H-嘌呤-2-基)異丁酰胺(7.355g，11.25mmol)的無(wú)水吡啶(29mL)攪拌溶液中。將反應(yīng)混合物在氮?dú)夥障聰嚢?小時(shí)。將溶液在水(100mL)與二氯甲烷(100mL)之間分配。分離有機(jī)層，并將水層用二氯甲烷(100mL)反萃取。使用MgSO4和疏水玻璃料干燥合并的有機(jī)萃取物，然后真空蒸發(fā)，得到灰白色泡沫(8.903g)。將一部分泡沫(3.308g)溶于DMSO(12mL)中，施加到預(yù)處理的反相Biotage 400g KP-C18-HS柱筒上，并使用1柱體積的55%乙腈水溶液洗脫，然后使用55-75%乙腈的水溶液梯度洗脫20柱體積(檢測(cè)波長(zhǎng)237nm)。將適當(dāng)?shù)募?jí)分合并成兩批，并真空蒸發(fā)，得到標(biāo)題化合物8a，為白色固體(1.223g)和標(biāo)題化合物8b，為白色固體(1.268g)。
中間體8a
LCMS(系統(tǒng)C)：tRET = 1.51min；MH+ 768
中間體8b
LCMS(系統(tǒng)C)：tRET = 1.59min；MH+ 768。
將混合的級(jí)分真空蒸發(fā)，并與剩余的初始白色泡沫(5.595g)合并。將物質(zhì)溶于DMSO(15mL)中，施加到預(yù)處理的反相Biotage 400g KP-C18-HS柱筒上，并使用1柱體積的55%乙腈水溶液洗脫，然后使用55-75%乙腈水溶液梯度洗脫20個(gè)柱體積(檢測(cè)波長(zhǎng)237nm)。將適當(dāng)?shù)募?jí)分合并成兩批，并真空蒸發(fā)，得到額外批次的標(biāo)題化合物8a，為白色固體(1.837g)和額外批次的標(biāo)題化合物8b，為白色固體(1.844g)
中間體9：(1S,2R,3R,5R)-3-((雙(4-甲氧基苯基)(苯基)甲氧基)甲基)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(2-異丁酰胺基-6-氧代-1H-嘌呤-9(6H)-基)環(huán)戊基 (2-氰基乙基) 二異丙基亞磷酰胺
將N-(9-((1R,2S,3R,4R)-4-((雙(4-甲氧基苯基)(苯基)甲氧基)甲基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-羥基環(huán)戊基)-6-氧代-6,9-二氫-1H-嘌呤-2-基)異丁酰胺(455mg，0.592mmol)在無(wú)水乙腈(2×10mL)中共沸。在室溫下將3-((雙(二異丙基氨基)膦基)氧基)丙腈(0.226mL，0.711mmol)和1H-四唑(50mg，0.714mmol)加入到共沸的N-(9-((1R,2S,3R,4R)-4-((雙(4-甲氧基苯基)(苯基)甲氧基)甲基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-羥基環(huán)戊基)-6-氧代-6,9-二氫-1H-嘌呤-2-基)異丁酰胺(455mg，0.592mmol)的無(wú)水二氯甲烷(7mL)攪拌溶液中。將反應(yīng)混合物在氮?dú)夥障聰嚢?0小時(shí)。反應(yīng)混合物用二氯甲烷(50mL)稀釋，并用飽和碳酸氫鈉水溶液(50mL)洗滌。分離有機(jī)層，水層用另外的二氯甲烷(50mL)萃取。使用疏水玻璃料干燥合并的有機(jī)萃取物，并真空蒸發(fā)，得到白色泡沫(640mg)。使用在1%三乙胺的二氯甲烷(140mL)溶液、二氯甲烷(140mL)、乙酸乙酯(140mL)和環(huán)己烷(140mL)預(yù)處理20g二氧化硅柱筒。將粗物質(zhì)溶于最小體積的二氯甲烷中，然后裝載至柱上，并使用0-100%乙酸乙酯/環(huán)己烷梯度洗脫40分鐘(檢測(cè)波長(zhǎng)=254nm)。合并適當(dāng)?shù)募?jí)分，并真空蒸發(fā)，得到標(biāo)題化合物，為白色泡沫(460mg)。
LCMS(系統(tǒng)E)：tRET = 1.69，1.73min；MH+ 968。
中間體10：(1R,2S,3R,5R)-3-(6-苯甲酰胺基-9H-嘌呤-9-基)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-((((((1S,2R,3R,5R)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-3-(羥甲基)-5-(2-異丁酰胺基-6-氧代-1H-嘌呤-9(6H)-基)環(huán)戊基)氧基)(2-氰基乙氧基)磷?；?氧基)甲基)環(huán)戊基氫膦酸酯
將(1S,2R,3R,5R)-3-((雙(4-甲氧基苯基)(苯基)甲氧基)甲基)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(2-異丁酰胺基-6-氧代-1H-嘌呤-9(6H)-基)環(huán)戊基 (2-氰基乙基) 二異丙基亞磷酰胺(363mg，0.375mmol)溶于無(wú)水乙腈(2.5mL)中，加入三個(gè)3?分子篩，并將溶液在氮?dú)夥障聝?chǔ)存約45分鐘(注意-在放置時(shí)形成沉淀，需要輕微加熱以再次形成溶液)。在氮?dú)夥障略谑覝叵陆?jīng)30秒向粗(1R,2S,3R,5R)-3-(6-苯甲酰胺基-9H-嘌呤-9-基)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(羥甲基)環(huán)戊基氫膦酸酯(物質(zhì)的理論質(zhì)量：158mg，0.289mmol)的無(wú)水乙腈(1mL)懸浮液中滴加(1S,2R,3R,5R)-3-((雙(4-甲氧基苯基)(苯基)甲氧基)甲基)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(2-異丁酰胺基-6-氧代-1H-嘌呤-9(6H)-基)環(huán)戊基 (2-氰基乙基) 二異丙基亞磷酰胺(363mg，0.375mmol)的無(wú)水乙腈(2.5mL)溶液。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌50分鐘。加入無(wú)水叔丁基過(guò)氧化氫溶液(~5.5M，在癸烷中)(0.157mL，0.866mmol)，并將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌30分鐘。加入另一份無(wú)水叔丁基過(guò)氧化氫溶液(~5.5M，在癸烷中)(0.157mL，0.866mmol)，并將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)混合物在冰/水浴中冷卻，并用33%亞硫酸氫鈉水溶液(0.288mL)淬滅。將混合物真空蒸發(fā)，并將殘余油狀物在帶塞的燒瓶中儲(chǔ)存在冰箱中20小時(shí)。然后將該物質(zhì)溶于二氯甲烷(9.2mL)和水(0.052mL，2.89mmol)中。加入二氯乙酸(0.276mL，3.35mmol)，并將淺橙色溶液在室溫下攪拌15分鐘。
反應(yīng)混合物用無(wú)水吡啶(3mL)淬滅，并真空濃縮(35-40℃水浴)至約3mL體積。加入另外的無(wú)水吡啶(7.5mL)，并將反應(yīng)混合物再次真空濃縮(35-40℃水浴)至約3mL體積，將其在帶塞的燒瓶中儲(chǔ)存在冰箱中16小時(shí)。將含有標(biāo)題化合物的粗混合物用于下一反應(yīng)序列。
LCMS(系統(tǒng)B)：tRET = 0.96-0.98min；MH+ 1128。
中間體11：N-{9-[(1S,6R,8R,9S,10R,15R,17R,18R)-9,18-雙[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]-3-(2-氰基乙氧基)-12-羥基-17-[2-(2-甲基丙酰胺基)-6-氧代-6,9-二氫-1H-嘌呤-9-基]-3,12-二氧代-2,4,11,13-四氧雜-3λ5,12λ5-二磷雜三環(huán)[13.2.1.06,10]十八烷-8-基]-9H-嘌呤-6-基}苯甲酰胺
向粗(1R,2S,3R,5R)-3-(6-苯甲酰胺基-9H-嘌呤-9-基)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-((((((1S,2R,3R,5R)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-3-(羥甲基)-5-(2-異丁酰胺基-6-氧代-1H-嘌呤-9(6H)-基)環(huán)戊基)氧基)(2-氰基乙氧基)磷酰基)氧基)甲基)環(huán)戊基氫膦酸酯(粗混合物中所需物質(zhì)的理論質(zhì)量：326mg，0.289mmol)的無(wú)水吡啶(3mL總體積的吡啶和粗物質(zhì))中加入另外的無(wú)水吡啶(6mL)。加入2-氯-5,5-二甲基-1,3,2-二氧雜磷雜環(huán)己烷2-氧化物(187mg，1.011mmol)，并將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌15分鐘。將另一份2-氯-5,5-二甲基-1,3,2-二氧雜磷雜環(huán)己烷2-氧化物(100mg，0.542mmol)加入到反應(yīng)混合物中，并繼續(xù)攪拌40分鐘。用水(0.28mL，15.54mmol)淬滅反應(yīng)，并立即加入碘(95mg，0.376mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌15分鐘，然后倒至0.14%亞硫酸氫鈉水溶液(41mL)上。5分鐘后，分批加入固體碳酸氫鈉(1.17g)(注意：氣體放出)，混合物用乙酸乙酯/乙醚(1:1)萃取。分離有機(jī)層，水層用乙酸乙酯/乙醚(1:1)反萃取。使合并的有機(jī)層通過(guò)疏水玻璃料，并真空蒸發(fā)，得到深黃色油狀物(1.206g)。將粗物質(zhì)溶于最小體積的二氯甲烷中，施加到二氯甲烷預(yù)處理的100g二氧化硅柱筒上，并使用0-25%甲醇/二氯甲烷梯度洗脫22個(gè)柱體積(檢測(cè)波長(zhǎng)260nm)。合并適當(dāng)?shù)募?jí)分，并真空蒸發(fā)，得到標(biāo)題化合物，為淺黃色固體(143mg)。
LCMS(系統(tǒng)B)：tRET = 1.00-1.07 min；MH+ 1127。
中間體12：N-{9-[(1S,6R,8R,9S,10R,15R,17R,18R)-17-(2-氨基-6-氧代-6,9-二氫-1H-嘌呤-9-基)-9,18-雙[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]-3,12-二羥基-3,12-二氧代-2,4,11,13-四氧雜-3λ5,12λ5-二磷雜三環(huán)[13.2.1.06,10]十八烷-8-基]-9H-嘌呤-6-基}苯甲酰胺
將甲胺(33wt.%，在無(wú)水乙醇中)(3.35mL，26.9mmol)加入到N-{9-[(1S,6R,8R,9S,10R,15R,17R,18R)-9,18-雙[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]-3-(2-氰基乙氧基)-12-羥基-17-[2-(2-甲基丙酰氨基)-6-氧代-6,9-二氫-1H-嘌呤-9-基]-3,12-二氧代-2,4,11,13-四氧雜-3λ5,12λ5-二磷雜三環(huán)[13.2.1.06,10]十八烷-8-基]-9H-嘌呤-6-基}苯甲酰胺(143mg，0.127mmol)中。將溶液在室溫下攪拌2小時(shí)。再加入3.35mL(26.9mmol)的甲胺(33wt.%，在無(wú)水乙醇中)，并將溶液在室溫下再攪拌19小時(shí)。在室溫下在甲胺(33wt.%，在無(wú)水乙醇中)中脫保護(hù)不再進(jìn)行，將反應(yīng)混合物真空蒸發(fā)，并向剩余的殘余物中加入氨溶液(0.88)(11mL)和甲醇(4mL)。將懸浮液在密封容器中在50℃下攪拌22小時(shí)，然后在密封容器(微波小瓶)中在55℃下攪拌4小時(shí)。將反應(yīng)混合物真空蒸發(fā)，并將剩余的殘余物懸浮于氨溶液(0.88)(6mL)和甲醇(2mL)中。將懸浮液在密封容器中在55℃下攪拌18小時(shí)，然后真空蒸發(fā)反應(yīng)混合物，得到淺黃色固體。
將固體溶于最小體積的DMSO中，施加到預(yù)處理的反相Biotage 120g KP-C18-HS柱筒上，并使用15-40%乙腈(+0.1% 0.88氨溶液)/10mM碳酸氫銨水溶液(用氨溶液調(diào)節(jié)至pH 10)梯度洗脫18個(gè)柱體積(檢測(cè)波長(zhǎng)254nm)。合并適當(dāng)?shù)募?jí)分，并真空蒸發(fā)，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(29mg)。
LCMS(系統(tǒng)B)：tRET = 0.71min；MH+ 899。
中間體13：(1R,2S,3R,5R)-3-(6-苯甲酰胺基-9H-嘌呤-9-基)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-((((((2R,3R,4R,5R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(羥甲基)-2-(2-異丁酰胺基-6-氧代-1H-嘌呤-9(6H)-基)四氫呋喃-3-基)氧基)(2-氰基乙氧基)磷酰基)氧基)甲基)環(huán)戊基氫膦酸酯
從(2R,3R,4R,5R)-5-((雙(4-甲氧基苯基)(苯基)甲氧基)甲基)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(2-異丁酰胺基-6-氧代-1H-嘌呤-9(6H)-基)四氫呋喃-3-基 (2-氰基乙基) 二異丙基亞磷酰胺(950mg，0.979mmol)和粗(1R,2S,3R,5R)-3-(6-苯甲酰胺基-9H-嘌呤-9-基)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(羥甲基)環(huán)戊基氫膦酸酯(413mg，0.755mmol)以類似于中間體10進(jìn)行制備。得到粗標(biāo)題化合物的無(wú)水吡啶(8mL)溶液，其直接用于下一反應(yīng)。
LCMS(系統(tǒng)D)：tRET = 1.01min；MH+ 1131。
中間體14：N-{9-[(1R,6R,8R,9S,10R,15R,17R,18R)-9,18-雙[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]-3-(2-氰基乙氧基)-12-羥基-17-[2-(2-甲基丙酰胺基)-6-氧代-6,9-二氫-1H-嘌呤-9-基]-3,12-二氧代-2,4,11,13,16-五氧雜-3λ5,12λ5-二磷雜三環(huán)[13.2.1.06,10]十八烷-8-基]-9H-嘌呤-6-基}苯甲酰胺
向粗(1R,2S,3R,5R)-3-(6-苯甲酰胺基-9H-嘌呤-9-基)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-((((((2R,3R,4R,5R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(羥甲基)-2-(2-異丁酰胺基-6-氧代-1H-嘌呤-9(6H)-基)四氫呋喃-3-基)氧基)(2-氰基乙氧基)磷?；?氧基)甲基)環(huán)戊基氫膦酸酯(粗混合物中所需物質(zhì)的理論質(zhì)量：853mg，0.755mmol)的無(wú)水吡啶(8mL)溶液中加入另外的無(wú)水吡啶(15mL)。加入2-氯-5,5-二甲基-1,3,2-二氧雜磷雜環(huán)己烷2-氧化物(488mg，2.64mmol)，并將反應(yīng)混合物在氮?dú)庀略谑覝叵聰嚢?5分鐘。加入更多的2-氯-5,5-二甲基-1,3,2-二氧雜磷雜環(huán)己烷2-氧化物(488mg，2.64mmol)，并將反應(yīng)混合物在氮?dú)庀略谑覝叵略贁嚢?5分鐘。然后加入更多的2-氯-5,5-二甲基-1,3,2-二氧雜磷雜環(huán)己烷2-氧化物(139mg，0.755mmol)，并將反應(yīng)混合物在氮?dú)庀略谑覝叵略贁嚢?5分鐘，當(dāng)反應(yīng)用水(1.086mL，60.35mmol，相對(duì)于DMOCP為10當(dāng)量)淬滅時(shí)，立即加入碘(249mg，0.982mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌5分鐘，然后倒至0.14%亞硫酸氫鈉水溶液(110mL)上。5min后，分批加入固體碳酸氫鈉(3.058g)，混合物用乙酸乙酯:乙醚(1:1)(125mL)萃取。分離有機(jī)層，水層用乙酸乙酯:乙醚(1:1)(125mL)反萃取。使合并的有機(jī)層通過(guò)疏水玻璃料，并真空蒸發(fā)，得到橙色油狀物(2.26g)。將該粗產(chǎn)物的一部分(1.06g)溶于最小體積的二氯甲烷中，施加到二氯甲烷預(yù)處理的100g二氧化硅柱筒上，并使用0-25%甲醇/二氯甲烷梯度洗脫20個(gè)柱體積(檢測(cè)波長(zhǎng)280nm)。合并適當(dāng)?shù)募?jí)分，并真空蒸發(fā)，得到白色固體(200mg)。將剩余的粗產(chǎn)物(1.20g)溶于最小體積的二氯甲烷中，并以相同方式純化，得到白色固體(270mg)。將兩批白色固體合并，得到粗標(biāo)題化合物(470mg)。
LCMS(系統(tǒng)D)：tRET = 1.06-1.08min；MH+ 1129。
該物質(zhì)直接用于下一反應(yīng)
中間體15：(1R,6R,8R,9S,10R,15R,17R,18R)-17-(2-氨基-6-氧代-6,9-二氫-1H-嘌呤-9-基)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-9,18-雙[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]-3,12-二羥基-2,4,11,13,16-五氧雜-3λ5,12λ5-二磷雜三環(huán) [13.2.1.06,10]十八烷-3,12-二酮
向粗N-{9-[(1R,6R,8R,9S,10R,15R,17R,18R)-9,18-雙[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]-3-(2-氰基乙氧基)-12-羥基-17-[2-(2-甲基丙酰胺基)-6-氧代-6,9-二氫-1H-嘌呤-9-基]-3,12-二氧代-2,4,11,13,16-五氧雜-3λ5,12λ5-二磷雜三環(huán)[13.2.1.06,10]十八烷-8-基]-9H-嘌呤-6-基}苯甲酰胺(470mg，0.417mmol)的甲醇(8mL)溶液中加入0.88氨溶液(8mL)。將懸浮液在密封的微波小瓶中在55℃下攪拌64小時(shí)。將冷卻的反應(yīng)混合物真空蒸發(fā)(將甲醇加入到反應(yīng)混合物中以減少蒸發(fā)期間的起泡)，得到淺黃色固體(478mg)，將其溶于最小體積的DMSO中，施加到預(yù)處理的反相Biotage 120 KP-C18-HS柱筒，并使用15-40%乙腈(+0.1% 0.88氨溶液)/10mM碳酸氫銨水溶液(用氨溶液調(diào)節(jié)至pH 10)梯度洗脫18個(gè)柱體積(檢測(cè)波長(zhǎng)254nm)。合并適當(dāng)?shù)募?jí)分，并真空蒸發(fā)，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(163mg)。
LCMS(系統(tǒng)D)：tRET = 0.73min；MH+ 901。
中間體16：(2R,3R,4R,5R)-5-(6-苯甲酰胺基-9H-嘌呤-9-基)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(羥甲基)四氫呋喃-3-基氫膦酸酯
從(2R,3R,4R,5R)-5-(6-苯甲酰胺基-9H-嘌呤-9-基)-2-((雙(4-甲氧基苯基)(苯基)甲氧基)甲基)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氫呋喃-3-基 (2-氰基乙基) 二異丙基亞磷酰胺(628mg，0.636mmol)以類似于中間體5進(jìn)行制備，得到標(biāo)題化合物的無(wú)水乙腈懸浮液(約2mL)
LCMS(系統(tǒng)E)：tRET = 0.74min；MH+ 550。
中間體17：(2R,3R,4R,5R)-5-(6-苯甲酰胺基-9H-嘌呤-9-基)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-((((((1S,2R,3R,5R)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-3-(羥甲基)-5-(2-異丁酰胺基-6-氧代-1H-嘌呤-9(6H)-基)環(huán)戊基)氧基)(2-氰基乙氧基)磷?；?氧基)甲基)四氫呋喃-3-基氫膦酸酯
從(1S,2R,3R,5R)-3-((雙(4-甲氧基苯基)(苯基)甲氧基)甲基)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(2-異丁酰胺基-6-氧代-1H-嘌呤-9(6H)-基)環(huán)戊基 (2-氰基乙基) 二異丙基亞磷酰胺(801mg，0.827mmol)和粗(2R,3R,4R,5R)-5-(6-苯甲酰胺基-9H-嘌呤-9-基)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(羥甲基)四氫呋喃-3-基氫膦酸酯(物質(zhì)的理論質(zhì)量：350mg，0.636mmol)以類似于中間體10進(jìn)行制備。得到粗標(biāo)題化合物的無(wú)水吡啶溶液(6mL)，其直接用于下一反應(yīng)。
LCMS(系統(tǒng)B)：tRET = 1.00min；MH+ 1130。
中間體18：N-{9-[(1S,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-9,18-雙[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]-3-(2-氰基乙氧基)-12-羥基-17-[2-(2-甲基丙酰胺基)-6-氧代-6,9-二氫-1H-嘌呤-9-基]-3,12-二氧代-2,4,7,11,13-五氧雜-3λ5,12λ5-二磷雜三環(huán)[13.2.1.06,10]十八烷-8-基]-9H-嘌呤-6-基}苯甲酰胺
通過(guò)用2-氯-5,5-二甲基-1,3,2-二氧雜磷雜環(huán)己烷2-氧化物(2 x 411mg，2.226mmol和1 x 116mg，0.635mmole)處理粗(2R,3R,4R,5R)-5-(6-苯甲酰胺基-9H-嘌呤-9-基)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-((((((1S,2R,3R,5R)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-3-(羥甲基)-5-(2-異丁酰胺基-6-氧代-1H-嘌呤-9(6H)-基)環(huán)戊基)氧基)(2-氰基乙氧基)磷?；?氧基)甲基)四氫呋喃-3-基氫膦酸酯(粗混合物中所需物質(zhì)的理論質(zhì)量：0.719g，0.636mmol)，并用水(0.915mL)和碘(210mg，0.827mmol)淬滅，以類似于中間體14進(jìn)行制備，并在后處理和色譜純化后得到粗制標(biāo)題化合物，為淺黃色固體(290mg)。
LCMS(系統(tǒng)B)：tRET = 1.06，1.08min；MH+ 1128。
該物質(zhì)直接用于下一反應(yīng)
中間體19：(1S,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-17-(2-氨基-6-氧代-6,9-二氫-1H-嘌呤-9-基)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-9,18-雙[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]-3,12-二羥基-2,4,7,11,13-五氧雜-3λ5,12λ5-二磷雜三環(huán)[13.2.1.06,10]十八烷-3,12-二酮
向粗N-{9-[(1S,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-9,18-雙[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]-3-(2-氰基乙氧基)-12-羥基-17-[2-(2-甲基丙酰胺基)-6-氧代-6,9-二氫-1H-嘌呤-9-基]-3,12-二氧代-2,4,7,11,13-五氧雜-3λ5,12λ5-二磷雜三環(huán)[13.2.1.06,10]十八烷-8-基]-9H-嘌呤-6-基}苯甲酰胺(290mg，0.257mmol)的甲醇(7mL)溶液中加入0.88氨溶液(7mL)。將懸浮液在密封的微波小瓶中在55℃下攪拌94小時(shí)，然后冷卻并真空蒸發(fā)(將甲醇加入到反應(yīng)混合物中以減少蒸發(fā)期間的起泡)，得到淺黃色固體。將該固體溶于甲醇(9mL)中，并加入0.88氨溶液(9mL)。將所得懸浮液在密封的微波小瓶中在55℃下攪拌22小時(shí)，然后冷卻并真空蒸發(fā)(將甲醇加入到反應(yīng)混合物中以減少蒸發(fā)期間的起泡)，得到淺黃色固體(260mg)。將該物質(zhì)溶于最小體積的DMSO中，施加到預(yù)處理的反相Biotage 120g KP-C18-HS柱筒上，并使用15-40%乙腈(+0.1% 0.88氨溶液)/10mM碳酸氫銨水溶液(用氨溶液調(diào)節(jié)至pH 10)梯度洗脫17個(gè)柱體積(檢測(cè)波長(zhǎng)254nm)。合并適當(dāng)?shù)募?jí)分，并真空蒸發(fā)(將乙腈加入到級(jí)分中以減少蒸發(fā)期間的起泡)，得到粗標(biāo)題化合物，為白色固體(71mg)。
LCMS(系統(tǒng)B)：tRET = 0.77min；MH+ 901。
中間體20：(2R,3R,4R,5R)-5-(6-苯甲酰胺基-9H-嘌呤-9-基)-4-氟-2-(羥甲基)四氫呋喃-3-基氫膦酸酯
從(2R,3R,4R,5R)-5-(6-苯甲酰胺基-9H-嘌呤-9-基)-2-((雙(4-甲氧基苯基)(苯基)甲氧基)甲基)-4-氟四氫呋喃-3-基 (2-氰基乙基) 二異丙基亞磷酰胺(453mg，0.517mmol)以類似中間體5進(jìn)行制備，得到粗標(biāo)題化合物的無(wú)水乙腈懸浮液(約2mL)
LCMS(系統(tǒng)E)：tRET = 0.50min；MH+ 438。
中間體21：(2R,3R,4R,5R)-5-(6-苯甲酰胺基-9H-嘌呤-9-基)-2-((((((1S,2R,3R,5R)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-3-(羥甲基)-5-(2-異丁酰胺基-6-氧代-1H-嘌呤-9(6H)-基)環(huán)戊基)氧基)(2-氰基乙氧基)磷酰基)氧基)甲基)-4-氟四氫呋喃-3-基氫膦酸酯
從(1S,2R,3R,5R)-3-((雙(4-甲氧基苯基)(苯基)甲氧基)甲基)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(2-異丁酰胺基-6-氧代-1H-嘌呤-9(6H)-基)環(huán)戊基 (2-氰基乙基) 二異丙基亞磷酰胺(651mg，0.672mmol)和粗((2R,3R,4R,5R)-5-(6-苯甲酰胺基-9H-嘌呤-9-基)-4-氟-2-(羥甲基)四氫呋喃-3-基氫膦酸酯(物質(zhì)的理論質(zhì)量：226mg，0.517mmol)以類似于中間體10進(jìn)行制備。得到粗標(biāo)題化合物的無(wú)水吡啶溶液(5mL)，其直接用于下一反應(yīng)。
LCMS(系統(tǒng)B)：tRET = 0.89min；MH+ 1018。
中間體22：N-{9-[(1S,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-18-[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]-3-(2-氰基乙氧基)-9-氟-12-羥基-17-[2-(2-甲基丙酰胺基)-6-氧代-6,9-二氫-1H-嘌呤-9-基]-3,12-二氧代-2,4,7,11,13-五氧雜-3λ5,12λ5-二磷雜三環(huán)[13.2.1.06,10]十八烷-8-基]-9H-嘌呤-6-基}苯甲酰胺
通過(guò)用2-氯-5,5-二甲基-1,3,2-二氧雜磷雜環(huán)己烷2-氧化物(2 x 334mg，1.810mmol，1 x 95mg，0.517mmol)處理粗(2R,3R,4R,5R)-5-(6-苯甲酰胺基-9H-嘌呤-9-基)-2-((((((1S,2R,3R,5R)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-3-(羥甲基)-5-(2-異丁酰胺基-6-氧代-1H-嘌呤-9(6H)-基)環(huán)戊基)氧基)(2-氰基乙氧基)磷?；?氧基)甲基)-4-氟四氫呋喃-3-基氫膦酸酯(粗混合物中所需物質(zhì)的理論質(zhì)量：0.526g，0.517mmol)，并用水(0.744mL)和碘(171mg)淬滅，以類似于中間體14進(jìn)行制備，在后處理和色譜純化后得到粗標(biāo)題化合物，為淺黃色固體(175mg)。
LCMS(系統(tǒng)B)：tRET = 0.84min；MH+ 1016。
該物質(zhì)直接用于下一反應(yīng)
中間體23：(1S,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-17-(2-氨基-6-氧代-6,9-二氫-1H-嘌呤-9-基)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-18-[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]-9-氟-3,12-二羥基-2,4,7,11,13-五氧雜-3λ5,12λ5-二磷雜三環(huán)[13.2.1.06,10]十八烷-3,12-二酮
向粗N-{9-[(1S,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-18-[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]-3-(2-氰基乙氧基)-9-氟-12-羥基-17-[2-(2-甲基丙酰胺基)-6-氧代-6,9-二氫-1H-嘌呤-9-基]-3,12-二氧代-2,4,7,11,13-五氧雜-3λ5,12λ5-二磷雜三環(huán)[13.2.1.06,10]十八烷-8-基]-9H-嘌呤-6-基}苯甲酰胺(175mg，0.172mmol)的甲醇(6mL)溶液中加入0.88氨溶液(5mL)。將懸浮液在密封的微波小瓶中在50℃下攪拌23小時(shí)。加入0.88氨溶液(2mL)，并將反應(yīng)混合物在50℃下再攪拌24小時(shí)，然后冷卻并真空蒸發(fā)(將甲醇加入到反應(yīng)混合物以減少蒸發(fā)期間的起泡)，得到淺黃色固體(185mg)。將該物質(zhì)溶于甲醇(10mL)中，加入0.88氨溶液(7mL)，并將懸浮液在密封的微波小瓶中在50℃下攪拌20小時(shí)。將冷卻的反應(yīng)混合物真空蒸發(fā)(將甲醇加入到反應(yīng)混合物中以減少蒸發(fā)期間的起泡)，得到淺黃色固體(185mg)。將該物質(zhì)再次溶于甲醇(10mL)中，加入0.88氨溶液(7mL)，并將懸浮液在密封的微波小瓶中在50℃下攪拌24小時(shí)。將冷卻的反應(yīng)混合物真空蒸發(fā)(將甲醇加入到反應(yīng)混合物中以減少蒸發(fā)期間的起泡)，得到淺黃色固體(186mg)。將該粗產(chǎn)物溶于最小體積的DMSO中，施加到預(yù)處理的反相Biotage 120g KP-C18-HS柱筒上，并使用5-40%乙腈(+0.1% 0.88氨溶液)/10mM碳酸氫銨水溶液(用氨溶液調(diào)節(jié)至pH 10)梯度洗脫15個(gè)柱體積(檢測(cè)波長(zhǎng)254nm)。合并適當(dāng)?shù)募?jí)分，并真空蒸發(fā)，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(43mg)。
LCMS(系統(tǒng)B)：tRET = 0.57min；MH+ 789。
實(shí)施例
實(shí)施例1：(1S,6R,8R,9S,10R,15R,17R,18R)-17-(2-氨基-6-氧代-6,9-二氫-1H-嘌呤-9-基)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-3,9,12,18-四羥基-2,4,11,13-四氧雜-3λ5,12λ5-二磷雜三環(huán)[13.2.1.06,10]十八烷-3,12-二酮銨鹽
將(1S,6R,8R,9S,10R,15R,17R,18R)-17-(2-氨基-6-氧代-6,9-二氫-1H-嘌呤-9-基)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-9,18-雙[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]-3,12-二羥基-2,4,11,13-四氧雜-3λ5,12λ5-二磷雜三環(huán)[13.2.1.06,10]十八烷-3,12-二酮(29mg，0.032mmol)懸浮于吡啶(0.5mL)中，并將圓底燒瓶用suba封條密封/插入氮?dú)夤堋腋∫涸?0℃的油浴中加熱，然后經(jīng)1分鐘同時(shí)滴加三乙胺(0.5mL)和三乙胺三氫氟酸鹽(0.263mL，1.613mmol)。將混合物在50℃下攪拌2.5小時(shí)。將溶液冷卻至室溫，然后經(jīng)2分鐘滴加HPLC級(jí)丙酮(2.8mL)。使所得非常細(xì)的懸浮液沉降。傾析大部分液體部分，并用丙酮(2x2mL)連續(xù)洗滌漿液。將所得濕固體真空蒸發(fā)至干，得到無(wú)色油狀物。將物質(zhì)溶于最小體積的水中，施加到預(yù)處理的反相Biotage 60g KP-C18-HS柱筒上，并使用10mM碳酸氫銨水溶液(用氨溶液調(diào)節(jié)至pH 10)洗脫(3個(gè)柱體積)，然后使用0-15%乙腈(+0.1% 0.88氨溶液)/10mM碳酸氫銨水溶液(用氨溶液調(diào)節(jié)至pH 10)梯度洗脫17個(gè)柱體積(檢測(cè)波長(zhǎng)254nm)。合并適當(dāng)?shù)募?jí)分，并真空蒸發(fā)，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(7mg)。
LCMS(系統(tǒng)D)：tRET = 0.18min；MH+ 671。
實(shí)施例2：(1R,6R,8R,9S,10R,15R,17R,18R)-17-(2-氨基-6-氧代-6,9-二氫-1H-嘌呤-9-基)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-3,9,12,18-四羥基-2,4,11,13,16-五氧雜-3λ5,12λ5-二磷雜三環(huán)[13.2.1.06,10]十八烷-3,12-二酮，雙銨鹽
從(1R,6R,8R,9S,10R,15R,17R,18R)-17-(2-氨基-6-氧代-6,9-二氫-1H-嘌呤-9-基)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-9,18-雙[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]-3,12-二羥基-2,4,11,13,16-五氧雜-3λ5,12λ5-二磷雜三環(huán)[13.2.1.06,10]十八烷-3,12-二酮(163mg，0.181mmole)以類似于實(shí)施例1進(jìn)行制備，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(81mg)。
LCMS(系統(tǒng)D)：tRET = 0.16min；MH- 671。
實(shí)施例3：(1S,6R,8R,9R,10S,15R,17R,18R)-17-(2-氨基-6-氧代-6,9-二氫-1H-嘌呤-9-基)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-3,9,12,18-四羥基-2,4,7,11,13-五氧雜-3λ5,12λ5-二磷雜三環(huán)[13.2.1.06,10]十八烷-3,12-二酮，雙銨鹽
從(1S,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-17-(2-氨基-6-氧代-6,9-二氫-1H-嘌呤-9-基)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-9,18-雙[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]-3,12-二羥基-2,4,7,11,13-五氧雜-3λ5,12λ5-二磷雜三環(huán)[13.2.1.06,10]十八烷-3,12-二酮(71mg，0.079mmol)以類似于實(shí)施例1進(jìn)行制備，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(23mg)。
LCMS(系統(tǒng)D)：tRET = 0.17min；MH+ 673。
實(shí)施例4：(1S,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-17-(2-氨基-6-氧代-6,9-二氫-1H-嘌呤-9-基)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-9-氟-3,12,18-三羥基-2,4,7,11,13-五氧雜-3λ5,12λ5-二磷雜三環(huán)[13.2.1.06,10]十八烷-3,12-二酮，雙銨鹽
將(1S,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-17-(2-氨基-6-氧代-6,9-二氫-1H-嘌呤-9-基)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-18-[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]-9-氟-3,12-二羥基-2,4,7,11,13-五氧雜-3λ5,12λ5-二磷雜三環(huán)[13.2.1.06,10]十八烷-3,12-二酮(43mg，0.055mmol)懸浮于吡啶(0.8mL)中，并將圓底燒瓶用suba封條密封/插入氮?dú)夤?。將懸浮液?0℃的油浴中加熱，然后經(jīng)1min同時(shí)滴加三乙胺(1.0mL)和三乙胺三氫氟酸鹽(0.44mL，2.70mmol)。將混合物在50℃下攪拌2.5小時(shí)(反應(yīng)混合物現(xiàn)在為溶液)。再加入0.2mL(1.228mmol)的三乙胺三氫氟酸鹽，并將混合物在50℃下攪拌2.5小時(shí)，然后在室溫下攪拌15小時(shí)。經(jīng)2mins滴加HPLC級(jí)丙酮(10mL)，并使所得非常細(xì)的懸浮液沉降。傾析大部分液體部分，并將所得濕固體真空蒸發(fā)至干，得到無(wú)色油狀物。將該物質(zhì)溶于最小體積的水中，施加到預(yù)處理的反相Biotage 60g KP-C18-HS柱筒上，并使用10mM碳酸氫銨水溶液(用氨溶液調(diào)節(jié)至pH 10)洗脫(3個(gè)柱體積)，然后使用0-15%乙腈(+0.1% 0.88氨溶液)/10mM碳酸氫銨水溶液(用氨溶液調(diào)節(jié)至pH 10)梯度洗脫17個(gè)柱體積(檢測(cè)波長(zhǎng)254nm)。合并適當(dāng)?shù)募?jí)分，并真空蒸發(fā)，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(8mg)。
LCMS(系統(tǒng)D)：tRET = 0.17，0.20min；MH+ 675。
以類似于Li等人(Nature Chemical Biology，10，1043-1048，(2014))所述的STING結(jié)合測(cè)定來(lái)測(cè)試化合物且pIC50>4。